检索结果-内蒙古大学图书馆

中国医学科学院学报 1999年第4期21卷 262-267页

作者：方芳曹清宋福津刘景生中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所药理室北京100005

目的　探讨吗啡长时作用下分化的人成神经瘤ＳＨＳＹ５Ｙ细胞中ｃＡＭＰ系统变化以及ＰＫＡ对转录因子ｃＦｏｓ的磷酸化调节。方法　采用蛋白竞争结合法、酶活性测定法及同位素掺入法分别观察ｃＡＭＰ、ＰＫＡ及ｃＦｏｓ的变化... 详细信息

目的　探讨吗啡长时作用下分化的人成神经瘤ＳＨＳＹ５Ｙ细胞中ｃＡＭＰ系统变化以及ＰＫＡ对转录因子ｃＦｏｓ的磷酸化调节。方法　采用蛋白竞争结合法、酶活性测定法及同位素掺入法分别观察ｃＡＭＰ、ＰＫＡ及ｃＦｏｓ的变化。结果　（１）１００μｍｏｌ／Ｌ吗啡作用２ｍｉｎ～３６ｈ可使ＳＨＳＹ５Ｙ细胞ｃＡＭＰ水平呈双相变化：短时作用下ｃＡＭＰ水平降低，随着吗啡作用时间的延长，ｃＡＭＰ水平逐渐回升，至３６ｈ时明显高于对照，这时加入１００ μｍｏｌ／Ｌ纳洛酮可诱发ｃＡＭＰ水平的反弹性超高现象。表明吗啡作用３６ｈ可使分化的ＳＨＳＹ５Ｙ细胞产生类吗啡依赖样变化；（２）吗啡长时作用下，胞质可溶相ＰＫＡ活性也呈双相变化，而膜相ＰＫＡ活性未见明显变化；（３）吗啡作用３６ｈ时，细胞ｃＦｏｓ磷酸化水平显著降低，ＰＫＡ抑制剂可抑制此作用；（４）纳洛酮可抑制上述ＰＫＡ活性及ｃＦｏｓ磷酸化水平的改变。结论　ＳＨＳＹ５Ｙ细胞ｃＡＭＰＰＫＡ系统的上调可能与吗啡依赖的形成有关，而且在吗啡依赖样细胞中ＰＫＡ可能通过磷酸酶而使细胞ｃＦｏｓ发生去磷酸化，从而激活某些基因的转录。

关键词：吗啡蛋白激酶A c-Fos磷酸化 cAMP 吗啡依赖

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Cholinergic receptor activity after quinolinic acid caused cerebral injury in rats

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Chinese Medical Journal 2002年第8期115卷 1175-1178页

作者：左萍萍雒蓬轶刘雁勇中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所北京100005

目的研究中枢胆碱能神经系统功能引起的外周淋巴系统变化,为临床诊断治疗提供参考指标.方法采用大鼠脑室内微量反复注射喹啉酸(quinolinic acid,QA)造成的学习记忆障碍模型和自然衰老大鼠,测定其学习记忆功能和脑内胆碱能神经系统的变化... 详细信息

目的研究中枢胆碱能神经系统功能引起的外周淋巴系统变化,为临床诊断治疗提供参考指标.方法采用大鼠脑室内微量反复注射喹啉酸(quinolinic acid,QA)造成的学习记忆障碍模型和自然衰老大鼠,测定其学习记忆功能和脑内胆碱能神经系统的变化.结果 QA模型的学习记忆能力明显受损,脑内胆碱能神经标志酶ChAT活性明显下降.脑海马、大脑皮层胆碱能毒蕈碱受体(MR)结合活性分别降低30%和26%;烟碱受体(NR)结合活性分别降低33%和27%,并较老年鼠明显.进一步发现,各组外周脾淋巴细胞膜胆碱能受体活性的改变与脑内变化一致.结论提示外周生物学指标可能间接反映中枢神经功能的变化而成为诊断某些脑疾患的重要参考.

关键词：喹啉酸脑损伤胆碱能受体淋巴细胞阿尔海默氏病学习记忆

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oxLDL对转入apoA1基因小鼠动脉平滑肌细胞胆固醇提取和清除的影响

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Chinese Medical Journal 2002年第4期115卷 584-588页

作者：曾莹赵高峰等中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所，北京100005

目的：探讨①oxLDL对转入apoAlC57BL/6小鼠主动脉SMC(trSMC)胆固醇清除与摄取的影响，以衡量转入的apoA1基因是否有助于减轻oxLDL引起的SMC胆固醇积聚；②oxLDL刺激下，转入的apoAI基因的表达状况，以探知在致病的环境下，所转入的基因... 详细信息

目的：探讨①oxLDL对转入apoAlC57BL/6小鼠主动脉SMC(trSMC)胆固醇清除与摄取的影响，以衡量转入的apoA1基因是否有助于减轻oxLDL引起的SMC胆固醇积聚；②oxLDL刺激下，转入的apoAI基因的表达状况，以探知在致病的环境下，所转入的基因是否能增加表达，提高抗病能力。方法：①用已建立的含小鼠金属硫蛋白I(MT-I)启动子的人apoAI转基因C57BL/6小鼠主动脉SMC，通过^3H-胆固醇标记率和清除率测定，观察oxLDL对trSMC胆固醇摄取与清除的影响。②通过RT-PCR及Northern blot技术检测oxLDL对trSMC基因表达的影响。结果：30μg/ml oxLDL明显促进小鼠SMC增生；未见trSMC与nSMC在标记率间的差别，oxLDL刺激后标记率增加约100％；trSMC清除率与nSMC相比，增加40％-50％；oxLDL刺激后，nSMC清除率下降28％，而trSMC下降10％；RT-PCR及Northern blot表明oxLDL刺激后trSMC基因表达明显增加。结论：转入apoA1基因小鼠SMC的基因表达有助于减轻oxLDL引起的SMC胆固醇积聚；在oxLDL刺激下，trSMC的人apoA1基因表达增加，减轻了oxLDL的致病作用。

关键词：转基因小鼠平滑肌细胞 oxLDL 载脂蛋白AI 胆固醇

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NO-cGMP信息通路在阿片类药物耐受和依赖中的调节作用

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中国药理学通报 1999年第2期15卷 106-111页

作者：臧梦维刘景生中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院药理室

ＮＯ合酶抑制剂能阻断或逆转μ、δ激动剂耐受和戒断反应，而对κ激动剂无明显作用，其药理效应类似于阿片成瘾治疗的常用药物可乐定。甲基兰抑制鸟苷酸环化酶活性，使ｃＧＭＰ生成减少，对阿片类药物耐受和戒断症状均有阻断作用，提示... 详细信息

ＮＯ合酶抑制剂能阻断或逆转μ、δ激动剂耐受和戒断反应，而对κ激动剂无明显作用，其药理效应类似于阿片成瘾治疗的常用药物可乐定。甲基兰抑制鸟苷酸环化酶活性，使ｃＧＭＰ生成减少，对阿片类药物耐受和戒断症状均有阻断作用，提示ＮＯｃＧＭＰ通路在阿片耐受和依赖发生中起重要作用，为寻找和设计治疗阿片类耐受成瘾的药物提供新的策略。

关键词：一氧化氮合酶阿片类药物阿片成瘾治疗

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河豚鱼基因组格式化粘粒文库的构建

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中国医学科学院学报 1999年第2期21卷 99-104页

作者：杨立刘山鸣张小晓周巍贾开亮戴理吴东颖高春生刘国仰杨焕明中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学遗传室

目的构建河豚鱼基因组文库，为人类基因组的研究提供资料。方法以红鳍东方豚的精子ＤＮＡ为材料，采用含有“外显子捕获”元件的粘粒（ｓＣＯＧＨ２）作为载体，构建河豚鱼的基因组粘粒文库。结果该文库共有５７６００个克隆，分别被保... 详细信息

目的构建河豚鱼基因组文库，为人类基因组的研究提供资料。方法以红鳍东方豚的精子ＤＮＡ为材料，采用含有“外显子捕获”元件的粘粒（ｓＣＯＧＨ２）作为载体，构建河豚鱼的基因组粘粒文库。结果该文库共有５７６００个克隆，分别被保存在６００块９６孔细胞培养板中，插入片段的大小平均为３５ｋｂ，相当于５．０个库容量，即从本文库中筛选到河豚鱼基因组任一单拷贝序列的机率为９９．２％。该文库能承受１０次以上的反复冻融，重组粘粒克隆在传代中仍保持高稳定性。以河豚鱼基因组ＤＮＡ为探针进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹分析，结果显示出强阳性的杂交信号。结论该文库符合粘粒文库的质量要求。

关键词：河豚鱼比较基因组学粘粒文库

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北京地区汉族人维生素D受体基因多态性分布

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中国医学科学院学报 1997年第1期19卷 18-23页

作者：赵金秀周学瀛刘国仰孟迅吾邢小平刘怀成中国医学科学院中国协和医科大学协和医院北京100730 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所

维生素D受体（VDR）基因是骨代谢遗传基础的候选基因之一。采用聚合酶链反应及限制性内切酶酶切技术和Southern杂交技术，对北京地区223名无血缘关系的健康汉族成人的VDR基因型进行分析。结果发现，中国人VDR基因多态性的分布频率以b、a... 详细信息

维生素D受体（VDR）基因是骨代谢遗传基础的候选基因之一。采用聚合酶链反应及限制性内切酶酶切技术和Southern杂交技术，对北京地区223名无血缘关系的健康汉族成人的VDR基因型进行分析。结果发现，中国人VDR基因多态性的分布频率以b、a、T等位基因为多，分别占95％、75％和95％，明显不同于高加索人种，与日本人也有一定差别，而与朝鲜人较为相似。

关键词：受体基因多态性维生素D 汉族

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修饰后中国山东地方株HPV16 E6E7基因的转化活性检测及免疫原性研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2002年第4期22卷 427-432页

作者：许雪梅张明策罗利群刘晓娟朱明昭司静懿郭秀婵宋国兴中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所生物物理室中国医学科学院中国协和医科大学肿瘤研究所免疫室中国医学科学院中国协和医科大学预防医学科学院病毒所

目的　利用突变修饰后消除转化活性并保留抗原性的中国山东地方株人乳头瘤病毒16型 (HPV16 )E6E7基因 ,研制HPV16DNA疫苗。方法　定点突变E6的终止密码 ,并保证E7读码框架不变 ;定点突变E7蛋白的Rb结合区中对其转化活性维持起关键作用的... 详细信息

目的　利用突变修饰后消除转化活性并保留抗原性的中国山东地方株人乳头瘤病毒16型 (HPV16 )E6E7基因 ,研制HPV16DNA疫苗。方法　定点突变E6的终止密码 ,并保证E7读码框架不变 ;定点突变E7蛋白的Rb结合区中对其转化活性维持起关键作用的第 2 4位氨基酸。突变修饰后的基因命名为fmE6E7。PCR扩增fmE6E7,重组入pLNCX载体 ,脂质体法转染 3T3细胞 ,免疫荧光组织化学及Westernblot检测转染细胞蛋白的表达。经软琼脂集落培养法和BALB c裸鼠皮下接种法检测fmE6E7的转化活性。然后PCR扩增fmE6E7,构建pVR10 12 fmE6E7真核表达质粒 ,于C5 7BL 6小鼠肌肉内直接进行裸DNA免疫 ,51 Cr释放法体外分析免疫鼠的细胞毒性T淋巴细胞活性 ,间接ELISA法检测免疫鼠血清中E7特异性抗体。结果　测序证实获得了预期的突变结果。pLNCX fmE6E7转染细胞体外软琼脂培养 3周未见集落形成 ;裸鼠皮下接种 2月后未见移植瘤形成 (0 3)。免疫鼠获得了较好的E7特异性的抗体E和抗原特异性的CTL。结论　修饰后E6E7基因可融合表达 ,转化活性消除的同时还可诱发特异的细胞免疫和体液免疫 ,表明中国山东地方株的E6E7基因可作为HPV16治疗性DNA疫苗的靶基因。

关键词：免疫原性人乳头瘤病毒16型 E6基因 E7基因 DNA疫苗细胞毒性T淋巴细胞宫颈癌

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冠心病患者血小板5-羟色胺_(2A)受体变化及运动试验的影响

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中国医学科学院学报 1997年第5期19卷 336-341页

作者：杨丽明林松柏庞懿许澍淮金兰斯琴中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所北京100005 中国医学科学院中国协和医科大学协和医院

比较了冠心病组和对照组血小板5-羟色胺2A受体密度，以及次极量平板运动试验对两组血小板5-羟色胺2A受体的影响，结合血浆5-羟色胺水平变化，以探讨5-羟色胺2A受体在心血管疾病血小板高反应中的作用。结果表明：血小板5-羟色胺2A受体与... 详细信息

比较了冠心病组和对照组血小板5-羟色胺2A受体密度，以及次极量平板运动试验对两组血小板5-羟色胺2A受体的影响，结合血浆5-羟色胺水平变化，以探讨5-羟色胺2A受体在心血管疾病血小板高反应中的作用。结果表明：血小板5-羟色胺2A受体与3H-酮色林特异结合具有饱和特性。安静状态下，冠心病组血小板5-羟色胺2A受体密度及血浆5-羟色胺水平均明显高于对照组，运动试验使受体密度及最大结合容量，血浆5-羟色胺水平进一步增加。对照组运动试验前后血小板5-羟色胺2A受体密度及最大结合容量，以及血浆5-羟色胺水平未见明显变化。提示血小板5-羟色胺2A受体密度增加与冠心病血小板高反应性有关，运动试验使冠心病组血小板5-羟色胺2A受体进一步增加，从而参与运动诱发的急性心肌缺血。

关键词： 5-羟色胺2A受体冠心病运动试验血小板

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热休克蛋白90β基因上游片段的转录调控活性研究

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中国医学科学院学报 1995年第4期17卷 241-249页

作者：刘巨洪吴宁华沈珝琲中国医学科学院中国协和医科大学北京基础医学研究所

以人工合成的一对寡聚核苷酸为引物和人外周血淋巴细胞λＧＥＭ－１１基因文库为模板，通过ＰＣＲ扩增并克隆了人ＨＳＰ９０β基因上游－１１０２／＋６８ｂｐ片段。将该片段删切后克隆在报告基因──萤火虫荧光素酶基因５＇上游，转染... 详细信息

以人工合成的一对寡聚核苷酸为引物和人外周血淋巴细胞λＧＥＭ－１１基因文库为模板，通过ＰＣＲ扩增并克隆了人ＨＳＰ９０β基因上游－１１０２／＋６８ｂｐ片段。将该片段删切后克隆在报告基因──萤火虫荧光素酶基因５＇上游，转染Ｊｕｒｋａｔ细胞后测定不同刺激条件下细胞裂解液中的荧光酶活性并同时测定荧光酶ｍＲＮＡ水平。结果表明，ＨＳＰ９０β基因上游片段在正常生理状态下通过启动子介导较高水平的基础转录；热休克时该片段起负调控作用，主要的负调控区位于－５５４／－１７１ｂｐ之间，删除５＇远端上游序列后报告基因对丝裂原的反应性降低。

关键词： HSP90基因基因转录调控荧光酶报告基因

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水溶液中分散的多壁碳纳米管与血液蛋白质分子的作用研究

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新型炭材料 2007年第3期22卷 218-226页

作者：孟洁杨曼王超英孔桦王睿王琛解思深许海燕中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所北京100005 中国科学院物理研究所北京100080 国家纳米中心北京100080

碳纳米管在水溶液中的稳定分散和与蛋白质分子的作用是实现其生物医学应用的重要研究内容之一。采用混合强酸结合超声处理的方法对多壁碳纳米管(MWCNTs)进行表面氧化处理,得到可以在无表面活性剂条件下稳定分散的MWCNTs水溶液。对该水... 详细信息

碳纳米管在水溶液中的稳定分散和与蛋白质分子的作用是实现其生物医学应用的重要研究内容之一。采用混合强酸结合超声处理的方法对多壁碳纳米管(MWCNTs)进行表面氧化处理,得到可以在无表面活性剂条件下稳定分散的MWCNTs水溶液。对该水溶液进行高速和超高速离心,通过扫描电镜、紫外/可见/近红外分光光度仪、激光动态光散射和X-射线光电子能谱分析等方法分别对留在水中和沉淀出来的MWCNTs进行表征。结果表明,经过氧化处理的MWCNTs表面引入了包括羧基在内的含氧基团,长度由初始的50μm变为500nm～800nm,且经过不同离心力作用下得到的上清液中MWCNTs的尺寸分布没有明显差别;MWCNTs水溶液在253nm处有与MWCNTs浓度相关的特征吸收峰,由此建立了测定水溶液中MWCNTs浓度的光谱分析方法。此外,通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺(SDS)凝胶电泳和荧光光谱分析方法研究了分散在水中的MWCNTs对单一白蛋白、单一纤维蛋白原、以及两种混合蛋白的吸附作用,探讨了聚乙二醇甲醚(PEG)修饰抑制纤维蛋白原在MWCNTs上吸附的可能性。结果表明,MWCNTs对两种单一蛋白均有吸附,对纤维蛋白原的吸附更加强烈。在双蛋白混合溶液中,MWCNTs对纤维蛋白原分子具有强烈的倾向性吸附作用。经PEG分子修饰后,MWCNTs对纤维蛋白原的吸附程度有所降低。

关键词：碳纳米管氧化分散血液蛋白质分子非特异性吸附

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