检索结果-内蒙古大学图书馆

基础医学与临床 2007年第7期27卷 834-840页

作者：王岩中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所北京100005

指数富集配基的系统进化(SELEX)技术是一类新的组合化学技术,应用人工合成的随机寡核苷酸文库,通过筛选、分离、富集获得能与各种配体特异结合的寡核苷酸适配子(Aptamer),且具有高亲和力。目前涉及多种疾病治疗的适配子,包括感染性疾病... 详细信息

指数富集配基的系统进化(SELEX)技术是一类新的组合化学技术,应用人工合成的随机寡核苷酸文库,通过筛选、分离、富集获得能与各种配体特异结合的寡核苷酸适配子(Aptamer),且具有高亲和力。目前涉及多种疾病治疗的适配子,包括感染性疾病,肿瘤,心血管疾病,免疫系统疾病等已被筛选出来,并且疗效已经通过体外实验或动物模型得到证实。两个适配子已进入药物III期临床实验阶段,还有很多适配子正处于预临床实验阶段,其中部分将很快进入临床实验。本文综述了SELEX技术及寡核苷酸适配子在治疗领域的最新进展,并且对其前景进行了分析和预测。

关键词： SELEX 适配子寡核苷酸配体文库

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内质网应激介导的细胞凋亡

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生物化学与生物物理进展 2007年第11期34卷 1136-1141页

作者：关丽英许彩民潘华珍中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所生物化学与分子生物学国家重点实验室北京100005

内质网是细胞内重要的细胞器,内质网功能的损伤引起ER应激(ERS).内质网通过激活未折叠蛋白质反应(UPR)以保护由内质网应激所引起的细胞损伤,恢复细胞功能,包括暂停早期蛋白质合成、内质网分子伴侣和折叠酶的转录激活、内质网相关性降解(... 详细信息

内质网是细胞内重要的细胞器,内质网功能的损伤引起ER应激(ERS).内质网通过激活未折叠蛋白质反应(UPR)以保护由内质网应激所引起的细胞损伤,恢复细胞功能,包括暂停早期蛋白质合成、内质网分子伴侣和折叠酶的转录激活、内质网相关性降解(ERAD)的诱导.长期过强的内质网应激诱导内质网相关性细胞凋亡,清除受损细胞,包括内质网应激诱导CHOP/GADD153表达、JNK的激活以及caspase-12蛋白水解酶的活化等一系列生物学效应.

关键词：内质网应激未折叠蛋白响应细胞凋亡

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高表达人淀粉样前体蛋白降低SH-SY5Y细胞M胆碱受体结合

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基础医学与临床 2007年第12期27卷 1334-1338页

作者：阮灿军王抒孙兰杜冠华中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所药理室北京100005 中国医学科学院中国协和医科大学药物研究所北京100050

目的观察阿尔茨海默病致病相关基因淀粉样前体蛋白（APP）基因的高表达致高度生成，对人神经母细胞瘤SH-SYSY细胞的胆碱乙酰转移酶（CHAT）活性及M和N胆碱受体功能的影响，探讨β-淀粉样肽（Aβ）生成增加对细胞胆碱功能的作用。方法采... 详细信息

目的观察阿尔茨海默病致病相关基因淀粉样前体蛋白（APP）基因的高表达致高度生成，对人神经母细胞瘤SH-SYSY细胞的胆碱乙酰转移酶（CHAT）活性及M和N胆碱受体功能的影响，探讨β-淀粉样肽（Aβ）生成增加对细胞胆碱功能的作用。方法采用Lipofectamine2000试剂盒将携带野生型人APP基因的pCMV695质粒转染至人神经母细胞瘤SH-SYSY细胞中。以ELISA方法测定Aβ生成量。取稳定高表达Aβ细胞的克隆，用放射免疫法测定ChAT的活性；放射配基结合测定M、N乙酰胆碱受体结合。结果与未转染APP的SH-SYSY细胞相比，当Aβ生成量为对照的2—2．6倍时，SH-SYSY-APP细胞中未观察到明确的细胞毒性形态学改变；ChAT活性无明显变化，但细胞M受体结合降低18．5％-21．8％（P〈0．05）；N受体结合未出现明显变化。结论单纯Aβ产生增加就可通过影响M受体结合功能而引起脑内胆碱能功能障碍。

关键词：阿尔茨海默病淀粉样前体蛋白 β-淀粉样肽胆碱能受体

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幼年起病的2例晚发型糖原贮积症Ⅱ型/Pompe病临床和基因分析

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中华儿科杂志 2007年第10期45卷 760-764页

作者：仇佳晶魏珉张为民施惠平中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院儿科 100730 中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院中心实验室 100730 中国医学科学院基础医学研究所

目的对中国大陆地区幼年起病的晚发型糖原贮积症Ⅱ型(GSDⅡ,Pompe 病)患者进行临床和基因突变分析。方法对2例幼年起病的 Pompe 病患儿进行临床分析,提取患儿皮肤成纤维细胞及其父母的外周血 DNA,应用聚合酶链反应(PCR)扩增α-1,4-葡萄... 详细信息

目的对中国大陆地区幼年起病的晚发型糖原贮积症Ⅱ型(GSDⅡ,Pompe 病)患者进行临床和基因突变分析。方法对2例幼年起病的 Pompe 病患儿进行临床分析,提取患儿皮肤成纤维细胞及其父母的外周血 DNA,应用聚合酶链反应(PCR)扩增α-1,4-葡萄糖苷酶的19个外显子,测序,进行突变检测。同时对50例健康对照100个等位基因进行15号外显子的 PCR 扩增,测序,确定突变特征。结果 1例临床表现为进行性近端肌肉无力,肌张力低下;1例表现为肌容积减少,呼吸肌受累;2例均有肌酸磷酸肌酶升高,肌电图提示肌源性损害,肌活检呈空泡性改变,皮肤成纤维细胞α-1,4-葡萄糖苷酶活性测定明显低下。突变检测:测序发现4个杂合错义突变,例1为 c796 C>T,p.266Pro>Ser;c2105 G>A,p.702Arg>His;例2为 c2132 C>G,p.711Thr>Arg;c2167 G>A,p.723Val>Met。其中后3个为新突变,50例健康对照100个等位基因测序未发现同样突变。结论幼年起病的 Pompe 病患儿临床表现存在差异,呼吸肌受累情况影响其预后;检测到3个错义新突变,可能为致病突变。

关键词：糖原贮积病,Ⅱ型葡聚糖1,4-α-葡糖苷酶外显子突变

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人胚胎肝细胞的体外培养及表型观察

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基础医学与临床 2007年第4期27卷 386-390页

作者：杨帆王春景苏小玲顾蓓张宏刘玉琴中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所北京100005

目的观察体外培养的人胚胎肝细胞的特性。方法采用胰酶分步消化法体外分离人胚胎肝细胞,在培养的不同代数,收集培养上清液测定甲胎蛋白、白蛋白及5种特异性酶(ALT、AST、GGT、ALP、LDH)的分泌量,用免疫组化法测定细胞内细胞色素C的表达... 详细信息

目的观察体外培养的人胚胎肝细胞的特性。方法采用胰酶分步消化法体外分离人胚胎肝细胞,在培养的不同代数,收集培养上清液测定甲胎蛋白、白蛋白及5种特异性酶(ALT、AST、GGT、ALP、LDH)的分泌量,用免疫组化法测定细胞内细胞色素C的表达情况。观察诱导分化剂丁酸钠对该细胞的作用效果。结果体外分离培养的肝细胞在DMEM培养基中呈单层多边形上皮样生长,常规传代可维持约5个半月(30代),在传代过程中具有分泌白蛋白及5种特异性酶的生理功能。结论建立的人胚胎肝细胞系,保持了肝细胞的表型及分泌多种特异性酶。

关键词：细胞培养肝细胞胚胎丁酸钠

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医学发展的未来:从基因组学到整合医学

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中华医学杂志 2007年第27期87卷 1873-1875页

作者：叶建伟张勇徐苓朱大海中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005 中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院协和医院妇产科北京100005

综观20世纪生命科学发展，从宏观向微观、由表型到机制的探求是其重要特征。以还原论为基础的经典结构生物学、分子生物学与细胞生物学的研究极大地增进了人们对生命本质的理解。人类基因组计划（HGP）完成后，生命科学研究进入到“功... 详细信息

综观20世纪生命科学发展，从宏观向微观、由表型到机制的探求是其重要特征。以还原论为基础的经典结构生物学、分子生物学与细胞生物学的研究极大地增进了人们对生命本质的理解。人类基因组计划（HGP）完成后，生命科学研究进入到“功能基因组学”研究时代，转录组学、蛋白质组学、代谢组学开始迅速发展，生命科学的研究方法不再局限于以还原论为指导的微观拆分，

关键词：功能基因组学整合医学医学发展人类基因组计划生命科学结构生物学细胞生物学分子生物学

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与鼻咽癌细胞CNE-2L2恶性生物学行为相关的蛋白质

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基础医学与临床 2007年第4期27卷 364-371页

作者：周异群时岩田云鞠吉雨陈双玲刘音朱立平中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所免疫学系北京100005

目的寻找与人鼻咽癌细胞CNE-2L2恶性生物学行为相关的蛋白质。方法用蛋白质组学分析高(W)和低(AS)恶性生物学行为的CNE-2L2细胞间蛋白质表达的差异,用实时定量PCR和免疫荧光染色流式细胞术对差异表达的蛋白质做确认,用siRNA抑制细胞中... 详细信息

目的寻找与人鼻咽癌细胞CNE-2L2恶性生物学行为相关的蛋白质。方法用蛋白质组学分析高(W)和低(AS)恶性生物学行为的CNE-2L2细胞间蛋白质表达的差异,用实时定量PCR和免疫荧光染色流式细胞术对差异表达的蛋白质做确认,用siRNA抑制细胞中目的基因的表达,Western blot确认目的基因表达的抑制,细胞接种裸鼠的肿瘤生长实验。结果MOLDI-TOF MS分析见12个明显的差异表达蛋白质点。它们是:抗氧化蛋白Peroxiredoxin 2,异构型b;原肌蛋白3;II型TPM4-ALK融合癌蛋白;MLL蛋白;CD44;视网膜母细胞结合蛋白7;微管蛋白,β多肽;ATP合成酶,转H+作用的线粒体F1复合物,β多肽;波形蛋白;D21S2056E蛋白;蛋白酶体(prosome,macropain)26S subunit,non-ATPase,4;ENO1蛋白。前4个在AS细胞高表达,后8个在AS细胞低表达。对积分最高的7个蛋白质的差异表达做了肯定的验证。用siCD44抑制W细胞的CD44表达后,细胞接种裸鼠的成瘤性生长明显抑制。结论蛋白质组学分析见AS细胞与W细胞间有12个差异表达蛋白质,CD44表达减弱与AS细胞的恶性行为减弱相关。

关键词：蛋白质组学鼻咽癌细胞恶性行为 CD44

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伯氏疟原虫pbmag-1基因片段克隆及原核表达优化

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2007年第4期25卷 314-319页

作者：高宇辉王恒中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所病原系分子寄生虫学实验室北京100005

目的克隆并表达伯氏疟原虫pbmag-1基因cDNA片段。方法在GenBank中检索伯氏疟原虫编码基因pbmag-1部分cDNA序列,设计特异引物,经RT-PCR从伯氏疟原虫ANKA株扩增出该基因的部分cDNA片段。以锚定OligodT引物反转录mRNA获得的cDNA为模板,利... 详细信息

目的克隆并表达伯氏疟原虫pbmag-1基因cDNA片段。方法在GenBank中检索伯氏疟原虫编码基因pbmag-1部分cDNA序列,设计特异引物,经RT-PCR从伯氏疟原虫ANKA株扩增出该基因的部分cDNA片段。以锚定OligodT引物反转录mRNA获得的cDNA为模板,利用已知序列设计特异引物,通过cDNA末端快速扩增(RACE)技术延伸pbmag-13′端未知的编码序列,并将其克隆于原核表达载体后转入大肠埃希菌(***)BL21-(DE3)-RIL株,经优化诱导条件,表达了重组蛋白PbMAg-1并用其免疫小鼠。结果获得1341bp具有完整3′末端序列的pbmag-1基因片段,其A/T含量为73%。以包涵体形式表达的重组蛋白免疫小鼠,其血清抗体经蛋白质印迹(Western blotting)分析,能特异性地识别伯氏疟原虫感染红细胞相对分子质量约为Mr64000的蛋白。结论获得重组蛋白PbMAg-1的3′端完整的pbmag-1基因cDNA片段,为研究伯氏疟原虫PbMAg-1蛋白在鼠疟免疫反应中的作用奠定了实验基础。

关键词： pbmag-1 伯氏疟原虫基因克隆原核表达

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加巴喷丁对神经病理性疼痛小鼠脑皮层组织内差异表达基因的影响

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基础医学与临床 2007年第6期27卷 652-655页

作者：陈绍辉赵晶罗爱伦黄宇光左萍萍杨楠郝文宇中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院麻醉科北京100730 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所药理室北京100005

目的观察加巴喷丁对神经病理性疼痛小鼠脑皮层基因表达差异的影响。方法120只小鼠随机分为对照(C)、假手术(S)和模型(M)组,各组再按不同给药分为生理盐水(P)和加巴喷丁(G)两个亚组(最终分为C+P、C+G、S+P、S+G、M+P、M+G六组)。部分坐... 详细信息

目的观察加巴喷丁对神经病理性疼痛小鼠脑皮层基因表达差异的影响。方法120只小鼠随机分为对照(C)、假手术(S)和模型(M)组,各组再按不同给药分为生理盐水(P)和加巴喷丁(G)两个亚组(最终分为C+P、C+G、S+P、S+G、M+P、M+G六组)。部分坐骨神经结扎2周后开始腹腔给药,给药4周后留取大脑皮层。通过手术侧足行为学和机械痛阈的改变来确认神经病理性疼痛模型成功及观察加巴喷丁的疗效。选择S+P、M+P和M+G三组做基因表达差异检测,并用实时PCR验证部分表达有显著差异的基因。结果M+P和S+P相比较,脑源性神经生长因子、神经肽Y、Pleiotrophin等基因显著下调。M+G和M+P相比较,上述基因显著上调。结论加巴喷丁镇痛的脑机制可能与脑源性神经生长因子、神经肽Y、Pleiotrophin等基因的上调有关。

关键词：神经病理性疼痛加巴喷丁脑源性神经生长因子神经肽Y pleiotrophin

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猪眼小梁组织眼前节灌流培养和组织块培养

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基础医学与临床 2007年第6期27卷 690-692页

作者：周崎刘玉琴赵家良张华中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院眼科北京100730 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所细胞中心北京100005

目的了解猪眼小梁组织的灌流眼前节培养和组织块培养在青光眼研究中的应用。方法采用恒速眼前节灌流培养和组织块培养法培养猪眼小梁组织，用光学显微镜观察不同培养方法保存的小梁组织的状态。结果恒速（0．1mL／h）灌流猪眼前节，眼... 详细信息

目的了解猪眼小梁组织的灌流眼前节培养和组织块培养在青光眼研究中的应用。方法采用恒速眼前节灌流培养和组织块培养法培养猪眼小梁组织，用光学显微镜观察不同培养方法保存的小梁组织的状态。结果恒速（0．1mL／h）灌流猪眼前节，眼压可以稳定在正常眼压范围（10～12mmHg）；在一定范围内，随着流速增加眼压能逐步升高。灌流培养的组织大体形态保留完好，组织层次清晰，细胞状态好。组织块原位培养的小梁组织，周边组织结构保留完好，细胞状态尚可，但是小梁网间隙不如灌流培养的小梁网间隙饱满。结论灌流眼前节培养法可作为短期高眼压模型，更接近小梁网的生理状态，小梁网的正常充盈是维持其功能和结构的必要条件。

关键词：眼小梁网组织灌流眼前节组织块培养

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