检索结果-内蒙古大学图书馆

中国医学科学院学报 1996年第2期18卷 89-94页

作者：关中晖吴宁华沈珝琲中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京协和医院

白细胞介素２／白细胞介素２受体（ＩＬ－２／ＩＬ－２Ｒ）系统在免疫系统中起极重要作用，研究糖皮质激素对ＩＬ－２／ＩＬ－２Ｒ系统的影响有助于了解糖皮质激素免疫调节作用的分子机理。通过荧光素酶报告基因的表达及狭缝杂交，发现... 详细信息

白细胞介素２／白细胞介素２受体（ＩＬ－２／ＩＬ－２Ｒ）系统在免疫系统中起极重要作用，研究糖皮质激素对ＩＬ－２／ＩＬ－２Ｒ系统的影响有助于了解糖皮质激素免疫调节作用的分子机理。通过荧光素酶报告基因的表达及狭缝杂交，发现在Ｊｕｒｋａｔ细胞中地塞米松对ＩＬ－２Ｒα链基因ｍＲＮＡ的基础表达及ＰＨＡ的诱导表达均有直接促进作用，这种正调节作用与ＩＬ－２Ｒα链基因５＇上游一４８２ｂｐ以内近端已知的诱导转录元件无关，且与ＰＨＡ的活化机制不同，两者间具有协同效应。

关键词：白细胞介素2 受体 α链地塞米松基因表达

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中国人基因组粘粒文库的构建

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中国医学科学院学报 1996年第5期18卷 333-337页

作者：秦学斌张军钟自力孔建沈岩吴冠芸中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室

用ＳｕｐｅｒＣｏｓ１粘粒载体构建中国人基因组文库，共得到５．９７×１０＾５个有效克隆，插入外源ＤＮＡ片段长度为３２￣４５ｋｂ平均４０ｋｂ，约８．１２倍于人类基因组３×１０＾９碱基ＤＮＡ长度。用分布于不同染色体... 详细信息

用ＳｕｐｅｒＣｏｓ１粘粒载体构建中国人基因组文库，共得到５．９７×１０＾５个有效克隆，插入外源ＤＮＡ片段长度为３２￣４５ｋｂ平均４０ｋｂ，约８．１２倍于人类基因组３×１０＾９碱基ＤＮＡ长度。用分布于不同染色体上６个已知标志做ＰＣＲ鉴定，结果皆有特异扩增，表明这些位点均包含在库中。

关键词：粘粒文库人基因组构建 DNA 载体克隆

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人神经生长因子低亲和力受体（p^（75）NGFR）cDNA的克隆及其在神经细胞中表达活性的初步研究

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生物化学杂志 1996年第1期12卷 17-21页

作者：易明顾继杰黄秉仁蔡良琬中国协和医科大学中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室

利用酸性异硫氰酸胍－酚－氯仿一步法从人胎儿基底前脑中提取总ＲＮＡ，用逆转录与聚合酶链反应相结合的ＲＴ－ＰＣＲ法，扩增出人神经生长因子低亲和力受体ｐ^（７５）ＮＧＦＲ基因ｃＤＮＡ，在限制性内切酶ＳｍａⅠ存在下的连接体系... 详细信息

利用酸性异硫氰酸胍－酚－氯仿一步法从人胎儿基底前脑中提取总ＲＮＡ，用逆转录与聚合酶链反应相结合的ＲＴ－ＰＣＲ法，扩增出人神经生长因子低亲和力受体ｐ^（７５）ＮＧＦＲ基因ｃＤＮＡ，在限制性内切酶ＳｍａⅠ存在下的连接体系中，将扩增出的ｃＤＮＡ片段克隆入ｐＵＣ１２的ＳｍａⅠ位或，经限制性内切酶ＥｃｏＲⅠ和ＰｓｔⅠ酶切鉴定是否插入以及ＨｉｎｄⅢ酶切鉴定方向。将重组质粒中的ｐ^（７５）ＮＧＦＲ的ｃＤＮＡ再次亚克隆至ｐＵＣ１２载体中后，以其双链ＤＮＡ为模板，用末端终止法测出其全部核苷酸顺序，证实其核苷酸编码的ｐ^（７５）ＮＧＦＲ除两个碱基突变外，其余与文献完全一致。完整的ｐ^（７５）ＮＧＦＲ的ｃＤＮＡ分两步克隆到逆转录病毒表达载体ｐＸＴ－１，经ＰＡ３１７包装细胞株体外包装后、收集病毒上清转染条件不死性大鼠小脑神经细胞系Ｒ２．初步结果表明转染了ｐ^（７５）ＮＧＦＲ的Ｒ２细胞株去除ＮＧＦ培养时出现程序化死亡的典型特征梯型ＤＮＡ带。

关键词：神经生长因子低亲和力受体神经细胞基因克隆

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人类基因组计划研究进展

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生物工程进展 1996年第5期16卷 51-54页

作者：袁建刚杜光伟强伯勤中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室

本文简要介绍了人类基因组计划的研究目标、内容、策略和人类基因组计划研究的新进展，如遗传图谱、转录图谱的构建、序列分析、疾病基因的鉴定等。同时还介绍了可能力。快基因组全序列分析的新策略和基因组后研究的几种方法。

关键词：人类基因组计划遗传图谱基因组

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差异显示反转录PCR技术的建立和改进

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基础医学与临床 1996年第6期16卷 463-467页

作者：陈斌袁建刚潘美辉俞耀庭强伯勤中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室南开大学分子生物学研究所

本文对差异显示反转录ＰＣＲ（ＤＤＲＴ－ＰＣＲ）的一系列条件进行了探索和改进，建立了有效的ＤＤＲＴ－ＰＣＲ方法。特别是单锚定碱基引物Ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）＿（１２）Ｍ（Ｍ＝Ａ，Ｇ，Ｃ）的应用，不但得到了十分良好的实验结果，... 详细信息

本文对差异显示反转录ＰＣＲ（ＤＤＲＴ－ＰＣＲ）的一系列条件进行了探索和改进，建立了有效的ＤＤＲＴ－ＰＣＲ方法。特别是单锚定碱基引物Ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）＿（１２）Ｍ（Ｍ＝Ａ，Ｇ，Ｃ）的应用，不但得到了十分良好的实验结果，而且在很大程度上降低了实验成本和工作量。

关键词：差异显示反转录聚合酶链反应

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乙型肝炎病毒X基因的分析与在大肠杆菌中的表达

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生物化学杂志 1996年第1期12卷 22-26页

作者：曾明黄秉仁蔡良琬潘国宗中国协和医科大学中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京协和医院

以ＨＢＶ－ＮＣｌＤＮＡ为材料研究了其中的Ｘ基因，首先确定了此Ｘ基因的顺序，即用ＡＢＩ自动萤光测序议测序证明了此Ｘ基因的３８５位核苷酸后缺失１９个核苷酸，从而引起移码突变，使此Ｘ基因共有５１９个核苷酸，编码１７２个氨基... 详细信息

以ＨＢＶ－ＮＣｌＤＮＡ为材料研究了其中的Ｘ基因，首先确定了此Ｘ基因的顺序，即用ＡＢＩ自动萤光测序议测序证明了此Ｘ基因的３８５位核苷酸后缺失１９个核苷酸，从而引起移码突变，使此Ｘ基因共有５１９个核苷酸，编码１７２个氨基酸，比另一种ａｄｒ型Ｘ蛋白多１８个氨基酸。在其第五位氨基酸上有一ＡＴＧ起始密码，也与另一Ｘ基因不同。经重组后获得在大肠杆菌中的热诱导表达，用Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ方法证明确为Ｘ蛋白，并有多态性。

关键词：乙型肝炎病毒 X基因序列分析体外表达

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HBV－NC1株X基因在真核细胞中表达，基因调控与致癌作用的初探

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生物化学杂志 1996年第1期12卷 27-30页

作者：曾明黄秉仁蔡良琬潘国宗中国协和医科大学中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京协和医院

报道了ＨＢＶ－ＮＣ１株的Ｘ基因进入真核细胞表达载体ｐＸＴ１质粒的ＴＫ启动子之后，转染细胞及表达Ｘ基因成功。即发现包装病毒感染ＮＩＨ／３Ｔ３细胞后有Ｘ基因表达，用斑点杂交又证明此Ｘ基因已整合到细胞的基因组中，当与有ｐＭ... 详细信息

报道了ＨＢＶ－ＮＣ１株的Ｘ基因进入真核细胞表达载体ｐＸＴ１质粒的ＴＫ启动子之后，转染细胞及表达Ｘ基因成功。即发现包装病毒感染ＮＩＨ／３Ｔ３细胞后有Ｘ基因表达，用斑点杂交又证明此Ｘ基因已整合到细胞的基因组中，当与有ｐＭＳＨ报告基因的质粒共同感染真核细胞后确有激活转录调控现象出现。应用反义的ＸＲＮＡ表达载体感染肝癌细胞发现有接触抑制作用出现。

关键词：肿瘤乙型肝炎病毒 X基因基因调控病理

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人免疫缺陷病毒Tat基因及LTR调控元件对基因表达的影响

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自然科学进展（国家重点实验室通讯） 1996年第2期6卷 229-235页

作者：于小兵袁建刚陈菊凤强伯勤中国协和医科大学基础医学院中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

构建了不同长度人免疫缺陷病毒LTR启动子的荧光酶报告基因(Luc)表达质粒;瞬时转染Jurkat细胞;同时与含tat基因的表达质粒pCVI共转染;通过荧光酶活性的测定,分析Tat与LTR对基因表达的作用机制。实验结果表明LTR—158上游区有负调控元件... 详细信息

构建了不同长度人免疫缺陷病毒LTR启动子的荧光酶报告基因(Luc)表达质粒;瞬时转染Jurkat细胞;同时与含tat基因的表达质粒pCVI共转染;通过荧光酶活性的测定,分析Tat与LTR对基因表达的作用机制。实验结果表明LTR—158上游区有负调控元件的存在;证实了Tat的反式激活作用可以大大提高LTR指导的基因表达水平;研究结果揭示LTR中的增强子序列及其结合蛋白NF—kB在高水平的LTR转录以及Tat的反式激活作用中可能起重要作用。

关键词：人免疫缺陷病毒 LTR 基因表达 Tat基因调控元件

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基因治疗与伦理学

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中国优生与遗传杂志 1996年第S1期4卷 4-6页

作者：刘德培梁植权中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室

基因治疗与伦理学中国医学科学院基础医学研究所（北京，１００００５）中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室刘德培，梁植权一、基因治疗与伦理学讨论的必要性与超前性在医学发展史中，每一项医学生物学新技术的产... 详细信息

基因治疗与伦理学中国医学科学院基础医学研究所（北京，１００００５）中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室刘德培，梁植权一、基因治疗与伦理学讨论的必要性与超前性在医学发展史中，每一项医学生物学新技术的产生和即将应用于临床，都要经过伦理学...

关键词：基因治疗生殖细胞基因转移技术伦理学问题受体细胞医学生物学基因操作早期胚胎转移基因染色体基因

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一种检测细胞程序化死亡梯型DNA带的快速简便方法（论著摘要）

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中国医学科学院学报 1996年第2期 152-152页

作者：顾继杰黄秉仁蔡良琬中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室

一种检测细胞程序化死亡梯型ＤＮＡ带的快速简便方法（论著摘要）顾继杰，黄秉仁，蔡良琬（中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室，北京１００００５）程序化死亡的细胞在显微镜下观察可见形态上... 详细信息

一种检测细胞程序化死亡梯型ＤＮＡ带的快速简便方法（论著摘要）顾继杰，黄秉仁，蔡良琬（中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室，北京１００００５）程序化死亡的细胞在显微镜下观察可见形态上呈细胞核破碎、染色质凝缩等特征，其...

关键词：细胞程序化死亡中国医学科学院简便方法蔡良琬 DNA 医学分子生物学国家重点实验室摘要秉仁染色质国家自然科学基金酚抽提溶剂精制

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