检索结果-内蒙古大学图书馆

中国医学科学院学报 2001年第4期23卷 361-364页

作者：王太宇吴宁华沈珝琲中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的研究细胞在热应激时的基因表达谱变化。方法提取热休克前后Jurkat细胞的总RNA，经逆转录合成cDNA探针后分别与人cDNA表达点阵杂交，再用ESTblot软件进行分析，并用Northern印迹证明基因表达的改变。结果经42℃ 1h热休克的细胞中... 详细信息

目的研究细胞在热应激时的基因表达谱变化。方法提取热休克前后Jurkat细胞的总RNA，经逆转录合成cDNA探针后分别与人cDNA表达点阵杂交，再用ESTblot软件进行分析，并用Northern印迹证明基因表达的改变。结果经42℃ 1h热休克的细胞中有40个基因的mRNA表达升高，16个基因的mRNA表达降低。其中除热休克基因表达显著增加外，原癌基因c-Jun、cdc 样激酶CLK-1基因表达明显增加。整合素integrin α-4基因，转化生长因子TGF-β基因表达显著降低。Northern 印迹证明c-Jun及hsp90α基因表达升高。结论在热应激条件下Jurkat细胞热休克基因、c-Jun、CLK-1基因表达增加，integrin α-4基因、TGF-β基因表达减少。

关键词：人cDNA表达点阵热休克基因表达

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高密度脂蛋白诱导内皮细胞系差异表达基因的研究

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中华医学杂志 2002年第13期82卷 921-923页

作者：张文成陈保生曾武威白玲薛红吴纲中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的　研究高密度脂蛋白 (HDL)抗动脉粥样硬化 (AS)的分子机理 ,克隆并分析血管内皮细胞在HDL作用下差异表达的已知和未知基因。方法　应用差异显示逆转录聚合酶链反应技术 ,分析人脐静脉内皮细胞系 (ECV) 30 4经高密度脂蛋白诱导后表... 详细信息

目的　研究高密度脂蛋白 (HDL)抗动脉粥样硬化 (AS)的分子机理 ,克隆并分析血管内皮细胞在HDL作用下差异表达的已知和未知基因。方法　应用差异显示逆转录聚合酶链反应技术 ,分析人脐静脉内皮细胞系 (ECV) 30 4经高密度脂蛋白诱导后表达明显差异的cDNA。对差异基因进行序列测定和同源性比较 ,Northern印迹分析部分差异基因的表达情况。结果　HDL诱导ECV 30 4细胞出现一些上调和下调表达的cDNA ,差异表达明显的已知基因有 9个 ,其中上调表达的基因包括STE2 0样激酶、PBK1蛋白、转谷氨酰胺酶、肌球蛋白轻链、apobec 1结合蛋白、DAP蛋白 ;下调表达的基因有核糖体蛋白L7a (RPL7A)、线粒体外膜电压依赖性阴离子通道蛋白基因、甘氨酰胺核糖核苷酸甲酰基转移酶。差异表达明显的未知基因 4个。Northern印迹证实 ,转谷氨酰胺酶基因表达上调5 0 % ,apobec 1结合蛋白基因表达上调 70 %。结论　HDL可诱导ECV 30 4细胞转谷氨酰胺酶、apobec 1结合蛋白表达水平上调。这两个基因表达水平的升高可能与HDL抗动脉粥样硬化作用相关。

关键词：高密度脂蛋白逆转录聚合酶链反应 HDL 基因表达动脉粥样硬化

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神经营养素-4(NT-4)在昆虫杆状病毒表达系统中的克隆与表达

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中国医学科学院学报 2001年第2期23卷 141-144页

作者：马晓骊黄秉仁中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所生化室医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的通过昆虫杆状病毒表达系统的优势，表达出具有生物学活性的神经营养素-4（ hNT-4）蛋白。方法通过 PCR方法获得 hNT-4成熟肽的基因，将其连接到昆虫表达载体 pAcGP67B上，在昆虫细胞 Sf9中进行表达。对表达产物进行免疫原性和生... 详细信息

目的通过昆虫杆状病毒表达系统的优势，表达出具有生物学活性的神经营养素-4（ hNT-4）蛋白。方法通过 PCR方法获得 hNT-4成熟肽的基因，将其连接到昆虫表达载体 pAcGP67B上，在昆虫细胞 Sf9中进行表达。对表达产物进行免疫原性和生物学活性测定。结果获得 hNT-4蛋白的表达产物， SDS-PAGE电泳显示表达产物相对分子质量为 15 000。经 Western-blot验证，表达上清及细胞全蛋白均有一条能与抗人 NT-4抗体发生特异性免疫反应的条带。经 PC12细胞测定，表达上清中的 rNT-4蛋白具有明确的生物学活性。结论 hNT-4在昆虫杆状病毒表达系统中的表达为今后进一步深入研究 hNT-4的功能及其在临床中的应用提供了条件。

关键词：神经营养素-4 载体PacGP67B Sf 细胞昆虫杆状病毒表达系统克隆表达

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阵发性睡眠性血红蛋白尿症患者骨髓正常及异常造血细胞增殖及生存特性初探

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中华血液学杂志 1997年第10期18卷 517-520页

作者：李强张之南许彩民王美健沈悌武永吉中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室

目的：探讨阵发性睡眠性血红蛋白尿症（ＰＮＨ）患者正常及异常造血细胞的增殖及生存特性。方法：用ＣＤ５９单抗及羊抗鼠ＩｇＧ免疫磁珠将６例患者骨髓单个核细胞（ＢＭＭＮＣ）分选为ＣＤ５９＋及ＣＤ５９－两群，分别进行体外培养并... 详细信息

目的：探讨阵发性睡眠性血红蛋白尿症（ＰＮＨ）患者正常及异常造血细胞的增殖及生存特性。方法：用ＣＤ５９单抗及羊抗鼠ＩｇＧ免疫磁珠将６例患者骨髓单个核细胞（ＢＭＭＮＣ）分选为ＣＤ５９＋及ＣＤ５９－两群，分别进行体外培养并与正常对照比较。结果：ＰＮＨ患者ＣＤ５９＋及ＣＤ５９－ＢＭＭＮＣ的体外增殖及生存能力均弱于正常ＢＭＭＮＣ；患者体内“正常”的ＣＤ５９＋ＢＭＭＮＣ生长能力反较异常的ＣＤ５９－细胞显著降低；患者ＣＤ５９＋细胞培养后出现ＣＤ５９抗原的丢失，正常对照则无此改变。结论：ＰＮＨ患者ＢＭＭＮＣ中ＣＤ５９－的异常造血细胞具有相对的生长优势，ＣＤ５９＋的ＢＭＭＮＣ并非真正“正常”，可能存在尚未明了的某种缺陷；ＰＮＨ发病机制复杂，异常细胞除可因ＰＩＧ－Ａ基因突变产生外，还可能因ＧＰＩ蛋白的丢失而产生。

关键词：血红蛋白尿症 PNA 骨髓 CD59抗原

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血管紧张素转化酶基因的插入/缺失多态性与其血清水平及心肌梗塞的关系

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中华心血管病杂志 1997年第1期25卷 34-36页

作者：郑豪义戴玉华邱长春中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院心内科中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室

旨在探讨中国人中血管紧张素转化酶（ＡＣＥ）基因的插入／缺失（ｉｎｓｅｒｔｉｏｎ／ｄｅｌｅｔｉｏｎ，Ｉ／Ｄ）多态性与血清中ＡＣＥ水平及心肌梗塞的关系。心肌梗塞患者１０３例；正常对照９６例。位于ＡＣＥ基因第１６内含子的Ｉ... 详细信息

旨在探讨中国人中血管紧张素转化酶（ＡＣＥ）基因的插入／缺失（ｉｎｓｅｒｔｉｏｎ／ｄｅｌｅｔｉｏｎ，Ｉ／Ｄ）多态性与血清中ＡＣＥ水平及心肌梗塞的关系。心肌梗塞患者１０３例；正常对照９６例。位于ＡＣＥ基因第１６内含子的Ｉ／Ｄ多态性经ＰＣＲ扩增可分为三种基因型：纯合缺失型（ＤＤ），纯合插入型（Ｉ），杂合子型（ＩＤ）。血清ＡＣＥ水平在ＤＤ、ＤＩ、Ｉ型分别为２８．３±９．９Ｕ／ｍｌ、２４．５±８．４Ｕ／ｍｌ、１９．２±４．８Ｕ／ｍｌ，即ＤＤ＞ＤＩ＞ⅠⅠ。结果显示，心肌梗塞患者的Ｄ等位基因的频率（０．６１）高于正常对照组（０．４８），Ｐ＜０．０１。认为：ＡＣＥ基因的缺失多态性与中国人血清ＡＣＥ水平及心肌梗塞相关。

关键词：血管紧张素转化酶基因多态性心肌梗塞多态性

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BTB/POZ结构域蛋白GRP对热休克中hsp900α基因表达的增强作用

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中国医学科学院学报 2004年第4期26卷 392-395页

作者：陈永军莫志成张旌张业吴宁华沈珝琲中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所分子生物学国家重点实验室北京100005

目的探讨人BTB/POZ结构域GAGA元件结合相关蛋白(GRP)在hsp90α基因表达中的作用。方法用正义或反义GRP真核表达质粒或空载体,分别与装有hsp90α基因启动子(-1756-+37)的pREP4 episomalvector质粒和对照质粒pMCAT共转染Jurkat细胞,提取... 详细信息

目的探讨人BTB/POZ结构域GAGA元件结合相关蛋白(GRP)在hsp90α基因表达中的作用。方法用正义或反义GRP真核表达质粒或空载体,分别与装有hsp90α基因启动子(-1756-+37)的pREP4 episomalvector质粒和对照质粒pMCAT共转染Jurkat细胞,提取总RNA,用竞争性半定量RT-PCR测定hsp90α-氯霉素乙酰基转移酶(CAT)报告基因相对启动子活性。结果热休克时,GRP明显促进pREP4 episomal vector质粒上hsp90α-CAT报告基因启动子活性。结论 GRP可能通过参与染色质动态调整促进pREP4 episomal vector质粒上hsp900α CAT的表达。

关键词： GAGA元件结合相关蛋白 pREP4 episomal vector hsp90a

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可溶性腺苷酸环化酶基因中与核定位相关序列

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中国医学科学院学报 2005年第3期27卷 280-284页

作者：冯起平左瑾孟雁方福德中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所分子生物学国家重点实验室北京100005

目的确定可溶性腺苷酸环化酶基因中与其核定位相关的序列区域。方法构建可溶性腺苷酸环化酶核苷酸第298-1722区域的各种截短突变体的真核表达载体,逐一转染Hela细胞,激光共聚焦观察各个突变体的定位情况。结果某些截短突变造成了可溶性... 详细信息

目的确定可溶性腺苷酸环化酶基因中与其核定位相关的序列区域。方法构建可溶性腺苷酸环化酶核苷酸第298-1722区域的各种截短突变体的真核表达载体,逐一转染Hela细胞,激光共聚焦观察各个突变体的定位情况。结果某些截短突变造成了可溶性腺苷酸环化酶基因定位的改变,使之无法完成正常的入核过程。结论可溶性腺苷酸环化酶基因的739-1038和1045-1261核苷酸区域与其核定位相关。

关键词：可溶性腺苷酸环化酶核定位相关区域激光共聚焦

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人免疫缺陷病毒1型TAT突变蛋白及反义TAT RNA对TAT反式激活作用的抑制

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病毒学报 1997年第1期13卷 6-12页

作者：白龙川袁建刚强伯勤中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室

Ｔａｔ（Ｔｒａｎｓａｃｔｉｖａｔｏｒ）是人免疫缺陷病毒（ＨＩＶ）基因组编码的反式激活因子，突变分析表明它含有几个重要的功能域。为寻找控制ＨＩＶ复制的途径，构建了以ＨＩＶ－１ＬＴＲ（－１５８－＋８０）为启动子的Ｔａｔｃ... 详细信息

Ｔａｔ（Ｔｒａｎｓａｃｔｉｖａｔｏｒ）是人免疫缺陷病毒（ＨＩＶ）基因组编码的反式激活因子，突变分析表明它含有几个重要的功能域。为寻找控制ＨＩＶ复制的途径，构建了以ＨＩＶ－１ＬＴＲ（－１５８－＋８０）为启动子的ＴａｔｃＤＮＡ全长反义表达质粒ｐＡＳ－Ｔａｔ，并用已经构建的以ＨＩＶＬＴＲ－１５８到＋８０为启动子，具有不同突变点的突变Ｔａｔ基因表达质粒，以荧光酶基因为报告基因，共转染Ｊｕｒｋａｔ细胞，结果发现无论是反义Ｔａｔ表达质粒还是突变Ｔａｔ表达质粒，在瞬时转染体系中均能不同程度地抑制Ｔａｔ的活性，其中以ｐＭ５（５２位Ａｒｇ由Ｌｅｕ替代）和反义ＴａｔＲＮＡ的抑制效果最好。结果说明。

关键词：艾滋病毒I型反义Tat RNA 突变Tat蛋白

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血管紧张素转换酶基因多态性与阻塞性睡眠呼吸暂停综合征

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中华结核和呼吸杂志 1998年第8期21卷 489-491页

作者：肖毅黄席珍邱长春朱席琳刘怡文中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院呼吸内科中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室

目的探讨血管紧张素转换酶（ＡＣＥ）基因多态性与阻塞性睡眠呼吸暂停综合征（ＯＳＡＳ）之间的关系。方法以ＡＣＥ基因内含子１６的一个２８７ｂｐ的Ａｌｕ顺序Ｉ／Ｄ（ｉｎｓｅｒｔｉｏｎ／ｄｅｌｅｔｉｏｎ）型为多态标志，用聚合酶... 详细信息

目的探讨血管紧张素转换酶（ＡＣＥ）基因多态性与阻塞性睡眠呼吸暂停综合征（ＯＳＡＳ）之间的关系。方法以ＡＣＥ基因内含子１６的一个２８７ｂｐ的Ａｌｕ顺序Ｉ／Ｄ（ｉｎｓｅｒｔｉｏｎ／ｄｅｌｅｔｉｏｎ）型为多态标志，用聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增基因片段，对５０例ＯＳＡＳ患者和５０名正常人ＡＣＥ基因多态性的分布进行了观察，并结合临床特点和多导睡眠监测结果进行了分析。结果发现在中国汉族正常人群中，ＡＣＥ基因Ｉ／Ｄ多态Ｉ、ＩＤ、ＤＤ基因型频率分别为１６％，５２％，３２％，其Ｄ和Ｉ等位基因频率分别为４２％和５８％。Ｉ／Ｄ多态分布符合Ｈａｒｄｙｗｅｉｎｂｅｒｇ定律，达到了遗传平衡，具有群体代表性。ＯＳＡＳ患者Ⅱ基因型显著高于正常人，ＤＤ基因型则明显低于正常人；Ｄ和Ｉ等位基因频率分别为２８％和７２％，其差异也具有统计学意义。Ⅱ基因型的ＯＳＡＳ患者较ＩＤ基因型，最长呼吸暂停时间，最低血氧饱和度和睡眠呼吸暂停低通气指数（ＡＨＩ）均较严重。另外，合并高血压的ＯＳＡＳ患者其最长呼吸暂停时间，最低血氧饱和度和ＡＨＩ较无高血压的ＯＳＡＳ患者严重。结论中国汉族人ＯＳＡＳ发病与ＡＣＥ基因Ｉ／Ｄ多态性相关联，基因型ＩＩ和等位基因Ｉ可能是中国人?

关键词：睡眠呼吸暂停综合征 ACE 基因多态性

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中国人阵发性睡眠性血红蛋白尿症的PIG-A基因突变的观察

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中华血液学杂志 1997年第10期18卷 509-512页

作者：杜涛许彩民张之南吕照江杨洋潘华珍中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院血液科中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所国家医学分子生物学重点实验室

目的：观察中国人阵发性睡眠性血红蛋白尿症（ＰＮＨ）的ＰＩＧ－Ａ基因突变，以与其他国家的突变类型比较。方法：应用逆转录－多聚酶链反应、异源双链分析／单链构象分析互补筛选异常片段，克隆，测序，针对ＰＩＧ－ＡｃＤＮＡ全长设... 详细信息

目的：观察中国人阵发性睡眠性血红蛋白尿症（ＰＮＨ）的ＰＩＧ－Ａ基因突变，以与其他国家的突变类型比较。方法：应用逆转录－多聚酶链反应、异源双链分析／单链构象分析互补筛选异常片段，克隆，测序，针对ＰＩＧ－ＡｃＤＮＡ全长设计７个区域进行分析。结果：４例ＰＮＨ患者均有ＰＩＧ－Ａ基因突变，皆在第２外显子，共确定了５个突变位点，包括４个单碱基突变（１个同义突变，３个错义突变）和１个移码突变（为１个碱基丢失）。５个突变位点各不相同，散布于基因的不同区域，显示突变位点有随意性，无突变热点。结论：中国ＰＮＨ患者的ＰＩＧ－Ａ基因突变均为小突变，无两个以上碱基置换或丢失。此发现与日本人相近，而与欧美、泰国人有一定差异，提示ＰＮＨ在不同地区可能有不同的致突变原。

关键词：血红蛋白尿症 PNA PIG-A基因基因突变

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