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辐射研究与辐射工艺学报 2013年第1期31卷 6-9页

作者：杜利清孟爱民王月英吴红英张恒王彦刘强李德冠王小春路璐中国医学科学院中国协和医科大学放射医学研究所天津市分子核医学重点实验室天津300192

观察DHEA(17aα-D-高炔雌二醇-3-乙酯)联合137Csγ射线辐照对EC109移植小鼠肿瘤的抑制作用及放疗后对荷瘤小鼠造血系统的防护作用。将接种食管癌细胞系EC109的裸鼠按照处理方式的不同分为对照组、单照组、DHEA组和DHEA联合辐照组,给药... 详细信息

观察DHEA(17aα-D-高炔雌二醇-3-乙酯)联合137Csγ射线辐照对EC109移植小鼠肿瘤的抑制作用及放疗后对荷瘤小鼠造血系统的防护作用。将接种食管癌细胞系EC109的裸鼠按照处理方式的不同分为对照组、单照组、DHEA组和DHEA联合辐照组,给药组连续给药9 d,12 d后分别检测肿瘤抑制率、外周血细胞数、骨髓有核细胞数等指标。结果表明,DHEA组抑瘤率明显高于对照组,DHEA联合辐照组的瘤重分别低于单照组和对照组,具有统计学差异(p<0.01)。DHEA联合辐照组的红细胞、血红蛋白均高于对照组及单照组,差异有统计学意义(p<0.05)。提示DHEA联合γ射线辐照对食管癌移植小鼠肿瘤具有显著的协同抗瘤效果,DHEA对辐照后荷瘤小鼠造血系统具有一定的防护作用。

关键词：食管癌 DHEA γ射线 BALB/c-nu小鼠

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17aα-D-高炔雌二醇-3-乙酯对化疗损伤小鼠的保护作用

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药学服务与研究 2011年第6期11卷 444-446页

作者：宋娜玲孟爱民吴红英王月英贺欣李德冠中国医学科学院中国协和医科大学放射医学研究所天津市分子核医学重点实验室天津300192

目的:观察17aα-D-高炔雌二醇-3-乙酯对环磷酰胺所致不同品系小鼠损伤的保护作用。方法:对IRM-1、IRM-2小鼠连续5d每只腹腔注射低、中、高剂量(100、150、200μg/0.2ml)17aα-D-高炔雌二醇-3-乙酯,从第3天同时给予环磷酰胺100mg/kg,连续... 详细信息

目的:观察17aα-D-高炔雌二醇-3-乙酯对环磷酰胺所致不同品系小鼠损伤的保护作用。方法:对IRM-1、IRM-2小鼠连续5d每只腹腔注射低、中、高剂量(100、150、200μg/0.2ml)17aα-D-高炔雌二醇-3-乙酯,从第3天同时给予环磷酰胺100mg/kg,连续3d;阳性对照组每只腹腔注射茜草双酯2.5mg/0.2ml,连续5d给药;对照组腹腔注射等体积茶油。观察小鼠外周血白细胞、骨髓有核细胞数、内源性脾结节形成、脾指数及胸腺指数的变化。结果:17aα-D-高炔雌二醇-3-乙酯可明显减轻化疗对两品系小鼠免疫功能的抑制,使外周血白细胞、骨髓有核细胞数和脾结节显著高于对照组(P<0.05)。与阳性对照茜草双酯组比较,17aα-D-高炔雌二醇-3-乙酯中、高剂量组小鼠白细胞数量显著升高(P<0.05)。结论:17aα-D-高炔雌二醇-3-乙酯具有抗化疗损伤及刺激骨髓造血功能的作用。

关键词： 17aα-D-高炔雌二醇-3-乙酯化疗损伤预防作用环磷酰胺造血功能

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放射受体显像剂-人tumstatin的克隆表达及其鉴定

放射受体显像剂-人tumstatin的克隆表达及其鉴定

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首届全球华人辐射研究大会

作者：宋娜玲贺欣颜廷东王德芝张春明唐晓赵启仁中国医学科学院中国协和医科大学放射医学研究所天津分子核医学重点实验室天津 300192

目的人肿瘤抑素(tumstatin)可以抑制肿瘤新生血管的生成,通过用99Tcm标记tumstatin,进行肿瘤的放射受体显像,具有重要和潜在的临床应用价值.克隆tumstatin基因,重组表达tumstatin蛋白,为人tumstatin的肿瘤放射受体显像奠定基础.方法从HE... 详细信息

目的人肿瘤抑素(tumstatin)可以抑制肿瘤新生血管的生成,通过用99Tcm标记tumstatin,进行肿瘤的放射受体显像,具有重要和潜在的临床应用价值.克隆tumstatin基因,重组表达tumstatin蛋白,为人tumstatin的肿瘤放射受体显像奠定基础.方法从HEK293细胞中提取总RNA,通过RT-PCR扩增tumstatin cDNA,导入克隆载体pMD19-T,再转化*** DH5 α,挑选阳性克隆,测定基因序列.然后双酶切克隆载体目的基因,插入原核表达载体pET28a中,转化*** BL21(DE3),IPTG诱导重组蛋白的表达,并对表达产物进行SDS-PAGE分析,western blot进行鉴定,通过MTT法检测tumstatin对卵巢癌细胞系ES-2增殖的影响.结果提取的RNA经电泳有明显的28S,18S,5S三条带,且28S,18S亮度之比约为2∶***-PCR扩增产物经琼脂糖电泳与理论值750bp相一致.酶切鉴定和DNA测序证实tumstatin基因正确地插入表达载体中,序列100％正确.重组tumstatin在大肠杆菌中获得高效表达,其分子量约为29kD,表达量约占菌体总蛋白量的30％.通过MTT实验,证实了其具有抑制肿瘤细胞生长的生物学活性.结论 tumstatin基因原核表达载体成功的构建和重组人tumstatin蛋白在大肠杆菌中的高效表达,为进一步的tumstatin的放射受体显像奠定基础.

关键词：肿瘤抑素肿瘤新生血管生成基因克隆

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核酸杂交分析的镧系元素发光时间分辨测定中关键试剂的研制及其初步应用

核酸杂交分析的镧系元素发光时间分辨测定中关键试剂的研制及其初...

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首届全球华人辐射研究大会

作者：唐晓宋娜玲贺欣王德芝张春明赵启仁中国医学科学院中国协和医科大学放射医学研究所天津市分子核医学重点实验室300192 天津

目的研制成核酸杂交的镧系元素发光时间分辨测定中的关键试剂.方法用过碘酸钠法研制成辣根过氧化物酶标记链霉亲和素,用戊二醛二步法研制成碱性磷酸酶标记链霉亲和素,还研制成生物素化酪胺、5-氟水杨酸磷酸酯和荧光发展溶液等关键试剂... 详细信息

目的研制成核酸杂交的镧系元素发光时间分辨测定中的关键试剂.方法用过碘酸钠法研制成辣根过氧化物酶标记链霉亲和素,用戊二醛二步法研制成碱性磷酸酶标记链霉亲和素,还研制成生物素化酪胺、5-氟水杨酸磷酸酯和荧光发展溶液等关键试剂.结果碱性磷酸酶分子量约为159kD,碱性磷酸酶标记链霉亲和素的标记率为43.6％.5-氟水杨酸磷酸酯,测定熔点为157 ～ 159℃、纯度为99.43％～100％、红外吸收光谱、紫外吸收光谱及核磁共振谱等特性鉴定与文献记载一致.结论研制成的各种关键均符合本实验的要求.

关键词：时间分辨荧光分析辣根过氧化物酶标记链霉亲和素碱性磷酸酶标记链霉亲和素

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核酸杂交的酶放大镧系元素发光分析

核酸杂交的酶放大镧系元素发光分析

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首届全球华人辐射研究大会

作者：唐晓宋娜玲贺欣王德芝张春明赵启仁中国医学科学院中国协和医科大学放射医学研究所天津市分子核医学重点实验室天津 300192

目的 DNA探针技术学已在基础研究中获得很大进展,而且在传染病、遗传病和肿瘤等疾病的诊断应用中有重要意义.目前,核酸杂交的分析测定系统的研究主要集中在提高分析灵敏度和非同位素两方面,为了解决这两方面的问题,从而建立一种超灵敏... 详细信息

目的 DNA探针技术学已在基础研究中获得很大进展,而且在传染病、遗传病和肿瘤等疾病的诊断应用中有重要意义.目前,核酸杂交的分析测定系统的研究主要集中在提高分析灵敏度和非同位素两方面,为了解决这两方面的问题,从而建立一种超灵敏的非同位素的核酸杂交测定方法—二次酶放大时间分辨荧光分析法.方法把酶放大、PCR扩增、Tb螯合物固有优点以及时间分辨和波长分辨测量技术结合起来.在PCR扩增中,抗原-dUTP结合于被扩增的靶DNA,PCR产物与其生物素化探针相结合.然后通过生物素与链霉亲和素的反应,将链霉亲和素标记的辣根过氧化物酶连接到杂化物上.当有H2O2存在时,由于二聚体形成反应,于是生物素化酪胺就共价地结合到固相上.通过生物素与碱性磷酸酶标记链霉亲和素的反应,ALP结合到固相上,碱性磷酸酶作用其底物5-氟水杨酸磷酸酯,产物5-氟水杨酸与Tb和EDTA形成发荧光的三元复合物,用时间分辨荧光仪直接测量荧光强度,确定待测DNA的量.结果靶DNA测定的标准曲线线性范围大,至少在两个数量级;灵敏度为10pmol/L(0.5fmol/孔);当靶DNA为10、30和60pmol/L时,准确度和精密度分别为77％～ 95％和12.9％～ 15.3％.测定本分析系统的最佳条件是：紫外灯照射时间为40min;HRP-SA连接物浓度为0.6mg/L;HRP-SA与固相上的生物素化杂化物的反应时间为15min;生物素化PSA探针浓度为82 μ g/L;B-T浓度为0.1 mmol/L(或0.15mmol/L);ALP-SA浓度为500U/L;过氧化物酶底物溶液中的H2O2浓度为2mmol/L;5-FSAP浓度为2mmol/L.结论建立了全新的、超灵敏、简捷和非同位素的核酸杂交的二次酶放大时间分辨荧光分析系统,有很好的应用前景.

关键词：核酸杂交时间分辨荧光分析

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E838对辐射所致小鼠淋巴细胞DNA双链断裂的防护作用

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肿瘤防治研究 2010年第7期37卷 748-750,762页

作者：王月英刘强吴红英李德冠张恒王小春路璐孟爱民王汝勤张良安中国医学科学院中国协和医科大学放射医学研究所天津市分子核医学重点实验室天津300192

目的探讨E838对辐射导致小鼠淋巴细胞DNA双链断裂的防护作用。方法小鼠照射前给予E838,观察其存活率和动物平均存活时间;用中性单细胞凝胶电泳技术,检测1Gyγ射线照射后小鼠淋巴细胞DNA双链断裂,并与给予同类药物小鼠进行比较,用CASP软... 详细信息

目的探讨E838对辐射导致小鼠淋巴细胞DNA双链断裂的防护作用。方法小鼠照射前给予E838,观察其存活率和动物平均存活时间;用中性单细胞凝胶电泳技术,检测1Gyγ射线照射后小鼠淋巴细胞DNA双链断裂,并与给予同类药物小鼠进行比较,用CASP软件分析彗星图像,SPSS12.0进行数据的统计学分析。结果 E838预防用药能够明显提高损伤动物的30天存活率,E838低、中、高剂量组存活率分别比对照组提高55%、85%、75%,平均生存天数与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.001),保护指数分别为1.99、2.56、2.46。E838与炔雌醇比较,中、高剂量组的动物平均生存天数明显延长,差异有统计学意义(P<0.001)。E838能明显减轻淋巴细胞DNA双链断裂损伤,E838低、中、高组,TDNA百分比(11.68、6.24、9.05)、TL(18.53、10.09、16.02)、TM(2.13、0.64、1.21)和OTM(2.52、0.99、1.59)残余损伤逐渐减少,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.001)。E838与炔雌醇、尼尔雌醇比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 E838对辐射损伤具有明显的保护作用。

关键词： E838 辐射损伤 DNA双链断裂

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E838及其联合放化疗对IRM-2小鼠自发淋巴瘤的抑制作用

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中国生化药物杂志 2010年第3期31卷 154-157页

作者：王月英李德冠吴红英张恒王小春杜利清路璐孟爱民中国医学科学院中国协和医科大学放射医学研究所天津市分子核医学重点实验室天津300192

目的观察E838及其联合放化疗对IRM-2小鼠自发淋巴瘤的抑制作用及对骨髓有核细胞数的影响。方法放疗组采取2～3 mm3瘤块接种于小鼠腋部皮下。化疗组采用1∶3(生理盐水)比例制成细胞悬液,每只小鼠前肢腋窝下皮下接种0.2 mL,建立小鼠肿瘤... 详细信息

目的观察E838及其联合放化疗对IRM-2小鼠自发淋巴瘤的抑制作用及对骨髓有核细胞数的影响。方法放疗组采取2～3 mm3瘤块接种于小鼠腋部皮下。化疗组采用1∶3(生理盐水)比例制成细胞悬液,每只小鼠前肢腋窝下皮下接种0.2 mL,建立小鼠肿瘤模型。放疗组在24 h后将荷瘤小鼠随机分为对照组、单放组、E838100,150,200μg/0.2 mL(低、中、高)治疗组及药物合用照射组;化疗组分为对照组、环磷酰胺(CTX)组、E838低、中、高治疗组及合用CTX组。治疗组连续7 d腹腔注射给药,合用照射组于给药的第4天进行全身137Csγ射线1Gy照射,1次/d,连续5 d。实验第12天时处死小鼠,剥离瘤体测瘤重,计算抑瘤率。合用化疗组于24 h后开始给药(CTX 500μg/0.2 mL),隔日1次,共4次。实验第12天处死小鼠,剥离瘤体测瘤重,计算抑瘤率。结果 E838(低、中、高)合用137Csγ射线能提高抑瘤效果,抑瘤率分别为65.43%,77.13%和67.55%,比E838治疗组(低、中、高)分别升高21.29%,6.39%,17.55%,抑制率比照射组提高42.83%,差异有统计学意义(P<0.001)。q值分别为1.03,0.95和1.00,显示与γ射线合用有相加作用。合用CTX的抑瘤率分别为81.68%,82.70%,82.14%,比治疗组分别升高42.9%,36.19%,40.05%,抑制率比CTX组提高21.0%,差异有统计学意义(P<0.001)。q值分别为1.07,1.04和1.06,与CTX合用有相加作用。结论 E838对IRM-2小鼠自发淋巴瘤具有抑制作用,E838联合放化疗能提高抑瘤效果。

关键词： E838 恶性肿瘤放射治疗化学治疗 IRM-2小鼠

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IRM-2近交系小鼠血液学常规指标的测定

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中国辐射卫生 2010年第1期19卷 24-25页

作者：王月英吴红英李德冠张恒王小春杜利清路璐王彦孟爱民中国医学科学院中国协和医科大学放射医学研究所天津市分子核医学重点实验室天津300192

目的建立IRM-2小鼠不同周龄血液学指标正常参考值,为该小鼠的应用提供基础数据。并与亲代鼠及C57BL/6J小鼠血液学指标进行对比研究。方法用血液学常规检查法对不同周龄、不同性别的IRM-2小鼠WBC、RBC、PLT、BMC进行检测,并对亲代鼠及C57... 详细信息

目的建立IRM-2小鼠不同周龄血液学指标正常参考值,为该小鼠的应用提供基础数据。并与亲代鼠及C57BL/6J小鼠血液学指标进行对比研究。方法用血液学常规检查法对不同周龄、不同性别的IRM-2小鼠WBC、RBC、PLT、BMC进行检测,并对亲代鼠及C57BL/6J小鼠白细胞分类进行测定。结果得到不同周龄、不同性别IRM-2小鼠血液学指标正常参考值范围;各组雌、雄性小鼠间血液学前三项指标均无显著性差异;7、14周龄时雄性小鼠BMC高于雌性小鼠,差异有统计学意义(P<0.01),14周龄,雌、雄性小鼠的四项指标均高于其他周龄组,其中BMC与其他组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。18周龄小鼠BMC有所下降,56周龄时小鼠的BMC均低于其他各组。与615、ICR、C57BL小鼠比较,IRM-2小鼠白细胞总数及骨髓有核细胞数均高于其三品系小鼠,有显著性差异(P<0.01),四种小鼠的白细胞分类计数基本一致,无显著性差异。结论IRM-2小鼠血液学指标受性别影响和随年龄发生变化,IRM-2小鼠造血功能较强,可作为新的小鼠近交系应用于医学生物学研究。

关键词： IRM-2小鼠血液学指标骨髓有核细胞

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放射增效剂尼可胺致突变性研究

放射增效剂尼可胺致突变性研究

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经济发展方式转变与自主创新——第十二届中国科学技术协会年会

作者：刘晓秋韩英沈秀赵阿津周则卫中国医学科学院中国协和医科大学放射医学研究所天津市分子核医学重点实验室

目的:检测尼可胺的致突变性,为临床安全用药提供理论依据。方法:采用Ames试验、CHO细胞染色体畸变试验及小鼠微核试验。结果:Ames试验中加S9与不加S9混合液的各剂量组回变菌数与阴性对照比较无显著性差异,且无剂量-效应关系。小鼠骨髓... 详细信息

目的:检测尼可胺的致突变性,为临床安全用药提供理论依据。方法:采用Ames试验、CHO细胞染色体畸变试验及小鼠微核试验。结果:Ames试验中加S9与不加S9混合液的各剂量组回变菌数与阴性对照比较无显著性差异,且无剂量-效应关系。小鼠骨髓细胞微核率及CHO细胞染色体畸变率与阴性对照组比较,也无显著性差异(P>0.05)。结论:在本实验条件下,尼可胺无致突变作用。

关键词： Ames试验微核试验染色体畸变试验尼可胺

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放射增效剂尼可胺致突变性研究

放射增效剂尼可胺致突变性研究

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第十二届中国科协年会

作者：刘晓秋韩英沈秀赵阿津周则卫中国医学科学院中国协和医科大学放射医学研究所，天津市分子核医学重点实验室，天津 300192

目的：检测尼可胺的致突变性，为临床安全用药提供理论依据。方法：采用Ames 试验、CHO细胞染色体畸变试验及小鼠微核试验。结果：Ames试验中加S9与不加S9混合液的各剂量组回变菌数与阴性对照比较无显著性差异，且无剂量-效应关系。小... 详细信息

目的：检测尼可胺的致突变性，为临床安全用药提供理论依据。方法：采用Ames 试验、CHO细胞染色体畸变试验及小鼠微核试验。结果：Ames试验中加S9与不加S9混合液的各剂量组回变菌数与阴性对照比较无显著性差异，且无剂量-效应关系。小鼠骨髓细胞微核率及CHO细胞染色体畸变率与阴性对照组比较，也无显著性差异。结论：在本实验条件下，尼可胺无致突变作用。

关键词：微核试验染色体畸变尼可胺致突变性临床安全用药放射增效剂

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