检索结果-内蒙古大学图书馆

中华血液学杂志 1999年第4期20卷 183-186页

作者：李强张之南吕照江刘尔坤武永吉许彩民中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院血液科华西医科大学附属第二医院儿科中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室

目的观察临床完全缓解的阵发性睡眠性血红蛋白尿症（ＰＮＨ）患者体内是否仍有异常造血细胞并探讨其临床意义。方法用免疫荧光标记及流式细胞术检测患者骨髓有核细胞、外周血红细胞ＣＤ５９抗原表达及骨髓ＣＤ３４＋造血干／祖细胞数。... 详细信息

目的观察临床完全缓解的阵发性睡眠性血红蛋白尿症（ＰＮＨ）患者体内是否仍有异常造血细胞并探讨其临床意义。方法用免疫荧光标记及流式细胞术检测患者骨髓有核细胞、外周血红细胞ＣＤ５９抗原表达及骨髓ＣＤ３４＋造血干／祖细胞数。结果２例临床完全缓解的ＰＮＨ患者体内仍呈正常造血细胞与异常克隆并存状态，但与未缓解ＰＮＨ患者相比，完全缓解患者外周血红细胞、骨髓单个核细胞及ＣＤ３４＋细胞中均以正常的ＣＤ５９＋细胞为主，表明体内异常克隆造血优势已经消失。结论临床完全缓解的ＰＮＨ患者仍可有残存的异常克隆；ＰＮＨ达到临床完全缓解并不一定需要体内异常克隆的彻底消灭；ＰＮＨ患者体内异常克隆的造血优势在一定条件下是可以消失的。

关键词：血红蛋白尿 PNH 抗原造血干细胞流式细胞术

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肿瘤的基因预防

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中国医学科学院学报 1999年第5期21卷 399-401页

作者：张敏磊方福德中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

肿瘤的发生和发展是一个渐进和缓慢的过程，在人类，有的癌形成需要几十年时间，但在出现临床症状以前，分子水平的改变大多已经出现。肿瘤的发生一方面有赖于外界致癌因素（化学的，生物的和物理的因素，特别是环境中化学致癌物）的反... 详细信息

肿瘤的发生和发展是一个渐进和缓慢的过程，在人类，有的癌形成需要几十年时间，但在出现临床症状以前，分子水平的改变大多已经出现。肿瘤的发生一方面有赖于外界致癌因素（化学的，生物的和物理的因素，特别是环境中化学致癌物）的反复刺激，另一方面也取决于个体的遗传学背景，即基因水平功能的完损与否。不同的个体其ＤＮＡ的修复、细胞的凋亡与分化、酶的解毒功能以及免疫系统的差异等因素，决定了该个体对致癌因素的易感性。因此肿瘤的预防包括两大方面，一是减少个体对致癌因素的暴露；另一是要修复或完善基因水平的功能，亦即肿瘤的基因预防。目前，肿瘤基因预防主要通过食物、药物和其他化学物质影响和调节基因的功能或直接导入不同作用原

关键词：肿瘤基因预防预防

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体外转运富含GPI-蛋白的红细胞囊泡改善PNH溶血的探索

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中国医学科学院学报 1999年第4期21卷 278-281页

作者：杨洋许彩民潘华珍吕照江张之南中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的　在体外观察是否能将富含ＣＤ５９的红细胞囊泡转运到缺失ＣＤ５９的阵发性睡眠性血红蛋白尿症（ＰＮＨ）红细胞膜上，以改善ＰＮＨ溶血，为ＰＮＨ的治疗提供新的线索。方法　采用免疫亲和层析分离技术分离ＰＮＨＣＤ５９－红... 详细信息

目的　在体外观察是否能将富含ＣＤ５９的红细胞囊泡转运到缺失ＣＤ５９的阵发性睡眠性血红蛋白尿症（ＰＮＨ）红细胞膜上，以改善ＰＮＨ溶血，为ＰＮＨ的治疗提供新的线索。方法　采用免疫亲和层析分离技术分离ＰＮＨＣＤ５９－红细胞，采用Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹分析、流式细胞仪及蛇毒因子溶血实验等检测和分析红细胞与囊泡的结合。结果　Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹分析显示，红细胞囊泡含有ＣＤ５９；流式细胞仪测定表明，ＰＮＨＣＤ５９－红细胞与囊泡结合后，ＣＤ５９的荧光标记率明显增高（Ｐ＜０００１）；蛇毒因子溶血实验显示，加入囊泡后ＰＮＨＣＤ５９－红细胞溶血度也显著下降（Ｐ＜００５）。结论　红细胞囊泡上的ＣＤ５９可以在体外转运到ＰＮＨＣＤ５９－红细胞上，并产生抑制补体溶血的作用，使ＰＮＨＣＤ５９－

关键词：红细胞囊泡 PNH 糖肌醇磷脂血红蛋白尿症

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改进的反向PCR技术克隆转移基因的旁侧序列

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生物化学与生物物理进展 1999年第6期26卷 600-602页

作者：李竹红刘德培梁植权中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

对传统的反向ＰＣＲ技术作了一些改进：用巢式ＰＣＲ扩增含量极少的靶序列；ＰＣＲ反应体系中加入５％的甲酰胺以减少非特异性扩增．结果表明，改进的反向ＰＣＲ体系是克隆人基因组已知片段旁侧序列的高度灵敏、高度特异的方法．

关键词：反向PCR 旁侧序列转移基因

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一个新的人类硫氧化还原蛋白基因的克隆

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科学通报 1999年第12期44卷 1307-1310页

作者：周彦潘美辉袁建刚杜光伟强伯勤中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

根据不同发育阶段 ( 1 3,33周 )的人胎脑组织mRNA差异显示分析 (又称DDRT PCR)所得到的具有差异表达的EST的序列 ,设计引物筛选点阵排列的人胎脑cDNA文库 ,得到一个新的全长cDNA克隆 .这个克隆全长 1 2 0 8bp ,包含一个 889bp的开放阅读... 详细信息

根据不同发育阶段 ( 1 3,33周 )的人胎脑组织mRNA差异显示分析 (又称DDRT PCR)所得到的具有差异表达的EST的序列 ,设计引物筛选点阵排列的人胎脑cDNA文库 ,得到一个新的全长cDNA克隆 .这个克隆全长 1 2 0 8bp ,包含一个 889bp的开放阅读框 ,一个 1 32bp的 5′非翻译序列和一个 2 0 9bp的 3′非翻译序列以及典型的polyA加尾信号 .其推断的氨基酸序列与人硫氧化还原蛋白同源 ,而且含有硫氧化还原蛋白的保守的活性位点序列 .将它命名为人的类硫氧化还原蛋白基因 (humanthioredoxinlikegene ,hTRXL) .

关键词：差异显示硫氧化还原蛋白胎脑基因克隆

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重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子在啤酒酵母中的表达和分泌

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基础医学与临床 1999年第1期19卷 43-48页

作者：李旌军黄秉仁蔡良琬中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室

利用啤酒酵母α－因子启动子和前导肽区与中国人ＧＭ－ＣＳＦ基因编码区正确融合后能产生具有正确Ｎ－端的分泌型表达载体，ＧＭ－ＣＳＦ基因在啤酒酵母细胞中得到表达和分泌。Ｗｅｓｔｅｍ印迹杂交和染糖结果表明酵母细胞能识别ｈＧＭ... 详细信息

利用啤酒酵母α－因子启动子和前导肽区与中国人ＧＭ－ＣＳＦ基因编码区正确融合后能产生具有正确Ｎ－端的分泌型表达载体，ＧＭ－ＣＳＦ基因在啤酒酵母细胞中得到表达和分泌。Ｗｅｓｔｅｍ印迹杂交和染糖结果表明酵母细胞能识别ｈＧＭ－ＣＳＦ中潜在的糖化位点。表达的ｈＧＭ－ＣＳＦ以不同程度的糖化形式存在。体外生物学活性测定表明，培养上肩能刺激骨髓干细胞的增殖，形成集落，其生物学活性为１．２５ｘ１０４Ｕ／ｍＬ。

关键词： GM-CSF 啤酒酵母表达分泌糖化

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一种与不育有关的人精子蛋白质的组织特异性及表达

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中国医学科学院学报 1999年第3期21卷 166-169页

作者：张梅林周雪峰曹登峰缪时英吴燕婉邢志军宗书东王琳芳中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室国家计划生育委员会科学技术研究所

目的通过对已被ＧｅｎＢａｎｋ接受、编码与不育有关的人精子蛋白质的ｃＤＮＡ片段（ＢＳＤ－２．４）的组织特异性及表达阶段的研究，进一步了解其特性。方法采用Ｄｏｔｂｌｏｔ、Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ和组织原位杂交技术。结果该... 详细信息

目的通过对已被ＧｅｎＢａｎｋ接受、编码与不育有关的人精子蛋白质的ｃＤＮＡ片段（ＢＳＤ－２．４）的组织特异性及表达阶段的研究，进一步了解其特性。方法采用Ｄｏｔｂｌｏｔ、Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ和组织原位杂交技术。结果该ｃＤＮＡ只在人和大鼠睾丸组织中表达；在人睾丸曲细精管的精原细胞、精母细胞和精子细胞中均有转录。结论ＢＳＤ－２．４ｃＤＮＡ编码蛋白具有睾丸组织特异性，并在精子发生的各个阶段均有不同程度的表达。

关键词：人精子蛋白质组织特异性组织原位杂交

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配子印迹

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基础医学与临床 1999年第2期19卷 91-96页

作者：周彦袁建刚强伯勤中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室

配子印迹周彦，袁建刚，强伯勤（中国医学科学院基础医学研究所，中国协和医科大学基础医学院，医学分子生物学国家重点实验室，北京　１００００５）随着细胞遗传学、发育遗传学和分子遗传学的发展及生物技术的不断更新，哺乳动物发育... 详细信息

配子印迹周彦，袁建刚，强伯勤（中国医学科学院基础医学研究所，中国协和医科大学基础医学院，医学分子生物学国家重点实验室，北京　１００００５）随着细胞遗传学、发育遗传学和分子遗传学的发展及生物技术的不断更新，哺乳动物发育过程中基因的活性及其调节机理的研究...

关键词：配子印迹印迹基因基因调控

来源：评论

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人胰岛素样生长因子Ⅱ在甲醇营养型酵母***中的表达、分泌和性质研究

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中国生物化学与分子生物学报 1999年第6期15卷 893-898页

作者：李旌军黄秉仁中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

为获得ＩＧＦ－Ⅱ的高效表达，构建了其多拷贝、分泌型表达载体：含有５个串联的ＩＧＦ－Ⅱ表达单元；由受甲醇诱导的醇氧化酶启动子控制表达；利用啤酒酵母α因子的前导肽引导分泌．线形化表达载体转化Ｐ．ｐａｓｔｏｒｉｓ蛋白酶缺陷... 详细信息

为获得ＩＧＦ－Ⅱ的高效表达，构建了其多拷贝、分泌型表达载体：含有５个串联的ＩＧＦ－Ⅱ表达单元；由受甲醇诱导的醇氧化酶启动子控制表达；利用啤酒酵母α因子的前导肽引导分泌．线形化表达载体转化Ｐ．ｐａｓｔｏｒｉｓ蛋白酶缺陷型菌株后，筛选到有ＩＧＦ－Ⅱ表达和分泌的阳性转化子；进一步优化表达、培养条件后，ＩＧＦ－Ⅱ在高密度发酵上清中的产量可达６０ｍｇ／Ｌ．对Ｐ．ｐａｓｔｏｒｉｓ产生的ｒｈＩＧＦ－Ⅱ的性质分析表明，其具有正确的分子量，Ｎ端和较好的生物活性．

关键词：甲醇营养型酵母分泌 IGF-Ⅱ 表达性质

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Yunnanese(~Aγδβ)~0-地贫缺失桥片段的克隆及缺失连接区的序列测定

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中国生物化学与分子生物学报 1999年第1期15卷 118-122页

作者：张俊武张雪青赵艳君中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室

为研究导致Ｙｕｎｎａｎｅｓｅ（Ａγδβ）０－地贫缺失事件的分子机制，并从３′并入序列中搜寻增强子类序列，使用ＥＭＢＬ３为载体构建了一例缺失杂合子的基因组文库，筛选到来源于异常染色体１１并包含Ｇγ珠蛋白基因区６．７ｋｂ... 详细信息

为研究导致Ｙｕｎｎａｎｅｓｅ（Ａγδβ）０－地贫缺失事件的分子机制，并从３′并入序列中搜寻增强子类序列，使用ＥＭＢＬ３为载体构建了一例缺失杂合子的基因组文库，筛选到来源于异常染色体１１并包含Ｇγ珠蛋白基因区６．７ｋｂ序列以及１１．５ｋｂ３′并入序列（即缺失桥片段）的克隆．此１１．５ｋｂ序列在正常染色体中位于β珠蛋白基因约下游６６～７８ｋｂ区域．详细分析了这一区域的限制性内切酶图谱．分析了围绕缺失连接区的ＤＮＡ序列，精确定位缺失的５′端点发生在Ａγ珠蛋白基因上游－１１６～－１１７碱基之间．确定缺失的３′端点处于一个Ｌ１序列内，位于β珠蛋白基因下游～６６ｋｂ，距离Ｃｈｉｎｅｓｅ（Ａγδβ）０－地贫缺失３′端点上游～１２．２ｋｂ的一个ＥｃｏＲⅠ位点上游４１３ｂｐ．围绕５′和３′端点的序列之间无明显同源性，说明这一缺失代表了体内的非同源重组事件．这一重组事件可能由Ｌ１序列介导．

关键词：地中海贫血缺失连接区非同源重组

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