检索结果-内蒙古大学图书馆

中国病理生理杂志 2000年第10期16卷 184-184页

作者：郑德先刘彦信中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室!北京100005

目的:T淋巴细胞抗原受体复合物(TCD/CD3)介导的信号传递途径决定其生存与死亡,而TCR的刺激信号是通过CD3各亚基胞内区免疫酪氨酸受体激活基序(ITAM)传递的.国内外和本实验室的一系列研究发现CD3ε-ITAM中的两个酪氨酸(Y170,Y181)对T淋... 详细信息

目的:T淋巴细胞抗原受体复合物(TCD/CD3)介导的信号传递途径决定其生存与死亡,而TCR的刺激信号是通过CD3各亚基胞内区免疫酪氨酸受体激活基序(ITAM)传递的.国内外和本实验室的一系列研究发现CD3ε-ITAM中的两个酪氨酸(Y170,Y181)对T淋巴细胞的生存与死亡起不同的调节作用,其中任何一个或两个酪氨酸同时突变为苯丙氨酸均可影响T淋巴细胞激活,并阻断T细胞死亡的信号传递.T细胞接受抗CD3抗体刺激后,CD3ε-ITAM的Y170可募集Lck、3-磷酸肌醇激酶的P85α亚基和Shc,而Y181可募集ZAP70与其结合,从而介导不同的信号极联,决定细胞生(激活)或死(凋亡)的不同命运.方法和结果:在CD3ε介导的细胞凋亡过程中,凋亡基因Fas及其配体FasL的表达增加.进一步的研究发现,核转录因子Nur77在细胞激活时表达上调,在细胞接受持续刺激并出现凋亡时,Nur77的表达进一步增加.为阐明Fas、FasL和Nur77三者表达的相关性,建立了稳定表达Nur77的T细胞株,构建了Fas及FasL启动子驱动的荧光素酶报告基因表达载体并转染该细胞株,研究Nur77过量表达对Fas及FasL转录的影响,结果表明Nur77可以上调Fas的表达,但对FasL的表达没有影响.Nur77上调Fas的表达,从而增加了Fas+细胞和细胞凋亡.结论:Nur77具有决定细胞'生'(细胞激活)或'死'(细胞凋亡)的关键作用.

关键词：细胞凋亡信号传递

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Fascin在乳腺增生症和乳腺癌中的表达

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医学研究杂志 2007年第11期36卷 30-33页

作者：崔迎彬孟庆敏陈虹黄秉仁中国协和医科大学基础医学院/中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 首都医科大学附属北京同仁医院外科 100730

目的探讨fascin在乳腺癌发病过程中的作用。方法用免疫组化方法检测20例乳腺导管上皮单纯性增生、9例乳腺导管上皮非典型性增生、25例乳腺浸润性导管癌患者中fascin的表达。结果Fascin在单纯性增生、非典型性增生、浸润性导管癌中的阳... 详细信息

目的探讨fascin在乳腺癌发病过程中的作用。方法用免疫组化方法检测20例乳腺导管上皮单纯性增生、9例乳腺导管上皮非典型性增生、25例乳腺浸润性导管癌患者中fascin的表达。结果Fascin在单纯性增生、非典型性增生、浸润性导管癌中的阳性率分别为95%、22.2%、8%。Fascin在导管上皮单纯性增生中的表达明显高于非典型性增生和浸润性导管癌(P<0.01)。结论Fascin在乳腺增生向乳腺癌的进展过程中可能起着某种作用,但目前尚难以作为乳腺癌诊断的分子标志。

关键词： fascin 乳腺增生症乳腺癌免疫组织化学

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深切怀念梁植权院士

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中国生物化学与分子生物学报 2006年第7期22卷 574-574页

作者：杨克恭中国协和医科大学基础医学院生物化学与分子生物学系中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室

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亚硒酸钠诱导白血病NB4细胞凋亡的蛋白质组学初步分析

亚硒酸钠诱导白血病NB4细胞凋亡的蛋白质组学初步分析

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生物膜与重大疾病学术研讨会

作者：董华天翼王恒樑许彩民中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室解放军军事医学科学院生物工程研究所解放军军事医学科学院生物工程研究所中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室

目的:研究亚硒酸钠诱导NB4细胞凋亡蛋白质组的变化。本研究工作是在本课题组前期应用基因芯片分析亚硒酸钠诱白血病NB4细胞调亡工作的基础上,发现有34个差异基因改变。这些差异基因主要是细胞周期蛋白,线立体调亡信号通路相关蛋白和蛋... 详细信息

目的:研究亚硒酸钠诱导NB4细胞凋亡蛋白质组的变化。本研究工作是在本课题组前期应用基因芯片分析亚硒酸钠诱白血病NB4细胞调亡工作的基础上,发现有34个差异基因改变。这些差异基因主要是细胞周期蛋白,线立体调亡信号通路相关蛋白和蛋白水解酶相关蛋白等。这提示我们在蛋白质组学上进行研究探讨可能会有新的发现。方法:采用2D胶和质谱分析方法。我们采用20μM的亚硒酸钠诱导36小时收集NB4,细胞全蛋白进行2D胶比较蛋白质组学分析。结果:发现有40多个显著差异的蛋白质,而且重复性好,目前对这些差异蛋白质正在进行质谱分析。

关键词：亚硒酸钠白血病 NB4 细胞凋亡

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Construction of an inducible nitric-oxide synthase gene transferring vector mediated by retrovirus

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Acta Pharmacologica Sinica 1998年第2期 26-32页

作者：刘景生臧梦维彭学贤胡萍中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院药理室中国科学院微生物研究所医学分子生物学国家重点实验室

目的：构建逆转录病毒介导的诱导型一氧化氮合酶（ｉＮＯＳ）基因转移载体．方法：应用ＤＮＡ重组和ＰＣＲ扩增技术．结果：通过二步克隆，从质粒ｐＫＳｉＮＯＳ分离编码巨噬细胞ｉＮＯＳ的全长ｃＤＮＡ，亚克隆于中间载体ｐＳＰ７２，... 详细信息

目的：构建逆转录病毒介导的诱导型一氧化氮合酶（ｉＮＯＳ）基因转移载体．方法：应用ＤＮＡ重组和ＰＣＲ扩增技术．结果：通过二步克隆，从质粒ｐＫＳｉＮＯＳ分离编码巨噬细胞ｉＮＯＳ的全长ｃＤＮＡ，亚克隆于中间载体ｐＳＰ７２，调整插入片段二端酶切位点；进而构建含ｉＮＯＳ基因、巨细胞病毒启动子和ｎｅｏ抗性基因的逆转录病毒载体ｐＬＮＣＸｉＮＯＳ．限制性酶切分析和ＰＣＲ鉴定证实，重组体ｉＮＯＳ插入片段的大小和方向正确．结论：获得含ｉＮＯＳ基因逆转录病毒表达载体，为建立ｉＮＯＳ基因修饰的神经细胞模型，研究ＮＯ／ＮＯＳ在阿片耐受依赖中的作用奠定基础．

关键词：一氧化氮合酶互补DNA 基因表达调控真核细胞重组DNA 逆转录病毒遗传载体限制性酶切图谱聚合酶链式反应

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经EB病毒转染建立阵发性睡眠性血红蛋白尿症永生细胞系的方法改进

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中国实验血液学杂志 1999年第4期7卷 282-285页

作者：杜涛许彩民朱苏玲徐文瑾潘华珍张之南中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院血液科北京100730 中国医学科学院基础医学研究所分子生物学国家重点实验室中国科学院遗传学研究所

为提高EB病毒(Epstein-Barr virus)转染阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)异常细胞建立永生性细胞株的成功率及加快建株时间,在改进培养方法方面进行了一些初步探索性研究。根据PNH异常细胞易受氧化损伤的原理,在培养体系中加入一种抗氧化... 详细信息

为提高EB病毒(Epstein-Barr virus)转染阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)异常细胞建立永生性细胞株的成功率及加快建株时间,在改进培养方法方面进行了一些初步探索性研究。根据PNH异常细胞易受氧化损伤的原理,在培养体系中加入一种抗氧化剂AA_2保护PNH异常细胞的生存。研究结果表明:2例PNH患者细胞均建株成功,不加药对照组有1例失败;建株时间明显缩短,并且建株后CD59^-细胞百分率无明显下降。实验结果提示,氧化损伤是PNH细胞建株困难的重要原因;在培养初期加抗氧化剂可提高建株的成功率及缩短建株时间,这是一个重要的改进;因观察例数尚少,有待进一步证实。

关键词：阵发性睡眠性血红蛋白尿症 EB病毒永生性细胞系 CD59^-细胞抗氧化剂

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AT_1R基因A1166C多态性与汉、藏和彝族原发性高血压的遗传易感性

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中华医学遗传学杂志 2003年第3期20卷 220-224页

作者：刘英单广良崔超英侯淑琴卓玛次仁芩维浚才旦郑华清萧占森乌正赉周文郁邱长春中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室西藏医学院生理学教研室北京100005 西藏医学院生理学教研室北京市房山区第一医院检验科西藏自治区人民医院心血管内科

目的　研究血管紧张素 1型受体 ( angiotensin type 1receptor,AT1 R)基因 A116 6 C多态性是否与汉族、藏族和彝族原发性高血压 ( essential hypertension,EH)的遗传易感性相关联。方法　以74 8名受试者的基因组 DNA为模板 ,应用聚合... 详细信息

目的　研究血管紧张素 1型受体 ( angiotensin type 1receptor,AT1 R)基因 A116 6 C多态性是否与汉族、藏族和彝族原发性高血压 ( essential hypertension,EH)的遗传易感性相关联。方法　以74 8名受试者的基因组 DNA为模板 ,应用聚合酶链反应 -限制性片段长度多态性方法检测 A116 6 C多态性。结果　在汉、藏、彝 3个民族正常人群中 ,A116 6等位基因的频率分别为 0 .979、0 .939和 0 .96 5 ;在藏族男性中 ,EH患者 A116 6等位基因的频率明显高于正常对照 ( P=0 .0 0 1) ,AA基因型 ( P=0 .0 0 34)是 EH的独立危险因素 ;在汉族和彝族人群中 ,EH患者和正常对照之间 A116 6 C基因型分布和等位基因频率的差异均无显著性。结论　在汉族、藏族和彝族人群中 ,AT1 R基因 A116 6是最常见的等位基因 ;A116 6 C多态性是藏族男性 EH的遗传易感因子 ,而不是汉族和彝族

关键词： ATlR基因 A1166C多态性汉族藏族彝族原发性高血压遗传易感性

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caspase-10研究进展

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医学分子生物学杂志 2006年第1期3卷 40-43页

作者：王瑞霞王平章王欣中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京市100005 国家人类基因组北方研究中心北京市100176

caspase-10是近年来发现的一类含有死亡效应结构域(dead-effector domain,DED)的蛋白酶,在结构上与caspase家族的另一成员caspase-8有很高的同源性,通过形成死亡诱导信号复合物(death inducedsignaling complex,DISC),激活自身蛋白酶活性,传递凋亡信号。caspase-10的功能异常与许多疾病的发生有着密切的关系。对caspase-10的进一步研究将有助于深化对这些疾病的认识,并为临床治疗这些疾病提供新的方法和思路。

关键词： caspase-10蛋白酶凋亡肿瘤细胞信号通路

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长期温和的能量限制改善C57BL/6小鼠高脂喂养后的脂代谢紊乱

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中国心血管杂志 2012年第2期17卷 124-127页

作者：李国平唐蔚青李红霞满永黎健陈保生卫生部北京医院卫生部北京老年医学研究所卫生部老年医学重点实验室 100730 中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室

目的探讨温和的能量限制对小鼠脂代谢的影响。方法给予3周龄C57BL/6小鼠高脂饮食12周后,按随机数字表法分组,对照组不限制饮食,实验组小鼠喂食对照组小鼠摄食量的85%,喂养12周后,收集小鼠血浆并冻存肝脏。抽提肝脏脂质并用酶法检测脂质... 详细信息

目的探讨温和的能量限制对小鼠脂代谢的影响。方法给予3周龄C57BL/6小鼠高脂饮食12周后,按随机数字表法分组,对照组不限制饮食,实验组小鼠喂食对照组小鼠摄食量的85%,喂养12周后,收集小鼠血浆并冻存肝脏。抽提肝脏脂质并用酶法检测脂质含量,油红O染色观察肝脏的脂质沉积;用实时定量聚合酶链反应法检测肝脏脂肪代谢相关基因的表达;并测定LDL、TG分泌速率和小鼠原代肝细胞脂肪酸氧化速率。结果实验组小鼠与对照组小鼠相比,在限食12周后:(1)体质量:(32.8±1.3)g比(38.9±3.5)g(P=0.007);(2)血浆TG水平:(0.26±0.01)mmol/L比(0.41±0.02)mmol/L(P=0.02),肝脏内TG含量:(435.7±26.3)μg/mg蛋白质比(812.4±38.2)μg/mg蛋白质(P=0.001);(3)实时定量聚合酶链反应结果显示,肝脏内长链脂肪酸和胆固醇合成相关基因mRNA表达水平无变化,但脂肪酸氧化基因mRNA表达水平显著增加(P=0.03)。肝脏原代细胞内脂肪酸的氧化速度增加了53.1%±7.2%(P=0.01),血浆游离脂肪酸水平:(0.41±0.04)mmol/L比(0.62±0.02)mmol/L(P=0.04);(4)肝脏中胆固醇:(85.2±9.8)μg/mg蛋白质比(169.3±13.5)μg/mg蛋白质(P=0.001),但血浆TC水平无显著改变。结论长期温和的能量限制可以有效缓解高脂饮食引起的小鼠肝脏的脂肪变性,这与肝脏中游离脂肪酸的氧化速度升高及摄取量降低密切相关;同时降低了小鼠血浆TG的水平,但没有改变血浆TC水平。

关键词：能量限制脂代谢脂肪酸氧化速率

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人载脂蛋白AV原核表达载体的构建与纯化研究

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心肺血管病杂志 2013年第4期32卷 499-502页

作者：李国平隋靖喆毕楠满永王抒陈保生黎健卫生部北京医院卫生部-北京老年医学研究所卫生部老年医学重点实验室 100730 中国医学科学院基础医学研究所-中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室

目的:构建人载脂蛋白AV(apolipoprotein AV,apoAV)的原核载体并表达纯化该蛋白。方法:从人肝癌细胞系HepG2中提取总RNA,以反转录的cDNA第一链为模板,经聚合酶链式反应(PCR)扩增得到含有编码apoAV完整成熟肽段的PCR片段。PCR产物和原核... 详细信息

目的:构建人载脂蛋白AV(apolipoprotein AV,apoAV)的原核载体并表达纯化该蛋白。方法:从人肝癌细胞系HepG2中提取总RNA,以反转录的cDNA第一链为模板,经聚合酶链式反应(PCR)扩增得到含有编码apoAV完整成熟肽段的PCR片段。PCR产物和原核表达载体pET30b经核酸内切酶双切后连接,连接产物经转化至大肠杆菌感受态细胞Top10,挑选克隆测序。重组质粒pET30b-apoAV转化大肠杆菌BL21(DE3),经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,并优化诱导表达条件,重组的apoAV经镍离子螯合树脂纯化获得。结果:经测序证实人apoAV目的基因成功克隆入pET30b原核表达载体中,经过IPTG诱导有约40KD的特异性蛋白表达,与预期大小一致。该蛋白在IPTG诱导下的最佳表达时间为5h,最佳浓度在31.3μmol/L。纯化的apoAV纯度在95%以上,产率约为15 mg/L。结论:成功构建人apoAV的原核表达载体,实现了高效表达和纯化,为进一步研究其结构与功能奠定了基础。

关键词：载脂蛋白AV 原核表达蛋白纯化

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