检索结果-内蒙古大学图书馆

中国生物化学与分子生物学报 1998年第5期14卷 512-517页

作者：黄秉仁蔡良琬廖洪涛唐申秀周海涛中国协和医科大学中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室

选用酵母菌偏爱密码子人工合成了编码５１个氨基酸的人表皮生长因子（ｈＥＧＦ）基因．将合成基因与编码酵母α因子前导肽８５个氨基酸的ＤＮＡ片段融合后克隆到醇氧化酶基因启动子下游，并构建出多拷贝表达载体．此载体转化甲基营养型... 详细信息

选用酵母菌偏爱密码子人工合成了编码５１个氨基酸的人表皮生长因子（ｈＥＧＦ）基因．将合成基因与编码酵母α因子前导肽８５个氨基酸的ＤＮＡ片段融合后克隆到醇氧化酶基因启动子下游，并构建出多拷贝表达载体．此载体转化甲基营养型酵母株ＧＳ１１５后筛选出整合型ＭｕｔＳＨｉｓ＋基因型菌株．高密度培养及诱导表达后该株可分泌具完好生物活性和正确物理化学性质的人表皮生长因子，产量达１００ｍｇ／Ｌ，经３次柱层析纯度达９５％以上。

关键词：人表皮生长因子甲基营养型酵母高效表达

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人白细胞介素2受体α链在因第三内含子的克隆与核苷酸序列分析

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基础医学与临床 1998年第5期18卷 51-57页

作者：张晶吴宁华沈 中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室

应用ＰＣＲ技术扩增了人白细胞介素２受体ａ链（ＩＬ２Ｒα）基因第三内含子２５ｋｂ片段，并成功地克隆到ｐＢＳＳＫ载体中。构建了一系列亚克隆并测定了２５ｋｂ全核苷酸序列，其中２２２８ｂｐ碱基序列为国内外首次测定，其... 详细信息

应用ＰＣＲ技术扩增了人白细胞介素２受体ａ链（ＩＬ２Ｒα）基因第三内含子２５ｋｂ片段，并成功地克隆到ｐＢＳＳＫ载体中。构建了一系列亚克隆并测定了２５ｋｂ全核苷酸序列，其中２２２８ｂｐ碱基序列为国内外首次测定，其数据已被ＧｅｎＢａｎｋ接受，接受号为Ｕ５６３８９。通过计算机分析发现ＩＬ２Ｒα基因第三内含子具有典型的Ｇ↓ＧＵ……Ｐｙｒｉｃｈ（∽１５ｂｐ）ＮＣＡＧ↓Ｇ结构特点，但在３’剪接点５’上游５００ｂｐ范围内未发现分支点结构。

关键词： IL-2Rα基因内含子 PCR 克隆核苷酸序列

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神经酰胺诱导药物敏感型和耐药型细胞凋亡机制的探讨

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中国生物化学与分子生物学报 1998年第2期14卷 205-211页

作者：金朝晖许彩民陈忠雷潘华珍中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室

以药物敏感型细胞株Ｋ５６２／Ｓ和耐药型细胞株Ｋ５６２／Ａ０２为对象．观察原癌基因Ｂｃｌ－２的表达量在两种细胞中的差异，以及神经酰胺作为一个新的脂质第二信使诱导细胞凋亡的能力，并利用酪氨酸激酶抑制剂ｇｅｎｉｓｔｅｉｎ，... 详细信息

以药物敏感型细胞株Ｋ５６２／Ｓ和耐药型细胞株Ｋ５６２／Ａ０２为对象．观察原癌基因Ｂｃｌ－２的表达量在两种细胞中的差异，以及神经酰胺作为一个新的脂质第二信使诱导细胞凋亡的能力，并利用酪氨酸激酶抑制剂ｇｅｎｉｓｔｅｉｎ，酪氨酸磷酸酯酶抑制剂ｖａｎａｄａｔｅ，观察酪氨酸可逆磷酸化与细胞凋亡间的关系．结果显示：在Ｋ５６２／Ａ０２中Ｂｃｌ－２的表达量明显高于Ｋ５６２／Ｓ；外源性神经酰胺能成功地诱导Ｋ５６２／Ｓ，Ｋ５６２／Ａ０２细胞凋亡，凋亡细胞具有典型的形态学改变和ＤＮＡ“Ｌａｄｄｅｒ”形成，ＦＣＭ检测出现凋亡细胞峰，但在同样的诱导条件下，Ｋ５６２／Ｓ细胞凋亡明显高于Ｋ５６２／Ａ０２细胞．ＦＣＭ检测ｇｅｎｉｓｔｅｉｎ能显著改变这两种细胞生长周期，但细胞阻滞于Ｇ２／Ｍ期，便对神经酰胺诱导的细胞凋亡无明显作用，ｖａｎａｄａｔｅ单独对细胞地明显作用，但与神经酰胺共同作用能明显提高细胞凋亡率．以上结果表明在药物诱导的细胞调亡中Ｂｃｌ－２基因起重要作用，神经酰胺能诱导Ｋ５６２／Ｓ和Ｋ５６２／Ａ０２细胞调亡．

关键词：神经酰胺诱导耐药性细胞凋亡肿瘤药物疗法

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CD3ε胞浆区2个酪氨酸共同介导T淋巴细胞凋亡

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科学通报 1998年第12期43卷 1299-1304页

作者：何亦平刘彦信郑勇刘音杨桂珍刘士廉郑德先中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005 中国医学科学院血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020

CD3ε是T细胞抗原受体复合物 (TCR/CD3)的一个成员 ,在此复合物的组装和介导细胞激活信号的传递中起重要作用 ,其信号传递的功能与其胞内区称之为免疫受体酪氨酸依赖的激活基序 (ITAM )有关 .已有报道人CD8分子的膜外区_跨膜区和CD3ε... 详细信息

CD3ε是T细胞抗原受体复合物 (TCR/CD3)的一个成员 ,在此复合物的组装和介导细胞激活信号的传递中起重要作用 ,其信号传递的功能与其胞内区称之为免疫受体酪氨酸依赖的激活基序 (ITAM )有关 .已有报道人CD8分子的膜外区_跨膜区和CD3ε分子的胞内区组成的融合分子 (CD8_ε)能介导T淋巴细胞激活后凋亡 ,表明单独的CD3分子的ITAM可传递细胞凋亡信号 .进一步以CD8_ε为模板和点突变PCR技术制备了其ITAM中酪氨酸 170 ,181分别和同时突变为苯丙氨酸的突变体 ,克隆入真核表达载体 pcDNA3后 ,转染CD8阴性的人白血病TJurkat淋巴细胞 ,获得了分别表达野生型和各突变型CD8_ε融合分子的细胞株 .以抗CD8单抗分别处理这些细胞株 ,发现抗CD8单抗只能诱导表达野生型CD8_ε分子的细胞激活后凋亡 ,而不能诱导任何表达突变型融合分子的细胞凋亡 ,证明CD3ε_ITAM中的 2个酪氨酸对T淋巴细胞激活和凋亡是缺一不可的 .

关键词：细胞凋亡 CD3ε 酪氨酸 T淋巴细胞白血病

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脊椎动物中枢神经系统发育相关基因的级联调控

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基础医学与临床 1998年第5期18卷 77-80页

作者：金虎林袁建刚强伯勤中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室

脊椎动物的中枢神经系统是一系列在组成上高度复杂的细胞构成的。它的形成经历了一个极其复杂的发育分化过程。这一过程受到了多种基因的级联调控（ＣａｓｃａｄｅＲｅｇｕｌａｔｉｏｎ）。参与这一级联调控网络的基因不仅包括了同源... 详细信息

脊椎动物的中枢神经系统是一系列在组成上高度复杂的细胞构成的。它的形成经历了一个极其复杂的发育分化过程。这一过程受到了多种基因的级联调控（ＣａｓｃａｄｅＲｅｇｕｌａｔｉｏｎ）。参与这一级联调控网络的基因不仅包括了同源盒基因等编码转录因子的基因，其它一...

关键词：脊椎动物中枢神经系统发育相关基因级联调控

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混合样品中微量SRY基因的毛细管电泳检测

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中华医学检验杂志 1998年第2期21卷 92-95页

作者：许琪韩富天范钰林秉承沈岩吴冠芸中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室中国科学院化学物理研究所

目的建立一种灵敏度高、重现性好的检测混合样品中微量目的基因的方法。方法采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增混合样品中微量男性ＤＮＡ的ＳＲＹ序列，分别通过琼脂糖凝胶电泳和毛细管电泳检测ＰＣＲ扩增产物，比较二者的检测灵敏度。结... 详细信息

目的建立一种灵敏度高、重现性好的检测混合样品中微量目的基因的方法。方法采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增混合样品中微量男性ＤＮＡ的ＳＲＹ序列，分别通过琼脂糖凝胶电泳和毛细管电泳检测ＰＣＲ扩增产物，比较二者的检测灵敏度。结果毛细管电泳可检测到２０ｐｇ男性模板ＤＮＡ（相当于３～４个细胞中的ＤＮＡ含量）ＰＣＲ扩增产物总量的１／６００，琼脂糖凝胶电泳可检测到７４ｐｇ男性模板ＤＮＡ（相当于１３个细胞中的ＤＮＡ含量）ＰＣＲ扩增产物总量的１／３。毛细管电泳检测微量目的基因扩增产物的综合灵敏度是琼脂糖凝胶电泳的７５０倍。结论毛细管电泳灵敏度高、重现性好，与ＰＣＲ技术结合可广泛用于各种混合样品中微量核酸分子的检测。

关键词：聚合酶链反庆 SRY基因毛细管电泳基因诊断

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人β^(41/42)地中海贫血基因的转基因小鼠研究

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自然科学进展（国家重点实验室通讯） 1998年第3期8卷 371-376页

作者：李政刘德培刘庆辉郭志晨章秋珩李志杰贾佩臣梁植权中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

人β珠蛋白基因簇位于第11号染色体短臂,由5个功能基因组成:5′-ε-G_γ-A_γ-δ-β-3′,其表达具有红系特异性和发育阶段特异性,并且β类珠蛋白基因与α类珠蛋白基因表达的终产物始终维持平衡。这些基因的适宜表达依赖于ε珠蛋白基因... 详细信息

人β珠蛋白基因簇位于第11号染色体短臂,由5个功能基因组成:5′-ε-G_γ-A_γ-δ-β-3′,其表达具有红系特异性和发育阶段特异性,并且β类珠蛋白基因与α类珠蛋白基因表达的终产物始终维持平衡。这些基因的适宜表达依赖于ε珠蛋白基因上游由4个DNaseⅠ高敏感位点(HS)组成的位点控制区(LCR),其中HS2具有主要的增强子活性。

关键词：异常珠蛋白基因贫血基因治疗地中海贫血

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用转基因动物研究珠蛋白基因红系增强子

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蚌埠医学院学报 1998年第5期23卷 291-293页

作者：刘德培梁植权中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室

珠蛋白基因分为α与β两个基因簇，α基因簇位于１６号染色体，以５′ζ２ψζ１ψα２ψα１α２α１θ１３′的顺序排列；β珠蛋白基因簇位于１１号染色体，以５′εＧγＡγψβδβ３′的顺序排列。... 详细信息

珠蛋白基因分为α与β两个基因簇，α基因簇位于１６号染色体，以５′ζ２ψζ１ψα２ψα１α２α１θ１３′的顺序排列；β珠蛋白基因簇位于１１号染色体，以５′εＧγＡγψβδβ３′的顺序排列。两个珠蛋白基因簇的序列均已测定。珠...

关键词：珠蛋白类基因重组转基因动物动物模型

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血细胞生成中的信号传递通路及其调控

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中国实验血液学杂志 1998年第3期6卷 161-167页

作者：张燕萍陈嘉林潘华珍中国医学科学院，中国协和医科大学北京协和医院内科，北京100730 中国医学科学院，中国协和医科大学北京协和医院血液科，北京100730 中国医学科学院，中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室，北京100730

造血生长因子通过与其受体的相互作用调节血细胞的增殖与分化。造血生长因子与受体结合后激活JAK,JAK发生自我磷酸化的同时也使受体磷酸化,继而通过SH2 蛋白激活ras通路。JAK还可以使STAT磷酸化。STAT磷酸化后移到细胞核内,启动有关基... 详细信息

造血生长因子通过与其受体的相互作用调节血细胞的增殖与分化。造血生长因子与受体结合后激活JAK,JAK发生自我磷酸化的同时也使受体磷酸化,继而通过SH2 蛋白激活ras通路。JAK还可以使STAT磷酸化。STAT磷酸化后移到细胞核内,启动有关基因的转录。

关键词：血细胞生成信号传递造血调控造血生长因子

来源：评论

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利用一种新的DNA操作系统克隆人神经生长因子

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中国医学科学院学报 1998年第2期20卷 126-126页

作者：王欣黄秉仁中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京 100005

神经生长因子(NGF)是最早发现的神经趋化因子。它对神经细胞具有营养与保护作用,对损伤神经具有调节与修复功能。为大量获得重组人NGF,本研究采用构建杂合克隆因子(hybrid clonemid)进行DNA操作,使NGF基因与pET-16 b载体重组。根据人NG... 详细信息

神经生长因子(NGF)是最早发现的神经趋化因子。它对神经细胞具有营养与保护作用,对损伤神经具有调节与修复功能。为大量获得重组人NGF,本研究采用构建杂合克隆因子(hybrid clonemid)进行DNA操作,使NGF基因与pET-16 b载体重组。根据人NGF基因序列合成一对PCR引物,并在引物的5’端加上与载体互补的一小段序列(21bp)。用此引物进行PCR扩增,获得NGF基因扩增产物。将载体pET-16b用Nde I酶切使其成为线性载体(为避免克隆过程中载体自身转化的本底,此步酶切要完全)。为使NGF基因位于正确的阅读框架上并与因子Xa特异酶切位点相接,在得到酶切完全的线性载体后,应用T4DNA聚合酶的3’→5’外切酶活性,将3’端AC去除

关键词： DNA 基因神经 NGF 酶切操作系统计算机系统

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