检索结果-内蒙古大学图书馆

药学学报 2000年第8期35卷 566-570页

作者：臧梦维孟爱民沈琦汪青郭菲刘景生中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所药理室医学分子生物学国家重点实验室

目的　观察阿片激动剂长时程作用对NO cGMP信号转导系统的影响。方法　选用iNOScDNA稳定表达的NG LNCXiNOS细胞 ,采用NOS活性和cGMP放免测定 ,Western杂交和NADPH黄递酶组化染色技术。结果阿片类药物长时程作用剂量依赖性增高胞浆相iNO... 详细信息

目的　观察阿片激动剂长时程作用对NO cGMP信号转导系统的影响。方法　选用iNOScDNA稳定表达的NG LNCXiNOS细胞 ,采用NOS活性和cGMP放免测定 ,Western杂交和NADPH黄递酶组化染色技术。结果阿片类药物长时程作用剂量依赖性增高胞浆相iNOS活性和胞内cGMP含量 ,药物作用强弱顺序是DPDPE >DADLE >吗啡 ,EC50 都在nmol·L-1数量级。用纳洛酮急性戒断阿片耐受细胞 ,造成酶活性和cGMP水平增加更显著。DPDPE长时程作用还引起iNOS基因表达增强和NADPH黄递酶染色阳性细胞增多。结论　提示NO cGMP信号转导系统上调可能是阿片耐受和成瘾的重要生化改变。

关键词： δ-阿片受体阿片类依赖 NO-cGMP 信号转导

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白血病细胞系中B-Raf与Raf-1的表达及活性

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中国医学科学院学报 2000年第6期22卷 533-535页

作者：张静刘彦信刘士廉郑德先中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的研究白血病细胞及正常人外周血淋巴细胞中的 B- Raf和 Raf- 1表达水平及激酶活性。方法利用 Western印迹法检测 B- Raf和 Raf- 1表达水平，利用免疫沉淀及 Western印迹法检测 Raf- 1及 B- Raf的激酶活性。结果 Raf- 1在白血病细胞... 详细信息

目的研究白血病细胞及正常人外周血淋巴细胞中的 B- Raf和 Raf- 1表达水平及激酶活性。方法利用 Western印迹法检测 B- Raf和 Raf- 1表达水平，利用免疫沉淀及 Western印迹法检测 Raf- 1及 B- Raf的激酶活性。结果 Raf- 1在白血病细胞及正常人外周血淋巴细胞中均有表达 ,表达水平基本相似，其激酶活性较低； B- Raf仅在白血病细胞中表达，且在 Jurkat和 K562细胞中的表达水平较高，其激酶活性也较高。结论在白血病细胞中， B- Raf的高表达及活化可能是白血病发病的机制之一。

关键词： Raf-1 B-Raf 激酶活性白血病细胞

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人泛素结合酶cDNA的分离与克隆

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中国医学科学院学报 2000年第4期22卷 306-311页

作者：吕鸿雁李光涛周严金鉴蒋科艺彭小忠袁建刚强伯勤中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的　分离、克隆人泛素结合酶基因 ,并初步研究其组织表达谱。方法　根据与鼠泛素结合酶有较高一致性的人表达序列标签 (EST)设计筛库引物 ,筛选人胎脑 c DNA文库 ,采用生物信息学方法分析筛选到的阳性克隆 ;设计探针 ,应用人多组织杂... 详细信息

目的　分离、克隆人泛素结合酶基因 ,并初步研究其组织表达谱。方法　根据与鼠泛素结合酶有较高一致性的人表达序列标签 (EST)设计筛库引物 ,筛选人胎脑 c DNA文库 ,采用生物信息学方法分析筛选到的阳性克隆 ;设计探针 ,应用人多组织杂交膜分析该基因的组织表达谱。结果　从文库中筛选到两个互为剪接异构体的长度分别为 1471和 1315 bp的 c DNA克隆 ,其开放读码框分别编码 147和 10 9个氨基酸 ,与鼠、果蝇、线虫等生物的泛素结合酶均高度同源 ,含泛素结合结构域 ,Gen Bank登录号分别为 AF12 5 0 44和 AF12 5 0 45。Northern杂交显示 ,该基因在成人心脏、胎盘、胰腺等组织中呈特异表达 ,而在脑、肝、肺、肾和骨胳肌中基本不表达。结论　泛素结合酶基因在人体中的表达受到时间和空间的双重调控。

关键词：泛素泛素结合酶 cDNA 分离克隆

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我国人类疾病基因控制工程基础研究的近期进展

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中国医学科学院学报 2000年第3期22卷 205-207页

作者：方福德 *** 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室

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新世纪医学分子生物学的历史使命

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中国医学科学院学报 2000年第4期22卷 303-305页

作者：方福德中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

什么叫医学分子生物学 ?简单地说它是研究医学问题的分子生物学。那么 ,什么叫分子生物学呢 ?这就有争议了 ,出现了正、反两种意见。早在二十世纪七十年代 ,当分子生物学开始腾飞的时候 ,国外就有人提出“分子生物学早已死亡”的结论 ,... 详细信息

什么叫医学分子生物学 ?简单地说它是研究医学问题的分子生物学。那么 ,什么叫分子生物学呢 ?这就有争议了 ,出现了正、反两种意见。早在二十世纪七十年代 ,当分子生物学开始腾飞的时候 ,国外就有人提出“分子生物学早已死亡”的结论 ,国内直到最近几年还有不少人不赞成分子生物学作为一门分支学科而存在。提出反对意见的主要理由有三 :一是所谓分子生物学 ,只是分子水平分析方法和技术的集合 ,充其量只能作为其他经典学科的研究“工具”和“手段”而已 ;二是分子水平的研究把复杂的生命现象简单化为分子事件的分析 ,缺乏整体 (综合 )式观念和整合型研究方法 ;三是研究内容与其他学科有重叠 ,难以界定。实际上 ,

关键词：医学分子生物学分子生物学生物大分子结构

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嗜水气单胞菌hec毒素溶血试验诊断阵发性睡眠性血红蛋白尿症

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中华血液学杂志 2000年第10期21卷 517-520页

作者：刘海丽许彩民吕照江陆承平潘华珍张之南中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005 北京协和医院南京农业大学

目的　研究嗜水气单胞菌hec毒素对红细胞的作用 ,为阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)的临床诊断提供一种新方法。方法　从患暴发性传染病的家养鲫鱼分离到嗜水气单胞菌 ,其培养上清经硫酸铵沉淀获得粗提毒素 ,经DEAE纤维素层析得提纯毒素... 详细信息

目的　研究嗜水气单胞菌hec毒素对红细胞的作用 ,为阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)的临床诊断提供一种新方法。方法　从患暴发性传染病的家养鲫鱼分离到嗜水气单胞菌 ,其培养上清经硫酸铵沉淀获得粗提毒素 ,经DEAE纤维素层析得提纯毒素。粗提毒素作用于PNH和其他贫血患者及正常人的红细胞 ,采用 96孔板在波长 6 30nm酶标仪比色 ;同时用CD59单抗和FITC标记的羊抗鼠IgG标记红细胞 ,以流式细胞仪分析毒素作用前后CD59标记率。结果　对 15例PNH患者、15名正常人、15例非PNH贫血患者的红细胞 ,进行hec毒素试验 ,发现毒素在 0 .12 5g/L、37℃作用 2 0min后 ,正常人和非PNH贫血患者的红细胞完全溶解 ,而PNH患者存留红细胞的百分率与CD59标记率成反比。毒素作用前后流式细胞仪检测结果表明 ,毒素可以特异地作用于CD59阳性细胞。结论　PNH患者的红细胞比其他非PNH贫血患者及正常人的红细胞有明显的抗毒素溶破作用 ,且毒素作用后存留细胞的百分数反映CD59标记率 ,故可作为PNH诊断的敏感、特异、简便可行的新诊断方法。

关键词：阵发性睡眠性血红蛋白尿嗜水气单胞菌 hec毒素

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CD2胞内区结合蛋白的分子克隆与鉴定

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科学通报 2000年第11期45卷 1163-1167页

作者：邵源肖声翟文静李董刘彦信刘士廉郑德先中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

为了探讨ＣＤ２分子的信号传递功能，以编码ＣＤ２胞内区（Ｔｈｒ２１１－Ｇ１ｎ３３６）肽段的ｃＤＮＡ为“钓饵”，采用酵母双杂交系统从激活的人Ｔ淋巴细胞ｃＤＮＡ文库中筛选与之相互作用蛋白的ｃＤＮＡ序列．并采用免疫共沉淀法... 详细信息

为了探讨ＣＤ２分子的信号传递功能，以编码ＣＤ２胞内区（Ｔｈｒ２１１－Ｇ１ｎ３３６）肽段的ｃＤＮＡ为“钓饵”，采用酵母双杂交系统从激活的人Ｔ淋巴细胞ｃＤＮＡ文库中筛选与之相互作用蛋白的ｃＤＮＡ序列．并采用免疫共沉淀法鉴定该蛋白在体内与ＣＤ２胞内区结合的特异性．克隆并鉴定了一个与ＣＤ２胞内区特异性结合的胞内蛋白分子，与ｖ－ｆｏｓ转化效应蛋白（Ｆｔｅ－１）同源Ｆｔｅ－１参与细胞转化、生长、蛋白合成及向线粒体转运蛋白质．蛋白数据库检索表明，Ｆｔｅ－１具有蛋白激酶ＰＫＣ的结合与作用位点。

关键词： CD2胞内区结合蛋白分子克隆鉴定

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一个遗传性乳光牙本质家系致病基因的初步定位

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中华医学遗传学杂志 2000年第6期17卷 386-389页

作者：张晓海赵军朱席琳高山李常福范钰刘萍金英淑张连云邱长春沈岩中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室天津医科大学口腔医院

目的　研究遗传性乳光牙本质家系致病基因是否与染色体 4q2 1连锁。方法　提取在天津塘沽地区发现的一个遗传性乳光牙本质家系成员的外周血 DNA,选择染色体 4q2 1上的 4个短串联重复序列多态性标记 (short tandem repeatpolymorphism,ST... 详细信息

目的　研究遗传性乳光牙本质家系致病基因是否与染色体 4q2 1连锁。方法　提取在天津塘沽地区发现的一个遗传性乳光牙本质家系成员的外周血 DNA,选择染色体 4q2 1上的 4个短串联重复序列多态性标记 (short tandem repeatpolymorphism,STRP) :GATA6 2 A11、DSP(P)、SPP1和 D4S15 6 3做荧光标记 PCR、等位片段分析 ,用 L od连锁分析法分析该家系致病基因位点与上述 4个 STR的连锁关系。结果分别得到 13个家庭成员上述 4个位点的基因型和单体型。ML INK软件分析显示 :GATA6 2 A11、DSP(P)与致病基因位点连锁的最大 L od值分别为 1.6 3(θ=0 )和 1.6 8(θ=0 )。结论　遗传性乳光牙本质家系的致病基因初步定位在

关键词：遗传性乳光牙本质连锁分析 STRP 致病基因

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药物诱导的小鼠红白血病细胞沿红系分化过程中基因表达的差异显示分析

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基础医学与临床 2000年第3期20卷 250-255页

作者：陈渝萍刘德培薛社普中国医学科学院基础医学研究所国家医学分子生物学重点实验室中国协和医科大学基础医学院细胞生物室北京100005

应用mRNA差异显示技术分析了药物诱导MEL细胞沿红系分化过程中基因表达的改变.以六个锚定引物和六个随机引物共36种组合进行差异显示分析,得到67个差异片段.对部分片段进行克隆测序,获20个片段的序列,其中12个新的表达序列标签.以反向... 详细信息

应用mRNA差异显示技术分析了药物诱导MEL细胞沿红系分化过程中基因表达的改变.以六个锚定引物和六个随机引物共36种组合进行差异显示分析,得到67个差异片段.对部分片段进行克隆测序,获20个片段的序列,其中12个新的表达序列标签.以反向斑点杂交检测部分差异显示带的差异性,阳性率为27/39(69%).

关键词： MEL细胞红系分化差异显示分析

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重组可溶型Fas的表达及抗体制备

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中华医学杂志 2000年第12期80卷 914-915页

作者：刘彦信赵芳萍祖淑玉刘士廉刘复强翟艳苓杨敏赵相印郑德先中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室 100005 首都医科大学附属北京同仁医院

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