检索结果-内蒙古大学图书馆

基础医学与临床 2004年第3期24卷 331-334页

作者：田士强王任直李桂林王欣张波姚勇窦万臣孔燕国中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院神经外科北京100730 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所北京100005

为了深入研究二型谷氨酸羧肽酶 (glutamatecarboxypeptidaseⅡ ,GCPⅡ )功能和了解其在兴奋性氨基酸代谢过程中作用 ,拟构建GCPⅡ的表达载体 ,建立稳定表达细胞株 ;采用聚合酶链反应 ,酶切连接 ,和蓝白筛选的方法 ,构建表达载体 ;磷酸... 详细信息

为了深入研究二型谷氨酸羧肽酶 (glutamatecarboxypeptidaseⅡ ,GCPⅡ )功能和了解其在兴奋性氨基酸代谢过程中作用 ,拟构建GCPⅡ的表达载体 ,建立稳定表达细胞株 ;采用聚合酶链反应 ,酶切连接 ,和蓝白筛选的方法 ,构建表达载体 ;磷酸钙共沉淀的方法转染HEK2 93细胞 ,G4 18筛选阳性细胞克隆 ;逆转录聚合酶链反应和免疫荧光细胞染色的方法鉴定阳性细胞株。采用PCR方法扩增出GCPⅡ ;构建含有GCPⅡ基因的表达载体———pcDNA3 1 NA ;建立了细胞株HEK 2 93 NA。成功构建了GCPⅡ的表达载体 ,建立了稳定表达细胞株 ,为深入研究该酶的功能和兴奋性氨基酸毒性作用奠定了基础。

关键词：二型谷氨酸羧肽酶稳定表达细胞株表达载体聚合酶链反应

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

重组腺相关病毒转染神经干细胞球的实验研究

引用

中国应用生理学杂志 2004年第2期20卷 166-170页

作者：窦万臣王任直李桂林王欣李学坤张波田士强姚勇中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院北京100730 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所北京100730

目的 :探讨重组腺相关病毒 2型 (rAAV2 )对神经干细胞球的转染能力。方法 :①将FITC标记的rAAV2(FITC rAAV2 )分成两组 ,A组直接与神经干细胞球混合 ,B组与肝素混匀后再与神经干细胞球混合 ,孵育 30min后在荧光显微镜下观察 ;②含有GFP... 详细信息

目的 :探讨重组腺相关病毒 2型 (rAAV2 )对神经干细胞球的转染能力。方法 :①将FITC标记的rAAV2(FITC rAAV2 )分成两组 ,A组直接与神经干细胞球混合 ,B组与肝素混匀后再与神经干细胞球混合 ,孵育 30min后在荧光显微镜下观察 ;②含有GFP报告基因的rAAV2 (rAAV2 GFP)与神经干细胞球孵育 30min后 ,分成两组 :A组继续在培养箱内培养 ,B组分散成单细胞后移植到大鼠脑内 ,一个月后分别在荧光显微镜下观察神经干细胞球和大鼠脑组织切片中报告基因的表达情况 ;③将含有低氧启动子 (低氧应答元件 ,HRE)、VEGF和GFP的rAAV2(rAAV2 HRE VEGF GFP)转染神经干细胞球后分为两组 :A组在低氧条件下培养 ,B组在常规条件下培养 ,72h后观察报告基因的表达情况。结果 :①FITC rAAV2转染神经干细胞球的结果 :A组有明亮的绿色荧光 ,B组基本无绿色荧光 ;②rAAV2 GFP转染神经干细胞球后一个月 ,A、B两组均可以看到绿色荧光 ;③rAAV2 HRE VEGF GFP转染神经干细胞球后 72h ,A组可见绿色荧光 ,B组无绿色荧光。结论 :rAAV2可以与神经干细胞球特异性结合 ,rAAV2携带的外源基因在体内和体外均可以有效表达 ,rAAV2携带外源基因的表达可以人为调控。

关键词： rAAV2 转染神经干细胞球外源基因

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

内皮细胞白细胞黏附分子-1对猪眼小梁细胞形态和细胞骨架的作用

引用

中华眼科杂志 2004年第9期40卷 614-619页

作者：周崎赵家良刘玉琴中国协和医科大学中国医学科学院北京协和医院眼科眼科研究中心北京100730 中国协和医科大学中国医学科学院基础医学研究所

目的　研究内皮细胞白细胞黏附分子 1(ELAM 1)对猪眼小梁细胞形态和肌动蛋白细胞骨架的作用 ,探讨青光眼的发病机制。方法　原代培养的猪眼小梁细胞 ,经白细胞介素 1(IL 1)刺激活化后 ,结合ELAM 1抗体或IgG进一步交联 ,观察细胞形态、... 详细信息

目的　研究内皮细胞白细胞黏附分子 1(ELAM 1)对猪眼小梁细胞形态和肌动蛋白细胞骨架的作用 ,探讨青光眼的发病机制。方法　原代培养的猪眼小梁细胞 ,经白细胞介素 1(IL 1)刺激活化后 ,结合ELAM 1抗体或IgG进一步交联 ,观察细胞形态、细胞间连接的动态改变及肌动蛋白和细胞厚度的改变。结果　未经IL 1作用的猪眼小梁细胞不表达ELAM 1,IL 1作用后猪眼小梁细胞表达ELAM 1。经过IL 1活化的猪眼小梁细胞 ,结合ELAM 1抗体或IgG进一步交联后 ,细胞间隙扩大 ,细胞变圆、变厚 ,细胞立体感增强 ;肌动蛋白变稀疏 ,荧光弥散 ,细胞的刚性降低 ,细胞厚度增加。结论　猪眼小梁细胞能表达ELAM 1,表达的ELAM 1通过与抗体结合或同时通过IgG交联影响肌动蛋白细胞骨架 ,改变细胞形态。

关键词：小梁细胞 IL-1 白细胞黏附分子表达肌动蛋白内皮细胞抗体交联活化增强

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

大鼠局灶性脑缺血模型的改进

引用

基础医学与临床 2004年第4期24卷 449-451,F003页

本研究旨在改进SD大鼠的局灶性脑缺血模型的制作方法。 1%的戊巴比妥钠腹腔内注射麻醉动物 ,采用线栓法制作大鼠大脑中动脉栓塞模型。采用 3种不同的手术方法完成手术 ,1组不分离迷走神经节 ,不结扎翼腭动脉 ;2组分离保护迷走神经节、... 详细信息

本研究旨在改进SD大鼠的局灶性脑缺血模型的制作方法。 1%的戊巴比妥钠腹腔内注射麻醉动物 ,采用线栓法制作大鼠大脑中动脉栓塞模型。采用 3种不同的手术方法完成手术 ,1组不分离迷走神经节 ,不结扎翼腭动脉 ;2组分离保护迷走神经节、结扎翼腭动脉 ;3组分离并保护迷走神经节 ,但暂时阻断翼腭动脉。 1、2和 3组的手术死亡率分别为 33%、7%和 10 % (P <0 0 5 ) ,成功率分别是 6 0 %、80 %和 85 % ;与 1、2组相比 ,3组的手术费时短 (P<0 0 1)、创伤小。因而分离并保护迷走神经节是降低局灶性脑缺血模型手术死亡率的重要手段 ,从而成功制作大鼠的局灶性脑缺血模型。

关键词：局灶性脑缺血模型迷走神经大鼠动脉结扎分离腹腔内注射保护手段法制

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

2型糖尿病KKA^y模型小鼠肾脏中TGF-β及其受体和细胞外基质蛋白表达的关系

引用

基础医学与临床 2004年第4期24卷 422-427页

作者：陈丽萌李学旺黄利伟林嘉友李艳中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院肾内科北京100730 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所免疫室北京10005

探讨 2型糖尿病动物模型KKAy 小鼠肾脏细胞外基质蓄积的原因和TGF β及其受体的关系。 15只KKAy 小鼠和 18只C5 7BL J小鼠 ,分成 3组 ,分别于 16、2 0和 2 4周处死动物 ,常规测体重、肾功能、血脂和尿蛋白 ,取肾皮质常规切片、染色 ,观... 详细信息

探讨 2型糖尿病动物模型KKAy 小鼠肾脏细胞外基质蓄积的原因和TGF β及其受体的关系。 15只KKAy 小鼠和 18只C5 7BL J小鼠 ,分成 3组 ,分别于 16、2 0和 2 4周处死动物 ,常规测体重、肾功能、血脂和尿蛋白 ,取肾皮质常规切片、染色 ,观察肾脏病理改变。用免疫组化和免疫印迹法检测不同周龄的KKAy 小鼠及参照组C5 7BL J小鼠肾皮质TGF β1及TGF βⅠ、Ⅱ型受体的表达 ,并用RT PCR方法检测肾皮质细胞外基质Ⅳ型胶原和纤维连接蛋白(fibronectin ,FN)mRNA水平。KKAy 小鼠 16周龄以后便开始出现明显的肥胖、高血糖、高胰岛素血症和蛋白尿 ,符合2型糖尿病早期肾病特点。其FN和Ⅳ型胶原mRNA表达都比同龄参照组C5 7BL J小鼠高 2～ 4倍 ,其中以 16周时最为显著 ,FN为 1 5 3± 0 4 6比较 0 6 3± 0 16 (P <0 0 0 1) ;Ⅳ型胶原为 5 0 8± 1 92比较 1 2 1± 0 2 5 (P <0 0 1)。KKAy 小鼠肾小球内TGF β1及TGF βⅠ型受体的水平明显低于C5 7BL J小鼠 ,而Ⅱ型受体表达却高于C5 7BL J小鼠。2型糖尿病KKAy 小鼠早期肾病时 ,肾皮质细胞外基质合成增加 ,与TGF βⅡ型受体表达增加有关。

关键词：小鼠 2型糖尿病肾皮质 TGF-β 表达 Ⅱ型受体 Ⅳ型胶原细胞外基质蛋白 BL mRNA水平

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

二型谷氨酸羧肽酶口服基因疫苗的制备及其降低大鼠麻醉药用量的初步研究

引用

中华医学杂志 2004年第14期84卷 1152-1156页

作者：田士强王任直李桂林王欣张波姚勇窦万臣孔燕国张振兴栗世方中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院神经外科 100730 中国协和医科大学基础医学研究所

目的　研制携带二型谷氨酸羧肽酶 (GCPⅡ )的口服疫苗 ,探讨该疫苗对大鼠麻醉药用量的影响。方法　采用聚合酶链反应、酶切连接和蓝白筛选的方法 ,构建GCPⅡ的表达载体 ;用磷酸钙共沉淀的方法转染HEK2 93细胞 ,G4 18筛选阳性细胞克隆 ;... 详细信息

目的　研制携带二型谷氨酸羧肽酶 (GCPⅡ )的口服疫苗 ,探讨该疫苗对大鼠麻醉药用量的影响。方法　采用聚合酶链反应、酶切连接和蓝白筛选的方法 ,构建GCPⅡ的表达载体 ;用磷酸钙共沉淀的方法转染HEK2 93细胞 ,G4 18筛选阳性细胞克隆 ;逆转录聚合酶链反应和免疫荧光细胞染色的方法鉴定阳性细胞株 ;氯化钙法制备携带GCPⅡ表达载体的减毒鼠伤寒沙门氏菌口服疫苗(SL GCPⅡ ) ;采用原代培养的巨噬细胞吞噬SL GCPⅡ的方法 ,观察疫苗的体外表达情况 ;将 5 0只雄性SD大鼠随机分为A、B 2组 ,每组 2 5只 ,2组鼠的体重分别为 ( 174 g±13g)和 ( 172 g± 11g) ,差异无显著意义 (P =0 0 72 )。A组胃内灌注 6 0 0 μL、OD2 60 0 6SL GCPⅡ ,两周内 4次给药 ;B组为对照组 ,给予SL32 6 1,剂量和方法与A组相同。采用免疫荧光的方法检测大鼠循环中GCPⅡ抗体滴度 ,观察麻醉药戊巴比妥钠的用量。结果　扩增GCPⅡ基因并构建了含有GCPⅡ基因的表达载体———pCDNA3 1 GCPⅡ ;建立了细胞株HEK 2 93 GCPⅡ ;体外实验证明培养的巨噬细胞吞噬SL GCPⅡ后 ,能够有效表达GCPⅡ基因。体内实验发现口服疫苗能够激活 2 2 / 2 5只SD大鼠产生GCPⅡ抗体 ,实验组麻醉药戊巴比妥钠的用量 ( 36 9mg/kg± 1 6mg/kg)显著低于对照组 ( 4 0

关键词：二型谷氨酸羧肽酶口服基因疫苗大鼠麻醉药戊巴比妥沙门氏菌菌苗

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

原纤维蛋白1基因新突变导致单纯性晶状体异位

引用

中华眼科杂志 2004年第12期40卷 828-831页

作者：睢瑞芳魏洪斌赵家良胡韶毅王波黄尚志董敏中国协和医科大学中国医学科学院北京协和医院眼科眼科研究中心 100730 解放军第二五二医院眼科中国医学科学院基础研究所中国协和医科大学基础医学院

目的　研究我国单纯性晶状体异位家系的致病基因 ,并确定基因突变。方法　对单纯性晶状体异位一家系进行临床研究和系谱分析。采集家系中 7例患者和 3例健康成员的静脉血 ,提取基因组DNA。通过连锁分析确定致病基因的染色体位点后 ,应... 详细信息

目的　研究我国单纯性晶状体异位家系的致病基因 ,并确定基因突变。方法　对单纯性晶状体异位一家系进行临床研究和系谱分析。采集家系中 7例患者和 3例健康成员的静脉血 ,提取基因组DNA。通过连锁分析确定致病基因的染色体位点后 ,应用聚合酶链反应 (PCR)扩增原纤维蛋白(FBN) 1基因外显子 ,直接测序确定致病的基因突变。采用PCR和限制性内切酶法进行群体分析。结果　单纯性晶状体异位患者的FBN1基因外显子 6发生了错义突变 ,cDNA 6 4 0位的鸟嘌呤被腺嘌呤取代 (G6 4 0A) ;对应的甘氨酸改变为丝氨酸 (G2 14S)。突变后EagⅠ内切酶位点消失。家系中健康成员和5 0名正常人均未发现该突变。结论　FBN1基因新突变G6 4 0A (G2 14S)是该家系单纯性晶状体异位的致病基因突变。

关键词：原纤维蛋白1 基因新突变单纯性晶状体异位甘氨酸丝氨酸

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

6A8α-甘露糖苷酶表达抑制使Jurkat细胞间的黏附性增强

引用

中华微生物学和免疫学杂志 2004年第6期24卷 456-461页

作者：曲莉向志光史耕先刘音崔巍杨海鹏朱立平中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所免疫学系北京大学首钢医院检验科

目的　探讨 6A8α 甘露糖苷酶表达抑制对人T淋巴母细胞Jurkat生物学行为的影响。方法　采用反义核酸技术抑制细胞中 6A8α 甘露糖苷酶的表达。用PCR检测转导基因在基因组中的整合。用单抗 6A8作探针 ,Western印迹和免疫荧光染色流式细... 详细信息

目的　探讨 6A8α 甘露糖苷酶表达抑制对人T淋巴母细胞Jurkat生物学行为的影响。方法　采用反义核酸技术抑制细胞中 6A8α 甘露糖苷酶的表达。用PCR检测转导基因在基因组中的整合。用单抗 6A8作探针 ,Western印迹和免疫荧光染色流式细胞术检测细胞中 6A8α 甘露糖苷酶的表达状况。用ConA结合试验检测细胞蛋白质的糖基化改变。普通光学显微镜观察细胞的形态。用DNA芯片技术分析AS细胞和M细胞mRNA表达的差异。用RT PCR和免疫荧光染色流式细胞术验证基因芯片结果的可靠性。结果　制备了 6A8α 甘露糖苷酶表达抑制的Jurkat细胞 (AS)。与对照细胞 (野生型细胞W和转导空载体的细胞M)相比 ,AS细胞在培养中黏附成大团块。DNA芯片分析见与M细胞相比 ,AS细胞中有 19个基因的表达上调 ,2 0个基因的表达下调。上调的基因中有一些与细胞间黏附相关 ,如CD5 4、CD11a、CD2 4、CD82、整合素αX、整合素α7、整合素αE、IL 1R、IL 2Rγ和TNFSF9。RT PCR肯定了DNA芯片分析的可靠性。免疫荧光染色流式细胞术进一步肯定了CD5 4和CD11a在AS细胞表达的上调。结论　 6A8α 甘露糖苷酶表达抑制使Jurkat细胞间黏附增强 ,CD5 4和CD11a等黏附分子表达的增高可能与此相关。

关键词： 6A8α-甘露糖甘酶表达抑制 Jurkat细胞黏附性生物学糖基化

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

带血管肌筋膜包埋促进细胞载体复合体成骨效应与预构骨肌皮瓣的实验研究

引用

中华整形外科杂志 2004年第2期20卷 132-135页

作者：赵宇胡平陆应麟高峰乔群戚可名中国医学科学院中国协和医科大学整形外科医院北京100041 清华大学军事医学科学院基础医学研究所

目的　研究带血管肌筋膜包裹方法促进植入体种子细胞的成活作用。方法　经解剖分离裸鼠带背阔肌血管蒂的深筋膜 ,包裹人骨髓间充质干细胞 (MSCs)与载体 3 羟基丁酸、3 羟基己酸无规嵌段共聚物复合物 ,另将同样复合物植入裸鼠臀部肌袋中 ... 详细信息

目的　研究带血管肌筋膜包裹方法促进植入体种子细胞的成活作用。方法　经解剖分离裸鼠带背阔肌血管蒂的深筋膜 ,包裹人骨髓间充质干细胞 (MSCs)与载体 3 羟基丁酸、3 羟基己酸无规嵌段共聚物复合物 ,另将同样复合物植入裸鼠臀部肌袋中 (无血管蒂 )作为对照。经HE染色、骨桥素的原位杂交、Vonkossa钙染色与图像软件分析评价带血管肌筋膜包裹方法对促进植入体血管化与细胞成活的影响。结果　实验组术后 2周的骨桥素表达与 4周的钙染色程度均高于对照组。结论　带血管肌筋膜的包裹能促进组织工程植入物血管化与种子细胞的成活 ,从而能促进成骨。

关键词：带血管肌筋膜细胞载体复合体成骨效应骨肌皮瓣骨髓间充质干细胞组织工程

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

中华医学会消化病学分会2003年全国胃肠动力学术会议纪要

引用

中华消化杂志 2004年第4期24卷 252-253页

作者：柯美云周吕姜葵王邦茂中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院消化科 100730 中国医学科学院基础医学研究所天津医科大学总医院消化科

中华医学会消化病学分会2003年全国胃肠动力学术会议于2003年10月17～19日在天津举行,来自国内外的内、外、儿、中医科等近400名代表参加了会议.本次会议共有27个专题报告,收到论文172篇,其中12篇进行了大会发言交流.会议就胃肠动力疾... 详细信息

中华医学会消化病学分会2003年全国胃肠动力学术会议于2003年10月17～19日在天津举行,来自国内外的内、外、儿、中医科等近400名代表参加了会议.本次会议共有27个专题报告,收到论文172篇,其中12篇进行了大会发言交流.会议就胃肠动力疾病的基础与临床、回顾及展望均进行了热烈讨论.会议论文交流主要涉及以下几个方面.

关键词：中华医学会消化病学 2003年全国胃肠动力学术会议心理障碍肠梗阻

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：