检索结果-内蒙古大学图书馆

中华医学杂志 2000年第10期80卷 784-786页

作者：张可满陈保生吴纲薛红曾武威中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的　克隆、分离血管内皮细胞在致动脉粥样硬化因素作用下差异表达的基因 ,了解动脉粥样硬化发生的分子机制。方法　培养血管内皮细胞系 (ECV30 4)在低密度脂蛋白 (LDL)的诱导下 ,用改进的差异显示聚合酶链反应 (PCR)技术分析表达水... 详细信息

目的　克隆、分离血管内皮细胞在致动脉粥样硬化因素作用下差异表达的基因 ,了解动脉粥样硬化发生的分子机制。方法　培养血管内皮细胞系 (ECV30 4)在低密度脂蛋白 (LDL)的诱导下 ,用改进的差异显示聚合酶链反应 (PCR)技术分析表达水平明显差异的cDNA。对差异显示基因进行序列测定和同源比较。用NorthernBlot证实差异显示基因片段。结果　LDL诱导ECV30 4细胞出现一些上调和下调表达的cDNA。已知的上调表达基因包括 10 0 0 0蛋白、FGFR1原癌基因伴随蛋白、rTSβ蛋白、FK5 0 6结合蛋白、细胞间粘附分子 1;下调表达的基因有fb19、Apobec 1结合蛋白 1、RBP2。不同的上调或下调基因表达水平变化在 70 %～ 2 0 0 %之间不等。结论　用差异显示 PCR方法证实LDL可诱导ECV30 4细胞许多基因表达水平的变化。高水平LDL作用于内皮细胞可引起炎性反应 ,影响动脉粥样硬化的早期发生。

关键词：基因表达 LDL 内皮细胞差异显示动脉粥样硬化

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白血病细胞系中B-Raf与Raf-1的表达及活性

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中国医学科学院学报 2000年第6期22卷 533-535页

作者：张静刘彦信刘士廉郑德先中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的研究白血病细胞及正常人外周血淋巴细胞中的 B- Raf和 Raf- 1表达水平及激酶活性。方法利用 Western印迹法检测 B- Raf和 Raf- 1表达水平，利用免疫沉淀及 Western印迹法检测 Raf- 1及 B- Raf的激酶活性。结果 Raf- 1在白血病细胞... 详细信息

目的研究白血病细胞及正常人外周血淋巴细胞中的 B- Raf和 Raf- 1表达水平及激酶活性。方法利用 Western印迹法检测 B- Raf和 Raf- 1表达水平，利用免疫沉淀及 Western印迹法检测 Raf- 1及 B- Raf的激酶活性。结果 Raf- 1在白血病细胞及正常人外周血淋巴细胞中均有表达 ,表达水平基本相似，其激酶活性较低； B- Raf仅在白血病细胞中表达，且在 Jurkat和 K562细胞中的表达水平较高，其激酶活性也较高。结论在白血病细胞中， B- Raf的高表达及活化可能是白血病发病的机制之一。

关键词： Raf-1 B-Raf 激酶活性白血病细胞

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人泛素结合酶cDNA的分离与克隆

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中国医学科学院学报 2000年第4期22卷 306-311页

作者：吕鸿雁李光涛周严金鉴蒋科艺彭小忠袁建刚强伯勤中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的　分离、克隆人泛素结合酶基因 ,并初步研究其组织表达谱。方法　根据与鼠泛素结合酶有较高一致性的人表达序列标签 (EST)设计筛库引物 ,筛选人胎脑 c DNA文库 ,采用生物信息学方法分析筛选到的阳性克隆 ;设计探针 ,应用人多组织杂... 详细信息

目的　分离、克隆人泛素结合酶基因 ,并初步研究其组织表达谱。方法　根据与鼠泛素结合酶有较高一致性的人表达序列标签 (EST)设计筛库引物 ,筛选人胎脑 c DNA文库 ,采用生物信息学方法分析筛选到的阳性克隆 ;设计探针 ,应用人多组织杂交膜分析该基因的组织表达谱。结果　从文库中筛选到两个互为剪接异构体的长度分别为 1471和 1315 bp的 c DNA克隆 ,其开放读码框分别编码 147和 10 9个氨基酸 ,与鼠、果蝇、线虫等生物的泛素结合酶均高度同源 ,含泛素结合结构域 ,Gen Bank登录号分别为 AF12 5 0 44和 AF12 5 0 45。Northern杂交显示 ,该基因在成人心脏、胎盘、胰腺等组织中呈特异表达 ,而在脑、肝、肺、肾和骨胳肌中基本不表达。结论　泛素结合酶基因在人体中的表达受到时间和空间的双重调控。

关键词：泛素泛素结合酶 cDNA 分离克隆

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新世纪医学分子生物学的历史使命

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中国医学科学院学报 2000年第4期22卷 303-305页

作者：方福德中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

什么叫医学分子生物学 ?简单地说它是研究医学问题的分子生物学。那么 ,什么叫分子生物学呢 ?这就有争议了 ,出现了正、反两种意见。早在二十世纪七十年代 ,当分子生物学开始腾飞的时候 ,国外就有人提出“分子生物学早已死亡”的结论 ,... 详细信息

什么叫医学分子生物学 ?简单地说它是研究医学问题的分子生物学。那么 ,什么叫分子生物学呢 ?这就有争议了 ,出现了正、反两种意见。早在二十世纪七十年代 ,当分子生物学开始腾飞的时候 ,国外就有人提出“分子生物学早已死亡”的结论 ,国内直到最近几年还有不少人不赞成分子生物学作为一门分支学科而存在。提出反对意见的主要理由有三 :一是所谓分子生物学 ,只是分子水平分析方法和技术的集合 ,充其量只能作为其他经典学科的研究“工具”和“手段”而已 ;二是分子水平的研究把复杂的生命现象简单化为分子事件的分析 ,缺乏整体 (综合 )式观念和整合型研究方法 ;三是研究内容与其他学科有重叠 ,难以界定。实际上 ,

关键词：医学分子生物学分子生物学生物大分子结构

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我国人类疾病基因控制工程基础研究的近期进展

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中国医学科学院学报 2000年第3期22卷 205-207页

作者：方福德 *** 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室

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嗜水气单胞菌hec毒素溶血试验诊断阵发性睡眠性血红蛋白尿症

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中华血液学杂志 2000年第10期21卷 517-520页

作者：刘海丽许彩民吕照江陆承平潘华珍张之南中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005 北京协和医院南京农业大学

目的　研究嗜水气单胞菌hec毒素对红细胞的作用 ,为阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)的临床诊断提供一种新方法。方法　从患暴发性传染病的家养鲫鱼分离到嗜水气单胞菌 ,其培养上清经硫酸铵沉淀获得粗提毒素 ,经DEAE纤维素层析得提纯毒素... 详细信息

目的　研究嗜水气单胞菌hec毒素对红细胞的作用 ,为阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)的临床诊断提供一种新方法。方法　从患暴发性传染病的家养鲫鱼分离到嗜水气单胞菌 ,其培养上清经硫酸铵沉淀获得粗提毒素 ,经DEAE纤维素层析得提纯毒素。粗提毒素作用于PNH和其他贫血患者及正常人的红细胞 ,采用 96孔板在波长 6 30nm酶标仪比色 ;同时用CD59单抗和FITC标记的羊抗鼠IgG标记红细胞 ,以流式细胞仪分析毒素作用前后CD59标记率。结果　对 15例PNH患者、15名正常人、15例非PNH贫血患者的红细胞 ,进行hec毒素试验 ,发现毒素在 0 .12 5g/L、37℃作用 2 0min后 ,正常人和非PNH贫血患者的红细胞完全溶解 ,而PNH患者存留红细胞的百分率与CD59标记率成反比。毒素作用前后流式细胞仪检测结果表明 ,毒素可以特异地作用于CD59阳性细胞。结论　PNH患者的红细胞比其他非PNH贫血患者及正常人的红细胞有明显的抗毒素溶破作用 ,且毒素作用后存留细胞的百分数反映CD59标记率 ,故可作为PNH诊断的敏感、特异、简便可行的新诊断方法。

关键词：阵发性睡眠性血红蛋白尿嗜水气单胞菌 hec毒素

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CD2胞内区结合蛋白的分子克隆与鉴定

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科学通报 2000年第11期45卷 1163-1167页

作者：邵源肖声翟文静李董刘彦信刘士廉郑德先中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

为了探讨ＣＤ２分子的信号传递功能，以编码ＣＤ２胞内区（Ｔｈｒ２１１－Ｇ１ｎ３３６）肽段的ｃＤＮＡ为“钓饵”，采用酵母双杂交系统从激活的人Ｔ淋巴细胞ｃＤＮＡ文库中筛选与之相互作用蛋白的ｃＤＮＡ序列．并采用免疫共沉淀法... 详细信息

为了探讨ＣＤ２分子的信号传递功能，以编码ＣＤ２胞内区（Ｔｈｒ２１１－Ｇ１ｎ３３６）肽段的ｃＤＮＡ为“钓饵”，采用酵母双杂交系统从激活的人Ｔ淋巴细胞ｃＤＮＡ文库中筛选与之相互作用蛋白的ｃＤＮＡ序列．并采用免疫共沉淀法鉴定该蛋白在体内与ＣＤ２胞内区结合的特异性．克隆并鉴定了一个与ＣＤ２胞内区特异性结合的胞内蛋白分子，与ｖ－ｆｏｓ转化效应蛋白（Ｆｔｅ－１）同源Ｆｔｅ－１参与细胞转化、生长、蛋白合成及向线粒体转运蛋白质．蛋白数据库检索表明，Ｆｔｅ－１具有蛋白激酶ＰＫＣ的结合与作用位点。

关键词： CD2胞内区结合蛋白分子克隆鉴定

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重组可溶型Fas的表达及抗体制备

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中华医学杂志 2000年第12期80卷 914-915页

作者：刘彦信赵芳萍祖淑玉刘士廉刘复强翟艳苓杨敏赵相印郑德先中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室 100005 首都医科大学附属北京同仁医院

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巨噬细胞集落刺激因子受体的配基结合区的分析

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科学通报 2000年第2期45卷 178-182页

作者：罗寿青郑德先刘彦信饶青吴克复中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020 中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

从人胎盘中提取总ＲＮＡ，利用ＲＴ－ＰＣＲ技术分别扩增巨噬细胞集落刺激因子受体（Ｍ－ＣＳＦＲ）胞外区的Ｄ１－３，Ｄ２－３和Ｄ３功能区，并在大肠杆菌中成功地表达了各相应的重组蛋白．酶联免疫吸附分析（ＥＩＡ）证明重组Ｄ... 详细信息

从人胎盘中提取总ＲＮＡ，利用ＲＴ－ＰＣＲ技术分别扩增巨噬细胞集落刺激因子受体（Ｍ－ＣＳＦＲ）胞外区的Ｄ１－３，Ｄ２－３和Ｄ３功能区，并在大肠杆菌中成功地表达了各相应的重组蛋白．酶联免疫吸附分析（ＥＩＡ）证明重组Ｄ１－３结合Ｍ－ＣＳＦ的能力是重组Ｄ２－３的３倍，前者的Ｋｄ为１１ｎｍｏｌ／Ｌ，后者的为３９ｎｍｏｌ／Ｌ．而重组的Ｄ３则完全没有结合能力．这些数据提示Ｄ２－３是与其配基结合的主体位点，Ｄ１为其配基结合的辅助位点，可能对配基结合位点的刚性也有贡献．

关键词：巨噬细胞集落刺激因子受体结合活性 M-CSF

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异丁酰胺活化成年小鼠中胚胎εy珠蛋白基因的转录

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基础医学与临床 2000年第3期20卷 64-68页

作者：张雪青陈平张俊武中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

实验自己合成的异丁酰胺对小鼠活体内胚胎珠蛋白基因转录的影响。在以每天500～900mg／kg体重的剂量注射15天后，鼠胚胎εymRNA水平可达到未注射对照的3～6倍。受注射小鼠的血红蛋白浓度（HGB）、红细胞计数（RBC）、红细胞压积（HCT）... 详细信息

实验自己合成的异丁酰胺对小鼠活体内胚胎珠蛋白基因转录的影响。在以每天500～900mg／kg体重的剂量注射15天后，鼠胚胎εymRNA水平可达到未注射对照的3～6倍。受注射小鼠的血红蛋白浓度（HGB）、红细胞计数（RBC）、红细胞压积（HCT）及白细胞计数（WBC）基本上均在正常范围内。受注射家兔的血液钾、钠、氯含量无异常变化，血浆离子渗透压亦保持稳定。这些结果说明异丁酰胺能够有效地在成年小鼠体内作用于早期成红细胞，激活胚胎εy-珠蛋白基因的转录，并且不显示血液学和电解质毒性，进一步证明了其在β-地中海贫血治疗中的潜在价值。

关键词：异丁酰氨胚胎εy珠蛋白基因毒性实验

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