检索结果-内蒙古大学图书馆

人免疫缺陷病毒1型TAT突变蛋白及反义TAT RNA对TAT反式激活作用的抑制

病毒学报 1997年第1期13卷 6-12页

作者：白龙川袁建刚强伯勤中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室

Ｔａｔ（Ｔｒａｎｓａｃｔｉｖａｔｏｒ）是人免疫缺陷病毒（ＨＩＶ）基因组编码的反式激活因子，突变分析表明它含有几个重要的功能域。为寻找控制ＨＩＶ复制的途径，构建了以ＨＩＶ－１ＬＴＲ（－１５８－＋８０）为启动子的Ｔａｔｃ... 详细信息

Ｔａｔ（Ｔｒａｎｓａｃｔｉｖａｔｏｒ）是人免疫缺陷病毒（ＨＩＶ）基因组编码的反式激活因子，突变分析表明它含有几个重要的功能域。为寻找控制ＨＩＶ复制的途径，构建了以ＨＩＶ－１ＬＴＲ（－１５８－＋８０）为启动子的ＴａｔｃＤＮＡ全长反义表达质粒ｐＡＳ－Ｔａｔ，并用已经构建的以ＨＩＶＬＴＲ－１５８到＋８０为启动子，具有不同突变点的突变Ｔａｔ基因表达质粒，以荧光酶基因为报告基因，共转染Ｊｕｒｋａｔ细胞，结果发现无论是反义Ｔａｔ表达质粒还是突变Ｔａｔ表达质粒，在瞬时转染体系中均能不同程度地抑制Ｔａｔ的活性，其中以ｐＭ５（５２位Ａｒｇ由Ｌｅｕ替代）和反义ＴａｔＲＮＡ的抑制效果最好。结果说明。

关键词：艾滋病毒I型反义Tat RNA 突变Tat蛋白

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FMR1基因在人胚胎组织中的选择剪接表达

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中国医学科学院学报 1997年第4期19卷 242-246页

作者：丁剑涛黄涛李兰英范钰沈岩吴冠芸中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 天津医科大学内分泌研究所

本实验分析了6月龄胚胎心、肝、肾、脾4种组织中FMR1基因的选择剪接表达。在所分析的胚胎组织中，FMR1mRNA主要异构体与该胚胎大脑皮层的主要异构体相同，与成人大脑皮层的主要异构体完全不同。这一差异提示FMR1基因的选择剪接表达存在... 详细信息

本实验分析了6月龄胚胎心、肝、肾、脾4种组织中FMR1基因的选择剪接表达。在所分析的胚胎组织中，FMR1mRNA主要异构体与该胚胎大脑皮层的主要异构体相同，与成人大脑皮层的主要异构体完全不同。这一差异提示FMR1基因的选择剪接表达存在发育转换。FMR1基因的选择剪接表达在胚胎和成人组织中的主要差别表现在外显子12和外显子17编码多肽的去留上，对这两段多肽功能的研究将具有重要意义。

关键词： FMR1基因选择剪接脆性X综合征

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人类热休克蛋白HSP90β基因组成性转录调控元件的重组研究(简报)

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中国医学科学院学报 1997年第3期 235-240页

作者：刘巍沈丅琲刘巨洪吴宁华张书岭 100005 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室!北京

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p75NGFR在哺乳动物神经细胞中的表达及其在诱导细胞凋亡中的功能

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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 1997年第4期29卷 19-26页

作者：顾继杰明洪黄秉仁蔡良琬中国协和医科大学、中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室

将从人胎儿基底前脑提取的总ＲＮＡ用ＲＴ－ＰＣＲ扩增并克隆在ｐＵＣ１２中的人神经生长因子低亲和力受体（ｐ７５ＮＧＦＲ）基因分两步克隆到逆转录病毒表达载体ｐＸＴ－１中，经ＰＡ３１７细胞体外包装后收集假病毒上清感染大鼠小脑... 详细信息

将从人胎儿基底前脑提取的总ＲＮＡ用ＲＴ－ＰＣＲ扩增并克隆在ｐＵＣ１２中的人神经生长因子低亲和力受体（ｐ７５ＮＧＦＲ）基因分两步克隆到逆转录病毒表达载体ｐＸＴ－１中，经ＰＡ３１７细胞体外包装后收集假病毒上清感染大鼠小脑神经细胞系Ｒ２，在ＲＮＡ转录和蛋白质合成水平获得了表达。转染了ｐ７５ＮＧＦＲ的Ｒ２细胞在去血清培养时可以诱导细胞凋亡的发生，此凋亡可被ＲＮＡ合成抑制剂放线菌素Ｄ和蛋白质合成抑制剂环己酰亚胺抑制。表明ｐ７５ＮＧＦＲ诱导的细胞凋亡过程中有活跃的基因表达参与。

关键词：神经生长因子低亲和力受体（p75NGFR）细胞凋亡大分子合成抑制剂

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与细胞因子网络相关联的蛋白聚糖

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基础医学与临床 1997年第2期17卷 81-86页

作者：王航中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室

与细胞因子网络相关联的蛋白聚糖王航（中国医学科学院基础医学研究所，中国协和医科大学基础医学院，医学分子生物学国家重点实验室，北京１００００５）蛋白聚糖是一类重要而独特的蛋白糖复合物，由带负电荷的糖胺聚糖链通过共价键与... 详细信息

与细胞因子网络相关联的蛋白聚糖王航（中国医学科学院基础医学研究所，中国协和医科大学基础医学院，医学分子生物学国家重点实验室，北京１００００５）蛋白聚糖是一类重要而独特的蛋白糖复合物，由带负电荷的糖胺聚糖链通过共价键与蛋白质连接而成。蛋白聚糖广泛分布于...

关键词：细胞因子网络蛋白聚糖

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基因差异表达的研究方法

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基础医学与临床 1997年第5期17卷 1-10页

作者：潘美辉金虎林袁建刚强伯勤中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室

基因差异表达的研究方法△潘美辉金虎林袁建刚强伯勤（中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室，北京，１００００５）ＡｂｓｔｒａｃｔＤｉｆｅｒｅｎｔｉａｌｇｅｎｅｅｘｐｒｅｓｓｉ... 详细信息

基因差异表达的研究方法△潘美辉金虎林袁建刚强伯勤（中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室，北京，１００００５）ＡｂｓｔｒａｃｔＤｉｆｅｒｅｎｔｉａｌｇｅｎｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｓｃｌｏｓｅｌｙｒｅｌａｔｅ...

关键词：基因差异表达研究方法分子生物学

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cDNA3′端代表差异显示分析

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生物工程进展 1997年第3期17卷 52-55,43页

作者：潘美辉金虎林袁建刚中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室

根据真核ｍＲＮＡ３′端一般含Ｐｏｌｙ（Ａ）的原理，可使用共同引物将不同的ｍＲＮＡ反转录成ｃＤＮＡ，然后设计特殊引物进行反转录ＰＣＲ，或者将限制性酶切与反转录ＰＣＲ偶联使用，均可获得对应于ｍＲＮＡ３′端的ｃＤＮＡ３′端... 详细信息

根据真核ｍＲＮＡ３′端一般含Ｐｏｌｙ（Ａ）的原理，可使用共同引物将不同的ｍＲＮＡ反转录成ｃＤＮＡ，然后设计特殊引物进行反转录ＰＣＲ，或者将限制性酶切与反转录ＰＣＲ偶联使用，均可获得对应于ｍＲＮＡ３′端的ｃＤＮＡ３′端代表扩增子。比较不同条件下的ｃＤ－ＮＡ３′端代表扩增子，可以获得两种或多种细胞中ｍＲＮＡ的表达差异谱，并分离。

关键词： DNA cDNA3'端代表扩增子差异显示分析

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DNA疫苗及其应用

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基础医学与临床 1997年第5期17卷 26-28页

作者：陈大虎中国协和医科大学基础医学院中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室

ＤＮＡ疫苗及其应用陈大虎（中国协和医科大学基础医学院中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室，北京１００００５）ＡｂｓｔｒａｃｔＤＮＡｖａｃｉｎｅ，ａｋｉｎｄｏｆｎｅｗｖａｃｉｎｅｄｅｖｅｌｏｐｅｄｉ... 详细信息

ＤＮＡ疫苗及其应用陈大虎（中国协和医科大学基础医学院中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室，北京１００００５）ＡｂｓｔｒａｃｔＤＮＡｖａｃｉｎｅ，ａｋｉｎｄｏｆｎｅｗｖａｃｉｎｅｄｅｖｅｌｏｐｅｄｉｎ９０＇ｓ，ａｎｄｉｔｓａｐｐｌｉ...

关键词： DNA疫苗临床应用疫苗

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人白细胞介素-15 cDNA的克隆及其在大肠杆菌中的表达

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基础医学与临床 1997年第5期17卷 29-32,28页

作者：沈永泉崔莲仙何维赵庆胡愉刘庆丰巴德年中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室

从正常人外周血中分离粘附的单核细胞，加入ＬＰＳ刺激４ｈ后提取细胞ｍＲＮＡ反转录获得ｃＤＮＡ第一链，用两对特异引物进行巢式ＰＣＲ扩增出含ＢａｍＨＩ酶切位点的编码人１Ｌ－１５成熟蛋白的ｃＤＮＡ，其大小约３６０ｂｐ。用ＰＥ... 详细信息

从正常人外周血中分离粘附的单核细胞，加入ＬＰＳ刺激４ｈ后提取细胞ｍＲＮＡ反转录获得ｃＤＮＡ第一链，用两对特异引物进行巢式ＰＣＲ扩增出含ＢａｍＨＩ酶切位点的编码人１Ｌ－１５成熟蛋白的ｃＤＮＡ，其大小约３６０ｂｐ。用ＰＥＧ法回收其片段并将其连接到ｐＢＳＳＫ载体的ＳｍａⅠ位点上进行序列分析，结果表明其序列与文献报道一致。然后再将其片段亚克隆插入到ｐＧＥＸ－２Ｔ的ＢａｍＨＩ位点。筛选插入方向正确的克隆，转化大肠杆菌ＪＭ１０９，以１ｍｍｏｌ／ＬＩＰＴＧ诱导５ｈ收集菌体直接进行ＳＤＳ－ＰＡＧＥ，与阴性对照相比，ＭＷ４４ＫＤ处多出一条带，紫外扫描显示此带占菌体蛋白总量的８．８％。ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ证实此带能够特异地与兔抗人ＩＬ－１５的抗体发生反应。证明ＲＴ－ＰＣＲ所得的人ＩＬ－１５ｃＤＮＡ在大肠杆菌中获得了表达，为进一步探讨人ＩＬ－１５的生物学作用打下基础。

关键词：白细胞介素-15 基因克隆基因表达大肠杆菌

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一种从琼脂糠凝胶中分离DNA的快速方法

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基础医学与临床 1997年第2期17卷 154-155页

作者：潘美辉杨文华袁建刚中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室

本文介绍一种冷冻挤压离心法从琼脂糖凝胶中分离ＤＮＡ片段，适合从０．５％～１．８％的凝胶中分离几十到几万ｂｐ的不同ＤＮＡ，ＤＮＡ回收率与凝胶浓度、ＤＮＡ大小有关，介于２５％～８０％。本方法快速、简单、经济、重复性好，值... 详细信息

本文介绍一种冷冻挤压离心法从琼脂糖凝胶中分离ＤＮＡ片段，适合从０．５％～１．８％的凝胶中分离几十到几万ｂｐ的不同ＤＮＡ，ＤＮＡ回收率与凝胶浓度、ＤＮＡ大小有关，介于２５％～８０％。本方法快速、简单、经济、重复性好，值得推广应用。

关键词：琼脂凝胶电泳冷冻挤压离心 DNA分离分离技术

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