检索结果-内蒙古大学图书馆

中华医学杂志 2007年第27期87卷 1873-1875页

作者：叶建伟张勇徐苓朱大海中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005 中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院协和医院妇产科北京100005

综观20世纪生命科学发展，从宏观向微观、由表型到机制的探求是其重要特征。以还原论为基础的经典结构生物学、分子生物学与细胞生物学的研究极大地增进了人们对生命本质的理解。人类基因组计划（HGP）完成后，生命科学研究进入到“功... 详细信息

综观20世纪生命科学发展，从宏观向微观、由表型到机制的探求是其重要特征。以还原论为基础的经典结构生物学、分子生物学与细胞生物学的研究极大地增进了人们对生命本质的理解。人类基因组计划（HGP）完成后，生命科学研究进入到“功能基因组学”研究时代，转录组学、蛋白质组学、代谢组学开始迅速发展，生命科学的研究方法不再局限于以还原论为指导的微观拆分，

关键词：功能基因组学整合医学医学发展人类基因组计划生命科学结构生物学细胞生物学分子生物学

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与鼻咽癌细胞CNE-2L2恶性生物学行为相关的蛋白质

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基础医学与临床 2007年第4期27卷 364-371页

作者：周异群时岩田云鞠吉雨陈双玲刘音朱立平中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所免疫学系北京100005

目的寻找与人鼻咽癌细胞CNE-2L2恶性生物学行为相关的蛋白质。方法用蛋白质组学分析高(W)和低(AS)恶性生物学行为的CNE-2L2细胞间蛋白质表达的差异,用实时定量PCR和免疫荧光染色流式细胞术对差异表达的蛋白质做确认,用siRNA抑制细胞中... 详细信息

目的寻找与人鼻咽癌细胞CNE-2L2恶性生物学行为相关的蛋白质。方法用蛋白质组学分析高(W)和低(AS)恶性生物学行为的CNE-2L2细胞间蛋白质表达的差异,用实时定量PCR和免疫荧光染色流式细胞术对差异表达的蛋白质做确认,用siRNA抑制细胞中目的基因的表达,Western blot确认目的基因表达的抑制,细胞接种裸鼠的肿瘤生长实验。结果MOLDI-TOF MS分析见12个明显的差异表达蛋白质点。它们是:抗氧化蛋白Peroxiredoxin 2,异构型b;原肌蛋白3;II型TPM4-ALK融合癌蛋白;MLL蛋白;CD44;视网膜母细胞结合蛋白7;微管蛋白,β多肽;ATP合成酶,转H+作用的线粒体F1复合物,β多肽;波形蛋白;D21S2056E蛋白;蛋白酶体(prosome,macropain)26S subunit,non-ATPase,4;ENO1蛋白。前4个在AS细胞高表达,后8个在AS细胞低表达。对积分最高的7个蛋白质的差异表达做了肯定的验证。用siCD44抑制W细胞的CD44表达后,细胞接种裸鼠的成瘤性生长明显抑制。结论蛋白质组学分析见AS细胞与W细胞间有12个差异表达蛋白质,CD44表达减弱与AS细胞的恶性行为减弱相关。

关键词：蛋白质组学鼻咽癌细胞恶性行为 CD44

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伯氏疟原虫pbmag-1基因片段克隆及原核表达优化

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2007年第4期25卷 314-319页

作者：高宇辉王恒中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所病原系分子寄生虫学实验室北京100005

目的克隆并表达伯氏疟原虫pbmag-1基因cDNA片段。方法在GenBank中检索伯氏疟原虫编码基因pbmag-1部分cDNA序列,设计特异引物,经RT-PCR从伯氏疟原虫ANKA株扩增出该基因的部分cDNA片段。以锚定OligodT引物反转录mRNA获得的cDNA为模板,利... 详细信息

目的克隆并表达伯氏疟原虫pbmag-1基因cDNA片段。方法在GenBank中检索伯氏疟原虫编码基因pbmag-1部分cDNA序列,设计特异引物,经RT-PCR从伯氏疟原虫ANKA株扩增出该基因的部分cDNA片段。以锚定OligodT引物反转录mRNA获得的cDNA为模板,利用已知序列设计特异引物,通过cDNA末端快速扩增(RACE)技术延伸pbmag-13′端未知的编码序列,并将其克隆于原核表达载体后转入大肠埃希菌(***)BL21-(DE3)-RIL株,经优化诱导条件,表达了重组蛋白PbMAg-1并用其免疫小鼠。结果获得1341bp具有完整3′末端序列的pbmag-1基因片段,其A/T含量为73%。以包涵体形式表达的重组蛋白免疫小鼠,其血清抗体经蛋白质印迹(Western blotting)分析,能特异性地识别伯氏疟原虫感染红细胞相对分子质量约为Mr64000的蛋白。结论获得重组蛋白PbMAg-1的3′端完整的pbmag-1基因cDNA片段,为研究伯氏疟原虫PbMAg-1蛋白在鼠疟免疫反应中的作用奠定了实验基础。

关键词： pbmag-1 伯氏疟原虫基因克隆原核表达

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临床耳鼻咽喉头颈外科杂志 2007年第11期21卷 510-512页

作者：陈志宏倪道凤高扬林嘉友中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院耳鼻咽喉-头颈外科中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所免疫系

目的:研究凋亡相关基因Bcl-2、bax和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)在流感病毒感染后小鼠嗅上皮的表达,探讨其对嗅感觉神经元凋亡的调节作用。方法:采用半定量RT-PCR法检测流感病毒感染后小鼠嗅上皮Bcl-2、bax和iNOS的mRNA表达水平。结果:流... 详细信息

目的:研究凋亡相关基因Bcl-2、bax和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)在流感病毒感染后小鼠嗅上皮的表达,探讨其对嗅感觉神经元凋亡的调节作用。方法:采用半定量RT-PCR法检测流感病毒感染后小鼠嗅上皮Bcl-2、bax和iNOS的mRNA表达水平。结果:流感病毒感染后:①嗅上皮表达Bcl-2mRNA相对恒定;②嗅上皮表达baxmRNA早期显著增加,恢复期逐渐回落;③嗅上皮表达iNOSmRNA在一段较短的时期内显著增加,1周后逐渐下降至不可测水平。结论:凋亡相关基因Bcl-2、bax和iNOS可能在流感病毒感染所致的嗅感觉神经元凋亡中起重要的调节作用。

关键词：流感病毒嗅感觉神经元基因 Bcl-2 基因 bax 一氧化氮合酶

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加巴喷丁对神经病理性疼痛小鼠脑皮层组织内差异表达基因的影响

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基础医学与临床 2007年第6期27卷 652-655页

作者：陈绍辉赵晶罗爱伦黄宇光左萍萍杨楠郝文宇中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院麻醉科北京100730 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所药理室北京100005

目的观察加巴喷丁对神经病理性疼痛小鼠脑皮层基因表达差异的影响。方法120只小鼠随机分为对照(C)、假手术(S)和模型(M)组,各组再按不同给药分为生理盐水(P)和加巴喷丁(G)两个亚组(最终分为C+P、C+G、S+P、S+G、M+P、M+G六组)。部分坐... 详细信息

目的观察加巴喷丁对神经病理性疼痛小鼠脑皮层基因表达差异的影响。方法120只小鼠随机分为对照(C)、假手术(S)和模型(M)组,各组再按不同给药分为生理盐水(P)和加巴喷丁(G)两个亚组(最终分为C+P、C+G、S+P、S+G、M+P、M+G六组)。部分坐骨神经结扎2周后开始腹腔给药,给药4周后留取大脑皮层。通过手术侧足行为学和机械痛阈的改变来确认神经病理性疼痛模型成功及观察加巴喷丁的疗效。选择S+P、M+P和M+G三组做基因表达差异检测,并用实时PCR验证部分表达有显著差异的基因。结果M+P和S+P相比较,脑源性神经生长因子、神经肽Y、Pleiotrophin等基因显著下调。M+G和M+P相比较,上述基因显著上调。结论加巴喷丁镇痛的脑机制可能与脑源性神经生长因子、神经肽Y、Pleiotrophin等基因的上调有关。

关键词：神经病理性疼痛加巴喷丁脑源性神经生长因子神经肽Y pleiotrophin

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人成纤维细胞在裸鼠体内生长和胶原分泌的观察

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基础医学与临床 2007年第10期27卷 1140-1145页

作者：赵玉明丁俊生左瑾方福德王佳琦中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院整形美容外科北京100730 中国医学科学院中国协和医科大学整形外科医院北京100041 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所北京100005

目的观察人成纤维细胞注射移植后是否在裸鼠体内增殖并分泌胶原。方法将经原代培养的2×1010L-1人成纤维细胞1mL注射于BALB/CNU裸鼠真皮内,于1、2和3个月处死取材,行HE和Ⅰ、Ⅲ型胶原免疫组化染色。结果在1、2和3个月时可以观察到... 详细信息

目的观察人成纤维细胞注射移植后是否在裸鼠体内增殖并分泌胶原。方法将经原代培养的2×1010L-1人成纤维细胞1mL注射于BALB/CNU裸鼠真皮内,于1、2和3个月处死取材,行HE和Ⅰ、Ⅲ型胶原免疫组化染色。结果在1、2和3个月时可以观察到人成纤维细胞在裸鼠体内呈分裂象,随着时间的推移细胞外基质Ⅰ、Ⅲ型胶原分泌量呈增多趋势。结论人成纤维细胞注射移植裸鼠后,能够自行分裂、增殖并分泌人Ⅰ、Ⅲ型胶原,为自体成纤维细胞作为移植材料,发挥充填功能的持久性提供了理论依据。

关键词：成纤维细胞细胞移植胶原

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酪氨酸硫化修饰对酪氨酸硫化转移酶活性的调节

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中国医学科学院学报 2007年第2期29卷 241-245页

作者：高金明冯起平左瑾方福德蒋磊郭子健中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院呼吸内科北京100730 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所分子生物学国家重点实验室北京100005

目的研究酪氨酸硫化修饰对酪氨酸硫化转移酶(TPST)1和TPST2的调节作用。方法以人cDNA为模板,采用聚合酶链反应方法扩增人TPST1和TPST2基因野生型的全长cDNA序列,并融合入人IgG1的Fc编码区域;采用定点突变方法将TPST1和TPST2蛋白中可硫... 详细信息

目的研究酪氨酸硫化修饰对酪氨酸硫化转移酶(TPST)1和TPST2的调节作用。方法以人cDNA为模板,采用聚合酶链反应方法扩增人TPST1和TPST2基因野生型的全长cDNA序列,并融合入人IgG1的Fc编码区域;采用定点突变方法将TPST1和TPST2蛋白中可硫化的酪氨酸突变为苯丙氨酸。针对TPST1(259～275位核苷酸)和TPST2(73～94位核苷酸)基因,分别构建小干扰RNA(shRNA)1和shRNA2重组质粒。测定所有构建质粒开放读框序列。证实序列正确后,将上述质粒分别转染人肾胚胎上皮细胞(HEK)293T。24h后将细胞分成3份:1份用于35S-蛋氨酸/半胱氨酸或35S-亚硫酸钠标记,48h后再进行免疫沉淀反应;1份用于125I标记配基结合;1份用于流式细胞仪检测受体的表达水平。结果TPST1326位和TPST2325位酪氨酸在翻译后被硫化修饰,这一翻译后修饰被特异性的硫化抑制剂shRNA1和shRNA2及非特异性的硫化抑制剂NaClO3显著抑制。shRNA1和shRNA2可显著抑制补体3a和5a受体的硫化,并进一步降低这两种受体与特异性配基的结合效率。结论TPST1和TPST2翻译后受酪氨酸硫化修饰的调节,硫化抑制剂shRNA可以显著抑制TPST的活性,并进一步抑制补体3a和5a受体结合其特异性配基的作用。

关键词：硫化酪氨酸酪氨酸硫化转移酶

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乙型肝炎遗传易感性研究

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基础医学与临床 2007年第7期27卷 721-728页

作者：王丽李辉中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所流行病统计教研室北京100005

乙型肝炎病毒感染后可产生多种临床结局,包括自限性感染(病毒被清除)、非活动性HBV携带状态、慢性乙型肝炎及肝硬变等不同的临床表型。导致HBV感染结局个体差异的机制目前尚不完全清楚。宿主因素可能是影响HBV感染不同结局的原因之一。... 详细信息

乙型肝炎病毒感染后可产生多种临床结局,包括自限性感染(病毒被清除)、非活动性HBV携带状态、慢性乙型肝炎及肝硬变等不同的临床表型。导致HBV感染结局个体差异的机制目前尚不完全清楚。宿主因素可能是影响HBV感染不同结局的原因之一。本文对近年来HLA-Ⅰ类、Ⅱ类基因、TNF-α启动子区基因及维生素D受体基因多态性与乙型肝炎病毒感染结局的关联研究进行综述。

关键词：乙型病毒性肝炎遗传易感性关联研究

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PI3K-AKT-mTOR信号通路在细胞分化中的作用

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基础医学与临床 2007年第12期27卷 1404-1408页

作者：孟艳米蕊芳赵春华中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所组织工程中心北京100005 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所生理学系北京100005

磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)及其下游分子AKT、TSC1/2和mTOR所组成的信号通路参与增殖、凋亡等多种细胞功能的调节。近年来发现,这一信号通路与细胞的分化密切相关。细胞分化的异常可以引起多种疾病,肿瘤就是一种分化异常的疾病,而PI3K-AKT-... 详细信息

磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)及其下游分子AKT、TSC1/2和mTOR所组成的信号通路参与增殖、凋亡等多种细胞功能的调节。近年来发现,这一信号通路与细胞的分化密切相关。细胞分化的异常可以引起多种疾病,肿瘤就是一种分化异常的疾病,而PI3K-AKT-mTOR信号传递通路调节失常在肿瘤中最为常见,因此本文旨在综述PI3K-AKT-mTOR信号通路在细胞分化和肿瘤中的作用。

关键词： P13K PTEN TSC1/2 mTOR 分化

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伴内耳畸形的人工耳蜗植入患者SLC26A4(PDS)基因突变分析

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中华医学杂志 2007年第40期87卷 2820-2824页

作者：陈东野陈晓巍金昕左瑾魏朝刚曹克利方福德中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院耳鼻喉科 100730 中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院基础医学研究所国家医学分子生物学实验室 100730

目的探讨伴内耳畸形的人工耳蜗植入患者 SLC26A4(PDS)基因突变发生的概率、突变类型,以及 SLC26A4(PDS)基因突变与各种内耳畸形及术中听神经电诱发复合动作电位(ECAP)检出率之间的关系。方法选取48例伴有内耳畸形的人工耳蜗植入者及50... 详细信息

目的探讨伴内耳畸形的人工耳蜗植入患者 SLC26A4(PDS)基因突变发生的概率、突变类型,以及 SLC26A4(PDS)基因突变与各种内耳畸形及术中听神经电诱发复合动作电位(ECAP)检出率之间的关系。方法选取48例伴有内耳畸形的人工耳蜗植入者及50例健康对照。取外周血提取基因组 DNA,经聚合酶链反应扩增 SLC26A4(PDS)基因全部编码区,包括2～21号外显子,扩增产物纯化后直接测序分析突变。48例患者在人工耳蜗植入术中通过神经反应遥测(NRT)技术,直接近场记录听神经电诱发复合动作电位(ECAP)。结果前庭水管扩大组中70.3%(26/37)、其他内耳畸形组中18.2%(2/11)的患者发现有 SLC26A4(PDS)基因突变。本研究中共发现15种突变类型,其中有8种为新发现的类型。IVS7-2A>G 是最常见的 SLC26A4(PDS)基因突变类型,45.9%(17/37)的前庭水管扩大患者发现此种突变。在伴内耳畸形的人工耳蜗植入者患者中,未发现 SLC26A4(PDS)基因突变与术中听神经电诱发复合动作电位(ECAP)检出率之间有相关性。结论 SLC26A4(PDS)基因突变是前庭水管扩大畸形的主要病因,IVST-2A>G 是其最常见的突变类型。

关键词：耳畸形获得性前庭水管突变耳蜗植入

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