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基础医学与临床 2005年第6期25卷 507-511页

作者：张洁邱劲娄晋宁王小明斯琴吴其夏郭恒怡中国医学科学院中国协和医科大学基础医学院病理生理学系中日友好医院临床医学研究所北京100029

目的探讨TNFαⅠ型受体(TNFR1)对小鼠脑血管内皮细胞iNOS、HO1基因表达水平的影响。方法体外培养TNFR1基因敲除的小鼠脑血管内皮细胞(BVECTNFR1)和野生型小鼠脑血管内皮细胞(BVEC),分别给予5ngmLTNFα刺激24h后,用实时荧光定量PCR技术及... 详细信息

目的探讨TNFαⅠ型受体(TNFR1)对小鼠脑血管内皮细胞iNOS、HO1基因表达水平的影响。方法体外培养TNFR1基因敲除的小鼠脑血管内皮细胞(BVECTNFR1)和野生型小鼠脑血管内皮细胞(BVEC),分别给予5ngmLTNFα刺激24h后,用实时荧光定量PCR技术及Westernblot方法检测两种细胞iNOS基因和HO1mRNA和蛋白表达量。结果给予TNFα刺激后,iNOSmRNA和蛋白表达仅在野生型脑血管内皮细胞内明显增高,而在受体敲除脑血管内皮细胞无明显变化。HO1mRNA和蛋白表达量在野生型小鼠脑血管内皮细胞和受体敲除小鼠脑血管内皮细胞均明显增高。结论TNFα可能作用于脑血管内皮细胞TNFR1,增加iNOS表达,HO1表达增高并非由TNFR1介导,而由TNFα的其他受体介导。

关键词：脑血管内皮细胞 TNF-α HO-1 Ⅰ型受体小鼠实时荧光定量PCR技术 TNFR1 基因表达水平 Westem iNOS基因 mRNA iNOS表达野生型基因敲除体外培养 blot 蛋白表达受体介导表达量 24h 种细胞增高细胞内

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肿瘤血管内皮细胞的免疫学特性

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癌症 2005年第5期24卷 634-638页

作者：张文健吴练秋叶丽亚娄晋宁中国医学科学院基础医学院中国协和医科大学病理生理学系卫生部中日友好医院临床医学研究所卫生部中日友好医院临床医学研究所北京100029

在肿瘤的发展过程中,肿瘤血管起到极为重要的作用,不仅为肿瘤提供营养、而且为肿瘤的转移提供了途径。由于肿瘤血管内皮细胞长期处于肿瘤微环境中,其表型及功能特性都发生了明显的变化,其中包括某些免疫学特性的改变,例如内皮细胞粘附... 详细信息

在肿瘤的发展过程中,肿瘤血管起到极为重要的作用,不仅为肿瘤提供营养、而且为肿瘤的转移提供了途径。由于肿瘤血管内皮细胞长期处于肿瘤微环境中,其表型及功能特性都发生了明显的变化,其中包括某些免疫学特性的改变,例如内皮细胞粘附分子表达水平降低、白细胞粘附作用减弱、抗原递呈功能不良、抗自由基损伤能力增强、合成大量的细胞外基质等。由于肿瘤血管内皮细胞是免疫细胞和免疫治疗药物进入肿瘤组织的第一道屏障,因此肿瘤血管内皮细胞的免疫学特性可能与肿瘤细胞逃避免疫监视、抵抗免疫杀伤有关。本文简要综述有关肿瘤血管内皮细胞免疫学特性,并分析这些特性与肿瘤免疫逃逸的关系。

关键词：肿瘤血管内皮细胞粘附分子 MHC分子氧化损伤细胞外基质免疫逃逸

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成人心房肌细胞的急性分离和电生理学鉴定

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中国病理生理杂志 2005年第11期21卷 2286-2288页

作者：黄兵曹济民陈雷刘振伟左明章李立环卫生部北京医院麻醉科北京100730 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所生理研究室北京100005 中国医学科学院中国协和医科大学心血管病研究所阜外心血管病医院麻醉科北京100037 军事医学科学院毒物药物研究所北京100850

目的介绍一种适用于成人的心房肌细胞膜片钳研究的急性分离方法,并对所分离的细胞进行电生理学鉴定。方法采用两步酶解与机械分离相结合的方法制备成年人心房肌细胞标本,应用倒置显微镜初步观察细胞形态、数目后,用全细胞膜片钳技术鉴... 详细信息

目的介绍一种适用于成人的心房肌细胞膜片钳研究的急性分离方法,并对所分离的细胞进行电生理学鉴定。方法采用两步酶解与机械分离相结合的方法制备成年人心房肌细胞标本,应用倒置显微镜初步观察细胞形态、数目后,用全细胞膜片钳技术鉴定细胞的电生理学特性。结果分离的细胞呈多种形态,其中有良好折光性、细胞膜完整、有清晰横纹的杆状细胞约占50%-60%,计算出11例独立实验分离出的此类细胞获得率为(57.2±3.1)%;具有正常的电生理学特性,能够诱发出人心房肌细胞上主要的Na+、K+通道混合电流以及心房肌细胞特有的超快速激活钾通道电流(IKur)。结论实验数据表明该方法分离的细胞保持有其典型的通道特性,并证明其具有实用、快速和高效的特点,适用于人心房肌细胞的电生理学和电药理学研究,有良好的可行性。

关键词：心肌分离膜片钳术电生理学

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新疆维吾尔族人自然长寿与HLADRB、ACE基因的关联分析

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基础医学与临床 2005年第6期25卷 492-497页

作者：玛依拉.吾甫尔周文郁顾明亮方鸣武程祖亨邱长春新疆医科大学第一医院心内科新疆乌鲁木齐830054 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的探讨人类白细胞抗原(HLA)DRB基因及血管紧张素转换酶(ACE)基因多态性与新疆维吾尔族人自然长寿的关系。方法研究样本分为4组:第1组年龄≥100岁;第2组年龄为90～99岁;第3组年龄为70～90岁;第4组为65～70岁自然死亡者。分别应用聚合... 详细信息

目的探讨人类白细胞抗原(HLA)DRB基因及血管紧张素转换酶(ACE)基因多态性与新疆维吾尔族人自然长寿的关系。方法研究样本分为4组:第1组年龄≥100岁;第2组年龄为90～99岁;第3组年龄为70～90岁;第4组为65～70岁自然死亡者。分别应用聚合酶链反应序列特异引物法(PCRSSP)、单链构象多态性(SSCP)分析和直接测序技术对各组进行基因分型。结果百岁组HLADR1的频率明显高于对照组(分别为9.5%和1.9%,P<0.05);HLADR6(14)的频率也明显高于对照组(分别为9.5%和0.9%,P<0.05);HLADR6的频率明显高于其余3组;HLADR4的频率明显低于对照组(分别为9.5%和23.6%,P<0.05);HLADR9的频率明显低于对照组(分别为1.2%和9.4%,P<0.05)。相关分析显示:HLADR1及ACE基因的D等位基因与长寿呈正相关,而HLADR9呈负相关。结论HLADRB基因的DR1等位基因和ACE基因的等位基因D对长寿可能有保护作用;HLADRB基因的DR9等位基因可能是不利于长寿的危险因素,HLADRB基因多态性和ACE基因多态性相互作用对长寿有协同作用。

关键词：新疆维吾尔族人长寿关联分析 HLA-DR6 HLA-DRB基因血管紧张素转换酶 ACE基因多态性人类白细胞抗原单链构象多态性 HLA-DR4 HLA-DR9 序列特异引物聚合酶链反应 D等位基因对照组研究样本基因分型测序技术相关分析

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核包膜蛋白gp210 p62和LBR自身抗原基因克隆表达及其抗体在原发性胆汁性肝硬化中的诊断价值初探

核包膜蛋白gp210 p62和LBR自身抗原基因克隆表达及其抗体在原发性...

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第十届全国风湿病学学术会议

作者：李永哲佟大伟张蜀澜于孟学张奉春高扬朱立平刘镭孙庆国孙庆国赵振国中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所北华大学医学院北华大学医学院吉林北方肝胆医院吉林北方肝胆医院

为研究克隆人核包膜蛋白自身抗原gp210、p62和LBR基因,构建重组表达质粒,获得纯化重组蛋白并进行免疫学活性鉴定,建立酶联免疫吸附试验(ELISA)法,初探抗核包膜蛋白gp210、p62和LBR自身抗体检测在原发性胆汁性肝硬化(primary biliary cir... 详细信息

为研究克隆人核包膜蛋白自身抗原gp210、p62和LBR基因,构建重组表达质粒,获得纯化重组蛋白并进行免疫学活性鉴定,建立酶联免疫吸附试验(ELISA)法,初探抗核包膜蛋白gp210、p62和LBR自身抗体检测在原发性胆汁性肝硬化(primary biliary cirrhosis,PBC)诊断中的意义。构建重组表达载体PET30a-gp210、pQE30-p62和pQE30-LBR;在大

关键词：核包膜蛋白原发性胆汁性肝硬化 LBR gp210 p62 基因克隆表达

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胰腺癌流行病调查及高危评分模型研究

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医学研究通讯 2005年第7期34卷 11-14,61页

作者：陆星华王丽杨爱明钱家鸣李辉麦灿荣钟守先邓瑞雪周璐杨晓鸥蒋卫君中国协和医科大学/中国医学科学院北京协和医院 100730 中国协和医科大学/中国医学科学院基础医学研究所流行病教研组

目的调查中国胰腺癌病死率、危险因素,建立胰腺癌高危评分模型。方法通过中国疾病监测点监测人群胰腺癌病死率及分布特征;采用病例对照,通过面对面问卷方式对胰腺癌危险因素进行调查分析;用 Logistic 回归方法建立高危评分模型。结果胰... 详细信息

目的调查中国胰腺癌病死率、危险因素,建立胰腺癌高危评分模型。方法通过中国疾病监测点监测人群胰腺癌病死率及分布特征;采用病例对照,通过面对面问卷方式对胰腺癌危险因素进行调查分析;用 Logistic 回归方法建立高危评分模型。结果胰腺癌10年间(1991～2000年)病死率由1991年的1.83%增加到2000年的2.26%,其在肿瘤中的位次一直在第7、8位之间波动;男性高于女性;胰腺癌主要危及中老年,60岁以上占69.62%;不同地区胰腺癌病死率差别明显,东北和华东地区显著高于其他地区;城市报告病死率为农村的2.42～4.68倍。胰腺癌危险因素主要表现在高剂量吸烟人群;饮食中高热量、高胆固醇,如肉食可增加胰腺癌风险;糖尿病也为胰腺癌的危险因素。临床症状中厌食、上腹痛、腹胀、黄疸及体重下降为高危因素,每个危险因素以与胰腺癌相关的重要性给予评分,如总分高于33分,则属于高危人群,其敏感性为88.9%、特异性为97.6%。结论中国胰腺癌病死率仍有逐渐上升趋势,吸烟、生活方式、糖尿病是胰腺癌的危险因素,胰腺癌高危评分模型敏感性为88.9%、特异性为97.6%。

关键词：胰腺癌流行病调查评分模型 Logistic回归 1991~2000年中国疾病监测点危险因素病死率 1991年 60岁以上监测人群病例对照方法建立不同地区华东地区吸烟人群主要表现高胆固醇临床症状高危因素体重下降高危人群

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中国汉族人群中α-抗胰凝乳蛋白酶(ACT)基因多态性与阿尔茨海默病的关联性研究

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中国神经免疫学和神经病学杂志 2005年第4期12卷 199-203,232页

作者：周涌涛张振馨张俊武何小明徐涛中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院神经内科临床流行病学教研室北京100730 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所北京100730

目的研究中国汉族人群中α抗胰凝乳蛋白酶启动子区51(ACT51)G/T多态性与阿尔茨海默病(Alzheimerdisease,AD)发病的相关性。方法通过实时定量荧光PCR和GeneAmp5700SDS软件检测544例AD患者和557例非痴呆对照者ACT51G/T的基因多态性,应用lo... 详细信息

目的研究中国汉族人群中α抗胰凝乳蛋白酶启动子区51(ACT51)G/T多态性与阿尔茨海默病(Alzheimerdisease,AD)发病的相关性。方法通过实时定量荧光PCR和GeneAmp5700SDS软件检测544例AD患者和557例非痴呆对照者ACT51G/T的基因多态性,应用logistic回归模型分析与AD发病的相关性。结果ACT的G/G、G/T和T/T在AD组和对照组中分布差异存在显著性,携带T/T基因型比携带G/G基因型个体显示出较高的AD发病危险性(OR=1.50,P<0.05);非条件Logistic回归模型分析提示ACT的T/T和G/T基因型、高龄和女性均为AD发病的危险因素,调整年龄和性别影响后T/T和G/T基因型均为AD发病的危险因素,且对AD发病存在剂量效应关系,其OR值分别为3.55和1.55,P值分别为0.000和0.015。结论在中国汉族人群中ACT51T/T和C/T基因型、高龄和女性为AD发病的危险因素,共同影响AD的发病。

关键词：基因多态性 α-抗胰凝乳蛋白酶阿尔茨海默病实时定量荧光PCR

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喉癌患者血清巨噬细胞集落刺激因子的检测

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中国耳鼻咽喉头颈外科 2005年第1期12卷 21-24页

作者：葛平江张宝泉张建民孔庆利高志强王辉何维广东省人民医院耳鼻咽喉头颈外科广东广州510080 中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院耳鼻咽喉头颈外科北京100730 中国医学科学院基础研究所免疫室北京100730

目的通过对喉癌患者外周血巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)进行检测,探讨M-CSF对肿瘤的影响及其作用机理。方法用ELISA法检测31例喉鳞状细胞癌患者和17例年龄和性别匹配的正常对照者血清中的M-CSF、白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(... 详细信息

目的通过对喉癌患者外周血巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)进行检测,探讨M-CSF对肿瘤的影响及其作用机理。方法用ELISA法检测31例喉鳞状细胞癌患者和17例年龄和性别匹配的正常对照者血清中的M-CSF、白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)的浓度,并进行统计学分析。结果31例喉癌患者血清中M-CSF浓度(341.37±80.57pg/ml)较17例正常对照(281.22±72.11pg/ml)升高(P<0.05),而且在癌转移患者中浓度更高(P=0.036)。结论喉癌患者血清中M-CSF浓度升高,且同肿瘤的淋巴结转移有关,浓度越高转移的可能性就越大。

关键词：患者喉癌 M-CSF 血清肿瘤坏死因子a 巨噬细胞集落刺激因子正常升高对照 TNF—α

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蛋白芯片与自身免疫性疾病

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北京医学 2005年第2期27卷 111-114页

作者：于孟学薛静朱立平中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院风湿免疫科 100730 浙江大学医学院附属二院风湿免疫科中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所免疫室

自身免疫性疾病是以体内存在多种针对自身抗原成分的自身抗体为特征的一类疾病.对抗原抗体及其反应系统的深入研究不仅有助于揭示本类疾病的病因和病理过程,而且对于临床诊断具有非常重要的作用.同时,随着生命科学研究进入21世纪,基因... 详细信息

自身免疫性疾病是以体内存在多种针对自身抗原成分的自身抗体为特征的一类疾病.对抗原抗体及其反应系统的深入研究不仅有助于揭示本类疾病的病因和病理过程,而且对于临床诊断具有非常重要的作用.同时,随着生命科学研究进入21世纪,基因序列数据及蛋白序列数据也正以前所未有的速度增长.怎样研究和利用这些信息推进对自身免疫性疾病的认识已成为目前倍受关注的问题.……

关键词：蛋白芯片自身免疫性疾病抗原抗体基因序列数据蛋白序列数据

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一种新的亲合素法分离孕妇外周血中的有核红细胞

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中国优生与遗传杂志 2005年第1期13卷 13-15页

作者：唐爱兰刘国仰夏晓艳高春生刘歌张俊荣张学中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学遗传学系北京100005 北京市妇产医院北京100006 北京医院北京100730

目的　为了分离孕妇外周血中的有核红细胞用于非损伤性产前诊断。方法　采用了一种新的亲合素法 ,用红细胞表面半乳糖基特异的凝集素 (大豆凝集素 )来选择富集孕妇外周血中的有核红细胞。结果　从 11份 2 .5ml孕 14 + ～ 15 +w的孕妇外... 详细信息

目的　为了分离孕妇外周血中的有核红细胞用于非损伤性产前诊断。方法　采用了一种新的亲合素法 ,用红细胞表面半乳糖基特异的凝集素 (大豆凝集素 )来选择富集孕妇外周血中的有核红细胞。结果　从 11份 2 .5ml孕 14 + ～ 15 +w的孕妇外周血中都分离到了有核红细胞 ,平均每份血样得到有核红细胞 2 .8个。结论　本方法实验成本低 ,操作简单 ,对于非损伤性产前诊断的研究和推广都具有重要的参考价值。

关键词：大豆凝集素双密度梯度离心有核红细胞非损伤性产前诊断

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