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基础医学与临床 2006年第5期26卷 529-533页

作者：张振兴李桂林窦万臣魏宇魁吴海涛孔燕国范明王任直中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院神经外科北京100730 军事医学科学院基础医学研究所北京100850

目的探讨成人成肌细胞在体外能否转化为神经前体细胞。方法从成人正常颞肌分离单细胞,体外培养及克隆纯化,培养至第三代时加入含有碱性成纤维细胞生长因子、表皮生长因子和白血病抑制因子的无血清培养液诱导分化,观察诱导后细胞的形态变... 详细信息

目的探讨成人成肌细胞在体外能否转化为神经前体细胞。方法从成人正常颞肌分离单细胞,体外培养及克隆纯化,培养至第三代时加入含有碱性成纤维细胞生长因子、表皮生长因子和白血病抑制因子的无血清培养液诱导分化,观察诱导后细胞的形态变化,并进行免疫细胞化学鉴定和RT-PCR分析。结果成肌细胞经诱导后聚集成球,悬浮生长。免疫细胞化学染色见细胞球表达巢蛋白,5-溴脱氧尿嘧啶核苷掺入试验阳性;细胞分化后表达神经丝蛋白68,胶质纤维酸性蛋白和半乳糖脑苷脂。RT-PCR分析结果与免疫细胞化学染色结果一致。结论成人成肌细胞在体外一定条件下诱导能够转化为神经前体细胞。

关键词：干细胞成肌细胞神经前体细胞

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血小板膜与脑细胞线粒体和突触体外周型苯二氮卓受体的相关性及生物学意义

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吉林大学学报（医学版） 2006年第4期32卷 582-585页

作者：陈春富郎森阳左萍萍王湘庆夏程杨楠解放军总医院神经内科北京100853 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所北京100005

目的:探讨衰老过程中脑细胞线粒体和突触体外周型苯二氮卓受体(PBRs)的动态变化以及与外周血血小板膜PBRs相关性的生物学意义。方法:实验动物分为3月龄、12月龄和24月龄3组。动物断头取血后,迅速取脑。采用梯度离心技术提取大脑皮质线... 详细信息

目的:探讨衰老过程中脑细胞线粒体和突触体外周型苯二氮卓受体(PBRs)的动态变化以及与外周血血小板膜PBRs相关性的生物学意义。方法:实验动物分为3月龄、12月龄和24月龄3组。动物断头取血后,迅速取脑。采用梯度离心技术提取大脑皮质线粒体和海马突触体,低渗溶血法制备外周血血小板膜。应用放射配基[3H]PK11195结合实验测定PBR结合活力。结果:3组比较,大脑皮质线粒体(F=194.6)、海马突触体(F=94.2)、外周血血小板膜(F=162.2)[3H]PK11195结合活性差异均有显著性(P<0.001)。随着鼠龄增加,上述指标显著下降。外周血血小板膜[3H]PK11195结合活性与大脑皮质线粒体(r=0.894)、海马突触体(r=0.893)[3H]PK11195结合活性比较差异均具有显著性(P<0.001)。结论:大脑皮质线粒体、海马突触体PBRs水平呈增龄下降改变,外周血血小板膜[3H]PK11195结合活性能够反映脑组织该指标的变化。

关键词：脑衰老血小板线粒体外周型苯二氮卓受体

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蛋白芯片技术在自身抗体检测中的应用

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中华检验医学杂志 2006年第12期29卷 1116-1119页

作者：李永哲赵智贤佟大伟张蜀澜胡朝军高扬杨卫平于孟学朱立平程京中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院检验科 100730 生物芯片北京国家工程研究中心博奥生物有限公司中国医学科学院中国协和医大学基础医学研究所免疫学系中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院风湿免疫科 100730

目的建立应用蛋白芯片技术检测抗核抗体谱中11种自身抗体的方法,并对蛋白芯片技术对自身抗体检测的敏感性和特异性进行评价。方法通过蛋白芯片技术与间接免疫荧光法(IIF)和酶联免疫吸附法(ELISA)自身抗体检测试剂盒进行比对,验证抗核抗... 详细信息

目的建立应用蛋白芯片技术检测抗核抗体谱中11种自身抗体的方法,并对蛋白芯片技术对自身抗体检测的敏感性和特异性进行评价。方法通过蛋白芯片技术与间接免疫荧光法(IIF)和酶联免疫吸附法(ELISA)自身抗体检测试剂盒进行比对,验证抗核抗体谱检测蛋白芯片(抗SSA-52抗体、抗SSA-60抗体、抗SSB抗体、抗Sm抗体、抗RNP抗体、抗Scl-70抗体、抗Jo-1抗体、抗dsDNA抗体、抗rRNP抗体、抗着丝点抗体和抗核抗体)在临床应用中的敏感性和特异性。除抗Jo-1抗体阳性样品较罕见,仅检测阳性样品32份,其他10种自身抗体,每种选择各阳性样本70份,阴性样本294份;并对检测结果进行统计学分析。结果除抗SSA52抗体和抗SSB抗体的检测敏感度分别为95·7%和98·6%外,其他9种自身抗体的检测敏感度均为100%;除抗SSB抗体、抗RNP-68抗体、抗Scl-70抗体、抗dsDNA抗体、抗CENP-B抗体、抗核抗原提取物抗体(ANA)的检测特异度分别为98·0%、98·0%、99·7%、99·7%、99·7%、98·3%外,其他5种自身抗体的检测特异度均为100%。结论蛋白芯片技术检测11种抗核抗体谱自身抗体的检测敏感度(均>95·0%)和特异度(均>98·0%)均较高,且与IIF和ELISA法有较高的符合率,能满足临床检测自身抗体谱的要求。此外,蛋白芯片技术检测自身抗体时具有高通量、简单快速、敏感度好和特异度强等优点,值得临床推广应用。

关键词：自身抗体抗体抗核蛋白芯片自身免疫性疾病

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对氧磷酶1基因Gln192Arg多态性与阿尔茨海默病的相关性分析

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中华内科杂志 2006年第4期45卷 270-273页

作者：何小明张振馨张俊武周涌涛唐牟尼武成斌洪震中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院神经内科 100730 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所 100730 广州脑科医院精神科西安交通大学第一医院神经内科上海复旦大学附属华山医院神经内科

目的探讨中国汉族人群中对氧磷酶1(PON1)基因Gln192Arg单核苷酸多态性(SNP)与阿尔茨海默病(AD)的相互关系。方法采用实时定量PCR技术检测521例AD患者和578例健康老年人PON1基因Gln192Arg位点SNP的分布,并通过OR做疾病关联分析。结果AD组... 详细信息

目的探讨中国汉族人群中对氧磷酶1(PON1)基因Gln192Arg单核苷酸多态性(SNP)与阿尔茨海默病(AD)的相互关系。方法采用实时定量PCR技术检测521例AD患者和578例健康老年人PON1基因Gln192Arg位点SNP的分布,并通过OR做疾病关联分析。结果AD组(Q/R+R/R)基因型频率较对照组低,统计分析差异有统计学意义(χ2=4.68,P=0.03);等位基因频率差异也存在统计学意义,AD组R等位基因频率明显低于对照组(χ2=3.85,P=0.05)。logistic回归分析表明,调整年龄和性别的影响后,(Q/R+R/R)基因型患AD的危险性是Q/Q基因型的0.71倍(P=0.044,95%CI=0.51～0.99)。结论中国汉族人群中PON1基因Gln192Arg位点R等位基因可能是AD的保护因素。

关键词：阿尔茨海默病多态性,单核苷酸

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超声研究成年后颈动脉粥样硬化与胎儿期宫内发育的关系

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中华超声影像学杂志 2006年第11期15卷 827-830页

作者：谭莉姜玉新张振馨齐振红吕珂徐涛刘爱民盖铭英王姮王子时曾毅中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院超声诊断科北京100730 中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院临床流行病室北京100730 中国协和医科大学基础医学院中国医学科学院基础医学研究所统计室中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院病案室北京100730 中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院妇产科北京100730 中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院内分泌科北京100730 中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院心内科北京100730 Center for Demographic Studies of Duke University Durham U.S.A

目的探讨成年颈动脉粥样硬化与胎儿期宫内生长情况之间的关系。方法对2036例有完整出生记录的50岁以上成人进行颈动脉超声检查，测量颈总动脉及其分叉处内中膜厚度，判断有无动脉粥样硬化。抽取外周静脉血进行各项生化检查，并填写心... 详细信息

目的探讨成年颈动脉粥样硬化与胎儿期宫内生长情况之间的关系。方法对2036例有完整出生记录的50岁以上成人进行颈动脉超声检查，测量颈总动脉及其分叉处内中膜厚度，判断有无动脉粥样硬化。抽取外周静脉血进行各项生化检查，并填写心脑血管调查表。分析颈动脉粥样硬化与出生时、成年后各项指标之间的关系。结果颈动脉内中膜增厚组的出生体质量和头围均明显低于正常组，出生体质量〈2500g的胎儿成年后颈动脉硬化的发生率最高，调整心脑血管危险因素后仍比出生体质量3000-3500g者高。结论胎儿期宫内发育不良是颈动脉粥样硬化的独立影响因素。

关键词：超声检查颈动脉动脉硬化胎儿生长迟缓

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HLA-DQA1基因多态性与HBV感染结局相关

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基础医学与临床 2006年第5期26卷 494-498页

作者：陈冬梅高冀荣都特郭新会李卓刘英李辉中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100054 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所首都医科大学北京佑安医院肝炎研究所北京100054 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所流行病学教研室北京100005

目的探讨中国汉族人群人类白细胞抗原(HLA)-DQA1基因多态性是否与乙型肝炎病毒(HBV)感染结局相关联。方法以213例HBV自限性感染者和420例慢性乙肝患者为研究对象,应用聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)技术进行HLA-DQA1基因分型,用... 详细信息

目的探讨中国汉族人群人类白细胞抗原(HLA)-DQA1基因多态性是否与乙型肝炎病毒(HBV)感染结局相关联。方法以213例HBV自限性感染者和420例慢性乙肝患者为研究对象,应用聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)技术进行HLA-DQA1基因分型,用EPI和SPSS软件分析DQA1多态性的分布频率及其组间差异。结果DQA1*0102在慢性乙肝组的分布频率显著低于HBV自限性感染组(15.47%比较20.42%,P<0.05),而DQA1*0201在慢性乙肝组的分布频率显著高于HBV自限性感染组(10.48%比较6.10%,P<0.05)。调整性别、年龄等混杂因素影响的非条件logistic回归分析结果显示,与HLA-DQA1其他等位基因相比,携带DQA1*0102者降低慢性乙肝发生的风险(P<0.05,OR=0.69,95%C I:0.49-0.96),而携带DQA1*0201者增加慢性乙肝发生的风险(P<0.05,OR=1.77,95%C I:1.09-2.87)。结论HLA-DQA1基因多态性可能是影响HBV感染结局的重要宿主遗传因素。

关键词：乙型肝炎 HLA-DQA1基因多态性

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体外培养诱导成人骨骼肌干细胞向神经样细胞分化的实验

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中国临床康复 2006年第21期10卷 4-6,i0001页

作者：张振兴汪璇刘淑红吴海涛窦万臣栗世方孔燕国魏宇魁赵飞帆范明王任直中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院神经外科北京市100730 解放军军事医学科学院基础医学研究所北京市100850

目的:以含有碱性成纤维细胞生长因子和二甲基亚砜的培养液对原代培养的成人骨骼肌干细胞进行诱导,探讨其转化为神经细胞的可行性。方法:实验于2004-06/12在军事医学科学院基础医学研究所完成。实验所用3例成人正常颞肌标本取自于开颅手... 详细信息

目的:以含有碱性成纤维细胞生长因子和二甲基亚砜的培养液对原代培养的成人骨骼肌干细胞进行诱导,探讨其转化为神经细胞的可行性。方法:实验于2004-06/12在军事医学科学院基础医学研究所完成。实验所用3例成人正常颞肌标本取自于开颅手术患者,由北京协和医院神经外科提供,患者知情同意。机械分离加混合消化液处理分离单细胞,体外培养及克隆纯化,培养至第3代时加入含有碱性成纤维细胞生长因子二甲基亚砜的培养液诱导分化,进行反转录-聚合酶链反应分析和免疫荧光细胞化学染色,观察诱导后细胞形态变化,同时结合普通光线在100倍下随机计数6个视野(大于100个细胞),计算阳性细胞的百分比。结果:①骨骼肌干细胞培养24h后见少量细胞贴壁呈短的梭形或棒状。培养第3天红细胞开始裂解成细胞碎屑并聚集、悬浮在培养基中,这些碎屑随着换液而逐渐消失。克隆培养的细胞大约于接种后两三周才能铺满孔底,胞体呈梭形,排列规整。②荧光显微镜下胞核蓝染,每个细胞都呈Desmin染色阳性,证明成人骨骼肌干细胞能够在体外进行克隆培养。③在含有碱性成纤维细胞生长因子和二甲基亚砜的培养液诱导下,骨骼肌干细胞可分化为形态上类似于神经元和星形胶质细胞的细胞。④反转录-聚合酶链反应分析证实诱导后的骨骼肌干细胞有神经丝蛋白和胶质纤维酸性蛋白基因表达。⑤免疫荧光细胞化学检测到诱导后的骨骼肌干细胞呈神经丝蛋白和胶质纤维酸性蛋白免疫反应阳性。⑥诱导后骨骼肌干细胞分化为神经丝蛋白阳性细胞的比例为(35.9±6.3)%,分化为胶质纤维酸性蛋白阳性细胞的比例为(43.7±5.3)%。结论:成人骨骼肌干细胞在体外经诱导分化后形态类似于神经元和星形胶质细胞,并且表达神经元标志物神经丝蛋白、星形胶质细胞标志物胶质纤维酸性蛋白,认为成人骨骼肌干细胞在体外可诱导分化为神经元和星形胶质细胞。

关键词：干细胞肌,骨骼二甲亚砜神经元

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胆固醇24S-羟化酶基因多态性与阿尔茨海默病的相关性分析

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中华神经科杂志 2006年第1期39卷 44-47页

作者：何小明张振馨张俊武周涌涛唐牟尼武成斌洪震中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院神经内科 100730 中国医学科学院协和医科大学基础医学研究所广州脑科医院精神科西安交通大学第一医院神经内科上海复旦大学附属华山医院神经内科

目的探讨胆固醇24S－羟化酶（cholesterol 24-hydroxylase，CYP46）基因第二内含子单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism，SNP）与阿尔茨海默病（AD）的相互关系。方法采用等位基因特异性聚合酶链反应（allele—specific PCR... 详细信息

目的探讨胆固醇24S－羟化酶（cholesterol 24-hydroxylase，CYP46）基因第二内含子单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism，SNP）与阿尔茨海默病（AD）的相互关系。方法采用等位基因特异性聚合酶链反应（allele—specific PCR，A—SPCR）技术检测508例AD患者和549名健康老年人CYP46基因第二内含子基因SNP的分布，并通过比值比（OR）做疾病关联分析。结果AD组与对照组CYP46基因SNP分布差异有统计学意义（12，9％，8．1％；X^2=6．59，P=0．037），AD组携带T等位基因（C／T＋T／T）频率明显高于健康对照组（91．9％，87．0％；X^2=6，58，P=0．01）。Logistic回归分析表明，C／T和T／T基因型均是AD的危险因素，调整年龄和性别的影响后，其OR值分别为：1．70（95％CI=1．10—2．63，C／T），1．69（95％ CI=1．10—2．59，T／T）。结论CYP46基因的SNP与AD存在相关性，携带T等位基因可能是AD的危险因素。

关键词：阿尔茨海默病甾类-羟化酶类聚合酶链反应多态性单核苷酸

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脑源性神经营养因子基因Val66Met多态性与阿尔茨海默病的相关性

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中华老年医学杂志 2006年第2期25卷 85-88页

作者：何小明张振馨周涌涛张俊武唐牟尼武成斌洪震中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院神经内科 100730 中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院基础医学研究所 100730 广州脑科医院精神科西安交通大学第一医院神经内科复旦大学附属华山医院神经内科

目的探讨中国汉族人群中脑源性神经营养因子(BDNF)基因 Val66Met 单核苷酸多态性(SNP)与阿尔茨海默病(AD)的相互关系。方法采用等位基因特异性聚合酶链反应(A-SPCR)技术检测513例 AD 患者和575例健康老年人 BDNF 基因 Val66Met 位点 SNP... 详细信息

目的探讨中国汉族人群中脑源性神经营养因子(BDNF)基因 Val66Met 单核苷酸多态性(SNP)与阿尔茨海默病(AD)的相互关系。方法采用等位基因特异性聚合酶链反应(A-SPCR)技术检测513例 AD 患者和575例健康老年人 BDNF 基因 Val66Met 位点 SNP 的分布,分析各基因型与发病年龄和疾病严重程度的关系。结果 AD 组和对照组基因型频率(22.0%和21.7%;x^2=0.41,P=0.82)、等位基因频率(45.9%和46.5%;x^2=0.08,P=0.77)差异均无统计学意义(P>0.05)。进一步将 AD 组按照发病年龄(<65岁和≥65岁)和性别分层,也未发现差异有统计学意义(P>0.05)。各基因型与发病年龄和疾病的严重程度不存在相关性。结论中国汉族人群中BDNF 基因 Val66Met 位点 SNP 与 AD 未发现关联关系。

关键词：阿尔茨海默病脑源性神经营养因子基因表达单核苷酸

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D-半乳糖致衰老大鼠脑海马外周型苯二氮受体改变及其与认知行为的相关研究

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中华医学杂志 2006年第21期86卷 1470-1473页

作者：陈春富郎森阳左萍萍王湘庆杨楠解放军总医院神经内科北京100853 现在煤炭总医院神经内科中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所

目的观察海马突触体外周型苯二氮受体(PBR)水平对大鼠空间学习和记忆能力的影响。方法SD大鼠随机分为对照组和D-半乳糖组。D-半乳糖组动物连续皮下注射D-半乳糖(100mg/kg,每日1次)56次,对照组注射生理盐水。利用Morris水迷宫测试动物... 详细信息

目的观察海马突触体外周型苯二氮受体(PBR)水平对大鼠空间学习和记忆能力的影响。方法SD大鼠随机分为对照组和D-半乳糖组。D-半乳糖组动物连续皮下注射D-半乳糖(100mg/kg,每日1次)56次,对照组注射生理盐水。利用Morris水迷宫测试动物学习记忆能力后制备海马突触体,测定PBR最大结合容量(Bmax)和平衡解离常数(KD)。结果与对照组比较,D-半乳糖组动物学习记忆能力降低(P<0.001),KD无显著变化。D-半乳糖组Bmax(177.2fmol/mg±26·7fmol/mg)低于对照组(296.7fmol/mg±33.5fmol/mg)(P<0.001),海马突触体[3H]PK11195特异性结合活性与迷宫试验动物逃避潜伏期(r=-0.854)、平台象限游泳时间(r=0.845)及距离(r=0·851)显著相关(P<0.001)。结论海马突触体PBR表达量可能与大鼠空间学习和记忆有关。

关键词：海马突触体外周型苯二氮[艹卓]受体 D-半乳糖学习记忆大鼠

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