检索结果-内蒙古大学图书馆

中国科学（C辑） 2006年第5期36卷 424-431页

作者：姜文锡邱长春程祖亨周文郁顾明亮许群方鸣武牛文全玛依拉新疆医科大学乌鲁木齐830054 中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005 中国医学科学院中国协和医科大学医学生物学研究所医学遗传学研究室昆明650118

探讨载脂蛋白B（apolipoprotein B，apoB）基因单体型与维吾尔族自然长寿之间的关系．选择新疆和田地区191名年龄90岁以上的健康维吾尔族个体为研究对象，另选53名年龄65—70岁、民族、性别、地域相匹配的正常个体为对照．采用PCR—SSP... 详细信息

探讨载脂蛋白B（apolipoprotein B，apoB）基因单体型与维吾尔族自然长寿之间的关系．选择新疆和田地区191名年龄90岁以上的健康维吾尔族个体为研究对象，另选53名年龄65—70岁、民族、性别、地域相匹配的正常个体为对照．采用PCR—SSP（sequence specific primer），PCR—RFLP（restriction fragment length polymorphism）和PCR-直接测序（PCR—sequencing）等技术对apoB基因第1外显子5＇端信号肽插入／缺失（insertion／deletion，PD）、第26外显子Xba Ⅰ限制性片段长度多态性（restriction fragment length polymorphisms，Xba Ⅰ—RFLP）和第29外显子3＇端可变数目重复序列（vaffable number of tandemly repeat，VNTR）进行分型．经Logistic回归分析显示，长寿组apoB基因X^＋X^＋基因型频率显著高于对照组；M，L的等位基因频率和其组成的基因型频率显著增高；在单体型分析中，长寿组中由X^＋和M等位基因组成的单体型频率显著增高，而由X^-和S等位基因组成的单体型频率显著降低（均P〈0．05）．研究认为：等位基因M，L，基因型X^＋X^＋，MM，ML，LL和单体型I—X^＋-M，X^＋-M与自然长寿显著正相关，可能为长寿的保护因素，而等位基因S，基因型SS和单体型X^＋-S，D—S和D—X^＋-S则可能是影响长寿的不利因素．

关键词： apoB基因单体型等位基因基因型自然长寿维吾尔族

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白介素2基因佐剂协同单纯疱疹病毒1型糖蛋白D核酸疫苗免疫诱导的特异性免疫应答

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中国医学科学院学报 2005年第1期27卷 67-72页

作者：刘晓娟朱明昭宋国兴许于飞刘宏伟王盛杨宝玲董方田许雪梅中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所生物物理室北京100005

目的研究白介素2(IL-2)cDNA协同单纯疱疹病毒1型(HSV-1)gD核酸疫苗免疫对机体体液免疫和细胞免疫应答的影响,以及在HSV-1病毒角膜攻击时的保护效果。方法利用pcDNA3.1载体分别构建HSV-1糖蛋白D和IL-2的真核表达质粒pgD和pIL-2,体外鉴定... 详细信息

目的研究白介素2(IL-2)cDNA协同单纯疱疹病毒1型(HSV-1)gD核酸疫苗免疫对机体体液免疫和细胞免疫应答的影响,以及在HSV-1病毒角膜攻击时的保护效果。方法利用pcDNA3.1载体分别构建HSV-1糖蛋白D和IL-2的真核表达质粒pgD和pIL-2,体外鉴定其表达。动物实验分为pcDNA3.1空载体对照组、pgD单独免疫组和pgD+pIL-2联合免疫组3组,具体为通过肌肉免疫接种BALB/c小鼠3次,间隔2周,每次接种质粒100μg,第3次免疫后2周,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抗体滴度并做亚型分析,利用3H-TdR掺入法进行Th细胞增殖实验,ELISA试剂盒检测Th细胞分泌的IL-2、IFN-γ和IL-10水平,耳廓肿胀实验检测迟发型超敏反应(DTH)反应;HSV-1病毒角膜攻击后,裂隙灯显微镜观察角膜上皮病变。结果与pgD单独免疫组相比,pIL-2的协同免疫可以显著提高IgG2a抗体滴度、Th细胞增殖反应和DTH反应,Th细胞分泌IL-2和IFN-γ水平也显著提高,IL-10水平明显下降。在动物保护实验中,pIL-2的协同免疫明显增强了pgD疫苗在病毒攻击时对角膜的保护效果。结论IL-2cDNA的协同免疫可以显著提高pgD核酸疫苗诱导的体液免疫和细胞免疫应答水平,增加核酸疫苗的免疫保护效果。

关键词： DNA疫苗白介素2 单纯疱疹病毒1型角膜炎

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活性氧在大鼠心肌细胞低氧预适应中的作用

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基础医学与临床 2005年第9期25卷 838-841页

作者：张晓蓓齐保申周晓梅中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所生理研究室北京100005

目的探讨活性氧在心肌细胞低氧预适应过程中的作用机制。方法建立SD乳鼠心肌细胞的低氧预适应模型;检测不同阶段超氧阴离子和H2O2含量以及T-SOD、Cu,Zn-SOD和Mn-SOD活性变化,分析活性氧在低氧预适应不同窗口期的作用。结果(1)超氧阴离... 详细信息

目的探讨活性氧在心肌细胞低氧预适应过程中的作用机制。方法建立SD乳鼠心肌细胞的低氧预适应模型;检测不同阶段超氧阴离子和H2O2含量以及T-SOD、Cu,Zn-SOD和Mn-SOD活性变化,分析活性氧在低氧预适应不同窗口期的作用。结果(1)超氧阴离子和过氧化氢均能明显提高心肌细胞在第一窗口期低氧1h后的存活率(P<0·05);(2)超氧阴离子可明显升高心肌细胞第二窗口期低氧1h后的存活率(P<0·05),而过氧化氢作用不明显;(3)低氧预适应可使超氧阴离子和过氧化氢含量明显升高,同时伴有第一窗口期Cu、Zn-SOD活性及第二窗口期Mn-SOD活性显著升高(P<0·05)。结论说明低氧预适应可提高大鼠心肌细胞在不同窗口期对长时间缺氧的耐受性,其作用机制可能与活性氧及SOD有密切关系。

关键词：心肌细胞低氧预适应窗口期活性氧超氧化物歧化酶

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植物雌激素的心血管效应

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中国医学科学院学报 2005年第2期27卷 258-261页

作者：徐海珊戴顺龄孙仁宇中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所病理生理教研室北京100005

植物雌激素是一类天然存在于植物中,与雌激素结构近似的生物活性物质。本文主要介绍植物雌激素的分类和来源,从植物雌激素对心功能、心肌电生理效应阐述其对心脏的作用;通过对血脂代谢、动脉血管、细胞因子和凝血纤溶系统的调节,阐述其... 详细信息

植物雌激素是一类天然存在于植物中,与雌激素结构近似的生物活性物质。本文主要介绍植物雌激素的分类和来源,从植物雌激素对心功能、心肌电生理效应阐述其对心脏的作用;通过对血脂代谢、动脉血管、细胞因子和凝血纤溶系统的调节,阐述其抗动脉粥样硬化的效应,为心血管疾病的预防和治疗提供新的思路。

关键词：植物雌激素心脏动脉粥样硬化

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哺乳动物日节律基因表达调控研究进展

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基础医学与临床 2005年第7期25卷 587-593页

作者：李然彭小忠曹济民中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所生理学系北京100005 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

生物体机能活动的日节律是一种基本的生命现象。在分子水平上研究日节律的调控机制,有助于更好地认识生命现象,揭示机体适应环境的内在机制,以及提高疾病的诊治水平。生物钟中枢的日节律基因通过分子水平的反馈环路产生节律性振荡,后者... 详细信息

生物体机能活动的日节律是一种基本的生命现象。在分子水平上研究日节律的调控机制,有助于更好地认识生命现象,揭示机体适应环境的内在机制,以及提高疾病的诊治水平。生物钟中枢的日节律基因通过分子水平的反馈环路产生节律性振荡,后者通过一定的信号放大机制统领整个脑和所有外周器官的节律性活动,进而产生整个机体协调一致的日节律。在生物体中,从基因到组织器官乃至系统的功能都与日节律紧密联系,因而日节律机制是生物学的重要研究领域。本文简要综述了哺乳动物生物钟基因表达和调控的有关研究进展。

关键词：日节律生物钟基因日节律基因

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成人心房肌细胞的急性分离和电生理学鉴定

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中国病理生理杂志 2005年第11期21卷 2286-2288页

作者：黄兵曹济民陈雷刘振伟左明章李立环卫生部北京医院麻醉科北京100730 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所生理研究室北京100005 中国医学科学院中国协和医科大学心血管病研究所阜外心血管病医院麻醉科北京100037 军事医学科学院毒物药物研究所北京100850

目的介绍一种适用于成人的心房肌细胞膜片钳研究的急性分离方法,并对所分离的细胞进行电生理学鉴定。方法采用两步酶解与机械分离相结合的方法制备成年人心房肌细胞标本,应用倒置显微镜初步观察细胞形态、数目后,用全细胞膜片钳技术鉴... 详细信息

目的介绍一种适用于成人的心房肌细胞膜片钳研究的急性分离方法,并对所分离的细胞进行电生理学鉴定。方法采用两步酶解与机械分离相结合的方法制备成年人心房肌细胞标本,应用倒置显微镜初步观察细胞形态、数目后,用全细胞膜片钳技术鉴定细胞的电生理学特性。结果分离的细胞呈多种形态,其中有良好折光性、细胞膜完整、有清晰横纹的杆状细胞约占50%-60%,计算出11例独立实验分离出的此类细胞获得率为(57.2±3.1)%;具有正常的电生理学特性,能够诱发出人心房肌细胞上主要的Na+、K+通道混合电流以及心房肌细胞特有的超快速激活钾通道电流(IKur)。结论实验数据表明该方法分离的细胞保持有其典型的通道特性,并证明其具有实用、快速和高效的特点,适用于人心房肌细胞的电生理学和电药理学研究,有良好的可行性。

关键词：心肌分离膜片钳术电生理学

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鼻咽癌患者外周血γδT细胞对鼻咽癌细胞的细胞毒活性测定

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中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 2005年第6期40卷 466-468页

作者：王小路何维张素梅何洪彬张连山姜鸿武警总医院耳鼻咽喉科北京100039 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所免疫研究室北京协和医院耳鼻咽喉科

T细胞受体(T cell receptor,TCR)γδ表型细胞与TCRαβ细胞不同,识别抗原的方式类似于免疫球蛋白,以主要组织相容性复合体非限制性方式识别抗原分子[1,2],无需抗原呈递分子配合,直接识别广谱肿瘤抗原.我们以抗体固相法体外扩增7例鼻咽... 详细信息

T细胞受体(T cell receptor,TCR)γδ表型细胞与TCRαβ细胞不同,识别抗原的方式类似于免疫球蛋白,以主要组织相容性复合体非限制性方式识别抗原分子[1,2],无需抗原呈递分子配合,直接识别广谱肿瘤抗原.我们以抗体固相法体外扩增7例鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)患者及6例健康人外周血的γδT细胞,经原代NPC细胞同步培养,得到高纯度的NPC细胞.流式细胞仪检测γδT细胞纯度,研究两种来源的γδT细胞对Daudi、CNE1、CNE2和新建的传代培养NPC细胞的细胞毒作用,探讨NPC患者外周血中γδT细胞的抗肿瘤作用.

关键词： γδT细胞鼻咽癌细胞鼻咽癌患者活性测定主要组织相容性复合体 carcinoma receptor 流式细胞仪检测抗原呈递分子 T细胞受体免疫球蛋白抗体固相法 Daudi 细胞毒作用抗肿瘤作用 C细胞 cell γδ表型识别抗原抗原分子

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质粒纯化利用离子交换柱的再生方法

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基础医学与临床 2005年第6期25卷 561-563页

作者：董敏王小竹李继红王恒中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所病原学研究室北京100005 河北北方学院细胞生物系河北075000

目的为提高质粒大量提取纯化柱的使用率,降低实验成本。方法用0.5molLHCl和0.5molLNaOH溶液处理已使用过的一次性纯化柱,使之再生,继而被重复利用。结果再生纯化柱所提纯的质粒DNA经PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳分析证实DNA纯度高,无不同质... 详细信息

目的为提高质粒大量提取纯化柱的使用率,降低实验成本。方法用0.5molLHCl和0.5molLNaOH溶液处理已使用过的一次性纯化柱,使之再生,继而被重复利用。结果再生纯化柱所提纯的质粒DNA经PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳分析证实DNA纯度高,无不同质粒间污染。结论此方法操作简便、快捷,具有较高的实用价值。

关键词：再生方法离子交换 mol/L NaOH溶液凝胶电泳分析 PCR扩增质粒DNA 提取纯化实验成本重复利用实用价值使用率 HCl 一次性琼脂糖

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植物雌激素α-玉米赤霉醇对去卵巢大鼠凝血及纤溶功能的影响与补充外源性17β-雌二醇的比较(英文)

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中国临床康复 2005年第27期9卷 195-197页

作者：王雯朱广瑾首都医科大学病理生理学教研室北京市100054 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所病理生理学系北京市100005

背景:天然植物雌激素α-玉米赤霉醇具有与雌激素类似的抗动脉粥样硬化作用,且副作用明显低于雌激素,有一定的应用前景。目的:探讨补充外源性17β-雌二醇及植物雌激素α-玉米赤霉醇对去卵巢大鼠凝血及纤溶功能的影响,并对二者的药物作用... 详细信息

背景:天然植物雌激素α-玉米赤霉醇具有与雌激素类似的抗动脉粥样硬化作用,且副作用明显低于雌激素,有一定的应用前景。目的:探讨补充外源性17β-雌二醇及植物雌激素α-玉米赤霉醇对去卵巢大鼠凝血及纤溶功能的影响,并对二者的药物作用进行比较分析。设计:观察对比实验。单位:首都医科大学病理生理学教研室和中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所病理生理学系。材料:实验于2003-07/09在首都医科大学实验动物科学部完成。选择36只12周龄健康雌性Wistar大鼠,体质量(250±10)g,清洁级,随机分为4组,假手术对照组、去卵巢组、去卵巢+17β-雌二醇组及去卵巢+α-玉米赤霉醇组各9只。方法:假手术对照组开腹而不摘除卵巢。去卵巢组在无菌条件下摘除双侧卵巢复制去卵巢动物模型。去卵巢+17β-雌二醇组和去卵巢+α-玉米赤霉醇组分别在去卵巢14d后肌注17β-雌二醇(1mg/kg)和α-玉米赤霉醇(1mg/kg),3d注射1次,共35d。实验结束后大鼠经颈总动脉采血,分离血浆备用。用凝固法测定血浆凝血酶原时间及活化部分凝血活酶时间。用全自动生化分析仪测定血浆纤维蛋白原水平。用酶联免疫吸附法测定血浆组织因子水平。组织型纤溶酶原激活剂及纤溶酶原激活剂抑制物活性测定均采用发色底物法。同时分离子宫,计算子宫质量与体质量的比值。主要观察指标:①血浆凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间、血浆纤维蛋白原水平、血浆组织因子水平、组织型纤溶酶原激活剂活性及纤溶酶原激活剂抑制物活性。②子宫质量/体质量的比值。结果:36只大鼠全部进入结果分析。①凝血酶原时间变化:去卵巢组显著短于假手术对照组(P<0.01);补充17β-雌二醇和补充α-玉米赤霉醇后长于去卵巢组(P<0.05～0.01)。②纤维蛋白原和组织因子水平变化:去卵巢组显著高于假手术对照组(P<0.05～0.01);补充17β-雌二醇和补充α-玉米赤霉醇后低于去卵巢组(P<0.05～0.01)。③组织型纤溶酶原激活剂活性变化:去卵巢组显著低于假手术对照组犤(0.33±0.33)μkat/L,(4.00±1.50)μkat/L,(q=9.43,P<0.01)犦。补充17β-雌二醇和补充α-玉米赤霉醇后犤(1.83±0.67)μkat/L,(1.17±0.83)μkat/L犦显著高于去卵巢组(q=13.50,P<0.01;q=5.00,P<0.05)。④纤溶酶原激活剂抑制物活性变化:去卵巢组显著高于假手术对照组犤(2.33±0.67)μkat/L,(1.17±0.33)μkat/L,(q=10.5,P<0.01)犦。⑤子宫质量/体质量比值:去卵巢+α-玉米赤霉醇组明显低于去卵巢+17β-雌二醇组犤0.66,1.96,(q=14.67,P<0.01)犦。结论:补充外源性17β-雌二醇或α-玉米赤霉醇后,均可使去卵巢大鼠重新建立起凝血-纤溶的动态平衡,表明α-玉米赤霉醇具有同17β-雌二醇相似的心血管保护作用,且其致子宫增生的副作用明显小于17β-雌二醇,是一种有一定应用前景的雌激素替代药物。

关键词：卵巢切除术雌二醇凝血酶原纤维蛋白溶酶原

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植物雌激素α-玉米赤霉醇对HUVEC组织因子基因表达的转录调控作用

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基础医学与临床 2005年第6期25卷 539-542页

作者：王雯刘伟祖淑玉朱广瑾张立克首都医科大学病理生理学教研室北京100054 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所病理生理学系北京100005

目的探讨植物雌激素α玉米赤霉醇(ZAL)影响血管内皮细胞组织因子(TF)基因表达的转录调控机制,并与内源性动物类雌激素17β联雌二醇(17β联estradiol,E2)进行比较分析。方法进行人脐静脉内皮细胞(HUVECs)原代培养,利用基因重组技术构建4... 详细信息

目的探讨植物雌激素α玉米赤霉醇(ZAL)影响血管内皮细胞组织因子(TF)基因表达的转录调控机制,并与内源性动物类雌激素17β联雌二醇(17β联estradiol,E2)进行比较分析。方法进行人脐静脉内皮细胞(HUVECs)原代培养,利用基因重组技术构建4个含人TF基因5′上游不同长度序列的荧光素酶报告基因质粒,用脂质体转染法分别转入以下6组细胞:①正常对照组;②10-7molLE2刺激组;③10-7molLZAL刺激组;④10-6molLAngⅡ刺激组;⑤10-7molLE2+10-6molLAngⅡ刺激组;⑥10-7molLZAL+10-6molLAngⅡ刺激组;测定细胞裂解液中荧光素酶比活性(relativeluciferaseactivity,RLA)的变化。结果转染pGL3TF171+71的各组细胞RLA均较低,不同刺激组之间无显著差异;AngⅡ可使质粒pGL3TF593+71,pGL3TF316+71,pGL3TF236+71荧光素酶表达大量增加,E2、ZAL均可不同程度地抑制AngⅡ的上述效应,2者间无显著差异。结论含有1个NFκB位点和2个AP1位点的-236bp～-171bp区域在E2或ZAL影响TF基因转录中有重要作用。

关键词： α-玉米赤霉醇植物雌激素基因表达 HUVEC 调控作用血管内皮细胞组织因子 estradiol mol/L 人脐静脉内皮细胞 activity 转录调控机制报告基因质粒基因重组技术脂质体转染法荧光素酶表达抑制AngⅡ 正常对照组细胞裂解液

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