检索结果-内蒙古大学图书馆

中国病原生物学杂志 2022年第4期17卷 425-429,434页

作者：刘辉毕晓娟杨宁柯颖孙立楚瑨孙涛吕国栋林仁勇新疆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学第一附属医院临床医学研究院省部共建中亚高发病成因与防治国家重点实验室

目的探讨泡球蚴蛋白(Echinococcus multilocularis protein,EmP)促脂肪间充质干细胞(Adipose tissue Derived Mesenchymal Stem Cells,ADSCs)向肝细胞分化的作用。方法体外分离人脂肪组织来源的ADSCs,第三代(P3)ADSCs分为对照组(HDM肝细胞诱导分化组)和Em蛋白处理组(HDM+EmP组),经无血清肝细胞诱导培养基培养7、14和21 d,检测对照组和EmP处理组肝细胞样细胞(iHep)百分比、糖原染色面积、肝细胞标志物白蛋白(Albumin,ALB)的蛋白及基因表达水平。Western-Blot法检测p-GSK-3β的表达情况。结果 P3代ADSCs具有成脂及成骨分化能力并表达干细胞标志物(CD29、CD90和CD105等)。在ADSCs向肝细胞诱导分化14 d,EmP处理组iHep细胞百分比显著高于对照组(P<0.05),EmP处理组糖原染色面积显著高于对照组(P<0.05)。免疫荧光染色结果显示两组细胞在诱导分化7 d开始表达ALB,荧光强度随诱导时间增加呈增强趋势。qPCR结果显示在诱导分化后第14 d,EmP处理组ALB表达水平显著高于对照组,两组间具有统计学差异(P<0.05)。Western-Blot结果显示,诱导分化第7 d和14 d,EmP处理组p-GSK-3β蛋白表达水平显著高于对照组(P<0.01和P<0.05)。结论 Em蛋白可能通过激活GSK-3β而具有促进ADSCs向肝细胞分化的作用,本研究为临床应用ADSCs移植治疗泡型棘球蚴病奠定了基础。

关键词：泡球蚴蛋白脂肪间充质干细胞肝细胞分化 GSK-3β

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自噬相关基因5在人恶性胸膜间皮瘤中的表达及其意义

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中国医科大学学报 2024年第8期53卷 673-679页

作者：刘如爱王播勇李锦松普元倩余敏熊伟大理大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室云南大理671000 云南省高校临床生物化学检验重点实验室云南大理671000 云南省昆虫生物医药研发重点实验室云南大理671000 云南大学生命科学学院生物化学与分子生物学实验室昆明650091

目的探讨自噬相关基因5(ATG5)在人恶性胸膜间皮瘤(MPM)细胞和组织中的表达情况,分析ATG5与MPM患者临床病理参数和预后的相关性。方法实时定量PCR(RT-qPCR)和Western blotting检测正常人胸膜间皮细胞和MPM细胞、非MPM胸膜间皮组织和MPM... 详细信息

目的探讨自噬相关基因5(ATG5)在人恶性胸膜间皮瘤(MPM)细胞和组织中的表达情况,分析ATG5与MPM患者临床病理参数和预后的相关性。方法实时定量PCR(RT-qPCR)和Western blotting检测正常人胸膜间皮细胞和MPM细胞、非MPM胸膜间皮组织和MPM组织中ATG5的表达差异。应用TCGA数据库分析ATG5与MPM患者临床病理特征和预后的相关性。构建Cox回归模型,分析影响MPM患者预后的因素。GEPIA数据库评估ATG5与MPM肿瘤标志物和新型血清标志物的相关性。TIMER数据库分析ATG5与MPM免疫细胞浸润和关键免疫调节基因的相关性。结果ATG5在MPM细胞和组织中显著高表达,且与MPM患者的肿瘤分期呈正相关(P<0.05)。生存分析显示,ATG5高表达组MPM患者的预后更差,肿瘤病理类型可能是患者预后不良的危险因素(P<0.05)。ATG5与多种MPM肿瘤标志物(MTAP、SETD2、NF2、FIB3)和新型血清标志物(HMGB1、SMPR、THBS2、KRAS)显著相关(P<0.05)。ATG5表达与MPM中免疫细胞浸润(B细胞、CD4^(+)T细胞和巨噬细胞)和免疫相关基因(CD28、CUL48B、CD166、MMP14)呈显著正相关(P<0.05)。结论ATG5在MPM中表达上调,且与患者不良预后和免疫浸润水平相关,有望成为MPM早期筛查、诊断和预后评估的重要生物标志物。

关键词：恶性胸膜间皮瘤自噬相关基因5 自噬预后免疫浸润

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细粒棘球绦虫TAK1基因ORF的克隆及其蛋白生物信息学分析

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中国病原生物学杂志 2022年第12期17卷 1392-1398页

作者：刘丽英李军张文宝吴军杨梅新疆医科大学公共卫生学院劳动卫生与环境卫生教研室新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室新疆医科大学第一附属医院临床医学研究院省部共建中亚高发病成因与防治国家重点实验室新疆医科大学新疆地方病分子生物学重点实验室

目的克隆细粒棘球绦虫(Eg)TAK1基因的开放阅读框(ORF)全长,预测其编码的蛋白EgTAK1的结构特点和生物学功能。方法从新疆株细粒棘球蚴中扩增EgTAK1-ORF全长,克隆至载体pMD20-T上并测序;从NCBI蛋白质数据库中下载EgTAK1的氨基酸序列,利用... 详细信息

目的克隆细粒棘球绦虫(Eg)TAK1基因的开放阅读框(ORF)全长,预测其编码的蛋白EgTAK1的结构特点和生物学功能。方法从新疆株细粒棘球蚴中扩增EgTAK1-ORF全长,克隆至载体pMD20-T上并测序;从NCBI蛋白质数据库中下载EgTAK1的氨基酸序列,利用生物信息学分析软件分别对EgTAK1的理化性质、磷酸化位点、O-糖基化位点、N-糖基化位点、亲/疏水性、保守结构域、跨膜结构域、信号肽序列进行预测;采用MEGA 7.0软件对不同物种来源的TAK1蛋白进行多序列比对并构建系统进化树。采用实时荧光定量PCR检测细粒棘球绦虫在不同发育阶段TAK1基因mRNA的相对表达量。结果EgTAK1基因ORF全长1116 bp,编码371个氨基酸,理论等电点为5.97,不稳定指数为49.59,属于不稳定蛋白;脂肪系数为87.22,总平均亲水系数为-0.291,为亲水性蛋白;EgTAK1蛋白含有64个磷酸化位点,3个O-糖基化潜在位点,4个N-糖基化位点;EgTAK1蛋白属于蛋白激酶C类似(PKC-like)家族;无跨膜结构和信号肽,亚细胞可能定位于细胞膜、细胞质及细胞核内。该蛋白含有7个优势B细胞抗原表位,具有良好的免疫原性。二级结构包含34.77%的α-螺旋,5.12%的β-转角,40.97%的无规卷曲,19.14%的延伸链。TAK1蛋白同源序列比对中与多房棘球绦虫的TAK1同源性最高为83%。实时荧光定量PCR显示,细粒棘球绦虫在不同发育阶段EgTAK1表达有差异,成虫阶段相对表达量最高。结论基因EgTAK1可能是细粒棘球绦虫发育分化的重要调控基因,预测该基因编码的蛋白含有B细胞抗原表位,有可能成为包虫病免疫学预防及药物研制的靶标抗原。

关键词：细粒棘球绦虫 TAK1 生物信息学分析 PCR

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量化评估脓毒症患者膈肌收缩功能障碍的超声研究

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中华结核和呼吸杂志 2025年第2期48卷 116-122页

作者：焦光宇刘雨佳杨可溢孔维姮陈云秋中国医科大学附属盛京医院呼吸与危重症医学科沈阳110004 辽宁中医药大学中医学院沈阳110032 中国医科大学附属第四医院呼吸与危重症医学科沈阳110032

目的为系统评估脓毒症膈肌功能障碍,在前期脓毒症患者膈肌位移与膈肌增厚分数(DTF)明显下降的基础上,进一步分析与膈肌收缩时间相关的膈肌收缩速率与位移时间指数。方法采用单中心前瞻性观察研究,选择中国医科大学附属盛京医院59例肺炎... 详细信息

目的为系统评估脓毒症膈肌功能障碍,在前期脓毒症患者膈肌位移与膈肌增厚分数(DTF)明显下降的基础上,进一步分析与膈肌收缩时间相关的膈肌收缩速率与位移时间指数。方法采用单中心前瞻性观察研究,选择中国医科大学附属盛京医院59例肺炎所致脓毒症患者(脓毒症组)。根据年龄和性别匹配原则(1∶1),选择59名同期门诊健康体检人员作为对照组。收集一般基线资料,并采用床旁超声测量膈肌厚度、DTF、膈肌位移、吸气时间、膈肌位移时间指数(E-T指数)以及每分钟E-T指数(平静呼吸膈肌E-T指数×呼吸频率);并将膈肌超声指标与序贯器官功能衰竭评分(SOFA)做相关性分析。结果(1)脓毒症组膈肌厚度与对照组差异无统计学意义[平静呼气末膈肌厚度:(2.06±0.35)mm vs.(1.96±0.37)mm,t=-1.516,P>0.05;最大吸气末膈肌厚度:3.18(2.86,3.61)mm vs.3.04(2.73,3.27)mm,Z=-1.688,P>0.05),DTF明显低于对照组(0.49±0.17 vs.0.65±0.17,t=5.360,P<0.05)。(2)在平静呼吸和深呼吸状态下,脓毒症组膈肌位移低于对照组(平静呼吸:t=-4.187,P<0.05;深呼吸:t=-11.720,P<0.05),吸气时间少于对照组(平静呼吸:t=-7.410,P<0.05;深呼吸:t=-6.348,P<0.05)。(3)在平静呼吸状态脓毒症组患者膈肌收缩速率快于对照组(Z=2.330,P<0.05),而在深呼吸状态下脓毒症组膈肌收缩速率低于对照组(Z=-3.383,P<0.05)。(4)在平静呼吸状态下,脓毒症组膈肌E-T指数低于对照组(Z=-5.762,P<0.05);而每分钟E-T指数通过增加呼吸频率代偿至正常。深呼吸状态下,与SOFA评分相关性最高(r=-0.882,P<0.05)的膈肌E-T指数低于对照组(Z=-7.974,P<0.05)。结论床旁超声可以系统量化评估脓毒症患者膈肌收缩功能障碍。在平静呼吸状态下,脓毒症患者呈现为浅快呼吸模式,机体可以代偿性满足氧需求。在深呼吸状态下,脓毒症患者膈肌内在收缩效能及做功能力下降,而膈肌因失代偿无法满足机体的氧需求。

关键词：脓毒症超声检查膈肌收缩膈肌位移时间指数

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柯萨奇病毒B组5型山东分离株基因特征分析

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中国病原生物学杂志 2024年第6期19卷 659-664,670页

作者：曹梦圆崔亚楠王敏姚雪韦庆娟胡弢邢薇佳史卫峰李娟山东第一医科大学(山东省医学科学院)山东省高等学校新发传染病重点实验室山东泰安271000 山东第一医科大学(山东省医学科学院)临床与基础医学院(基础医学研究所)病原生物学系泰安市疾病预防控制中心山东第一医科大学(山东省医学科学院)公共卫生与健康管理学院济南市儿童医院泰安市妇幼保健院上海交通大学医学院附属瑞金医院上海交通大学医学院上海市病毒研究院

目的探明山东11株柯萨奇病毒B组5型(CVB5)的全基因组特征,探讨CVB5病毒遗传进化规律。方法采集2020年山东省手足口病患者的粪便样本,通过临床样本荧光定量检测、病毒分离、高通量和一代测序验证,共获得11株CVB5分离株,同时结合GenBank... 详细信息

目的探明山东11株柯萨奇病毒B组5型(CVB5)的全基因组特征,探讨CVB5病毒遗传进化规律。方法采集2020年山东省手足口病患者的粪便样本,通过临床样本荧光定量检测、病毒分离、高通量和一代测序验证,共获得11株CVB5分离株,同时结合GenBank公共数据库中收录的CVB5病毒株全长基因组和结构蛋白VP1基因序列,构建最大似然系统进化树,研究CVB5基因特征和遗传进化规律。结果11株CVB5分离株全长基因组呈高度核苷酸和氨基酸相似性(>99.9%),与多数2008-2020年我国流行毒株均位于全基因组进化树的Group 4分支,且与2013年江苏省分离株417核苷酸相似性最高,为96.8%;11株CVB5分离株与Group 4参考株相比,P3区3A、3B、3C和3D基因核苷酸同源性均低于P1和P2区其他基因,且多为同义突变;11株CVB5分离株VP1基因位于我国主要流行亚型即C4基因亚型中,与2018年山东省分离株SWG14、SWG44、JN18120亲缘关系较近,核苷酸同源性为96.1%~98.2%。结论CVB5毒株在我国多地持续流行,11株山东分离株同国内多数CVB5株的全基因组及VP1基因均位于同一进化分支,说明11株分离株均为近期国内流行株,它们所在Group 4为国内优势流行分支,C4基因亚型为国内VP1基因流行亚型。

关键词：柯萨奇病毒B组5型(CVB5) 手足口病全基因组 VP1 遗传进化

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中国角膜内皮移植术专家共识(2024年)

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中华眼科杂志 2024年第2期60卷 113-119页

作者：中华医学会眼科学分会角膜病学组史伟云不详山东第一医科大学附属眼科研究所、山东第一医科大学附属眼科医院(山东省眼科医院)山东省眼科学重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地、山东第一医科大学眼科学院济南250021

角膜内皮移植术是治疗角膜内皮疾病的重要方法,主要分为角膜后弹力层剥除内皮移植术和角膜后弹力层内皮移植术。与穿透性角膜移植术比较,角膜内皮移植术的术后视力好,免疫排斥反应发生率低,但手术技术和过程较为复杂,术中和术后并发症... 详细信息

角膜内皮移植术是治疗角膜内皮疾病的重要方法,主要分为角膜后弹力层剥除内皮移植术和角膜后弹力层内皮移植术。与穿透性角膜移植术比较,角膜内皮移植术的术后视力好,免疫排斥反应发生率低,但手术技术和过程较为复杂,术中和术后并发症有所不同。角膜内皮移植术的成功关键在于掌握手术的基本要素并预防并发症。为在我国规范开展和推广角膜内皮移植术,中华医学会眼科学分会角膜病学组以国内外研究结果和临床实践经验为基础,围绕角膜内皮移植术的适应证、术前评估、手术技术和操作、术后并发症处理和随访等进行充分讨论,达成共识性意见,以期为临床工作提供指导和参考。

关键词：角膜移植角膜后弹力层内皮移植术角膜后弹力层内皮角膜诊疗准则(主题)

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基于蛋白质组学的缺血预适应心肌保护相关机理研究

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中国病理生理杂志 2023年第2期39卷 212-219页

作者：尼鲁帕尔·谢甫开提阿曼古丽·如则唐婧赵翎赵帮豪高晓明省部共建中亚高发病成因与防治国家重点实验室新疆医科大学第一附属医院心内科新疆医学动物模型研究重点实验室新疆乌鲁木齐830054 新疆医科大学临床医学研究院新疆乌鲁木齐830054

目的:缺血预适应(IPC)是强有力的对抗心肌缺血/再灌注(I/R)损伤的心肌保护措施,但其保护作用相关的机制仍不完全清楚。本研究旨在识别缺血预适应处理后小鼠心肌差异表达蛋白,为缺血预适应进一步的基础及临床研究提供新思路。方法:用雄... 详细信息

目的:缺血预适应(IPC)是强有力的对抗心肌缺血/再灌注(I/R)损伤的心肌保护措施,但其保护作用相关的机制仍不完全清楚。本研究旨在识别缺血预适应处理后小鼠心肌差异表达蛋白,为缺血预适应进一步的基础及临床研究提供新思路。方法:用雄性成年C57BL/6小鼠建立心肌I/R损伤模型(缺血60 min/再灌注24 h)和IPC模型[3个(缺血5 min/再灌注5 min)循环的预适应+缺血60 min/再灌注24 h],用伊文思蓝和2,3,5-三苯基氯化四氮唑双重染色的方法测量心肌梗死面积。提取各组心肌总蛋白,通过将串联质谱标签、高效液相色谱分级技术以及基于质谱的定量蛋白质组学技术相结合,以差异表达量变化>1.2倍作为显著上调的阈值,<1/1.2作为显著下调的阈值,筛选差异表达蛋白。对差异表达蛋白进行同源蛋白簇功能分类统计。分别用qPCR和Western blot技术对差异显著的蛋白β-羟丁酸脱氢酶1(Bdh1)进行mRNA及蛋白水平上的验证。结果:与单纯I/R组相比,IPC干预后心梗面积降低33%(P<0.05)。定量蛋白质组学结果显示,与假手术组比较,I/R组表达下调的蛋白有91个,其中酮体氧化代谢关键酶Bdh1在下调蛋白中的表达倍数为0.708(<1/1.2);与I/R组相比,IPC组表达上调的蛋白有14个,其中Bdh1差异表达倍数最高(1.95倍)。qPCR及Western blot验证实验表明,与假手术组相比,I/R组Bdh1的mRNA及蛋白水平明显降低;IPC组Bdh1的mRNA及蛋白表达水平较I/R组明显升高,进一步验证了蛋白组学结果。结论:I/R损伤显著降低心肌Bdh1的mRNA及蛋白表达水平,而IPC处理显著恢复了Bdh1的mRNA及蛋白表达,表明酮体氧化代谢可能参与了缺血预适应介导的缺血心肌的保护。

关键词：缺血预适应缺血再灌注蛋白质组学 β-羟丁酸脱氢酶1

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靶向蛋白质泛素修饰及降解在前列腺癌治疗中的机遇与挑战

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生物化学与生物物理进展 2023年第4期50卷 782-794页

作者：彭韵桦刘莎崔莉刘健康龙建纲西安交通大学生命科学与技术学院线粒体生物医学研究所生物医学信息工程教育部重点实验室西安710049 陆军军医大学大坪医院重庆400042 西南医科大学基础医学院泸州646000 康复大学健康与生命科学学院青岛266071

前列腺癌是中国发病率增长最快的男性肿瘤,抗雄激素治疗耐药是导致前列腺癌患者预后差的主要原因。因此,解决耐药性难题是前列腺癌转化研究的关键问题。哺乳动物细胞利用泛素-蛋白酶体系统实现蛋白质的靶向降解。因此,前列腺癌中关键的... 详细信息

前列腺癌是中国发病率增长最快的男性肿瘤,抗雄激素治疗耐药是导致前列腺癌患者预后差的主要原因。因此,解决耐药性难题是前列腺癌转化研究的关键问题。哺乳动物细胞利用泛素-蛋白酶体系统实现蛋白质的靶向降解。因此,前列腺癌中关键的癌基因如雄激素受体(AR)的上游泛素化调控因子(如去泛素化酶)是潜在的治疗靶点。然而,这些酶具有较广的底物谱系,存在脱靶的可能性。近来,基于泛素-蛋白酶体系统开发的蛋白质降解靶向嵌合体(proteolysis-targeting chimeras,PROTAC)技术是最具前景和革命性的新型抗癌药物研发技术,能够利用特定E3泛素连接酶对靶蛋白进行降解而不影响其他底物。与传统小分子抑制剂相比,PROTAC分子在克服耐药性以及针对不可成药的靶点方面拥有巨大优势。目前,针对AR的PROTAC降解剂已在II期临床取得了成功,靶向蛋白质泛素化及降解途径的新技术将有望为前列腺癌的临床治疗带来新的突破。

关键词：前列腺癌泛素-蛋白酶体去势抵抗靶向策略

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棘球蚴感染极化巨噬细胞调控免疫性血小板减少症(ITP)的机制研究

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中国病原生物学杂志 2023年第9期18卷 1058-1064页

作者：张星星张文宝焦红杰艾柯代·卡得齐文静武娟宋传龙李军严媚新疆医科大学第一附属医院新疆乌鲁木齐830054 中亚高发病成因与防治国家重点实验室临床医学研究院新疆医科大学第一附属医院新疆医科大学基础医学院

目的探讨细粒棘球蚴感染早期和晚期巨噬细胞极化对免疫性血小板减少症(ITP)的调节作用。方法将BALB/c小鼠分为ITP组和空白对照组。ITP组经肝门静脉注射细粒棘球蚴建立BALB/c小鼠早期和晚期感染模型,并根据感染剂量和时间分为低剂量感染4... 详细信息

目的探讨细粒棘球蚴感染早期和晚期巨噬细胞极化对免疫性血小板减少症(ITP)的调节作用。方法将BALB/c小鼠分为ITP组和空白对照组。ITP组经肝门静脉注射细粒棘球蚴建立BALB/c小鼠早期和晚期感染模型,并根据感染剂量和时间分为低剂量感染4周/ITP组(Eg-L-4w/ITP),高剂量感染4周/ITP组(Eg-H-4w/ITP),高剂量感染4周/con组(Eg-H-4w/con)和高剂量感染12周/ITP组(Eg-H-12w/ITP)。分别于感染第4周和12周腹腔注射Anti-CD41抗体,对照组腹腔注射PBS。同时尾静脉连续采血5 d。将小鼠处死,取肝组织,HE染色后观察病理变化;通过流式细胞术检测小鼠脾脏、外周血F4/80^(+)CD11c^(+)M1和F4/80^(+)CD206^(+)M2型巨噬细胞以及T、B淋巴细胞及其亚型细胞比例。结果感染组小鼠肝组织出现棘球蚴感染寄生灶,感染灶周围炎症细胞浸润。ITP组小鼠注射致病抗体后血小板数显著减少,ITP模型建立成功。血常规结果显示,细粒棘球蚴感染小鼠4周ITP模型小鼠外周血血小板未明显增多,感染12周ITP模型小鼠血小板数增多。提示细粒棘球蚴感染小鼠晚期状态对ITP小鼠模型具有调节保护作用。流式细胞术检测低、高剂量感染4周组小鼠脾脏和外周血F4/80^(+)CD11c^(+)M1型巨噬细胞比例分别为(11.12±1.24)%、(12.54±1.73)%和(6.11±0.66)%、(6.34±0.79)%,与ITP组、对照组的(6.90±1.48)%、(7.30±1.20)%和(4.40±0.49)%、(2.78±0.56)%比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。低、高剂量感染4周组脾脏和外周血F4/80^(+)CD206^(+)M2型巨噬细胞以及B、T淋巴细胞比例均高于ITP组和对照组(均P<0.05)。结论细粒棘球蚴感染早期的F4/80^(+)CD11c^(+)M1型巨噬细胞和感染晚期的F4/80^(+)CD206^(+)M2型巨噬细胞均对免疫性血小板减少症(ITP)有调节作用。

关键词： ITP 细粒棘球蚴感染巨噬细胞极化小鼠模型

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多房棘球蚴感染小鼠腹膜腔免疫细胞迁移及其功能变化

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2025年第1期43卷 76-83页

作者：邓冰清阿迪莱·多力坤李寅时阿比旦·艾尼瓦尔孙胜肖雯颖葛聪蕙唐娜姜涛王慧张传山李静新疆医科大学基础医学院新疆乌鲁木齐830054 新疆医科大学第一附属医院临床医学研究院新疆乌鲁木齐830054 新疆医科大学实验动物中心新疆乌鲁木齐830011 新疆地区高发疾病研究教育部重点实验室(新疆医科大学) 新疆乌鲁木齐830054 中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所(国家热带病研究中心) 国家卫生健康委员会寄生虫病原与媒介生物学重点实验室(中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所)上海200025

目的了解多房棘球蚴感染小鼠腹膜腔免疫细胞迁移及分化的变化,探讨其发挥免疫功能的机制。方法裂解增强绿色荧光蛋白(EGFP)小鼠脾组织,分离EGFP示踪免疫细胞。C57BL/6J小鼠腹腔注射2.5×10^(7)个示踪免疫细胞,5 d后经肝门静脉穿刺接... 详细信息

目的了解多房棘球蚴感染小鼠腹膜腔免疫细胞迁移及分化的变化,探讨其发挥免疫功能的机制。方法裂解增强绿色荧光蛋白(EGFP)小鼠脾组织,分离EGFP示踪免疫细胞。C57BL/6J小鼠腹腔注射2.5×10^(7)个示踪免疫细胞,5 d后经肝门静脉穿刺接种3000个多房棘球蚴原头节。感染19周后,取感染小鼠肝、脾组织,冷冻切片后4,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色,免疫荧光观察示踪免疫细胞的分布。分离感染小鼠外周血、肝、脾和腹膜腔免疫细胞,流式细胞术检测EGFP示踪免疫细胞在不同组织的迁移分布和细胞分型,以及细胞因子γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素4(IL-4)的分泌情况。结果免疫荧光结果显示,EGFP示踪细胞主要迁移至小鼠脾组织。肝组织中各型示踪淋巴细胞占比从高到低依次为CD8^(+)T细胞(79.63±5.00)%、CD4^(+)T细胞(7.08±4.00)%、B细胞(2.01±1.00)%(F=396.20,P<0.01);脾组织中各型淋巴细胞占比从高到低依次为CD8^(+)T细胞(73.97±3.56)%、CD4^(+)T细胞(11.92±5.02)%、B细胞(3.86±0.32)%(F=349.00,P<0.01);腹膜腔中各型淋巴细胞占比从高到低依次为CD8^(+)T细胞(45.27±4.53)%、CD4^(+)T细胞(34.60±8.00)%、B细胞(15.03±6.38)%(F=16.90,P<0.05)。肝、脾、腹膜腔中的示踪CD4^(+)T细胞数量分别为2700±3120、14407±11958、3376±1481,示踪CD8^(+)T细胞数量分别为26407±22190、109179±92692、4245±798,示踪B细胞数量分别为698±719、5794±4971、1476±840,3种示踪淋巴细胞均主要分布在脾组织中(F=2.51、3.03、2.62,均P>0.05)。肝组织中各型髓系细胞占比从高到低依次为树突状细胞(3.94±1.33)%、单核细胞(3.79±1.80)%、巨噬细胞(3.13±1.85)%、嗜酸粒细胞(2.40±1.81)%、骨髓来源抑制性细胞(0.76±0.17)%、中性粒细胞(0.67±0.04)%(F=3.21,P<0.05);脾组织中各型髓系细胞占比从高到低依次为树突状细胞(1.86±0.89)%、单核细胞(0.41±0.09)%、巨噬细胞(0.23±0.03)%、中性粒细胞和骨髓来源抑制性细胞[均(0.13±0.14)%]、嗜酸粒细胞(0.04±0.04)%(F=42.70,P<0.01);外周血中组织中各型髓系细胞占比从高到低依次为树突状细胞(0.37±0.28)%、单核细胞(0.22±0.27)%、巨噬细胞(0.22±0.21)%、中性粒细胞和骨髓来源抑制性细胞[均(0.17±0.08)%]、嗜酸粒细胞(0.05±0.08)%(F=0.92,P>0.05)。肝组织的示踪CD4^(+)T细胞中,分泌IFN-γ、TNF-α、IL-4的细胞分别占(41.17±19.92)%、(30.70±3.35)%、(2.78±4.81)%(F=8.22,P<0.05);示踪CD8^(+)T细胞中,分泌IFN-γ、TNF-α、IL-4的细胞分别占(64.17±3.17)%、(24.85±15.66)%、(5.67±6.35)%(F=27.08,P<0.01)。脾组织的示踪CD4^(+)T细胞中,分泌IFN-γ、TNF-α、IL-4的细胞分别占(52.43±19.43)%、(27.67±18.99)%、(4.77±2.23)%(F=6.88,P<0.05);示踪CD8^(+)T细胞中,分泌TNF-α、IFN-γ、IL-4的细胞分别占(40.53±17.79)%、(38.97±18.04)%、(3.23±3.09)%(F=6.15,P<0.05)。腹膜腔的示踪CD4^(+)T细胞中,分泌IFN-γ、TNF-α、IL-4的细胞分别占(64.33±6.82)%、(46.43±13.44)%、(4.03±3.51)%(F=36.04,P<0.01);示踪CD8^(+)T细胞中,分泌IFN-γ、TNF-α、IL-4的细胞分别占(53.57±19.17)%、(21.47±8.54)%、(6.13±8.63)%(F=10.24,P<0.05)。结论多房棘球蚴感染小鼠腹膜腔内免疫细胞主要迁移至脾组织,细胞类型以CD8^(+)T细胞和树突状细胞为主。T细胞主要分泌IFN-γ,呈Th1型免疫应答。

关键词：多房棘球蚴病腹膜腔免疫细胞迁移 CD8^(+)T细胞

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