目的回顾分析经病理确诊的隐源性机化性肺炎临床、病理和影像学特征,以提高临床诊断水平。方法1993年4月至2005年10月在北京协和医院住院、经病理确诊的机化性肺炎23例,对其进行临床、影像学和病理学综合分析。结果23例机化性肺炎中5例为药物引起或合并结缔组织病,18例为隐源性机化性肺炎(cryptogen ic organ izing pneumon itis,COP)。其中10例经皮肺活检或经支气管肺活检,8例开胸肺活检或经胸腔镜肺活检,男8例,女10例,年龄(53.5±11.0)岁。气短、咳嗽及肺部爆裂音及湿性啰音是主要的症状和体征。肺功能显示限制性通气功能障碍(11例)及弥散障碍(18例)。胸部CT表现为磨玻璃样变(4例),肺实变(13例)伴支气管充气征(3例),胸腔积液(4例)。支气管肺泡灌洗液中淋巴细胞占细胞总数的0.40±0.16,中性粒细胞为0.15±0.08,嗜酸粒细胞为0.05±0.03;CD4/CD8为0.43±0.21。所有患者均给予糖皮质激素治疗。16例患者经随诊(8.67±6.21)个月仍存活,临床缓解或病情稳定。1例患者对糖皮质激素反应差,死于进行性加重的呼吸衰竭。另1例患者糖皮质激素治疗后出现肺部感染,死于感染性休克。结论临床表现及影像学特征对COP的诊断有一定的提示作用,但确诊需依靠病理检查。经皮肺活检或经支气管镜肺活检结合支气管肺泡灌洗液检查,对临床诊断隐源性机化性肺炎有较高的价值。
目的构建能自我激活的活性半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)3分子,并探讨其对卵巢上皮性癌(卵巢癌)细胞的致凋亡作用。方法利用基因重组技术构建活性 caspase-3分子——rev-caspase-3及其重组腺病毒——Ad-rev-casp3;应用免疫组化方法、细胞计数试剂盒8、流式细胞仪和蛋白印迹法分别检测 rev-caspase-3作用后卵巢癌细胞系 AO 细胞中活性 caspae-3蛋白的表达情况、细胞存活率、凋亡率、细胞周期、caspase-3活性亚单位 p17和聚(腺苷二磷酸-核糖)多聚酶(PARP)的分解产物 p85的表达水平,应用透射电镜观察 rev-caspase-3作用后细胞的超微结构,实时 PCR 技术检测细胞中凋亡相关基因的表达情况;建立卵巢癌裸鼠皮下及腹腔移植瘤模型,观测 rev-caspase-3作用后裸鼠生存情况及肿瘤体积的变化。结果 Ad-rev-casp3作用后的 AO 细胞中显著表达活性 caspase-3蛋白,细胞质明显棕染;细胞中活性 caspase-3亚单位 p17和 PARP 裂解片段 p85的表达水平升高。Ad-rev-casp3以感染复数(MOI)为70作用后的 AO 细胞存活率为30.3%,凋亡率为40.2%。Ad-rev-casp3以 MOI=10作用后的细胞凋亡率只为3.4%,但此时 S 期细胞比例高达56.5%,G_1期比例下降至9.8%,与未感染 Ad-rev-casp3(MOI=0)的 AO 细胞的 S 期和 G_1期比例显著不同(P 均<0.05)。Ad-rev-casp3作用后的 AO 细胞呈现显著的凋亡形态改变,电镜下见明显的凋亡小体形成;细胞中活性 caspase-3基因的表达水平显著升高,为9.44。Ad-rev-casp3能显著延长荷瘤裸鼠的生存期,平均生存时间为(213±16)d,并显著抑制移植瘤的生长,在第1次注射后53 d 时抑瘤率为70%。结论表达 rev-caspase-3的重组腺病毒载体对卵巢癌细胞有强烈的致凋亡作用,并可显著延长荷瘤裸鼠的生存期,抑制肿瘤生长。
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