检索结果-内蒙古大学图书馆

弓形虫TGME49＿240850基因编码的含WD40结构域蛋白的生物学功能

中国兽医科学 2025年第5期55卷 577-585页

作者：洪照微王萌孙黎秀寇永杰马志雅江新成付宝权中国农业科学院兰州兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室湖南农业大学动物医学院山西农业大学动物医学院江西农业大学动物科学技术学院

为探究弓形虫中TGME49＿240850基因编码的含WD40结构域蛋白的生物学功能，利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建弓形虫TGME49＿240850条件性敲除虫株（TGME49＿240850-m AID-6HA），并分析该基因在弓形虫Pru-TIR1虫株的亚细胞定位和基本生... 详细信息

为探究弓形虫中TGME49＿240850基因编码的含WD40结构域蛋白的生物学功能，利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建弓形虫TGME49＿240850条件性敲除虫株（TGME49＿240850-m AID-6HA），并分析该基因在弓形虫Pru-TIR1虫株的亚细胞定位和基本生物学功能。间接免疫荧光试验显示，TGME49＿240850蛋白定位于细胞核，并且加入吲哚乙酸后能将该蛋白降解；Western-blot结果表明，TGME49＿240850-m AID-6HA融合蛋白大小约为90 k Da；与对照组相比，TGME49＿240850-m AID-6HA虫株形成噬斑的能力（P<0.001）和增殖能力（P<0.01）均显著降低，而对入侵、逸出和缓殖子转化能力却无明显影响（P>0.05）。以上结果表明，TGME49＿240850蛋白的降解减弱了弓形虫的体外增殖能力。结论：成功构建了TGME49＿240850条件性敲除虫株，为进一步研究弓形虫中含WD40结构域相关蛋白的功能奠定基础。

关键词：弓形虫 WD40结构域条件性敲除生长素诱导降解系统

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α-硫辛酸通过mTOR通路抑制缺血再灌注诱导的PC12细胞自噬性凋亡

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中国老年学杂志 2021年第3期41卷 577-581页

作者：谢鹏任真奎吕菊胡玉梅官志忠张春林禹文峰贵州医科大学分子生物学重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学地方病与少数民族疾病教育部重点实验室贵州贵阳550004 黔西南州人民医院检验科贵州医科大学基础医学院

目的研究α-硫辛酸(LA)对PC12细胞缺血再灌注损伤的保护作用及其分子机制。方法传代培养PC12细胞,PC12细胞缺氧/复氧(氧糖剥夺4 h,复氧18 h)模拟缺血再灌注损伤模型。实验分为正常组、缺氧/复氧组、缺氧/复氧+α-LA、缺氧/复氧+自噬抑... 详细信息

目的研究α-硫辛酸(LA)对PC12细胞缺血再灌注损伤的保护作用及其分子机制。方法传代培养PC12细胞,PC12细胞缺氧/复氧(氧糖剥夺4 h,复氧18 h)模拟缺血再灌注损伤模型。实验分为正常组、缺氧/复氧组、缺氧/复氧+α-LA、缺氧/复氧+自噬抑制剂巴弗洛霉素(Baf)A1组。CCK8筛选α-LA的有效作用浓度;流式细胞术检测细胞凋亡变化;Western印迹检测细胞促凋亡蛋白B细胞淋巴瘤(Bcl-2)相关X蛋白(Bax)、酶切caspase-3、自噬标志分子SQSTM-1/P62、LC3-Ⅱ/Ⅰ及mTOR通路的表达变化。结果缺氧/复氧显著降低PC12细胞的存活率(P<0.05),Western印迹结果显示Bax、酶切caspase-3、LC3-Ⅱ/Ⅰ的表达水平均显著升高(P<0.05),P62和p-mTOR的表达水平降低(P<0.05);与缺氧/复氧组比较,给予α-LA和Baf A1均能显著降低缺氧/复氧诱导的凋亡水平(P<0.05)。结论α-LA通过抑制缺氧/复氧诱导的过度自噬进而减少过度自噬诱导的细胞凋亡。

关键词： α-硫辛酸缺血再灌注损伤自噬自噬性凋亡

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垂黄清脉饮对再狭窄模型兔的抗血小板活化的作用

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时珍国医国药 2024年第6期35卷 1312-1315页

作者：金学连何霄吴丹李建红赵凯宁夏医科大学中医学院宁夏银川750004 宁夏少数民族现代化教育部重点实验室宁夏银川750004 宁夏医科大学总医院宁夏银川750004

目的观察垂黄清脉饮对再狭窄的血小板活化的影响,进而探讨其治疗再狭窄的作用机理。方法选取70只新西兰大白兔,随机分为空白组,模型组,阿托伐他汀组、垂黄清脉饮低、中、高浓度组,垂黄清脉饮联合阿托伐他汀组。9周造模完成后,分别用对... 详细信息

目的观察垂黄清脉饮对再狭窄的血小板活化的影响,进而探讨其治疗再狭窄的作用机理。方法选取70只新西兰大白兔,随机分为空白组,模型组,阿托伐他汀组、垂黄清脉饮低、中、高浓度组,垂黄清脉饮联合阿托伐他汀组。9周造模完成后,分别用对应药物灌对应组兔,灌胃的第1、2、3、4周于耳缘静脉取血,酶联免疫吸附试验法(ELSA)检测血清中血栓素B2(TXB2)和6-酮前列腺素F1α(6-Keto-PGF1α)的指标,采用兽用B超及HE染色观察造模效果及治疗变化。结果对比空白组,模型组兔血清中TXB2显著升高(P<0.01),6-Keto-PGF1α则显著减少(P<0.01);对比模型组,随着灌胃时间的变化,各用药组的TXB2逐渐降低、6-Keto-PGF1α逐渐升高,其中垂黄清脉饮高浓度组和垂黄清脉饮联合阿托伐他汀组均显著变化(P<0.001);对比阿托伐他汀组,随着时间变化,中药组和中药联合西药组均有差异(P<0.05),且灌胃时间越久,中药浓度越高、中药联合阿托伐他汀对血清TXB2和6-Keto-PGF1α影响越大(P<0.01)。结论垂黄清脉饮对兔再狭窄具有抗血小板活化的作用,且与阿托伐他汀联合后具有协同效应,可能与调控血小板聚集作用的相关因子TXB2和6-Keto-PGF1α有关,且这种作用具有时间依赖性和浓度依赖性。

关键词：再狭窄垂黄清脉饮血小板活化血栓素B2 6-酮前列腺素F1α

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以问题为导向的混合式医学细胞生物学实验课探索与实践

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中国细胞生物学学报 2023年第9期45卷 1370-1375页

作者：刘泽昆陆蒙尉丁陈志南边惠洁空军军医大学基础医学院细胞生物学教研室&国家分子医学转化中心西安710032

医学细胞生物学是医学院校本科生必修的专业基础课,该课程的实验环节对提高学生的实践能力和培养学生创新思维有着举足轻重的作用。为培养复合型医学创新人才,该研究从转变实验课传统教学理念入手,以科学问题为导向,在培养科研创新思维... 详细信息

医学细胞生物学是医学院校本科生必修的专业基础课,该课程的实验环节对提高学生的实践能力和培养学生创新思维有着举足轻重的作用。为培养复合型医学创新人才,该研究从转变实验课传统教学理念入手,以科学问题为导向,在培养科研创新思维及激发学生自主实践操作方面进行教学设计,采用翻转课堂、案例式等教学方法,并综合运用网络化教学平台和国家精品课程等线上资源,融入思政教育内容,最终建立“科学问题、前置式学习、贯穿式跟踪评价”相结合的实验教学新模式。通过对新教学模式的探索和实践,旨在培养科研思维活跃、实践能力强,且适应新时代发展需要的新医科人才。

关键词：医学细胞生物学混合式实验教学科学问题教学改革

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牛支原体MBOVPG45_0212的原核表达及其免疫原性分析

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中国兽医科学 2022年第12期52卷 1538-1544页

作者：白宇彤黄志成李章程陈胜利兰仕梅李延召刘爽郝华芳储岳峰刘冠慧河北工程大学生命科学与食品工程学院河北邯郸056000 中国农业科学院兰州兽医研究所兰州大学动物医学与生物安全学院家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃兰州730046

为探究牛支原体MBOVPG45_0212蛋白的免疫学功能,以牛支原体基因组DNA为模板,PCR扩增MBOVPG45_0212基因并测序分析;经基因密码子优化后构建重组质粒pET-30a-0212,转化到大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达,用Ni-NTA纯化目的蛋白,Western-b... 详细信息

为探究牛支原体MBOVPG45_0212蛋白的免疫学功能,以牛支原体基因组DNA为模板,PCR扩增MBOVPG45_0212基因并测序分析;经基因密码子优化后构建重组质粒pET-30a-0212,转化到大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达,用Ni-NTA纯化目的蛋白,Western-blot验证纯化的重组蛋白与牛支原体不同血清的反应情况;将纯化蛋白免疫小鼠后制备多克隆抗体,Western-blot测定多克隆抗体是否识别牛支原体天然蛋白。PCR结果显示,MBOVPG45_0212基因全长约1 014 bp;pET-30a-0212重组质粒在大肠杆菌中于16℃经0.02 mmol/L IPTG诱导12 h能成功表达大小约43 ku的目的蛋白;纯化蛋白与牛支原体感染血清、免疫血清均能产生特异性反应,免疫小鼠血清效价达到1∶51 200以上,显示重组MBOVPG45_0212蛋白具有良好的免疫原性和反应活性。获得纯化重组MBOVPG45_0212蛋白,并制备其高效价的多克隆抗体,为其后续生物学功能研究奠定了基础。

关键词：牛支原体原核表达多克隆抗体免疫原性

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基于斑马鱼模型与分子对接的鼠曲草醇提物抗病毒性肺炎作用研究

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中国医院药学杂志 2025年第1期45卷 37-46页

作者：叶向丽林达淮刘婉婷陈彤张玉琴李煌福建医科大学附属协和医院呼吸与危重症医学科福建福州350001 福建中医药大学药学院福建福州350122

目的:探讨鼠曲草醇提物抗斑马鱼病毒性肺炎模型的作用,并借助分子对接预测其质量控制成分与其炎症靶点的结合情况。方法:制备鼠曲草醇提取物,采用高效液相色谱法检测主要的9种成分(原儿茶酸、绿原酸、咖啡酸、1,3-O-二咖啡酰基奎尼酸、... 详细信息

目的:探讨鼠曲草醇提物抗斑马鱼病毒性肺炎模型的作用,并借助分子对接预测其质量控制成分与其炎症靶点的结合情况。方法:制备鼠曲草醇提取物,采用高效液相色谱法检测主要的9种成分(原儿茶酸、绿原酸、咖啡酸、1,3-O-二咖啡酰基奎尼酸、金丝桃苷、异毛蕊花糖苷、芹菜素7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、槲皮素、芹菜素)。通过鱼鳔注射聚肌胞苷酸,建立斑马鱼病毒性肺炎模型;实验设置正常对照组、模型对照组、阳性对照组(吲哚美辛)、鼠曲草醇提物低、中、高剂量组(125、250、500μg·mL^(-1)),每组30尾,在测定最大耐受浓度(MTC)的基础上,荧光显微镜下分析统计各组鱼鳔中性粒细胞数量和巨噬细胞的荧光强度及鱼鳔组织病理情况,采用q-PCR检测各组斑马鱼炎症因子IL-1β和TNF-α基因的表达情况。采用AutoDock 1.5.7版进行分子对接,并应用PyMOL软件对结果进行可视化示例,得到分子对接模式图。结果:建立的高效液相多指标测定鼠曲草醇提物的方法稳定、可行;鼠曲草醇提物高剂量组能显著减少鱼鳔中性粒细胞数量;鼠曲草醇提物中、高剂量组,能降低鱼鳔巨噬细胞荧光强度;鱼鳔组织病理结果显示,鼠曲草醇提取物中、高剂量组斑马鱼炎性浸润减少,但低剂量组炎性浸润减少不明显;q-PCR结果显示,鼠曲草醇提物能够下调IL-1β和TNF-α基因相对表达量,特别是高剂量组显著下调IL-1β基因的表达。分子对接结果显示,绿原酸、芹菜素7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷和槲皮素与关键靶点IL-1β具有较好的结合能力;1,3-O-二咖啡酰基奎尼酸、芹菜素7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷和芹菜素与关键靶点TNF-α具有较好的结合能力。结论:鼠曲草醇提物具有抗病毒性肺炎的作用,可能因其部分成分能够与炎症关键靶点IL-1β和TNF-α紧密结合,竞争性抑制炎症反应,通过减少鱼鳔中性粒细胞和巨噬细胞数量、减少炎性浸润和下调IL-1β和TNF-α基因表达发挥作用。

关键词：斑马鱼模型分子对接鼠曲草醇提物抗病毒性肺炎

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miR-31改善2型糖尿病小鼠的肝损伤

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中国生物化学与分子生物学报 2022年第9期38卷 1226-1233页

作者：付媛王宇斐何金凤杜若琛原一桐张玉娟王春芳张轩萍山西医科大学基础医学院药理学教研室山西晋中030619 山西医科大学实验动物中心太原030001

2型糖尿病(type 2 diabetes,T2DM)是一种代谢性疾病,在世界范围内发病率逐年增高,会导致肝等多种组织器官损伤。miR-31在不同物种间是保守的,与代谢性疾病密切相关,但在2型糖尿病肝损伤中的作用尚未阐明。本研究的目的为探究miR-31对2... 详细信息

2型糖尿病(type 2 diabetes,T2DM)是一种代谢性疾病,在世界范围内发病率逐年增高,会导致肝等多种组织器官损伤。miR-31在不同物种间是保守的,与代谢性疾病密切相关,但在2型糖尿病肝损伤中的作用尚未阐明。本研究的目的为探究miR-31对2型糖尿病肝损伤的影响及其潜在的作用机制。取4~6周龄雄性FVB小鼠与筛选为阳性的过表达miR-31转基因小鼠,随机分为FVB小鼠对照组(C)、FVB小鼠诱导糖尿病组(DM)和过表达miR-31转基因小鼠诱导糖尿病组(31DM)。适应性喂养1周,采用高脂喂养联合腹腔注射链脲佐霉素(STZ)诱导T2DM小鼠模型,继续喂养6周。小鼠的一般情况及相关代谢指标显示,miR-31改善了T2DM小鼠的摄食饮水量升高,体重减轻及糖脂代谢紊乱。HE染色及肝组织学活动指数(histological activity index,HAI)评分结果显示,miR-31改善了T2DM小鼠肝组织中的炎症状况,降低了HAI评分。RT-qPCR结果显示,T2DM小鼠肝中miR-31高表达伴随转录激活因子6(activating transcription factor 6,ATF6)mRNA的表达降低。进一步Western印迹结果表明,miR-31抑制了T2DM小鼠肝中内质网应激相关蛋白质,例如ATF6、葡萄糖调节蛋白78(glucoregulatory protein 78,GRP78)和C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)的表达。综上所述,miR-31可能通过调节糖脂代谢紊乱和胰岛素抵抗,抑制ATF6、GRP78和CHOP等内质网应激因子,从而改善T2DM小鼠的肝损伤。

关键词： 2型糖尿病微RNA miR-31 内质网应激肝损伤

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rpl15在斑马鱼胚胎中的表达形式探究

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中国比较医学杂志 2021年第8期31卷 9-15页

作者：周唯君彭涛周栋珍杨懿琛周艳华李化何志旭舒莉萍贵州医科大学细胞工程生物医药技术国家地方联合工程实验室贵州省再生医学重点实验室基础医学院免疫学教研室贵阳550004 中国医学科学院成体干细胞转化研究重点实验室贵阳550004 遵义医科大学附属医院儿科学教研室贵州遵义563003 贵州大学贵阳550025

目的探究rpl15基因在野生型斑马鱼胚胎中的表达形式。方法利用NCBI和Ensemble数据库进行rpl15基因的共线性分析和Rpl15蛋白质序列相似性分析,使用MEGA X软件绘制进化树;构建pCS2^(+)-rpl15重组质粒,再利用T3聚合酶制备地高辛标记的rpl1... 详细信息

目的探究rpl15基因在野生型斑马鱼胚胎中的表达形式。方法利用NCBI和Ensemble数据库进行rpl15基因的共线性分析和Rpl15蛋白质序列相似性分析,使用MEGA X软件绘制进化树;构建pCS2^(+)-rpl15重组质粒,再利用T3聚合酶制备地高辛标记的rpl15反义RNA探针,用全胚胎原位杂交检测rpl15基因的mRNA水平的表达;通过Western blot检测24、48和72 hpf斑马鱼胚胎中Rpl15蛋白的表达。结果在进化过程中,rpl15基因相对保守。构建了pCS2^(+)-rpl15重组质粒,原位杂交结果显示在24 hpf,rpl15基因在斑马鱼的几乎所有细胞中广泛表达;到48 hpf,rpl15在中枢神经系统的表达最强并且在胰腺的表达也开始显现;72 hpf仍然可见rpl15在后脑中的表达以及胰腺、肝和肠道中的表达。Western blot结果显示24、48和72 hpf斑马鱼胚胎中Rpl15蛋白的相对表达量随时间增加而增多。结论系统观察了斑马鱼发育过程中rpl15的表达部位及表达水平的变化,为斑马鱼rpl15缺失模型的建立提供了实验基础。

关键词：斑马鱼 rpl15基因原位杂交基因表达反义mRNA 胚胎发育

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表观遗传修饰介导恶性肿瘤高表达TMEM16A的机制探讨

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现代肿瘤医学 2024年第12期32卷 2276-2281页

作者：郑晓恬高凤彤王惠杰潘晓丽白立川吴琼中国医科大学盛京医院神经功能科辽宁沈阳110000 中国医科大学基础医学院病理生理学教研室辽宁沈阳110122 中国医科大学药学院药学离子通道研究室辽宁沈阳110122

TMEM16A作为钙激活的电压依赖性氯通道广泛分布于体内多种组织器官,介导了腺体分泌、平滑肌收缩及肠道慢波形成等多种生理功能。研究证实TMEM16A在多种恶性肿瘤组织中如乳腺癌、肺癌、胶质瘤等高表达,且与患者的预后呈负相关。其高表达... 详细信息

TMEM16A作为钙激活的电压依赖性氯通道广泛分布于体内多种组织器官,介导了腺体分泌、平滑肌收缩及肠道慢波形成等多种生理功能。研究证实TMEM16A在多种恶性肿瘤组织中如乳腺癌、肺癌、胶质瘤等高表达,且与患者的预后呈负相关。其高表达的机制涉及到基因扩增、转录水平及转录后水平的调控,该文主要探讨表观遗传学介导恶性肿瘤中TMEM16A高度表达的相关信号通路,为深入探索其介导恶性肿瘤病理进程提供理论基础。

关键词： TMEM16A 表观遗传 DNA甲基化非编码RNA 组蛋白乙酰化

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多房棘球蚴感染小鼠肝转录组分析及肝纤维化关键基因的筛选与验证

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中国兽医科学 2024年第9期54卷 1157-1168页

作者：孙慧李立闫鸿斌李秀荣吴耀东何兴殷宏付宝权贾万忠中国农业科学院兰州兽医研究所兰州大学动物医学与生物安全学院动物疫病防控全国重点实验室甘肃省病原生物学基础学科研究中心甘肃省动物寄生虫病重点实验室国家动物包虫病专业实验室甘肃兰州730046 中国人民解放军海军军医大学上海200433 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009

为探究多房棘球蚴感染引起宿主肝纤维化的关键基因变化,通过建立多房棘球蚴感染小鼠模型,利用高通量测序技术获得感染小鼠肝不同时间点差异m RNA表达谱,结合DisGeNET、GeneGards等数据库中已收录的肝纤维化相关基因集,挖掘感染进程中影... 详细信息

为探究多房棘球蚴感染引起宿主肝纤维化的关键基因变化,通过建立多房棘球蚴感染小鼠模型,利用高通量测序技术获得感染小鼠肝不同时间点差异m RNA表达谱,结合DisGeNET、GeneGards等数据库中已收录的肝纤维化相关基因集,挖掘感染进程中影响肝纤维化的重要基因。结果显示,多房棘球蚴感染小鼠肝出现胶原纤维沉积;通过转录组测序数据结合vlookup函数检索,发现2943个肝纤维化相关基因在感染后不同时间出现差异表达,其中显著上调的基因主要富集在PI3K-Akt等通路上,实时荧光定量PCR验证结果与高通量测序结果一致,通路中神经生长因子(Ngf)、肌腱蛋白C(Tnc)基因在肝星状细胞中表达量显著高于肝实质细胞、肝窦内皮细胞和枯否细胞,在小鼠原代肝星状细胞中敲低Ngf基因影响胶原基因Col1α1及Timp1的表达,推测这些通路和基因可能参与多房棘球蚴感染后致小鼠肝组织纤维化的过程。

关键词：多房棘球蚴转录组测序生物信息学纤维化神经生长因子

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