检索结果-内蒙古大学图书馆

中国药学杂志 1998年第4期33卷 227-229页

作者：唐刚华姜国辉张云陈力真王树惠王世真中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院核医学科中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所微生物免疫研究室

目的：建立测定小鼠血浆中神经生长因子（ＮＧＦ）浓度的放射性核素（１２５Ｉ）示踪测定法。方法：１２５ＩＮＧＦ采用氯胺Ｔ法标记，血浆中ＮＧＦ的浓度采用同位素示踪法结合三氯醋酸（ＴＣＡ）沉淀法或ＳＤＳＰＡＧＥ电泳法测定... 详细信息

目的：建立测定小鼠血浆中神经生长因子（ＮＧＦ）浓度的放射性核素（１２５Ｉ）示踪测定法。方法：１２５ＩＮＧＦ采用氯胺Ｔ法标记，血浆中ＮＧＦ的浓度采用同位素示踪法结合三氯醋酸（ＴＣＡ）沉淀法或ＳＤＳＰＡＧＥ电泳法测定，并比较其测定结果。结果：ＴＣＡ沉淀法和ＳＤＳＰＡＧＥ电泳法同时对照测定５０份ＮＧＦ血浆样品，结果呈良好的相关性，ｒ＝０．９９４８。两种方法的最低检测浓度均为２．０ｎｇ·ｍｌ－１，日内、日间ＲＳＤ均小于１０％，血浆在１２．５ｎｇ·ｍｌ－１～４００ｎｇ·ｍｌ－１浓度范围内均呈良好的相关性，相关系数分别为ｒ＝０．９９９０和ｒ＝０．９９９７，血浆中ＮＧＦ的平均回收率分别为（９５．２１±３．７０）％和（９４．３０±４．６０）％。结论：同位素示踪法与沉淀法或电泳法结合，方法稳定、可靠、灵敏度较高，两法相辅相成，适于ＮＧＦ血药浓度的测定。

关键词：神经生长因子同位素标记示踪法血药浓度

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神经生长因子的药代动力学研究

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中国药学杂志 2000年第3期35卷 181-184页

作者：姜国辉唐刚华张云陈力真王世真王树惠中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院核医学科北京100730 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所微生物免疫研究室北京100730

目的 :研究神经生长因子 (nervegrowthfactor,简称NGF)在小鼠体内的药代动力学。方法 :12 5I NGF用氯胺T法制备经静注和肌注两种途径 ,血浆中NGF的浓度采用同位素示踪结合三氯醋酸 (TCA)沉淀法或SDS PAGE电泳法 ,测定小鼠血浆NGF的浓... 详细信息

目的 :研究神经生长因子 (nervegrowthfactor,简称NGF)在小鼠体内的药代动力学。方法 :12 5I NGF用氯胺T法制备经静注和肌注两种途径 ,血浆中NGF的浓度采用同位素示踪结合三氯醋酸 (TCA)沉淀法或SDS PAGE电泳法 ,测定小鼠血浆NGF的浓度。结果 :静注12 5I NGF 2 5 μg·kg-1,电泳法测得消除半衰期t1/ 2 β为 2 .2 2 3h ,酸沉法为 2 .2 6 4h。肌注12 5I NGF75 ,2 5 ,1 0 μg·kg-1,电泳法测得消除半衰期t1/ 2 β分别为 2 .1 4 0 ,2 .331 ,3.1 73h ,酸沉法测得消除半衰期t1/ 2 β分别为 2 .480 ,2 .5 5 2 ,2 .6 42h ,达峰时间tmax为 0 .5 83h。电泳法和酸沉法测得12 5I NGF平均血浆清除率 (Cl)分别为 0 .32 1和 0 .332L·h-1·kg-1,表观分布容积 (Vd)为 1 .2 5 9和 1 .31 5L·kg-1,体内平均滞留时间 (MRT)为 3.5 92和 3.5 39h。结论 :NGF在体内消除半衰期较短。本研究为今后的临床应用提供了必要的参考资料。

关键词：神经生长因子药代动力学小鼠 NGF

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小鼠红细胞分化相关因子cDNA片段的克隆与分析

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中国医学科学院学报 1999年第2期21卷 94-98页

作者：刘世广章正琰张世馥马静唐文章静波薛社普中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所细胞生物室

目的克隆与小鼠红细胞终末分化相关因子的基因，并对其表达特性进行分析。方法用致贫血Ｆｒｉｅｎｄ病毒（ＦＶＡ）诱导ＢＡＬＢ／ｃ小鼠脾脏产生大量ＦＶＡ原红细胞，后者经分离纯化并在促红细胞生成素作用下进行体外培养。采用减除杂... 详细信息

目的克隆与小鼠红细胞终末分化相关因子的基因，并对其表达特性进行分析。方法用致贫血Ｆｒｉｅｎｄ病毒（ＦＶＡ）诱导ＢＡＬＢ／ｃ小鼠脾脏产生大量ＦＶＡ原红细胞，后者经分离纯化并在促红细胞生成素作用下进行体外培养。采用减除杂交与ＰＣＲ相结合的方法，用未经培养的ＦＶＡ诱导的原红细胞（０ｈＦＶＡ原红细胞）的ｃＤＮＡ对培养３６ｈ的ＦＶＡ诱导的成红细胞（３６ｈＦＶＡ成红细胞）的ｃＤＮＡ进行多次减除杂交和ＰＣＲ扩增，构建上述３６ｈｃＤＮＡ的质粒减除文库并进行差异筛选。对阳性克隆进行核苷酸序列测定及Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹分析。结果获得１个４７２ｂｐ的ｃＤＮＡ片段，其中含有１个３０９ｂｐ的开放阅读框架，编码１０２个氨基酸。经ＧｅｎＢａｎｋ进行同源比较，未发现同源序列，已被ＧｅｎＢａｎｋ接受，（编号ＡＡ１１４３６９）。Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹分析表明，该ｃＤＮＡ在培养３６ｈ的ＦＶＡ中、晚幼红细胞中呈差异表达，其ｍＲＮＡ全长约为５００～６００ｂｐ左右。将其暂命名为小鼠红细胞分化相关因子（ＭＥＤＲＦ）基因。结论ＭＥＤＲＦ基因在红细胞分化的中、晚幼阶段特异表达，表明ＭＥＤＲＦ是一个新的与红细胞终末分化相关的因子。

关键词：红细胞分化细胞分化 cDNA 克隆相关因子

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修饰后中国山东地方株HPV16 E6E7基因的转化活性检测及免疫原性研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2002年第4期22卷 427-432页

作者：许雪梅张明策罗利群刘晓娟朱明昭司静懿郭秀婵宋国兴中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所生物物理室中国医学科学院中国协和医科大学肿瘤研究所免疫室中国医学科学院中国协和医科大学预防医学科学院病毒所

目的　利用突变修饰后消除转化活性并保留抗原性的中国山东地方株人乳头瘤病毒16型 (HPV16 )E6E7基因 ,研制HPV16DNA疫苗。方法　定点突变E6的终止密码 ,并保证E7读码框架不变 ;定点突变E7蛋白的Rb结合区中对其转化活性维持起关键作用的... 详细信息

目的　利用突变修饰后消除转化活性并保留抗原性的中国山东地方株人乳头瘤病毒16型 (HPV16 )E6E7基因 ,研制HPV16DNA疫苗。方法　定点突变E6的终止密码 ,并保证E7读码框架不变 ;定点突变E7蛋白的Rb结合区中对其转化活性维持起关键作用的第 2 4位氨基酸。突变修饰后的基因命名为fmE6E7。PCR扩增fmE6E7,重组入pLNCX载体 ,脂质体法转染 3T3细胞 ,免疫荧光组织化学及Westernblot检测转染细胞蛋白的表达。经软琼脂集落培养法和BALB c裸鼠皮下接种法检测fmE6E7的转化活性。然后PCR扩增fmE6E7,构建pVR10 12 fmE6E7真核表达质粒 ,于C5 7BL 6小鼠肌肉内直接进行裸DNA免疫 ,51 Cr释放法体外分析免疫鼠的细胞毒性T淋巴细胞活性 ,间接ELISA法检测免疫鼠血清中E7特异性抗体。结果　测序证实获得了预期的突变结果。pLNCX fmE6E7转染细胞体外软琼脂培养 3周未见集落形成 ;裸鼠皮下接种 2月后未见移植瘤形成 (0 3)。免疫鼠获得了较好的E7特异性的抗体E和抗原特异性的CTL。结论　修饰后E6E7基因可融合表达 ,转化活性消除的同时还可诱发特异的细胞免疫和体液免疫 ,表明中国山东地方株的E6E7基因可作为HPV16治疗性DNA疫苗的靶基因。

关键词：免疫原性人乳头瘤病毒16型 E6基因 E7基因 DNA疫苗细胞毒性T淋巴细胞宫颈癌

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关节软骨的细胞凋亡

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中国医学科学院学报 2000年第4期22卷 364-367页

作者：陈延文王艾琳周建平邱贵兴章静波中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所细胞生物室北京100005

目的　观察正常及关节炎时关节软骨是否发生细胞凋亡及其可能的意义。方法　采用光镜、电镜观察软骨细胞形态 ,以琼脂糖凝胶电泳检测软骨细胞特异 DNA的梯形带 ,以激光共聚焦显微镜观察细胞内 [Ca2 + ]i动态变化。结果　骨性关节炎及风... 详细信息

目的　观察正常及关节炎时关节软骨是否发生细胞凋亡及其可能的意义。方法　采用光镜、电镜观察软骨细胞形态 ,以琼脂糖凝胶电泳检测软骨细胞特异 DNA的梯形带 ,以激光共聚焦显微镜观察细胞内 [Ca2 + ]i动态变化。结果　骨性关节炎及风湿性关节炎患者的关节软骨细胞经体外培养 3d后 ,光镜及电镜下均可见处于正常分化期的软骨细胞 ,而未经培养直接分离的部分软骨细胞可见细胞凋亡早期形态学改变。此外 ,体外培养的牛正常软骨细胞在白细胞介素 - 1(IL - 1)、肿瘤坏死因子 -α(TNF-α)作用下出现细胞凋亡现象。凋亡细胞内 [Ca2 + ]i呈现双峰现象。结论　正常关节软骨、骨性关节炎及风湿性关节炎的关节软骨中均有细胞凋亡发生。 IL - 1、TNF-α能促进关节软骨细胞发生凋亡 ;细胞凋亡时细胞内 [Ca2 + ]i明显升高。

关键词：软骨细胞细胞凋亡关节软骨关节炎

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细胞生物学

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中华医学杂志 2002年第24期82卷 1722-1724页

作者：章静波狄凯军中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所细胞生物室北京100005

自1998年Thomson等成功地从人胚泡培养成功胚胎干细胞(embryonic stem cell)以及Gearhart从人胚胎生殖嵴的原始生殖细胞中分离和培养多能性(pluripotency)干细胞之后，人们立即认识到干细胞生物技术具有的特殊科学意义和临床应用前景，... 详细信息

自1998年Thomson等成功地从人胚泡培养成功胚胎干细胞(embryonic stem cell)以及Gearhart从人胚胎生殖嵴的原始生殖细胞中分离和培养多能性(pluripotency)干细胞之后，人们立即认识到干细胞生物技术具有的特殊科学意义和临床应用前景，并且很快成为生命科学研究的热点以及细胞生物学最主要的课题。《Science》连续2年将其评为最重要的研究进展之一，而且排在基因组研究之前。干细胞的概念由来已久，是指存在于胚胎、胎儿和成年动物组织，终生具有多种分化潜能和自我更新能力的细胞。

关键词：细胞生物学神经干细胞血液干细胞

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棉酚作为安全有效和可逆男用节育药的一线新曙光——低剂量棉酚组合甾体激素用药抗生育作用

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中国医学科学院学报 2000年第3期22卷 211-213页

作者：薛社普中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所细胞生物室北京100005

介绍和评述本期 2篇研究论文所取得的进展。该研究针对影响棉酚成为广泛应用的男性节育药的不可逆性不育和低血钾症毒副作用 ,采用一种新的用药方案 ,即以低剂量棉酚 (12 mg· kg- 1 · d- 1 )合并甾体激素 (甲基睾丸素 2 0 mg&... 详细信息

介绍和评述本期 2篇研究论文所取得的进展。该研究针对影响棉酚成为广泛应用的男性节育药的不可逆性不育和低血钾症毒副作用 ,采用一种新的用药方案 ,即以低剂量棉酚 (12 mg· kg- 1 · d- 1 )合并甾体激素 (甲基睾丸素 2 0 mg· kg- 1 · d- 1 和炔雌醇 10 0 μg· kg- 1 · d- 1 )服药 6周 ,作为起始剂量 ;然后 ,用同上单独低剂量棉酚作为维持剂量 ,连服 12周。结果可见服药大鼠在 6周内附睾精子被杀伤而起效不育。维持量可维持不育 ,未见产生不可逆性不育和血钾水平异常现象 ,脏器组织正常。停药 6周后全部恢复生育力。男性志愿者服低剂量棉酚 (15mg/d)后在 12周达到不育 ,改服维持量 (10 m g/d) 4 4周可维持不育并未出现低血钾症 ;停药 10周后 ,生育力和所导致的组蛋白 -精核蛋白取代反应 (HPRR)异常现象全部恢复。这些结果为组织进行低剂量棉酚合并甾体激素的临床新用药方案的试用及其作为安全可逆男用节育药的可能性提供了前景。

关键词：棉酚男用节育药安全性可逆性不育甾体激素

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补体活化与中性粒细胞产生活性氧之间的反馈调节作用

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中国医学科学院学报 1999年第3期21卷 170-174页

作者：范欣荣凌允礼吴元德侯健存中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所病理研究室

目的在试管实验中证明补体系统的活化与中性粒细胞产生的活性氧间存在相互作用的反馈关系。方法用菊糖活化的补体作用于中性粒细胞产生活性氧，并进一步通过测定吸光度以观察补体进一步活化情况。用佛波醇肉豆蔻醋酸酯激发中性粒细胞产... 详细信息

目的在试管实验中证明补体系统的活化与中性粒细胞产生的活性氧间存在相互作用的反馈关系。方法用菊糖活化的补体作用于中性粒细胞产生活性氧，并进一步通过测定吸光度以观察补体进一步活化情况。用佛波醇肉豆蔻醋酸酯激发中性粒细胞产生的活性氧作用于补体，并进一步采用发光测定仪测定活性氧来观察活化的补体对中性粒细胞释放活性氧的促进作用。结果试管实验证明活化的补体能刺激中性粒细胞产生活性氧，而活性氧又能进一步活化补体。结论补体和中性粒细胞产生的活性氧两者间存在着相互活化的反馈调节作用。从而推测炎症过程中补体活化在炎症反应的产生中起主要作用，而在炎症反应的持续过程中，此两者起互相促进的反馈调节作用。

关键词：补体中性粒细胞活性氧反馈调节

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红细胞分化去核因子在诱导小鼠红白血病细胞分化以及恶性逆转中的作用

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中国医学科学院学报 2001年第1期23卷 32-35,F003页

作者：赵青葛晔华周建平马静陈克铨薛社普韩代书中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所细胞生物室北京100005

研究小鼠红细胞分化去核分化因子 (MEDDF)在红细胞终末分化中的功能。方法构建在真核细胞中表达的重组质粒 pcDNA- MEDDF，用其转染小鼠红白血病细胞系 (MEL)。通过分析细胞的生长曲线、分裂指数及在半固体培养基中的集落形成率比较细... 详细信息

研究小鼠红细胞分化去核分化因子 (MEDDF)在红细胞终末分化中的功能。方法构建在真核细胞中表达的重组质粒 pcDNA- MEDDF，用其转染小鼠红白血病细胞系 (MEL)。通过分析细胞的生长曲线、分裂指数及在半固体培养基中的集落形成率比较细胞的生长特性，采用 RT- PCR检测 c- myc及β-珠蛋白 (β- globin)基因的表达。结果转染 pcDNA- MEDDF与转染空载体 (pcDNA3.1)的细胞相比较，细胞的增殖率减慢、分裂指数降低、在半固体培养基中形成集落的数量减少。转染细胞的联苯胺阳性率达 32.8％。用 RT- PCR检测发现，转染细胞β-珠蛋白的表达量上升了 3.43倍， c- myc表达量下降了 66.3％。结论 MEDDF能使小鼠红白血病细胞分化并抑制其恶性变。

关键词：小鼠红细胞分化去核因子红细胞分化红白血病

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红细胞分化去核因子:哺乳类红细胞终末分化/肿瘤抑制的调节因子家族及其相关基因的克隆

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中国医学科学院学报 2000年第4期22卷 371-375页

作者：薛社普刘友华张世馥马文丽王鑫费仁仁杜权章正琰章静波陈克铨周建平马静韩代书中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所细胞生物室北京100005

本文报道哺乳类红细胞终末分化去核因子 (EDDF)调控恶性骨髓瘤细胞的分化以及与 EDDF相关的基因克隆的系列研究结果。以不同分化期哺乳类红细胞为研究对象 ,观察红细胞自然排核前后的细胞形态变化和与之互为对应的物质代谢的改变 ,分析 ... 详细信息

本文报道哺乳类红细胞终末分化去核因子 (EDDF)调控恶性骨髓瘤细胞的分化以及与 EDDF相关的基因克隆的系列研究结果。以不同分化期哺乳类红细胞为研究对象 ,观察红细胞自然排核前后的细胞形态变化和与之互为对应的物质代谢的改变 ,分析 EDDF与终末分化、核浓缩及自然排核的可能关系 ;用自建的红细胞胞质体杂交模型 ,分别对红白血病和非红系的骨髓瘤细胞进行同种和异种的细胞杂交实验以验证 EDDF的作用规律。结果表明 ,哺乳类红细胞在终末分化不同阶段存在时相相关的分化去核因子家族。这些因子可调控不同分化阶段相关基因的活动 ,且呈时序性出现 ,与血红蛋白表达、细胞核停止分裂转向分化、核偏位、核浓 (固 )缩和自然去核等终末分化特征呈现明显的因果关系。 EDDF活性蛋白可逆转体外培养的肿瘤细胞系 (MEL,K5 6 2 )的恶性生长及诱导终末分化。在上述基础上分别采用不同的分离、提纯及基因克隆路线 ,从人和小鼠红细胞中连续克隆到 5种分化相关基因家族 (MEDDF,HEDDF- 1,HEDRF- 1,HEDRF- 2 ,HCNBP- 1)及其全长序列 ,并经 Gen Bank证实 ,它们均为无同源的新基因序列。

关键词：终末分化红细胞分化去核因子调控基因克隆

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