检索结果-内蒙古大学图书馆

中华医学杂志 2003年第22期83卷 1962-1967页

作者：程宏刘彦信张锦春刘士廉郑德先中国协和医科大学基础医学院中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的　研究CD3ε分子与化疗药物 5 氟尿嘧啶 (5 FU)在T淋巴细胞凋亡中的协同作用及P5 3的表达 ,为探索T淋巴细胞凋亡的分子机制打下基础 ,为相关肿瘤的治疗提供新的实验依据。方法　培养人T淋巴白血病细胞株JK ,转染了突变的CD3εITAM... 详细信息

目的　研究CD3ε分子与化疗药物 5 氟尿嘧啶 (5 FU)在T淋巴细胞凋亡中的协同作用及P5 3的表达 ,为探索T淋巴细胞凋亡的分子机制打下基础 ,为相关肿瘤的治疗提供新的实验依据。方法　培养人T淋巴白血病细胞株JK ,转染了突变的CD3εITAM的TJK及T3JK细胞株。用CD3ε特异的单克隆抗体 (2 0 0 μg/ml)和 /或 5 FU(2 5 μg/ml)刺激不同的T淋巴细胞诱导细胞凋亡 ,用噻唑蓝比色法检测细胞存活率 ,并计算细胞死亡率 ;用瞬时转染野生型或突变型P5 3表达质粒的方法和Western印迹检测P5 3蛋白质的表达 ,分析其在T淋巴细胞凋亡中的作用。结果　在CD3ε和 5 FU分别诱导T淋巴细胞凋亡过程中 ,均伴随着P5 3蛋白质表达增加 ;两者联合使用使T淋巴细胞凋亡和P5 3蛋白质表达显著增加 ;P5 3过表达可明显增加T淋巴细胞对 5 FU的敏感性。结论　抗CD3ε抗体和 5 FU联合作用可显著提高P5 3蛋白质表达 ,两者在T淋巴细胞凋亡中具有协同效应。

关键词： CD3ε 5-氟尿嘧啶 T淋巴细胞凋亡协同作用 P53 表达单克隆抗体

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神经生长因子低亲和力受体(p75NTR)的模拟配基的筛选

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中国生物化学与分子生物学报 2003年第6期19卷 769-774页

作者：高鹏王欣陈虹黄秉仁中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

人神经生长因子低亲和力受体 (p75NTR)转染R2细胞而建立的R2L1细胞 ,在去血清培养时发生凋亡 ,该作用可被神经生长因子 (NGF)所抑制 .用R2L1和R2两种细胞差式筛选噬菌体随机 7肽库和 1 2肽库 ,获得和p75NTR特异结合的噬菌体 .测定DNA序... 详细信息

人神经生长因子低亲和力受体 (p75NTR)转染R2细胞而建立的R2L1细胞 ,在去血清培养时发生凋亡 ,该作用可被神经生长因子 (NGF)所抑制 .用R2L1和R2两种细胞差式筛选噬菌体随机 7肽库和 1 2肽库 ,获得和p75NTR特异结合的噬菌体 .测定DNA序列后得到有关多肽的氨基酸序列 .7肽库共有序列为C (H D)LP(K M)HPM C ;1 2肽库优势序列为TLPSPLALLTVH .化学合成相应的 2个短肽 .用细胞结合法和ELISA方法证实阳性噬菌体和合成短肽能与p75NTR结合。

关键词：神经生长因子低亲和力受体神经生长因子噬菌体展示肽库氨基酸序列

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蛋白质组学研究方法及其在生物医学中的应用

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基础医学与临床 2003年第2期23卷 113-118页

作者：罗元明刘彦信郑德先中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

蛋白质组学方法发展迅速 ,并日见成熟。蛋白芯片技术、双向电泳 -质谱技术、多维液相色谱 -质谱技术等 ,已被广泛应用于寻找疾病相关的差异表达蛋白质、疾病相关的生物标记分子以及药物靶点用于临床诊断、药物设计、以及疾病发病机理的... 详细信息

蛋白质组学方法发展迅速 ,并日见成熟。蛋白芯片技术、双向电泳 -质谱技术、多维液相色谱 -质谱技术等 ,已被广泛应用于寻找疾病相关的差异表达蛋白质、疾病相关的生物标记分子以及药物靶点用于临床诊断、药物设计、以及疾病发病机理的研究等。本文对上述研究进展作了简要综述。

关键词：蛋白质组学研究方法生物医学蛋白芯片双向电泳-质谱技术质谱生物标记分子

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麦芽酚可抑制活性氧引起的SH-SY5Y细胞凋亡

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基础医学与临床 2003年第4期23卷 375-378页

作者：王健杨洋许彩民潘华珍中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

近年来研究表明 ,氧化应激在阿尔茨海默病等神经退行性疾病发生发展中具有重要作用。本文研究了麦芽酚对过氧化氢 (H2 O2 )引起的人神经瘤细胞株 (SH SY5Y)凋亡时细胞形态、磷脂酰丝氨酸 (PS)外翻和DNA损伤的保护作用。结果发现麦芽酚... 详细信息

近年来研究表明 ,氧化应激在阿尔茨海默病等神经退行性疾病发生发展中具有重要作用。本文研究了麦芽酚对过氧化氢 (H2 O2 )引起的人神经瘤细胞株 (SH SY5Y)凋亡时细胞形态、磷脂酰丝氨酸 (PS)外翻和DNA损伤的保护作用。结果发现麦芽酚浓度为 2mmol L ,作用 2h后 ,可以保护细胞免受H2 O2 引起的氧化损伤。实验结果表明麦芽酚可作为一种抗氧化剂 ,有效保护H2 O2 引起的SH SY5Y的凋亡。

关键词：麦芽酚活性氧 SH-SY5Y 细胞凋亡氧化损伤阿尔茨海默病

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衰老相关的T细胞生物学研究进展

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中华老年医学杂志 2003年第5期22卷 319-320页

作者：罗元明刘彦信郑德先中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京市100005

T细胞衰老是导致机体衰老、衰老相关疾病以及和寿命直接相关的重要因素.T细胞在免疫系统中处于核心地位,参与各种免疫应答,执行各种免疫功能,抵抗疾病,直接或间接地参与细胞免疫和体液免疫.所以,研究T细胞衰老是研究人体衰老的重要内容... 详细信息

T细胞衰老是导致机体衰老、衰老相关疾病以及和寿命直接相关的重要因素.T细胞在免疫系统中处于核心地位,参与各种免疫应答,执行各种免疫功能,抵抗疾病,直接或间接地参与细胞免疫和体液免疫.所以,研究T细胞衰老是研究人体衰老的重要内容.目前,人们在进行衰老生物学研究时,常用T细胞作为模型研究基因表达、细胞间通讯及体内平衡调节等,其他多细胞生物很少具有T细胞的优点.我们在此主要讨论引起T 细胞衰老的因素(机制)、由衰老而引起的T细胞功能的相关变化及检测衰老T细胞的常用方法.

关键词：衰老 T细胞生物学研究免疫系统

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载脂蛋白E基因多态性与阿尔茨海默病

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Acta Genetica Sinica 2003年第12期30卷 1167-1170页

作者：陈等张俊武张振馨赵华路李晓青吴亚宁屈秋明中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院神经内科北京100005 西安医科大学第一附属医院神经内科西安710061

利用PCR RFLP方法分析了中国汉族人群中 16 0例散发性阿尔茨海默病 (Alzheimerdisease,AD)患者和 195例正常对照老年人中载脂蛋白E(APOE)基因多态性分布的差异。结果表明 ,APOE 3种等位基因ε2、ε3和ε4的频率在AD组和对照组分别为 0 ... 详细信息

利用PCR RFLP方法分析了中国汉族人群中 16 0例散发性阿尔茨海默病 (Alzheimerdisease,AD)患者和 195例正常对照老年人中载脂蛋白E(APOE)基因多态性分布的差异。结果表明 ,APOE 3种等位基因ε2、ε3和ε4的频率在AD组和对照组分别为 0 0 5 6、0 713、0 2 31和 0 0 82、0 84 4、0 0 74。APOEε4等位基因携带个体患AD的危险为非携带个体的 3 82倍 (χ2 =2 8 7,P <0 0 0 1)。 6 5岁以上APOEε4携带个体患AD的危险为非携带个体的 5 38倍(χ2 =2 9 8,P <0 0 0 1) ,说明年龄因素可能影响ε4与AD间的相互作用。APOE等位基因和基因型频率在轻、中和重度痴呆病人间的分布无明显差异 (P >0 0 5 ) ,提示APOE基因多态性可能与AD患者的痴呆程度无关联。APOEε4基因型频率在女性AD病人中的分布略高于男性AD病人 (4 3 0 %对 36 5 % ) ,女性ε4携带个体患AD的危险也高于男性ε4携带个体 (4 3倍对 3 3倍 ) ,但统计学分析未检测到这些差异的显著性 (P >0 0 5 )。ε2等位基因频率在AD患者男性亚组明显低于女性亚组 ,也低于对照人群的男性亚组 (P <0 0 5 ) 。

关键词：阿尔茨海默病载脂蛋白E PCR-RFLP

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SARS冠状病毒PUMC_2株N蛋白cDNA的克隆、表达和纯化

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中国医学科学院学报 2003年第5期25卷 504-507页

作者：谈昕煜樊峥王华瑾石磊阴彬倪安平秦川邹柯沈岩袁建刚强伯勤彭小忠中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 Department of Clinical Laboratory PUMC HospitalCAMS and PUMCBeijing Institute of Experimental Animal CAMS and PUMCBeijing

目的原核表达并纯化SARS冠状病毒N蛋白。方法用RT-PCR技术克隆SARS冠状病毒PUMC2株N蛋白全长cDNA,cDNA经序列分析鉴定后,克隆到pET32a表达载体,转化***21进行原核表达并纯化出SARS冠状病毒N蛋白。结果实现了SARS冠状病毒N蛋白的表达及... 详细信息

目的原核表达并纯化SARS冠状病毒N蛋白。方法用RT-PCR技术克隆SARS冠状病毒PUMC2株N蛋白全长cDNA,cDNA经序列分析鉴定后,克隆到pET32a表达载体,转化***21进行原核表达并纯化出SARS冠状病毒N蛋白。结果实现了SARS冠状病毒N蛋白的表达及纯化。结论用基因重组方法表达的SARS冠状病毒N蛋白可为其进一步功能研究提供条件。

关键词： SARS冠状病毒 N蛋白

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肿瘤坏死因子α/淋巴毒素α基因多态性与支气管哮喘的关系

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基础医学与临床 2003年第5期23卷 512-516页

作者：高金明林耀广邱长春刘怡雯马毅刘英朱元珏中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院呼吸科北京100730 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

肿瘤坏死因子 (tumornecrosisfactor,TNF)在哮喘炎症过程中起重要作用 ,本文探讨了TNFα LTα基因多态性和哮喘遗传易感性及相关表型的关系。采用聚合酶链反应 (PCR) 限制性长度多态性 (RFLP)检测TNFα LTα基因多态性在 12 5名哮喘个... 详细信息

肿瘤坏死因子 (tumornecrosisfactor,TNF)在哮喘炎症过程中起重要作用 ,本文探讨了TNFα LTα基因多态性和哮喘遗传易感性及相关表型的关系。采用聚合酶链反应 (PCR) 限制性长度多态性 (RFLP)检测TNFα LTα基因多态性在 12 5名哮喘个体 ,12个哮喘家系成员和 96名无血缘关系的健康对照者间的分布 ;并测定了哮喘患者血清的TIgE ;肺通气功能 ,支气管舒张试验 ,乙酰甲胆碱 (Mch)气道激发试验。TNFα 2 2基因型的频率在哮喘组较健康对照组明显增高 (2 0 8%vs 11 4 % ,P <0 0 5 ) ,优势比 (OR)为 2 2 5 9(95 %CI1 30 1～ 4 94 9) ;等位基因频率TNF2在哮喘组较健康对照组明显增高 (0 4 2vs 0 33,P <0 0 1)。LTα基因的频率在两组间分布无差异。Logistic回归分析显示 :TNFα 2 2基因是哮喘的独立危险因素 (P <0 0 5 ) ,OR值为 0 2 2 6 (95 %CI 0 0 5 5 - 0 92 5 1)。携带TNFα 2 2基因型的患者在吸入 β2激动剂 2 0分钟后 ,FEV1的改善较携带其它基因型的患者差 (2 4 0 9± 19 5 ) %vs [2 9 4 6±2 2 6 0 ) %vs (38 81± 31 5 3) % ,P <0 0 5 ]。家系分析显示 :TNFα基因 LTα基因与哮喘连锁关系不肯定 ,LOD值 <1。TNFα 2 2基因型与哮喘的易感性相关。

关键词：肿瘤坏死因子α 淋巴毒素α 基因多态性支气管哮喘聚合酶链反应血清

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自体成纤维细胞注射移植的存活性初探

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基础医学与临床 2003年第3期23卷 314-317页

作者：赵玉明赵作均林惶左瑾方福德王佳琦中国医学科学院中国协和医科大学整形外科医院面颈整形美容中心北京100041 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

为观察自体成纤维细胞移植后在体内成活和分泌胶原情况 ,体外培养兔自体成纤维细胞 ,部分细胞3H TdR掺入 ,标记和未标记的 8× 10 1 0 L- 1 细胞悬液 ,分别注射于兔耳背侧真皮浅、深层交界处 3次。 5月后取材 ,进行放射自显影 ,H E... 详细信息

为观察自体成纤维细胞移植后在体内成活和分泌胶原情况 ,体外培养兔自体成纤维细胞 ,部分细胞3H TdR掺入 ,标记和未标记的 8× 10 1 0 L- 1 细胞悬液 ,分别注射于兔耳背侧真皮浅、深层交界处 3次。 5月后取材 ,进行放射自显影 ,H E染色 ,天狼猩红染色观察 ,发现3H TdR掺入标记的细胞依然存活 ;注射部位出现大量的幼稚型成纤维细胞 ;真皮厚度增加 ,实验组为 14 0 2 6± 6 31(× 5 μm) ,对照组为 12 7 6 6± 4 78(× 5 μm) (P <0 0 1) ;Ⅲ型胶原含量增加 ,实验组为 2 6 3± 1 4 1(cm2 ) ,对照组为 1 0 5± 0 90 (cm2 ) (P <0 0 5 )。表明自体成纤维细胞注射移植后 ,能够在体内长期存活并分泌新生Ⅲ型胶原 ,为临床应用提供了初步、可靠的理论依据。

关键词：成纤维细胞细胞移植放射自显影 ^3H-TdR

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大鼠神经元凋亡相关碱性蛋白ARBP cDNA的克隆和功能

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中国生物化学与分子生物学报 2003年第1期19卷 36-40页

作者：白氡明洪周新富陈虹黄秉仁中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 南澳洲Flinders大学医学院生理系

利用cDNA末端快速扩增 (RACE)方法 ,得到凋亡相关碱性蛋白 (ARBP)的全长序列 ,进而构建了其真核表达体系以了解其功能 .ARBP的全长cDNA序列为 90 1bp ,其开放读码框架编码 10 9个氨基酸残基 .免疫组化分析表明 ,ARBP蛋白在大鼠体内有广... 详细信息

利用cDNA末端快速扩增 (RACE)方法 ,得到凋亡相关碱性蛋白 (ARBP)的全长序列 ,进而构建了其真核表达体系以了解其功能 .ARBP的全长cDNA序列为 90 1bp ,其开放读码框架编码 10 9个氨基酸残基 .免疫组化分析表明 ,ARBP蛋白在大鼠体内有广泛的分布 .在R2L1细胞中转染ARBP反义cDNA表达载体后 ,既可以促进细胞增殖 ,又可以抑制去血清诱导的细胞凋亡 .因而 ,ARBP蛋白对神经元细胞的凋亡具有重要的调节作用 .

关键词：神经营养因子低亲和力受体 p75NTR cDNA末端快速扩增凋亡相关碱性蛋白大鼠神经元

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