检索结果-内蒙古大学图书馆

中国病原生物学杂志 2023年第4期18卷 432-438页

作者：赵文静焦正龙苏佩佩尚小丽修江帆国果贵州医科大学基础医学院贵州贵阳550025 贵州医科大学环境与健康重点实验室贵州医科大学转化医学研究中心

目的从基因家族的角度对家蝇几丁质酶进行鉴定与分析,初步探讨其潜在的生物学功能。方法采用生物信息学方法分析家蝇几丁质酶基因的结构、组成及蛋白的理化特性,并构建分子系统树;通过qPCR检测8个基因的时空表达情况和4个基因在3种浓度... 详细信息

目的从基因家族的角度对家蝇几丁质酶进行鉴定与分析,初步探讨其潜在的生物学功能。方法采用生物信息学方法分析家蝇几丁质酶基因的结构、组成及蛋白的理化特性,并构建分子系统树;通过qPCR检测8个基因的时空表达情况和4个基因在3种浓度的20E处理下的表达变化。结果共鉴定20个家蝇几丁质酶基因,N-J树划分为8组;不同基因的外显子数量及结构域组成存在差异性;催化结构域具备昆虫几丁质酶高保守序列;相对分子质量为(26.663~270.602)×10^(3),pI为5.02~10.28。MdCht2、MdCht5、MdCht7和MdCht10在蛹期显著性高表达;MdCht4、MdCht8、MdCht9和MdIDGF7主要在幼虫期高表达;Ⅱ龄幼虫的8种几丁质酶基因呈组织特异性表达,其中在马氏管和肠组织中MdCht4显著性高表达。MdCht4、MdCht5、MdCht7和MdCht10对蜕皮激素20E的刺激呈正向应答,注射后8h和12h时的应激表达量与20E的浓度相关。结论家蝇丁质酶基因呈组织特异性表达,部分几丁质酶基因对蜕皮激素20E的刺激呈正向应答,本文可为家蝇几丁质酶的功能研究及家蝇的防治提供参考。

关键词：几丁质酶基因家族表达模式 20-羟基蜕皮激素诱导(20E) 家蝇

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衰老对小鼠角膜中Pax6和Wnt7a表达的影响

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中国老年学杂志 2024年第17期44卷 4160-4164页

作者：高杰王明彪文邦红范雪朱婕胡蓉苏敏贵州医科大学组织学与胚胎学教研室贵州贵安新区561113 贵州医科大学转化医学研究中心贵州贵安新区561113 贵州医科大学细胞工程生物医药技术国家地方联合工程实验室贵州省再生医学重点实验室中国医学科学院成体干细胞转化研究重点实验室贵州贵安新区561113

目的研究衰老对小鼠角膜中配对盒基因(Pax)6和Wnt7a表达的影响,探索其与角膜缘干细胞(LSCs)衰老的关系。方法60只雌性昆明小鼠分为3组:青年组(2月龄),中年组(10月龄),老年组(18月龄)各20只。苏木素-伊红(HE)染色观察角膜形态结构改变,... 详细信息

目的研究衰老对小鼠角膜中配对盒基因(Pax)6和Wnt7a表达的影响,探索其与角膜缘干细胞(LSCs)衰老的关系。方法60只雌性昆明小鼠分为3组:青年组(2月龄),中年组(10月龄),老年组(18月龄)各20只。苏木素-伊红(HE)染色观察角膜形态结构改变,免疫荧光染色和流式细胞术检测p63、Pax6和Wnt7a分布和表达,实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测p63、Pax6和Wnt7a mRNA相对表达。结果与青年组相比,随着月龄的增加,小鼠角膜上皮的厚度明显变薄,角膜厚度明显增厚,p63、Pax6和Wnt7a表达均逐渐明显减少(P<0.05)。结论随着增龄,角膜呈老化趋势,可能与Pax6-Wnt7a调控有关。

关键词：角膜缘干细胞衰老 p63 配对盒基因(Pax6) Wnt7a

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国产泪液MMP9试剂盒快速检测的初步对比研究

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中华眼科杂志 2023年第4期59卷 272-278页

作者：万惜晨张洪沈燕周淑云杨培周旭娇谷浩乐琦骅徐建江周行涛洪佳旭复旦大学附属眼耳鼻喉科医院眼科国家卫生健康委员会/中国医学科学院近视眼重点实验室上海200031 贵州医科大学附属医院眼科贵阳550031

目的对比国产泪液基质金属蛋白酶9(MMP9)试剂盒与国外已用于临床试剂盒快速检测泪液中MMP9的效果。方法横断面研究。连续收集2022年6至7月在复旦大学附属眼耳鼻喉科医院干眼门诊就诊的30例(30只眼)年龄18~85岁干眼患者(干眼组)和30名(3... 详细信息

目的对比国产泪液基质金属蛋白酶9(MMP9)试剂盒与国外已用于临床试剂盒快速检测泪液中MMP9的效果。方法横断面研究。连续收集2022年6至7月在复旦大学附属眼耳鼻喉科医院干眼门诊就诊的30例(30只眼)年龄18~85岁干眼患者(干眼组)和30名(30只眼)年龄和性别均匹配的健康志愿者(健康组),采用国产MMP9试剂盒和InflammaDry试剂盒(国外已用于临床试剂盒)分别检测受检者泪液中的MMP9水平,记录2种试剂盒检测的阳性率进行定性分析,记录2种试剂盒条带灰度比值(检测条带灰度值与对照条带灰度值的比值)进行定量分析,并与患者年龄、眼表疾病指数(OSDI)评分、荧光素泪膜破裂时间(FBUT)、泪河高度、基础泪液分泌试验(SⅠt)结果、角膜荧光素染色(FL)评分及睑板腺缺失面积进行相关性分析。采用Mann-Whitney U检验、配对卡方检验、Kappa检验和Spearman相关系数等方法进行统计学分析。结果健康组30名(30只眼)健康受检者,男性14名,女性16名;年龄(39.37±19.55)岁。干眼组30例(30只眼)中重度干眼患者,男性11例,女性19例;年龄(46.87±17.85)岁。检测干眼组和健康组泪液MMP9的阳性率InflammaDry试剂盒分别为86.67%(26/30)和16.67%(5/30),2个组比较的差异有统计学意义(P<0.05);国产MMP9试剂盒分别为70.00%(21/30)和6.67%(2/30),2个组比较的差异有统计学意义(P<0.05)。国产MMP9试剂盒的检测灵敏度(70.0%)低于InflammaDry试剂盒(86.7%),特异度(93.3%)高于InflammaDry试剂盒(83.3%),2个组比较的差异均有统计学意义(均P<0.05)。2种试剂盒对干眼组进行检测,阳性符合率为80.7%(21/26),阴性符合率为100%(4/4),总符合率为83.3%(25/30),检测结果差异无统计学意义(χ^(2)=3.20,P>0.05),2种试剂盒的检测结果一致性分析显示Kappa=0.53(P=0.001)。国产MMP9试剂盒(ρ=0.52)和InflammaDry试剂盒(ρ=0.48)的条带灰度比值均与FL评分呈正相关(P<0.05)。结论国产泪液MMP9试剂盒快速检测泪液中MMP9的结果与InflammaDry试剂盒具有一致性,前者灵敏度较低但特异度更高。

关键词：干眼综合征眼泪角膜基质金属蛋白酶9 试剂盒,诊断荧光素类染色与标记对比研究

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康复治疗学专业基础医学课程的教学分析与改革探究

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中国康复医学杂志 2025年第1期40卷 120-122页

作者：刘守国耿阿燕张戎周莎南京医科大学第一附属医院康复医学中心/南京医科大学康复医学院南京市210029 南京医科大学基础医学院基础医学实验教学中心南京医科大学基础医学院病原生物学系

随着社会的发展和进步,国家对康复治疗技术人才的需求不断增加;培养专业的康复治疗技术人才成为社会的迫切需求。康复治疗学作为一个新兴医学专业,近二十多年来在全国一百多所高等院校已陆续开办,但其课程设置和教学模式在不同高校间存... 详细信息

随着社会的发展和进步,国家对康复治疗技术人才的需求不断增加;培养专业的康复治疗技术人才成为社会的迫切需求。康复治疗学作为一个新兴医学专业,近二十多年来在全国一百多所高等院校已陆续开办,但其课程设置和教学模式在不同高校间存在诸多差异,教学质量及教学水平、学生理论水平及实践能力也参差不齐,因此,亟需进行专业的教学研究,这对提高我国康复治疗学专业教育水平和人才培养质量至关重要[1]。

关键词：康复治疗学医学专业教学分析基础医学课程教学质量教学研究课程设置教学模式

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刚地弓形虫巨噬细胞迁移抑制因子基因敲除虫株的构建与鉴定

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2022年第3期40卷 349-354页

作者：王杰温红阳陈滢安然罗庆礼沈继龙都建安徽医科大学基础医学院生化与分子生物学教研室合肥230032 人畜共患病安徽高校省级重点实验室合肥230032 安徽医科大学基础医学院感染性疾病研究中心合肥230032 病原生物学安徽省重点实验室合肥230032

目的构建并鉴定刚地弓形虫RH株巨噬细胞迁移抑制因子(Tgmif)基因敲除虫株。方法设计刚地弓形虫RH株Tgmif的单向导RNA(sgRNA)和点突变引物,将pSAG1::Cas9-U6::sgUPRT质粒定点突变为针对Tgmif基因的pSAG1::Cas9-U6::sg Tgmif质粒。构建含... 详细信息

目的构建并鉴定刚地弓形虫RH株巨噬细胞迁移抑制因子(Tgmif)基因敲除虫株。方法设计刚地弓形虫RH株Tgmif的单向导RNA(sgRNA)和点突变引物,将pSAG1::Cas9-U6::sgUPRT质粒定点突变为针对Tgmif基因的pSAG1::Cas9-U6::sg Tgmif质粒。构建含有Tgmif上游1001 bp(Tgmif-up)、二氢叶酸还原酶-胸苷酸合成酶基因(dhfr-ts)和Tgmif下游1011 bp(Tgmif-down)等3个片段的Tgmif供体质粒,从Tgmif供体质粒PCR扩增获得Tgmif供体DNA。将pSAG1::Cas9-U6::sg Tgmif质粒和Tgmif供体DNA混合后电击转染野生型刚地弓形虫RH株(RH_(WT))速殖子,用乙胺嘧啶培养7 d,筛选获得稳定表达乙胺嘧啶抗性的虫株并进行单克隆筛选,PCR扩增dhfr-ts上、下游同源臂和Tgmif鉴定Tgmif基因敲除单克隆株(RH_(ΔTgmif))。提取RH_(ΔTgmif)和RH_(WT)株虫体蛋白,蛋白质免疫印迹(Western blotting)分析TgMIF蛋白的表达情况。RH_(ΔTgmif)在人包皮成纤维(HFF)细胞中传代10代,吉氏染色,镜检计数100个HFF中速殖子数,评估RH_(ΔTgmif)在体外培养HFF细胞中的增殖能力,以RH_(WT)为对照。将20只BABL/c小鼠随机分为RH_(WT)组和RH_(ΔTgmif)组(10只/组),各组分别腹腔注射RH_(WT)或RH_(ΔTgmif)株速殖子(1000个/鼠),记录小鼠生存情况。弓形虫增殖能力的比较采用独立样本t检验,小鼠生存率的比较采用Log Rank检验。结果PCR检测结果显示,含Tgmif-up、dhfr-ts和Tgmif-down等3个片段的Tgmif供体DNA片段长5049 bp,与预期相符;RH_(ΔTgmif)株分别扩增出1387、1524 bp的dhfr-ts上、下游同源臂条带,RH_(WT)株无相应条带;RH_(WT)株扩增出1837 bp的Tgmif条带,RH_(ΔTgmif)株无相应条带。Western blotting分析结果显示,RH_(WT)株在相对分子质量(M_(r))12500处出现1条蛋白条带,RH_(ΔTgmif)株无相应的蛋白条带。吉氏染色镜检结果显示,100个HFF中RH_(ΔTgmif)株速殖子为(2986±69.20)个,高于RH_(WT)株的(2067±51.08)个(t=18.50,P<0.01)。体内毒力试验结果显示,RH_(WT)组小鼠在第7天出现死亡,在第9天全部死亡;RH_(ΔTgmif)组小鼠在第5天出现死亡,第7天全部死亡,两组之间的差异有统计学意义(χ^(2)=17.45,P<0.01)。结论成功构建Tgmif基因敲除弓形虫虫株RH_(ΔTgmif),RH_(ΔTgmif)株的毒力比RH_(WT)株强。

关键词：刚地弓形虫巨噬细胞迁移抑制因子基因敲除

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数据挖掘并验证人参总皂苷改善酒精性肝炎的机制

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中国实验方剂学杂志 2024年第21期30卷 95-103页

作者：陈书灵刘逸韬吴骁张朵艾金慧袁桃花孙见飞贵州医科大学基础医学国家级实验教学示范中心贵阳550004

目的:通过数据分析和实验验证探究人参总皂苷改善酒精性肝炎(AH)的新靶点和中药,为AH的临床治疗提供新方向。方法:该研究前期从GEO数据库筛选GSE28619作为分析对象,选择GSE83148和GSE103580作为验证集。基于limma包和加权基因共表达网... 详细信息

目的:通过数据分析和实验验证探究人参总皂苷改善酒精性肝炎(AH)的新靶点和中药,为AH的临床治疗提供新方向。方法:该研究前期从GEO数据库筛选GSE28619作为分析对象,选择GSE83148和GSE103580作为验证集。基于limma包和加权基因共表达网络分析方法(WGCNA)识别AH相关差异基因和模块基因;通过“Venny”软件取交集基因。构建蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络,并进行富集分析,再进一步筛选核心基因评估其诊断价值。经过数据集验证后,综合分析出AH新潜在靶点并预测中药。对靶点和中药有效成分进行分子对接,并通过实验验证。将48只SD大鼠随机分出8只为空白组,剩下进行乙醇灌胃造模成功后随机均分为人参总皂苷低(10 mg·kg^(-1))、中(20 mg·kg^(-1))、高(40 mg·kg^(-1))剂量组、模型组和美他多辛组(117 mg·kg^(-1)),空白组以等量生理盐水灌胃。灌胃3周后取血清测定血清天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平;取肝组织进行苏木素-伊红(HE)染色、蛋白免疫印迹法(Western blot)和实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测肝组织潜在靶点蛋白和基因表达水平。结果:数据分析预测出潜在的原癌基因(FOS)、Ⅰ型胶原蛋白α2链基因(COL1A2),实验验证显示给药后肝脏损伤程度均较造模后减轻;血清AST、ALT水平在给药后降低;Western blot和Real-time PCR结果显示给药后FOS蛋白和基因表达水平均明显增高,COL1A2则相反。结论:人参总皂苷能通过FOS和COL1A2改善AH。

关键词：生物信息学酒精性肝炎关键基因中药预测人参总皂苷

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头颈部鳞状细胞癌巨噬细胞关键基因的筛选分析

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中国临床解剖学杂志 2024年第2期42卷 174-180页

作者：侯晓睿李浩坤宋贻芳常若水薛小磊张千兵吴砂王妮莎南方医科大学基础医学院免疫学教研室广东省功能蛋白质组学重点实验室广州510515 南方医科大学南方医院病理科广州510515 南方医科大学基础医学院肿瘤研究所广州510515 国家医学基础实验教学示范中心广州510515 南方医科大学基础医学院生物化学教研室广州510515

目的应用生物信息学的方法分析筛选头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)巨噬细胞中的潜在关键基因,为HNSCC的预后提供靶点。方法基于在线数据库,利用一致流形近似与投影(UMAP)降维,捕获巨噬细胞群;进一步通过t-分布随机近邻嵌入(tSNE)聚类降维分... 详细信息

目的应用生物信息学的方法分析筛选头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)巨噬细胞中的潜在关键基因,为HNSCC的预后提供靶点。方法基于在线数据库,利用一致流形近似与投影(UMAP)降维,捕获巨噬细胞群;进一步通过t-分布随机近邻嵌入(tSNE)聚类降维分析肿瘤组织与正常组织细胞群分布的变化并筛选差异基因的表达;运用Monocle包对关键风险基因在不同发育阶段细胞中的表达情况进行分析;利用Kaplan-Meier Plotter在线数据平台分析生存曲线;运用空间转录组技术验证关键基因在组织中的表达映射;多色荧光免疫组化进行临床样本的验证。结果捕获得到7个巨噬细胞亚群,其中第1亚群仅存在于肿瘤组织中且分泌型磷蛋白1(SPP1)基因高富集。SPP1高表达趋向巨噬细胞M2型极化并处于细胞分化的终末阶段。SPP1+巨噬细胞糖酵解、缺氧、上皮间质化、血管生成等功能活跃,与HNSCC患者的预后呈负相关。结论 SPP1可能成为HNSCC中有价值的预后生物标志物。

关键词：头颈部鳞状细胞癌分泌型磷蛋白1(SPP1) 肿瘤相关巨噬细胞

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铜绿假单胞菌PAO1中环二鸟苷单磷酸代谢蛋白PA0285感应环境因素的研究

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中国病原生物学杂志 2024年第6期19卷 653-658页

作者：海娥张慧敏高晓菁张小敏郭嘉义黄卫东宁夏医科大学基础医学院生物化学与分子生物学系宁夏银川750000 宁夏疾病预防控制中心宁夏医科大学科技中心

目的分析铜绿假单胞菌中环二鸟苷单磷酸(c-di-GMP)代谢蛋白PA0285感应环境因素的作用,探讨其参与c-di-GMP信号转导的机制。方法通过PCR技术对pa0285转座子突变菌株进行遗传背景确认;以铜绿假单胞菌野生型PAO1和2株PA0285插入失活突变菌... 详细信息

目的分析铜绿假单胞菌中环二鸟苷单磷酸(c-di-GMP)代谢蛋白PA0285感应环境因素的作用,探讨其参与c-di-GMP信号转导的机制。方法通过PCR技术对pa0285转座子突变菌株进行遗传背景确认;以铜绿假单胞菌野生型PAO1和2株PA0285插入失活突变菌株为研究对象,选定24种化合物,利用绿色荧光蛋白(GFP)报告基因融合法及刚果红结合试验,检测细菌胞内c-di-GMP水平;通过生物膜定量试验分析特定环境因素对细菌生物膜形成的影响;使用CAS平板法进一步分析PA0285在特定环境条件下对细菌分泌嗜铁素的调控。结果细菌基因组PCR结果表明转座子插入致pa0285基因失活;GFP报告基因融合法、刚果红结合试验及生物膜定量检测结果显示,与野生型PAO1相比,突变菌Δpa0285胞内c-di-GMP水平升高(F=88.92,P<0.01),生物膜合成增加(F=15.82,P<0.01);将异亮氨酸(Ile)或缬氨酸(Val)添加至培养基时,突变菌Δpa0285胞内c-di-GMP水平与PAO1相比降低(F=15.17,60.17,P<0.01),生物膜合成与PAO1比较差异无统计学意义(F=3.462,0.5018,P=0.10001,0.6287)。CAS定量检测结果显示,与野生型PAO1相比,突变菌Δpa0285分泌嗜铁素含量下降(F=58.22,P<0.01);CAS平板观察结果显示,无外源化合物添加时,突变菌Δpa0285菌落的螯合圈与野生型PAO1相比偏小,将精氨酸(Arg)、MgCl2、CaCl2添加至培养基时,突变菌Δpa0285的菌落螯合圈与PAO1相比大小相近;将Val和Ile添加至培养基时,突变菌Δpa0285的菌落螯合圈与野生型PAO1相比偏大。结论铜绿假单胞菌PAO1中代谢蛋白PA0285具有磷酸二酯酶(PDE)的活性;PA0285通过调控胞内c-di-GMP水平,进而影响生物膜合成及嗜铁素的分泌,以感应环境中氨基酸Val和Ile。

关键词：铜绿假单胞菌PAO1 PA0285蛋白环二鸟苷单磷酸环境信号

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黏膜免疫佐剂研究进展

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中国免疫学杂志 2024年

作者：张芹丁步坚张标广东医科大学基础医学院

黏膜是抗原侵入和机体抵抗外来病原体的重要场所，诱发有效黏膜免疫应答的疫苗在预防外来病原体感染方面具有十分重要的价值。然而，由于黏膜（消化道、呼吸道和泌尿生殖道等）环境十分复杂，使得疫苗抗原经黏膜途径免疫时难以诱发有效... 详细信息

黏膜是抗原侵入和机体抵抗外来病原体的重要场所，诱发有效黏膜免疫应答的疫苗在预防外来病原体感染方面具有十分重要的价值。然而，由于黏膜（消化道、呼吸道和泌尿生殖道等）环境十分复杂，使得疫苗抗原经黏膜途径免疫时难以诱发有效的黏膜免疫应答，阻碍了黏膜疫苗的开发。黏膜免疫佐剂因可以调节或加强疫苗的黏膜免疫应答效应，为黏膜疫苗的研发提供了新的机会。本文主要从细菌毒素、Toll样受体激动剂、细胞因子或趋化因子以及其他新型黏膜佐剂等方面对黏膜免疫佐剂的研究进展进行综述。

关键词：佐剂黏膜免疫 Toll受体激动剂抗原递送复合佐剂

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MBL途径在鼠冠状病毒感染中作用的探究

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中国动物传染病学报 2023年

作者：方盈盈郭彦孙世惠韩雪莲李敏赵光宇崔玉军王原安徽医科大学基础医学院军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室

本研究利用鼠肝炎病毒3株（MHV-3）感染免疫缺陷小鼠建立肝损伤模型，通过组织病理学实验，免疫组化，血清丙氨酸氨基转移酶浓度检测，血清炎症因子检测等，对被感染小鼠肝组织进行病理学分析以及血清学的分析，比较野生型小鼠和MBL缺... 详细信息

本研究利用鼠肝炎病毒3株（MHV-3）感染免疫缺陷小鼠建立肝损伤模型，通过组织病理学实验，免疫组化，血清丙氨酸氨基转移酶浓度检测，血清炎症因子检测等，对被感染小鼠肝组织进行病理学分析以及血清学的分析，比较野生型小鼠和MBL缺陷型小鼠中肝损伤的差异，研究MBL途径在鼠冠状病毒感染导致的小鼠肝损伤中作用。结果表明MHV-3攻毒后，与野生型小鼠比较，MBL缺陷小鼠遭受更加严重的肝损伤和更加严重的炎性反应。这些提示MBL在鼠冠状病毒感染中具有缓解小鼠肝损伤的作用，这可能给暴发性肝衰竭提供一些新的治疗思路。

关键词：鼠冠状病毒甘露糖结合凝集素暴发性肝衰竭补体

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