检索结果-内蒙古大学图书馆

中华检验医学杂志 2006年第1期29卷 69-71页

作者：车轶群齐新郭健齐军刘芝华中国医学科学院中国协和医科大学肿瘤医院检验科北京100021 吉林大学中日联谊医院检验科卫生部临床检验中心中国医学科学院中国协和医科大学肿瘤研究所分子肿瘤学国家重点实验室

目的探讨分泌性富含半胱氨酸的酸性蛋白(SPARC)在食管鳞癌(ESCC)增殖、浸润、转移中的作用和意义。方法用半定量逆转录聚合酶链反应(RTPCR)分析SPARC在24份ESCC组织和其相邻的正常黏膜组织的差异表达量及基因表达变化趋势。用酶联免疫... 详细信息

目的探讨分泌性富含半胱氨酸的酸性蛋白(SPARC)在食管鳞癌(ESCC)增殖、浸润、转移中的作用和意义。方法用半定量逆转录聚合酶链反应(RTPCR)分析SPARC在24份ESCC组织和其相邻的正常黏膜组织的差异表达量及基因表达变化趋势。用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测40名正常对照者和32例ESCC患者手术前后血浆中SPARC水平变化。结果经RTPCR分析SPARC在24份配对标本中的表达,其中19份ESCC组织中的表达明显高于其配对的正常黏膜组织,5份差异表达不明显;而在不同分化程度组织中的表达差异无统计学意义(P=0.663),淋巴结转移组与未转移组的差异有统计学意义(P<0.05)。正常人血浆SPARC水平[(644±124)ng/ml]与ESCC术前患者[(613±119)ng/ml]的差异无统计学意义(P=0.829);ESCC患者术后1周血浆SPARC水平[(245±45)ng/ml]明显低于术前(P<0.01),而19例ESCC术前患者血浆SPARC水平与术后3个月[(661±182)ng/ml]的差异亦无统计学意义(P=0.935);不同分化程度的ESCC患者血浆SPARC水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论组织中SPARC水平与ESCC的发生与发展密切相关,有淋巴结转移时SPARC表达升高,血浆SPARC水平对ESCC诊治无指导意义。

关键词：食管肿瘤基因表达基因差异表达分析酸性蛋白半胱氨酸食管鳞癌分泌性酶联免疫吸附试验(ELISA) 半定量逆转录-聚合酶链反应 SPARC

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

重组反义c-myc腺病毒抑制K562细胞生长、诱导凋亡的作用

引用

肿瘤 2006年第1期26卷 24-27,36页

作者：陈龙陈洁平林晨张芳兰州军区总医院肿瘤科兰州730050 第三军医大学西南医院血液科重庆400038 中国医学科学院中国协和医科大学肿瘤研究所分子肿瘤学国家重点实验室北京100021

目的研究重组反义c-myc腺病毒(Ad-AS-c-myc)对人慢性粒细胞K562细胞系抑制生长,诱导凋亡作用及分子机制,探讨Ad-AS-c-myc用于慢性粒细胞白血病基因治疗的可能性。方法采用重组腺病毒Lac-Z(Ad-LacZ)及Ad-AS-c-myc联合多聚季胺转染K562细... 详细信息

目的研究重组反义c-myc腺病毒(Ad-AS-c-myc)对人慢性粒细胞K562细胞系抑制生长,诱导凋亡作用及分子机制,探讨Ad-AS-c-myc用于慢性粒细胞白血病基因治疗的可能性。方法采用重组腺病毒Lac-Z(Ad-LacZ)及Ad-AS-c-myc联合多聚季胺转染K562细胞,X-gal染色判断转染效率。采用形态学、MTT试验、RT-PCR、DNA凝胶电泳、流式细胞仪及免疫细胞化学等方法进行研究。结果多聚阳离子可提高腺病毒载体对K562细胞的转染,Ad-LacZ+多聚季胺转染率达86%。Ad-AS-c-myc能抑制K562细胞c-myc基因在转录水平的表达,K562细胞生长受抑(抑制率38%);Ad-AS-c-myc可使K562细胞G1、G2期阻滞,增殖相关基因PCNA表达降低,Apo2.7蛋白阳性细胞率增高,DNA电泳出现DNA梯形条带。结论Ad-AS-c-myc对K562细胞具有抑制生长及诱导凋亡作用,其生物学作用与K562细胞c-myc及PCNA的表达降低有关。Ad-AS-c-myc在慢性粒细胞白血病基因治疗中具有潜在的临床价值。

关键词：白血病,髓样,慢性基因,myc 寡脱氧核糖核苷酸类,反义转染 K562细胞

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

肿瘤细胞CAR表达水平与5型腺病毒转导效率的关系

引用

中国肿瘤生物治疗杂志 2006年第6期13卷 429-434页

作者：王海娟李云峰钱海利张雪燕付明梁萧詹启敏林晨中国医学科学院中国协和医科大学肿瘤医院肿瘤研究所分子肿瘤学国家重点实验室北京100021

目的：通过体外、体内实验探讨肿瘤细胞柯萨奇腺病毒受体（coxsackie adenovirus receptor，CAR）表达水平与腺病毒转导效率的关系，为腺病毒相关的生物制剂在临床个体化应用提供实验依据。方法：将载有绿色荧光蛋白的Ad5型腺病毒（***... 详细信息

目的：通过体外、体内实验探讨肿瘤细胞柯萨奇腺病毒受体（coxsackie adenovirus receptor，CAR）表达水平与腺病毒转导效率的关系，为腺病毒相关的生物制剂在临床个体化应用提供实验依据。方法：将载有绿色荧光蛋白的Ad5型腺病毒（***）以100MOI、200MOI分别感染人食管癌细胞系KYSE510、KYSE150、EC9706、人宫颈癌细胞系HeLa、人卵巢癌细胞系SKOV3、人肝癌细胞系HepG2和人肺癌细胞系A549，感染后48h通过流式细胞术检测Ad—GFP对不同细胞系的转导效率。采用Western blotting方法检测这些细胞中CAR的表达水平。将HeLa、A549、SKOV3、EC9706细胞分别接种于裸鼠腋下，接种细胞数分别为3×10^6、3×10^6、3×10^6、2×10^6，建立裸鼠移植瘤模型。待肿瘤长径达5～7mm时，在裸鼠移植瘤内注射Ad—GFP，每次1×10^9PFU，间隔48h注射第2次。第2次注射后48h处死裸鼠，剖取瘤组织，荧光显微镜观察冰冻切片中GFP的表达情况以判定腺病毒在瘤体内的转导效率，同时用免疫组化法检测瘤组织内的CAR表达水平。结果：200MOIAd—GFP感染A549、HeLa、HepG2、KYSE150细胞48h后分别有92．67％、89．31％、84．98％、74．59％的细胞表达GFP；而SKOV3、KYSE510、EC9706细胞中腺病毒的转导效率明显降低，GFP阳性率分别为30．06％、27．40％、18．93％；各种细胞的CAR蛋白表达水平与腺病毒的转导效率呈正相关。注射Ad—GFP的裸鼠移植瘤组织中可见HeLa、A549瘤组织内有明显的点状绿色荧光，而SKOV3、EC9706瘤组织内表达GFP的细胞数明显少于前两种瘤组织；HeLa、A549裸鼠移植瘤组织内大多数瘤细胞高表达CAR（卅），SKOV3、EC9706移植瘤组织内CAR表达水平较低（＋或-），表明瘤体内CAR表达水平与***的转导效率也呈正相关。结论：体内外实验均显示肿瘤细胞的CAR表达水平与5型腺病毒转导效率密切相关。肿瘤患者治疗前检测组织中CAR表达水平有助于规范腺病毒载体的基因治疗药物的个体化使用。

关键词：肿瘤腺病毒柯萨奇腺病毒受体基因治疗

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

吉西他滨耐药胰腺癌细胞系的耐药机制

引用

中华肿瘤杂志 2005年第12期27卷 721-726页

作者：要洁冯奉仪林晨张雪燕付明梁萧杨莹中国医学科学院中国协和医科大学肿瘤研究所肿瘤医院内科中国医学科学院中国协和医科大学肿瘤研究所分子肿瘤学国家重点实验室北京100021 首都医科大学附属复兴医院肿瘤内科

目的探讨吉西他滨耐药胰腺癌细胞系的耐药机制。方法应用免疫组织化学方法和逆转录PCR法(RT-PCR),对吉西他滨耐药细胞系的耐药机制进行了研究。选用沙尔威辛(SAL)进行逆转耐药实验,采用了RT-PCR法、流式细胞仪和MTT法,评估SAL逆转耐药... 详细信息

目的探讨吉西他滨耐药胰腺癌细胞系的耐药机制。方法应用免疫组织化学方法和逆转录PCR法(RT-PCR),对吉西他滨耐药细胞系的耐药机制进行了研究。选用沙尔威辛(SAL)进行逆转耐药实验,采用了RT-PCR法、流式细胞仪和MTT法,评估SAL逆转耐药的效果。结果免疫组织化学法显示,耐药细胞SW1990-GEM的P-糖蛋白(P-gp)表达为弱阳性,其亲本细胞SW1990为阴性。多药耐药相关蛋白(MRP)在两细胞系表达均为阴性。SW1990-GEM的多药耐药基因(mdr-1)在mRNA水平上的转录比其亲本细胞系SW1990增强;脱氧胞苷激酶(dCK)基因的转录减少;核苷酸还原酶(RR)基因的转录增强。经过SAL作用后,mdr-1在mRNA水平上的转录减少。流式细胞仪显示,经过4,30,60,90nmol/L SAL作用后,细胞内罗丹明123的蓄积累分别增加1.04,1.16,1.39,1.72倍。用4nmol/L SAL进行逆转吉西他滨耐药实验,未接受SAL处理的对照组对吉西他滨的IC50为203.72μmol/L;经SAL作用1h后再加吉西他滨组的IC50为121.36μmol/L(P=0.219);经SAL作用24h后再加吉西他滨组的IC50为121.64μmol/L(P=0.167)。结论胰腺癌细胞对吉西他滨耐药的原因与dCK减少有关,同时也与mdr-1和RR升高相关。SAL能够下调SW1990-GEM耐药细胞的mdr-1和P-gp表达,但低浓度的SAL不能逆转SW1990-GEM对吉西他滨的耐药。

关键词：吉西他滨胰腺肿瘤沙尔威辛药物耐受性

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

食管癌表达上调基因NADH氧化还原酶MLRQ亚基的研究及临床意义

引用

中华医学杂志 2005年第9期85卷 590-592页

作者：王涛刘芝华李泽坚张立勇刘煜孙国斌王秀琴吴旻上海肺科医院胸外科 200433 中国医学科学院中国协和医科大学肿瘤研究所分子肿瘤学国家重点实验室北京协和医院胸外科

目的研究在食管癌中差异表达明显的NADH氧化还原酶MLRQ亚基基因在食管癌中的表达,并探讨它在食管癌发生发展过程中的可能机制。方法利用微陈列技术方法获得一个在食管癌中的表达显著上调的NADH氧化还原酶MLRQ亚基基因,用RT PCR及Norther... 详细信息

目的研究在食管癌中差异表达明显的NADH氧化还原酶MLRQ亚基基因在食管癌中的表达,并探讨它在食管癌发生发展过程中的可能机制。方法利用微陈列技术方法获得一个在食管癌中的表达显著上调的NADH氧化还原酶MLRQ亚基基因,用RT PCR及Northern印迹从mRNA水平检测其在38对食管癌、7对贲门癌、14对胃癌、11对结肠癌和7对肝癌等消化系统肿瘤中的表达情况。结果(1)MLRQ基因在食管癌、贲门癌、胃癌、结肠癌和肝癌中显著上调者,分别为81.6%(31/38)、57.1%(4/7)、85.7%(12/14)、65.6%(7/11)、57.1%(4/7)。用X2检验,各组之间差异无统计学意义(P>0.05)。(2)在38对食管癌配对组织中,MLRQ基因上调与临床分期、肿瘤浸润程度、淋巴结转移及分化程度无相关性(均P>0.05)。结论MLRQ亚基基因在消化道肿瘤中表达上调。

关键词：食管癌 NADH 表达上调基因上调肝癌胃癌氧化还原酶 mRNA水平印迹

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

SLP-2 mRNA在子宫内膜癌中的表达及其意义

引用

中华妇产科杂志 2005年第8期40卷 553-557页

作者：冯旺琴崔竹梅冯凤芝祈秀娟丁芳李文东刘芝华青岛大学医学院附属医院妇产科中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院妇产科中国医学科学院肿瘤研究所分子肿瘤学国家重点实验室

目的探讨SLP-2mRNA在子宫内膜癌中的表达,及其在子宫内膜癌发生、发展中的作用。方法采用半定量RT-PCR技术检测32例子宫内膜癌组织和28例正常子宫内膜组织中SLP-2mRNA的表达情况;并用表达SLP-2基因的正义和反义质粒,分别转染子宫内膜癌... 详细信息

目的探讨SLP-2mRNA在子宫内膜癌中的表达,及其在子宫内膜癌发生、发展中的作用。方法采用半定量RT-PCR技术检测32例子宫内膜癌组织和28例正常子宫内膜组织中SLP-2mRNA的表达情况;并用表达SLP-2基因的正义和反义质粒,分别转染子宫内膜癌细胞系HEC-1B细胞,RT-PCR技术检测转染前、后HEC-1B细胞中SLP-2mRNA的表达情况,观察转染前、后细胞的形态变化;用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞生长情况,并绘制细胞生长曲线;流式细胞仪检测细胞周期的变化。结果子宫内膜癌组织中SLP-2mRNA的表达水平为1.6±0.7,正常子宫内膜组织为0.7±0.3,两者比较,差异有统计学意义(P<0.05)。表达SLP-2基因的正义和反义质粒成功转入HEC-1B细胞中,正义质粒转染后SLP-2mRNA表达水平增加约2.4倍,细胞生长变快,其中G1期减少12.5%,S期增高8.0%;反义质粒转染后SLP-2mRNA表达水平减少50%,细胞生长变慢,其中G1期增高10.5%,S期减少9.8%。结论子宫内膜癌中SLP-2mRNA的高表达与子宫内膜癌发生、发展有一定关系。

关键词：子宫内膜肿瘤蛋白质类逆转录聚合酶链反应转染 mRNA表达子宫内膜癌 PCR技术检测细胞生长曲线其意义表达及

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

次级淋巴组织趋化因子基因转染对小鼠黑色素瘤细胞生物学特性的影响

引用

免疫学杂志 2005年第5期21卷 362-365页

作者：马飞孙文欣张叔人刘蓉枝付明梁肖张雪艳林晨中国医学科学院中国协和医科大学肿瘤医院肿瘤研究所分子肿瘤学国家重点实验室中国医学科学院中国协和医科大学肿瘤医院肿瘤研究所免疫室北京100021

目的研究次级淋巴组织趋化因子(SLC)基因转染对小鼠恶性黑色素瘤细胞生物学特性的影响。方法采用脂质体法将小鼠SLC基因转染至小鼠恶性黑色素瘤细胞中,并通过G418筛选出转基因细胞克隆。体外检测SLC基因转染恶性黑色素瘤细胞的增殖,并... 详细信息

目的研究次级淋巴组织趋化因子(SLC)基因转染对小鼠恶性黑色素瘤细胞生物学特性的影响。方法采用脂质体法将小鼠SLC基因转染至小鼠恶性黑色素瘤细胞中,并通过G418筛选出转基因细胞克隆。体外检测SLC基因转染恶性黑色素瘤细胞的增殖,并通过趋化小室法检测细胞培养基上清液中SLC的趋化活性。检测野生型和基因转染的恶性黑色素瘤细胞在体内的致瘤性,并病理检测肿瘤组织中免疫细胞的浸润。结果SLC基因转染的恶性黑色素瘤细胞和野生型恶性黑色素瘤细胞在体外的增殖没有明显差别。分泌于细胞培养基上清液中的SLC表现出了趋化活性。SLC基因转染并没有降低细胞的致瘤性,但是移植瘤的生长明显慢于野生型恶性黑色素瘤细胞移植瘤的生长,并且病理证实SLC基因转染的肿瘤细胞移植瘤内呈现明显的淋巴细胞浸润。结论SLC基因转染在小鼠黑色素瘤能诱导抗肿瘤免疫,有可能被应用于恶性肿瘤的免疫治疗。

关键词：次级淋巴组织趋化因子基因转移肿瘤疫苗趋化性

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

SLP-2基因反义核酸对食管鳞癌细胞系TE12生长和增殖的影响

引用

癌症 2005年第2期24卷 155-159页

作者：张立勇丁芳刘仲敏李文东刘芝华李衍达清华大学自动化系生物信息学教育部重点实验室北京100084 中国医学科学院中国协和医科大学肿瘤医院肿瘤研究所分子肿瘤学国家重点实验室北京100021

背景与目的应用cDNA微阵列从食管鳞癌配对组织中得到一批在食管鳞癌中差异表达的基因,其中包括SLP-2(stomatin-likeprotein2,SLP-2),它在食管鳞癌中高表达。为验证SLP-2在食管鳞癌中的高表达,构建SLP鄄2真核表达载体,以探讨SLP鄄2与食... 详细信息

背景与目的应用cDNA微阵列从食管鳞癌配对组织中得到一批在食管鳞癌中差异表达的基因,其中包括SLP-2(stomatin-likeprotein2,SLP-2),它在食管鳞癌中高表达。为验证SLP-2在食管鳞癌中的高表达,构建SLP鄄2真核表达载体,以探讨SLP鄄2与食管鳞癌发生、发展的关系。方法利用PCR从正常食管上皮cDNA中扩增SLP-2的开放阅读框,将SLP-2重组到pcDNA3.1/myc-His(-)中,构建SLP鄄2的真核表达质粒。然后将重组子导入食管鳞癌细胞系TE12中。半定量RT鄄PCR鉴定转染细胞,获得阳性细胞克隆。采用MTT比色法、平板克隆形成实验、流式细胞术和MTS比色法分析SLP鄄2对TE12细胞的影响。结果SLP鄄2在食管鳞癌中高表达。SLP鄄2基因反义转染抑制TE12细胞SLP鄄2表达时,可抑制细胞生长和增殖,导致S期阻滞,并抑制TE12细胞的粘附功能。结论食管鳞癌中SLP鄄2表达上调促进TE12细胞过度生长和增殖,并参与食管鳞癌的转移。

关键词：食管肿瘤 SLP-2 细胞转染

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

arresten对人胃癌细胞SGC-7901裸鼠移植瘤生长的抑制作用的研究

引用

中华外科杂志 2005年第21期43卷 1391-1394页

作者：卢灿荣陈凛窦春青陈文斌林晨解放军总医院肝胆外科北京100853 解放军总医院普通外科北京100853 中国医学科学院中国协和医科大学肿瘤研究所分子肿瘤学国家重点实验室

目的探讨arresten抑制人胃癌细胞SGC-7901裸鼠移植瘤生长的作用。方法构建包含arresten cDNA的分泌型真核表达质粒pcDNA3.1(+)-ss-arresten,并以脂质体法将重组质粒转染至SGC-7901细胞。蛋白印迹法(W estern b lot)检测SGC-7901是否分... 详细信息

目的探讨arresten抑制人胃癌细胞SGC-7901裸鼠移植瘤生长的作用。方法构建包含arresten cDNA的分泌型真核表达质粒pcDNA3.1(+)-ss-arresten,并以脂质体法将重组质粒转染至SGC-7901细胞。蛋白印迹法(W estern b lot)检测SGC-7901是否分泌表达arresten,同时,通过生长曲线绘制及生长周期测定的方法了解上述转基因措施本身对SGC-7901细胞的体外生物学特性的影响。将转基因的SGC-7901细胞株接种至裸鼠皮下,使其在接种局部表达arresten,观察肿瘤生长情况。结果成功构建了分泌型真核表达载体pcDNA3.1(+)-ss-arresten,并获得了可分泌表达arresten的人胃癌SGC-7901细胞株。质粒转染对SGC-7901细胞增殖特性无影响。转基因SGC-7901细胞的裸鼠移植瘤生长缓慢。结论arresten抑制人胃癌SGC-7901移植瘤的生长,其途径可能是通过抑制其滋养血管的生长而实现。

关键词：胃肿瘤真核表达载体血管生成抑制剂 Arresten

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

硒蛋白P同功型突变体短肽hSelP82m分析

引用

第四军医大学学报 2005年第10期26卷 872-874页

作者：王青窦科峰钱海利马庆久鲁建国宁力房青林晨第四军医大学西京医院肝胆外科陕西西安710033 中国医学科学院中国协和医科大学肿瘤研究所分子肿瘤学国家重点实验室北京100021 第四军医大学唐都医院普通外科陕西西安710038

目的: 切割硒蛋白P同功型突变体活性肽hSelP137m,以得到可能具备相同生物学活性而氨基酸数目更少的短肽.方法: 利用生物信息学技术分析hSelP280m,hSelP137m的活性功能域,用羟胺切割hSelP137m,并用SDSPAGE及蛋白质印迹加以分析验证.结果:... 详细信息

目的: 切割硒蛋白P同功型突变体活性肽hSelP137m,以得到可能具备相同生物学活性而氨基酸数目更少的短肽.方法: 利用生物信息学技术分析hSelP280m,hSelP137m的活性功能域,用羟胺切割hSelP137m,并用SDSPAGE及蛋白质印迹加以分析验证.结果: 切割hSelP137m后得到了82(28aa- 109aa)个氨基酸的多肽,在特定的位置出现了预期的目的蛋白条带.利用生物信息学技术加以分析,认为hSelP82m基本具备hSelP137m的生物学活性.结论: 经切割硒蛋白P同功型突变体活性肽hSelP137m,成功得到82个氨基酸的短肽hSelP82m,并且认为其基本具备hSelP137m的生物学活性.

关键词：硒蛋白质类肽类计算生物学化学裂解印迹法蛋白质

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：