目的：Brcal(Breast cancer slJsceptibility gene)基因是世界上第一个被发现的家族性乳腺癌抑制基因，它在很多生物学过程中起非常重要的作用，包括转录的激活和抑制，细胞周期的调节，染色体重组，DNA损伤修复和中心体复制等。Brcal...
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目的：Brcal(Breast cancer slJsceptibility gene)基因是世界上第一个被发现的家族性乳腺癌抑制基因，它在很多生物学过程中起非常重要的作用，包括转录的激活和抑制，细胞周期的调节，染色体重组，DNA损伤修复和中心体复制等。Brcal的遗传突变导致高发的家族性乳腺癌。但它在DNA损伤中的作用还不是很清楚。Gadd45a是受Brcal调节的主要下游基因。它们共同维持基因组的稳定，并对肿瘤的发生发展有一定的抑制作用，然而到目前为止这一机制还不清楚。本文旨在对Brcal和Gadd45a在维持基因组稳定以及抑制肿瘤发生发展的机制进行研究。
目的 DNA 探针技术学已在基础研究中获得很大进展,而且在传染病、遗传病和肿瘤等疾病的诊断应用中有重要意义。目前,核酸杂交的分析测定系统的研究主要集中在提高分析灵敏度和非同位素两方面,为了提高灵敏度而建立一种超灵敏的非同位素...
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目的 DNA 探针技术学已在基础研究中获得很大进展,而且在传染病、遗传病和肿瘤等疾病的诊断应用中有重要意义。目前,核酸杂交的分析测定系统的研究主要集中在提高分析灵敏度和非同位素两方面,为了提高灵敏度而建立一种超灵敏的非同位素的核酸杂交测定方法楋缦翟胤9．馐奔浞直嬗夥治龇ā? 方法先用抗体包被微滴定孔,加入靶 PSA DNA 与该抗体反应。用生物素化探针与靶 PSA DNA 杂交,再通过生物素（B）与链霉亲和素（SA）的反应,将链霉亲和素标记的辣根过氧化物酶（HRP-SA）连接到杂化物上当加入含有 HO和生物素化酪胺（B-T）的 HRP 的底物溶液,二聚体形成反应,于是 B-T 就共价地结合到固相上,再加入碱性磷酸酶标记链霉亲和素（ALP-SA）,经 B 与 SA 的反应,ALP 结合到固相上。至此,实现了杂交和建立了杂交的定量关系。洗涤后,加入 ALP 的底物5-氟水杨酸磷酸酯（5-FSAP）,ALP 作用于5-FSAP, 产物为5-氟水杨酸（5-FSA）,再加发展溶液,5-FSA 与发展溶液中的 Tb 和 EDTA 形成发射高产额、长荧光寿命的5-FSA：Tb：EDTA 三元复合物,用时间分辨荧光仪直接测量荧光强度,确定待测 DNA 的量。结果靶 PSA DNA 测定的标准曲线线性范围大,大于两个数量级;灵敏度为10pmot/L（0．5fmol/孔）;当靶 DNA 为10、30和60pmol/L 时,准确度和精密度分别为77%～95%和12．9%～15．3% 结论本法是一种超灵敏的、简捷和快速的全新分析方法,有很好的应用前景。
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