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云南大学学报（自然科学版） 1999年第S3期21卷 249-249页

作者：李光涛金鉴周严黄晓玮周海军胡松年袁建刚强伯勤医学分子生物学国家重点实验室中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院北京100005 医学分子生物学国家重点实验室中国医学科学院基础医学研究所国协和医科大学基础医学院北京100005

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生殖道上皮分泌对精子发生、成熟以及受精能力的调节

生殖道上皮分泌对精子发生、成熟以及受精能力的调节

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第一届中华医学会生殖医学分会、中国动物学会生殖生物学分会联合年会

作者：陈小章王琳芳张永莲石其贤中国香港中文大学医学院生理系上皮细胞生物学研究中心中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室中国科学院上海生物化学与细胞生物学研究所浙江省医学科学院

女性和男性生殖道内衬上皮的分泌被认为对许多生殖事件有重要作用,如精子发生、成熟和受精。我们最近的研究集中于男女两性的生殖道上皮分泌对这些生殖事件的调节.睾丸:男性生殖细胞的生成即精子发生强烈依赖于睾丸上皮细胞(Sertioli ce... 详细信息

女性和男性生殖道内衬上皮的分泌被认为对许多生殖事件有重要作用,如精子发生、成熟和受精。我们最近的研究集中于男女两性的生殖道上皮分泌对这些生殖事件的调节.睾丸:男性生殖细胞的生成即精子发生强烈依赖于睾丸上皮细胞(Sertioli cells)对其增生和分化的调节作用。我们最近的研究提示已分化的生殖细胞的生存依赖于由支持细胞分泌的苗勒氏管抑制物(MIS)作用于精子上的一种新 G 蛋白偶联受体。睾丸组织注射受体抗体导致精子数减少并阻断细胞生存的信号通道。

关键词：精子发生精子成熟生殖道受精能力

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结肠癌细胞HCT116中p53的R213突变对靶基因p21表达的影响

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基础医学与临床 2017年第5期37卷 663-667页

作者：张妍张艳君张业首都医科大学附属北京潞河医院中心实验室北京101149 首都医科大学附属北京潞河医院消化内科北京101149 中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的确定在结肠癌细胞系中,p53的213位精氨酸突变后对其下游靶基因p21表达的影响。方法在p53缺失的结肠癌细胞系HCT116^(-/-)中转染p53的R213位突变的质粒;荧光素酶双报告基因系统检测p53靶基因启动子活性;EMSA检测p53与其靶基因p21的... 详细信息

目的确定在结肠癌细胞系中,p53的213位精氨酸突变后对其下游靶基因p21表达的影响。方法在p53缺失的结肠癌细胞系HCT116^(-/-)中转染p53的R213位突变的质粒;荧光素酶双报告基因系统检测p53靶基因启动子活性;EMSA检测p53与其靶基因p21的结合能力;real-time PCR和Western blot检测p53下游靶基因p21的表达。结果 p53蛋白213位精氨酸突变为赖氨酸后,明显降低了p53靶基因的启动子活性(P<0.05);与靶基因p21启动子的结合能力明显降低(P<0.05);并抑制了p21基因的表达(P<0.05)。而213位突变为谷氨酰胺后,迁移率比突变前明显变快。结论在人的结肠癌细胞中,p53蛋白R213位的不同突变对下游靶基因p21有不同的影响,提示存在着不同的调控机制。

关键词： p53 213位精氨酸 p21 突变

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蛋白质转导——外源物质进入细胞的新工具

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生命的化学 2004年第3期24卷 192-195页

作者：李锋陈岚肖新莉韩俊董小平中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京100052 中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005 西安交通大学医学院西安710061

相对于常规的基因转移技术 ,蛋白质直接跨过细胞膜进入细胞 (proteintransduction ,蛋白质转导 )还比较新颖。蛋白质转导结构域 (proteintransductiondomain ,PTD)最早发现于HIV的TAT蛋白 ,之后证明多种天然的和人工合成的蛋白质和多肽... 详细信息

相对于常规的基因转移技术 ,蛋白质直接跨过细胞膜进入细胞 (proteintransduction ,蛋白质转导 )还比较新颖。蛋白质转导结构域 (proteintransductiondomain ,PTD)最早发现于HIV的TAT蛋白 ,之后证明多种天然的和人工合成的蛋白质和多肽都具有蛋白质转导能力。PTD有相似的结构特征 ,但是其转导的详细机制仍不清楚 ,很多研究结果倾向于静电相互作用模式。大量研究证明 ,PTD具有转导能力强、无细胞特异性、能够穿过血脑屏障等特点 ,这为癌症、AIDS。

关键词：蛋白质 FFD TAT 细胞细胞膜蛋白质转导结构域

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多巴胺代谢通路上的SNP型组合与偏执型精神分裂症的系统关联分析——一种研究复杂疾病的新策略

多巴胺代谢通路上的SNP型组合与偏执型精神分裂症的系统关联分析...

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第二届全国分子流行病学学术会议

作者：许琪计宏凯黄颖孙向青季梁李衍达原岩波舒良于欣沈渔邨于雅琴贾彦斌鞠桂芝刘树铮史杰萍张伯玉邹柯陶玉斌王艳萍强伯勤吴冠芸沈岩中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室清华大学生物信息学研究所北京大学精神卫生研究所吉林大学基因组医学研究中心

目的：以偏执型精神分裂症为模板，提出一种研究复杂疾病易感基因的新策略．方法：分析步骤：在80例散发偏执型精神分裂症患者和108例对照中，共筛检了多巴胺代谢通路上的18个代谢酶基因的52个SNPs，所得SNPs数据均分别经过传统的... 详细信息

目的：以偏执型精神分裂症为模板，提出一种研究复杂疾病易感基因的新策略．方法：分析步骤：在80例散发偏执型精神分裂症患者和108例对照中，共筛检了多巴胺代谢通路上的18个代谢酶基因的52个SNPs，所得SNPs数据均分别经过传统的统计学方法和自创的多位点联合作用分析方法(PESCP和PEDE)的处理．验证步骤：对分析步骤中所得到的阳性SNPs位点，在95个偏执型精神分裂症的核心家系中进行了重复筛检，并用上述两种方法对数据进行了再次处理分析．结果：在分析步骤中，共筛检到4个主要与疾病的易感性相关的SNPs型，共涉及7个阳性SNPs位点。在验证步骤中，使用传统统计学分析方法没有检出阳性位点，而使用多位点联合作用分析方法除一种组合外，其余阳性结果均再次被检出，其中COMT和ALDH基因的组合最具显著性。同时我们提出并建立了研究复杂疾病的系统研究策略．结论：对于多基因疾病的易感基因研究，多位点联合作用分析比单位点分析更加灵敏和特异。在不同人群中对结果进行验证，对于复杂疾病的研究是必要的．

关键词：精神分裂症易感基因多巴胺复杂疾病

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EGFR与COX-2联合阻断对食管鳞状细胞癌作用的体外实验

EGFR与COX-2联合阻断对食管鳞状细胞癌作用的体外实验

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第九届国际治疗内镜和消化疾病学术会议

作者：叶菲张澍田孟欣颖宗晔朱圣韬李鹏周巧直吕富靖许彩民首都医科大学附属友谊医院胃肠肝胆科首都医科大学消化病学系北京消化疾病中心中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究院医学分子生物学国家重点实验室

背景和目的食管癌是世界最常见的恶性肿瘤之一,我国以食管鳞状细胞癌(ESCC)为主。虽然手术方法和诊断水平不断提高,食管鳞状细胞癌的5年生存率没有明显改善。靶向治疗是在分子生物学理论基础上出现的全新治疗模式。表皮生长因子受体(EG... 详细信息

背景和目的食管癌是世界最常见的恶性肿瘤之一,我国以食管鳞状细胞癌(ESCC)为主。虽然手术方法和诊断水平不断提高,食管鳞状细胞癌的5年生存率没有明显改善。靶向治疗是在分子生物学理论基础上出现的全新治疗模式。表皮生长因子受体(EGFR)与环氧化酶-2(COX-2)是最近研究较多的分子靶向治疗的靶点,两者之间存在正反馈。目前多靶点联合阻断在食管癌治疗中的效果和可行性尚不清楚。本文结合国内鳞状细胞癌发病率高的实际情况,对EGFR与COX-2在食管鳞状细胞癌中的联合阻断做一初步探讨。

关键词：食管鳞状细胞癌增殖细胞周期表皮生长因子环氧化酶-2

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阿司匹林与IRESSA联合应用对ECa9706细胞裸鼠移植瘤的抑制作用

阿司匹林与IRESSA联合应用对ECa9706细胞裸鼠移植瘤的抑制作用

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第九届国际治疗内镜和消化疾病学术会议

作者：叶菲张澍田张莉许彩民孟欣颖宗晔李鹏周巧直吕富靖首都医科大学附属友谊医院胃肠肝胆科首都医科大学消化病学系北京消化疾病中心中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究院医学分子生物学国家重点实验室

背景与目的IRESSA(ZD1839)是一种新型分子靶向药物,其主要机制为抑制表皮生长因子(EGFR)胞内区的酪氨酸激酶。在治疗晚期非小细胞肺癌中显示出较好疗效,对IRESSA治疗食管癌的研究国内外报道较少。流行病学研究指出,服用阿司匹林能够减... 详细信息

背景与目的IRESSA(ZD1839)是一种新型分子靶向药物,其主要机制为抑制表皮生长因子(EGFR)胞内区的酪氨酸激酶。在治疗晚期非小细胞肺癌中显示出较好疗效,对IRESSA治疗食管癌的研究国内外报道较少。流行病学研究指出,服用阿司匹林能够减少食管癌的发病率。其主要机制在于阻断以环氧化酶-2的功能。EGFR与COX-2介导的细胞内信号传导途径存在相互促进的正反馈作用。本研究旨在探讨通过IRESSA与阿司匹林联合应用抑制同时抑制EGFR和COX-2在体内实验中的可行性。对食管鳞状细胞癌EC9706细胞裸鼠移植瘤的抑制作用及其可能出现的毒副作用。材料与方法20只雄性BALB nu/nu裸鼠随机分为对照组、阿司匹林组、IRESSA组和联合组,每组5只。分别给予生理盐水溶液、阿司匹林150 mg/kg,IRESSA 50 mg/kg和阿司匹林150 mg/kg+IRESSA 50 mg/kg灌胃每日1次。6天后接种食管鳞状细胞癌EC9706细胞悬液,继续按上述剂量灌胃,每周6天。共计8周。用药结束后处死动物。分别计算各组的抑瘤率,比较各组裸鼠肿瘤大小、体重及裸鼠体重。结果给药前各组裸鼠体重无差异。给药后各组瘤重如下:空白对照组1.33±0.24 g阿司匹林1.05±0.08 g,IRESSA组0.65±0.13 g,联合组0.25±0.12 g。联合组较各单药组有显著性差异(P<0.05)。各用药组与空白对照组之间裸鼠体重差异均无显著性(P>0.05)。IRESSA组有2只裸鼠出现不同程度的皮肤红斑、脱屑,联合组中有2只裸鼠出现比较明显的的体重下降,及皮肤脱屑。对照组2只裸鼠移植瘤与周围组织发生粘连。未发现肉眼可见的肿瘤远处转移。实验结束时,解剖各组受试动物消化道,未见明显糜烂、溃疡及粘膜出血。结论IRESSA对食管鳞状细胞癌EC9706细胞细胞移植瘤生长有明显抑制作用,联合IRESSA及阿司匹林能够显著抑制移植瘤的生长,两种药物在体内抑瘤实验中存在协同作用,但可以造成裸鼠体重下降。

关键词：食管鳞状细胞癌裸鼠移植瘤表皮生长因子环氧化酶-2

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优劣环境交替性生物循环选育作用的理论与技术体系的初步建立和实际应用

优劣环境交替性生物循环选育作用的理论与技术体系的初步建立和实...

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2003年中国博士后生命科学学术研讨会暨院士论坛

作者：张德礼李衍达黄高升朱关福方福德清华大学信息科学技术学院生物信息学教育部重点实验室北京100084 第四军医大学基础部中国癌症研究基金会肿瘤学研究所西安 710032 中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京 100005

在建立国内首家犬、猫、猴、鼠传代细胞种子库与工作库基础上,对研制生产犬五联和猫三联病毒活疫苗所用7种动物肾细胞系(F-81,CRFK,MDCK,Vero,Vero-2,MA-104,BHK-21)在700余只裸鼠进行了致癌(瘤)试验,并完成染色体变异率、克隆形成率、... 详细信息

在建立国内首家犬、猫、猴、鼠传代细胞种子库与工作库基础上,对研制生产犬五联和猫三联病毒活疫苗所用7种动物肾细胞系(F-81,CRFK,MDCK,Vero,Vero-2,MA-104,BHK-21)在700余只裸鼠进行了致癌(瘤)试验,并完成染色体变异率、克隆形成率、细胞凝集性与肿瘤形成相关性研究。试验结果证明,水貂肠炎病毒(MEV)S18和L12株为制苗用毒株,L12株为检验用强毒株。建立了MEV组织培养的方法及高效价无血清MEV抗原大批量生产和检验的新工艺。成功研制了安全有效的水貂病毒性肠炎(MVE)细胞培养灭活矿油苗和铝胶苗,并大批量常年生产应用,特制高效苗免疫产生期为3～5d,免疫期与保存期均在9个月以上,免疫保护率高达100％。制定了MEV疫苗制造及检验规程。实验证明F-81和CRFK猫肾细胞系为亚二倍体核型,不具有致癌性,可安全用于疫苗生产。该疫苗既可用于发生疫情时假定健康貂的紧急预防接种,又可接种隐性感染貂和发病水貂。同时,应用敏感细胞系与钝感细胞系交替培育的方法,大幅度提高MEV增殖滴度,获得最佳制苗毒株。筛选出高变异率上皮细胞系移植于裸鼠皮下,在体内环境下快速选育出更高突变率细胞系,进而发育成MRT,确立了异类肿瘤的在体实验转化现象。提出优劣环境交替性生物循环选育作用的理论与技术体系。

关键词：细小病毒疫苗交替选育生物循环

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值得关注的线粒体12SrRNA C1494T突变--药物敏感致聋靶点

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听力学及言语疾病杂志 2008年第6期16卷 446-450页

作者：王秋菊韩明鲲刘晓雯鲍晓林赵亚丽王大勇兰兰赵翠韩东一解放军总医院耳鼻咽喉-头颈外科解放军耳鼻咽喉科研究所北京100853 国家人类基因组北方研究中心兰州大学第二医院耳鼻咽喉-头颈外科中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室

目的探讨线粒体12SrRNA C1494T突变与氨基糖苷类药物致聋的临床表型特征的相关性，警示临床值得关注的又一药物致聋敏感靶点。方法对遗传性聋资源库中两个具有母系遗传特征的耳聋大家系成员进行病史、体检、纯音测听及听性脑干反应检查... 详细信息

目的探讨线粒体12SrRNA C1494T突变与氨基糖苷类药物致聋的临床表型特征的相关性，警示临床值得关注的又一药物致聋敏感靶点。方法对遗传性聋资源库中两个具有母系遗传特征的耳聋大家系成员进行病史、体检、纯音测听及听性脑干反应检查并绘制系谱图。提取耳聋患者的外周血基因组DNA，运用聚合酶链扩增反应（polymerase chain reaction。PCR）方法对耳聋患者线粒体12SrRNA基因1228～1984位序列（涵盖12SrRNA 1494及1555位点）进行扩增，扩增产物纯化后进行限制性酶切鉴定或测序，运用DNAStar软件对测序结果进行比对分析。结果两个家系分别为一个四代相传的母系遗传家系（196家系）和一个三代相传的母系遗传性耳聋家系（1802家系）。196家系发现8名12SrRNA C1494T携带者，其中3名在接触氨基糖苷类药物后出现重度耳聋，成为聋哑人（Ⅱ：2、Ⅱ：5、Ⅲ：2）；2名无耳毒性药物用药史者（Ⅱ：9、Ⅱ：7），表现为高频听力损失，言语发育正常；1名患者25岁时应用链霉素后致重度耳聋，现交流困难（Ⅱ：3）；1名突变者现为2岁幼儿，目前对声音反应正常（Ⅳ：1）；1名为听力正常人（Ⅲ：3），现年28岁。1802家系发现12名耳聋患者，其中7名患者为母系后代，全部为聋哑，配偶聋哑人5名。1802家系中母系后代成员10名（3名男性，7名女性），其中7名为聋哑患者（2名男性，5名女性），3名为听力正常人（1名男性，2名女性）。7名母系后代患者中有4名有明确的耳毒性药物用药史（奎宁、链霉素或庆大霉素），3名用药史不详。2名母系患者进行基因检测发现线粒体12SrRNA C1494T突变。结论本研究通过两个线粒体12SrRNA C1494T突变家系警示线粒体12SrRNA C1494T突变又是一个值得非常关注的药物敏感作用靶点。具有此突变的患者接触氨基糖苷类药物会产生重度耳聋，而未接触该药物者可以是正常听力或是高频听力下降者。临床要高度警示线粒体12SrRNA C1494T突变患者，早发现、早预警可避免聋哑患者的出现。

关键词：线粒体12SrRNA C1494T突变线粒体DNA 氨基糖苷类抗生素母系遗传

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优劣环境交替性生物循环选育的理论与技术体系和应用

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科技导报 2003年第11期21卷 11-17,10页

作者：张德礼李衍达黄高升朱关福方福德清华大学信息科学技术学院自动化系智能技术与系统国家重点实验室清华大学生物信息学研究所生物信息学教育部重点实验室北京100084 第四军医大学基础部病理学教研室中国癌症研究基金会肿瘤学研究所西安710032 中国医学科学院基础医学研究所/中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京710032

不同环境条件下的交替选育作用[1-6]虽已有成功的应用,但在恶劣环境下筛选后再回归到同类优越环境下培育,并反复循环选育的优良生物品种,特别是选育强毒高免疫原性的超高增殖病毒株,经体内外环境交替培育获得高变异率肿瘤细胞系并实现... 详细信息

不同环境条件下的交替选育作用[1-6]虽已有成功的应用,但在恶劣环境下筛选后再回归到同类优越环境下培育,并反复循环选育的优良生物品种,特别是选育强毒高免疫原性的超高增殖病毒株,经体内外环境交替培育获得高变异率肿瘤细胞系并实现异类肿瘤在体实验转化的现象,尚未见报道.

关键词：病毒疫苗交替选育恶性横纹肌样瘤制备水貂细小病毒致癌安全性

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