检索结果-内蒙古大学图书馆

中华医学杂志 2002年第15期82卷 1009-1012页

作者：卓玛次仁庄兰平崔超英仁丹边巴格桑罗布平措扎西次旦罗布陈勇岑维浚才旦邱长春许群刘英刘怡雯朱席琳方鸣武邬正赉西藏自治区人民医院心血管病研究所拉萨850000 西藏医学专科学校生理及生化教研室中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室

目的　探讨遗传因素在藏族原发性高血压 (EH)发病中的作用 ,以及血管紧张素Ⅱ的惟一前体物血管紧张素原 (AGT)基因变异是否参与EH发病。方法　以藏族 35 3例EH患者和 317名正常血压对照者为对象进行病例对照相关研究。根据相似家系结... 详细信息

目的　探讨遗传因素在藏族原发性高血压 (EH)发病中的作用 ,以及血管紧张素Ⅱ的惟一前体物血管紧张素原 (AGT)基因变异是否参与EH发病。方法　以藏族 35 3例EH患者和 317名正常血压对照者为对象进行病例对照相关研究。根据相似家系结构的指示对照和指示病例 1∶1配比分析 ,按Falconer公式计算藏族EH的遗传度。以聚合酶链反应 (PCR)和PCR产物的限制性片段长度多态性分析方法 ,分析AGT基因M2 35T多态性和 5′调控区 6A→G变异与藏族EH遗传易感的相关性。结果　 (1)藏族EH先证者 (指示病例 )一级亲属受累率为 43.3% ,EH遗传度为 77.2 %± 13 3%。(2 )EH患者血浆肾素活性 (μg·L-1·h-1)为 1.95± 0 .11,血管紧张素Ⅱ水平 (ng/L)为 72 .6± 4.6 ,均明显高于对照组 (分别为 1.5 9± 0 .11和 5 1.7± 4.6 ,P <0 .0 5 )。 (3)EH组AGT基因 5′调控区 6G等位基因频率 (0 .36 )明显高于对照组 (0 .2 7) (χ2 =9.35 ,P <0 .0 1) ,并与血管紧张素Ⅱ水平呈弱相关 ,而M2 35T多态性与EH易感无明显相关 (P >0 .0 5 )。结论　遗传因素在藏族EH发病中起重要作用。

关键词：藏族原发性高血压遗传学病例对照研究血管紧张素原多态性限制性片段长度

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北京协和医院1990～2000年副肿瘤综合征住院病例总结

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中风与神经疾病杂志 2002年第2期19卷 96-97页

作者：陈健华刘秀琴郭玉璞周严袁建刚北京协和医院神经内科北京100730 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的　了解副肿瘤综合征 2 6例患者的临床基本特征。方法　回顾性分析 1990～ 2 0 0 0年北京协和医院副肿瘤综合征患者的临床资料并加以总结。结果　副肿瘤综合征平均发病年龄 4 8.6± 2 6岁 ,男性占 6 9.2 % ,女性占 30 .8%。 3.8... 详细信息

目的　了解副肿瘤综合征 2 6例患者的临床基本特征。方法　回顾性分析 1990～ 2 0 0 0年北京协和医院副肿瘤综合征患者的临床资料并加以总结。结果　副肿瘤综合征平均发病年龄 4 8.6± 2 6岁 ,男性占 6 9.2 % ,女性占 30 .8%。 3.8%患者在发现肿瘤后才出现神经症状 ;96 .2 %在出现副肿瘤症状后才发现肿瘤。诊断出副肿瘤综合征时 ,2 6 .9%肿瘤已出现转移。从出现神经症状至发现肿瘤平均时间为 18± 6个月 ,患者多为慢性隐袭或亚急性起病 ,症状进行性加重 ,对治疗无明显缓解。结论　副肿瘤综合征出现明显的临床症状可发生在肿瘤发现之前、之后或与之同时发生 ,它们的出现几乎均预示预后不良。

关键词：副肿瘤综合征小细胞肺癌早期诊断肺肿瘤

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ESTs数据分析及ESTs数据系统

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国外医学（分子生物学分册） 2002年第2期24卷 113-116页

作者：丁克越沈岩中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室

为了充分利用大量 ESTs数据中的生物学价值 ,需要用一种系统方法对公共数据库中的 ESTs进行分析。目前已有几种 ESTs数据系统作了这样的尝试 ,包括 TIGR Indices、Uni Gene和 STACK等。不同的系统采用了不同的“聚类”和“拼接”的算法 ... 详细信息

为了充分利用大量 ESTs数据中的生物学价值 ,需要用一种系统方法对公共数据库中的 ESTs进行分析。目前已有几种 ESTs数据系统作了这样的尝试 ,包括 TIGR Indices、Uni Gene和 STACK等。不同的系统采用了不同的“聚类”和“拼接”的算法 ,它们对结果分析可产生不同的意义。这些数据系统为充分利用 ESTs数据提供了可能。

关键词：表达序列标签聚类拼接 ESTs数据系统数据分析基因组

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树鼩载脂蛋白CⅡ的cDNA和蛋白质结构分析

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基础医学与临床 2002年第2期22卷 134-137页

作者：曾武威陈保生吴钢张文成薛红张坚中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室100005

以从树鼩肝脏mRNA反转录获得的cDNA一链为模板,应用SMART-RACE技术,获得了树鼩apoCⅡ的cDNA序列,并推导出其蛋白质氨基酸序列,应用分子生物学软件对该蛋白的一级、二级结构进行分析和比较。结果显示,树鼩apoCⅡcDNA序列(在GenBank中的... 详细信息

以从树鼩肝脏mRNA反转录获得的cDNA一链为模板,应用SMART-RACE技术,获得了树鼩apoCⅡ的cDNA序列,并推导出其蛋白质氨基酸序列,应用分子生物学软件对该蛋白的一级、二级结构进行分析和比较。结果显示,树鼩apoCⅡcDNA序列(在GenBank中的注册号为AF335585)长483bp,其中开放阅读框架306 bp,编码101个氨基酸的前原蛋白,其蛋白原由79个氨基酸组成。树鼩apoCⅡ的氨基酸顺序与人、猴、狗的同源性分别为86%、87%和81%。与人及其它种属动物的相同序列比较显示,树鼩apoCⅡ分子C-端激活LPL功能区比N-端脂质结合区更具保守性。

关键词： DNA 互补氨基酸序列蛋白质构象树鼩科载脂蛋白类/遗传学动物

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胶原Ⅳα_1链NC1结构域基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

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云南大学学报（自然科学版） 2002年第1期24卷 62-65,69页

作者：唐慧阴彬孙万臣吴成军陈善娜彭小忠云南大学生物技术系云南昆明650091 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 云南省农业科学院生物技术研究所云南昆明650223

胶原中多个成分如ⅩⅤ ,ⅩⅤⅢ的NC结构域能抑制血管内皮细胞增殖和迁移 ,具有抑制肿瘤生长和转移的活性 .从胎盘组织中提取总RNA ,根据文献报道的胶原Ⅳα1链cDNA序列 ,设计一对特异性引物 ,应用RT -PCR方法扩增出胶原Ⅳα1链NC1结构... 详细信息

胶原中多个成分如ⅩⅤ ,ⅩⅤⅢ的NC结构域能抑制血管内皮细胞增殖和迁移 ,具有抑制肿瘤生长和转移的活性 .从胎盘组织中提取总RNA ,根据文献报道的胶原Ⅳα1链cDNA序列 ,设计一对特异性引物 ,应用RT -PCR方法扩增出胶原Ⅳα1链NC1结构域基因 .DNA序列测定发现 ,扩增得到的基因与文献报道序列存在单个核苷酸变异 (A132C) ,编码氨基酸 (Gly)不变 .将扩增得到的胶原Ⅳα1链NC1结构域基因克隆到原核表达载体 pPROEXHTb上 ,并在大肠杆菌BL2

关键词：胶原Ⅳ α1链NC1结构域 RT-PCR 基因克隆基因表达肿瘤抑制血管生成

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白细胞介素2受体α基因表达中两组近端启动子活性的研究

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中国医学科学院学报 2002年第1期24卷 40-40页

作者：程小款衡凤燕刘觉辉吴宁华沈珝琲中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

淋巴细胞表面的高亲和力白细胞介素2受体（IL-2R）的由α、β和γ三个亚基组成。其中α亚基只在激活淋巴细胞上表达，并且只能与IL-2特异性结合。因此，IL-2Rα基因的活化过程参与决定淋巴细胞增殖和免疫应答强度的调控。

关键词：启动子转录调控白细胞介素2受体α基因基因表达

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白细胞介素2受体α基因负调控元件相关结合蛋白的筛选与克隆

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中国医学科学院学报 2002年第2期24卷 184-184页

作者：陆瑜李宏帆莫志成吴宁华沈珝琲中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

白细胞介素2受体(IL-2R)α亚基的胞内末端较短,可能不直接参与IL-2的信号传递,但它在激活淋巴细胞中的特异表达以及与IL-2结合参与淋巴细胞增殖和免疫应答强度的调控.本组曾报道IL-2Rα基因5＇端顺式调控元件NRE不仅与其3＇端下游NRE反... 详细信息

白细胞介素2受体(IL-2R)α亚基的胞内末端较短,可能不直接参与IL-2的信号传递,但它在激活淋巴细胞中的特异表达以及与IL-2结合参与淋巴细胞增殖和免疫应答强度的调控.本组曾报道IL-2Rα基因5＇端顺式调控元件NRE不仅与其3＇端下游NRE反向重复序列(NIRS)共同参与对IL-2Rα基因表达的调控,同时反式作用因子可能通过NRE和/或NIRS以及单链或双链DNA的选择性影响该基因的启动子活性[1].为研究IL-2Rα基因NRE的作用机制,本组对其特异的结合蛋白进行了研究.

关键词：白细胞介素体α 基因负调控元件相关结合蛋白筛选克隆

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白细胞介素体α基因负调控元件相关结合蛋白的筛选与克隆

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中国医学科学院学报 2002年第2期24卷

作者：陆瑜李宏帆莫志成吴宁华沈？琲中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京 100005

白细胞介素2受体（IL-2R）α亚基的胞内末端较短，可能不直接参与IL-2的信号传递，但它在激活淋巴细胞中的调控。本组曾报道IL-2Rα基因5'端顺式调控元件NRE不仅与其3'端下游NRE反向重复序列9NIRS）共同参与对IL-2Rα基因表达... 详细信息

白细胞介素2受体（IL-2R）α亚基的胞内末端较短，可能不直接参与IL-2的信号传递，但它在激活淋巴细胞中的调控。本组曾报道IL-2Rα基因5'端顺式调控元件NRE不仅与其3'端下游NRE反向重复序列9NIRS）共同参与对IL-2Rα基因表达的调控，同时反式作用因子可能通过NRE和/或NIRS以及单链或双链DNA的选择性影响该基因的启动子活性。为研究IL-2Rα基因NRE的作用机制，本组对其特异的结合蛋白进行了研究。

关键词：白细胞介素体α 基因负调控元件相关结合蛋白筛选克隆

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神经营养素-4(NT-4)在昆虫杆状病毒表达系统中的克隆与表达

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中国医学科学院学报 2001年第2期23卷 141-144页

作者：马晓骊黄秉仁中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所生化室医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的通过昆虫杆状病毒表达系统的优势，表达出具有生物学活性的神经营养素-4（ hNT-4）蛋白。方法通过 PCR方法获得 hNT-4成熟肽的基因，将其连接到昆虫表达载体 pAcGP67B上，在昆虫细胞 Sf9中进行表达。对表达产物进行免疫原性和生... 详细信息

目的通过昆虫杆状病毒表达系统的优势，表达出具有生物学活性的神经营养素-4（ hNT-4）蛋白。方法通过 PCR方法获得 hNT-4成熟肽的基因，将其连接到昆虫表达载体 pAcGP67B上，在昆虫细胞 Sf9中进行表达。对表达产物进行免疫原性和生物学活性测定。结果获得 hNT-4蛋白的表达产物， SDS-PAGE电泳显示表达产物相对分子质量为 15 000。经 Western-blot验证，表达上清及细胞全蛋白均有一条能与抗人 NT-4抗体发生特异性免疫反应的条带。经 PC12细胞测定，表达上清中的 rNT-4蛋白具有明确的生物学活性。结论 hNT-4在昆虫杆状病毒表达系统中的表达为今后进一步深入研究 hNT-4的功能及其在临床中的应用提供了条件。

关键词：神经营养素-4 载体PacGP67B Sf 细胞昆虫杆状病毒表达系统克隆表达

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在大肠杆菌中以融合蛋白高效表达基因工程产品人心钠素

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中国医学科学院学报 2001年第6期23卷 573-579页

作者：陈伟京王俊路金芝卢圣栋中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的构建以融合蛋白形式在大肠杆菌中高效表达心钠素的重组质粒,稳定高效地获得基因工程产品心钠素。方法采用PCR和亚克隆技术构建带有心钠素的融合基因并在大肠杆菌中高效表达融合蛋白,利用操纵子重复克隆提高表达量,以凝血酶切割融合... 详细信息

目的构建以融合蛋白形式在大肠杆菌中高效表达心钠素的重组质粒,稳定高效地获得基因工程产品心钠素。方法采用PCR和亚克隆技术构建带有心钠素的融合基因并在大肠杆菌中高效表达融合蛋白,利用操纵子重复克隆提高表达量,以凝血酶切割融合蛋白释放心钠素小肽并通过柱层析纯化蛋白质,检定产品的各项理化指标和大鼠的体内降压、体内利尿和体外舒张血管等药理活性。结果构建了4个高效表达的心钠素融合蛋白的质粒,分别含1～4个目的基因串联操纵子;通过温度诱导表达后,该系列表达的目的蛋白分别为菌体总蛋白的46%、54.8%、56.1%和60.1%;提取纯化包涵体形式的融合蛋白后,以凝血酶切割释放心钠素,再经纯化分离出心钠素;实验室摇瓶发酵每升培养液可获得3mg以上的纯度大于96%的产品,产品具有利尿、降压和舒张血管的药理活性。结论利用融合基因的克隆与表达成功地研制了人心钠素基因工程产品。

关键词：心钠素大肠杆菌融合蛋白凝血酶基因工程

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