检索结果-内蒙古大学图书馆

中国普通外科杂志 2008年第3期17卷 242-245页

作者：马宁葛春林栾凤鸣胡朝军李宁刘永锋中国医科大学附属第一医院普通外科教研室肝胆外科辽宁沈阳110001 中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院检验科北京100730

目的探讨应用SELDI质谱技术对胰腺癌患者血清中特异性标志蛋白的筛选方法。方法采用表面增强激光解析/离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术,选择WCX磁珠及蛋白芯片阅读机对胰腺癌及健康人(对照组)和胰腺良性疾病组的血清进行检测,以... 详细信息

目的探讨应用SELDI质谱技术对胰腺癌患者血清中特异性标志蛋白的筛选方法。方法采用表面增强激光解析/离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术,选择WCX磁珠及蛋白芯片阅读机对胰腺癌及健康人(对照组)和胰腺良性疾病组的血清进行检测,以筛选胰腺癌患者血清中特异表达差异蛋白。结果发现胰腺癌血清表达差异的潜在标志物(蛋白)4个,相对分子质量分别为5705Da,4935Da,5318Da和3243Da,其中4935Da,3243Da差异表达蛋白质在对照组中低表达,而在胰腺癌组中高表达,5705Da和5318Da差异表达蛋白质在胰腺癌组中低表达而对照组中高表达。结论应用SELDI技术筛选胰腺癌患者血清中的特异性生物标记物的方法快速、有效;检测到的4个差异蛋白质可能是胰腺癌患者血清特异性生物标记物。

关键词：胰腺肿瘤蛋白质组学 SELDl技术生物标记物

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人磷脂转移蛋白的原核表达及其抗体的制备与鉴定

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免疫学杂志 2008年第6期24卷 684-687页

作者：刘惠荣吴刚周冰申乐薛红陈保生内蒙古农业大学生物工程学院生物科学教研室呼和浩特010018 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 北京市药品不良反应监测中心北京100024

目的利用大肠杆菌表达人磷脂转移蛋白(PLTP),制备兔抗人PLTP的多克隆抗血清。方法采用RT-PCR技术,将人PLTP蛋白编码序列克隆入pET-30b(+)原核表达载体,转化大肠杆菌,IPTG诱导表达,切胶纯化蛋白后免疫家兔,制备PLTP抗血清。用间接ELISA法... 详细信息

目的利用大肠杆菌表达人磷脂转移蛋白(PLTP),制备兔抗人PLTP的多克隆抗血清。方法采用RT-PCR技术,将人PLTP蛋白编码序列克隆入pET-30b(+)原核表达载体,转化大肠杆菌,IPTG诱导表达,切胶纯化蛋白后免疫家兔,制备PLTP抗血清。用间接ELISA法、Western blot、细胞免疫荧光检测对抗血清效价及特异性进行鉴定。结果SDS-PAGE分析表明,PLTP基因在大肠杆菌BL21(DE3)菌株的包涵体中高效表达,最佳诱导表达时间为3h;将纯化的蛋白免疫家兔,ELISA法测定的抗血清效价为1∶256000;Western blot及细胞免疫荧光检测显示,抗血清可以与PLTP原核及真核表达蛋白特异结合。结论成功地将PLTP进行了原核表达,制备了高效价、高特异性的兔抗人PLTP抗血清,为PLTP的临床检测及其结构与功能的进一步研究提供了有力工具。

关键词：磷脂转移蛋白原核表达抗体

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α-ZAL、GST和17βE2对去势大鼠HHCY所致血管内皮调节机制的比较研究

α-ZAL、GST和17βE2对去势大鼠HHCY所致血管内皮调节机制的比较...

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国际心脏研究会（ISHR）中国分会第十届暨中国病理生理学会心血管专业委员会第十三届学术会议

作者：洪倪段金虹张彦东吴云清蒋东桥戴顺龄王雯中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院首都医科大学病理生理教研室

复制去势(OVX)大鼠高同型半胱氨酸血症(HHCY)模型,比较植物雌激素α-玉米赤霉孵(α-ZAL)、大豆异黄酮主要成分染料木素(GST)和17β雌二醇(17βE2)对血管内皮的保护作用。雌性大鼠行OVX后分组:①正常对照;②假手术+2.5%蛋氨酸;③OVX+蛋氨... 详细信息

复制去势(OVX)大鼠高同型半胱氨酸血症(HHCY)模型,比较植物雌激素α-玉米赤霉孵(α-ZAL)、大豆异黄酮主要成分染料木素(GST)和17β雌二醇(17βE2)对血管内皮的保护作用。雌性大鼠行OVX后分组:①正常对照;②假手术+2.5%蛋氨酸;③OVX+蛋氨酸;④OVX+蛋氨酸+GST;⑤OVX+蛋氨酸+α-ZAL。GST和α-ZAL分别隔日肌注250μg/0.25 mL/12周。测定HCY和ET-1浓度,RT-PCR法检测血管内皮ET-1 mRNA表达;主动脉作病理制片。结果显示:血浆HCY含量(μmol/L)按组序①3.19±0.19*;②20.624±1.771*;③49.9±5.01;④14.41±0.15*,21.83±1.80*⑤20.06±3.33*,*与③比较,P<0.01。ET-1 (pg/mL)含量按组序①100.46±13.12*;②93.23±11.05*;③244.22±23.30;④80.92±12.46*;⑤94.56±11.93*,*与③组比较P<0.01,血管内皮ET-1 mRNA的表达与③组比较P<0.01。病理:OVX+蛋氨酸组血管内皮明显损伤,部分内膜增厚,有泡沫样细胞浸润,聚集呈小团状,肌层正常,假手术组、β-ZAL、GST和17βE2组血管内膜大致正常,未见明显的炎性细胞浸润。结论:α-ZAL、GST和17βE2均能降低HCY含量,α-ZAL低于GST。α-ZAL、GST和17βE2减少ET-1分泌和ET-1 mRNA表达调节血管内皮助能。主动脉血管病理显示α-ZAL、GST和17βE2在内皮保护作用相似。

关键词： α-ZAL 17βE2 GST HHCY ET-1mRNA

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HACE2转基因小鼠SARS-CoV感染后病理变化及非特异性免疫反应

HACE2转基因小鼠SARS-CoV感染后病理变化及非特异性免疫反应

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亚洲实验动物学会联合会（AFLAS）第三次会议暨中国实验动物学会（CALAS）第八届学术年会

作者：杨秀红邓巍张连峰魏强朱华陈云新秦川中国医学科学院中国协和医科大学实验动物研究所华北煤炭医学院生理学教研室

目的观察人血管紧张素转换酶2(human angiotensin conversing enzyme,HACE2)转基因小鼠在重症急性呼吸综合症相关病毒(severe acute respiratory syndrome-associated coronavirus,SARS-CoV)感染后全身各组织器官的病理变化并初步探讨其发生的免疫学机制,为SARS研究提供可靠的小动物模型。方法实时PCR测定转基因小鼠HACE2基因的拷贝数;RT-PCR、Nested RT-PCR检测HACE2基因在各组织器官转录水平的表达;Western blot检测HACE2基因在各组织器官蛋白水平表达。用PUMC01株SARS-CoV感染HACE2转基因小鼠,在感染后3d和7d,病毒分离和免疫荧光试验(IFA)观察肺组织的SARS-CoV复制情况;光镜下观察小鼠全身各组织器官的病理变化及病毒抗原分布;ELISA方法检测肺组织上清细胞因子TNF-α、IL-6、IFN-γ变化。结果实时PCR检测显示为单拷贝HACE2转基因小鼠;RT-PCR及Nested RT-PCR实验证明,在转基因小鼠的肺、心、肾和小肠均有HACE2基因表达;Western blot结果显示,HACE2蛋白在转基因小鼠的肺、心、肾和小肠均有表达。病毒分离和免疫荧光试验(IFA)结果显示,在接种后的第3天和第7天,转基因小鼠肺组织上清的病毒滴度明显高于野生型小鼠;在接种后的第7天,转基因小鼠的感染率明显高于野生型小鼠;转基因小鼠出现典型的间质性肺炎,而且伴有肾脏、心脏、肝脏、脑组织和胃肠道等肺外多个组织器官的损伤。而部分野生型小鼠只在感染后第3天出现轻微的间质性肺炎。通过免疫组化染色,在转基因小鼠的肺脏上皮细胞和血管内皮细胞及大脑神经细胞可发现SARS-CoV抗原。ELISA结果显示,转基因小鼠在病毒感染后早期肺组织匀浆上清TNF-α、IL-6、IFN-γ的水平明显升高。结论 HACE2转基因小鼠对SARS-CoV的易感性明显高于野生型小鼠,出现与人类SARS患者相似的病理特征和非特异性的免疫学反应,为研究SARS发病机制和药物评价提供了可靠的小动物模型。

关键词：血管紧张素转换酶2 转基因小鼠 SARS-CoV 病理学免疫学

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α-ZAL、GST和17βE2对去势大鼠HHCY模型子宫内膜和乳腺上皮作用的病理学比较

α-ZAL、GST和17βE2对去势大鼠HHCY模型子宫内膜和乳腺上皮作用...

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国际心脏研究会（ISHR）中国分会第十届暨中国病理生理学会心血管专业委员会第十三届学术会议

作者：张彦东段金虹洪霓吴云清蒋东桥王雯戴川页龄中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院首都医科大学病理生理教研室

植物雌激素α-玉米赤霉醇(α-ZAL)、大豆异黄酮中主要成分染料木素(GST)和17βE2对血管内皮的保护作用相类似,本文从病理学角度比较三种激素对去势(OVX)大鼠高同型半胱氨酸血症(HHCY)子宫内膜和乳腺上皮的增殖作用。用雌性大鼠行去势术... 详细信息

植物雌激素α-玉米赤霉醇(α-ZAL)、大豆异黄酮中主要成分染料木素(GST)和17βE2对血管内皮的保护作用相类似,本文从病理学角度比较三种激素对去势(OVX)大鼠高同型半胱氨酸血症(HHCY)子宫内膜和乳腺上皮的增殖作用。用雌性大鼠行去势术后分组,①正常对照组;②假手术组+2.5%蛋氨酸;③OVX +蛋氨酸;④OVX+蛋氨酸+GST;⑤OVX+蛋氨酸+α-ZAL,且GST和α-ZAL分别隔日肌注250μg/ 0.25 mL/12周。测定血浆同型半胱氨酸(HCY)浓度;子宫和乳腺作病理制片。结果显示:血浆HCY含量(μmol/L)按组序①3.25±0.14*;②20.62±1.78*;③51.58±4.58;④14.38±0.14*;⑤22.59±1.60*,*与③比较P<0.01。子宫指数按组序①0.18±0.07;②0.19±0.05;③0.03±0.01*;④0.04±0.01*;⑤0.07±0.02*,*与③比较P<0.01。病理:OVX+蛋氨酸组乳腺萎缩,腺体明显减少,纤维增生:子宫内膜萎缩,腺体减少,平滑肌萎缩;17βE2组乳腺上皮明显增生,腺体增多;子宫内皮明显增生、增厚,腺体明显增多部分鳞化,肌层明显增厚;α-ZAL和GST两组乳腺上皮与子宫内膜略增生,腺体增生不明显,肌层大致正常,其余各组基本正常。结论:α-ZAL、GST和17βE2均能降低HHCY大鼠血浆的HCY含量,α-ZAL略优于GST。17βE2组子宫指数明显升高,α-ZAL和GST组略高于正常组。α-ZAL和GST在促进子宫内膜和乳腺增生方面明显低于17βE2,与GST相比α-ZAL略优于GST。

关键词： α-ZAL 17βE2 GST HHCY 子宫内膜乳腺

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睡眠-觉醒的神经调节机制

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国际药学研究杂志 2008年第1期35卷 30-33页

作者：臧照辉雷志勇陈虹张建军中国人民武装警察部队医学院生药教研室天津300162 中国医学科学院/中国协和医科大学药物研究所北京100050

睡眠-觉醒是一个涉及多系统、多中枢的生理过程,具有复杂的神经调节机制。促进觉醒的系统大部分起源于一系列明确的细胞群,并且这些细胞群与各自明确的神经递质相关联。促进睡眠的系统主要与大脑中抑制性神经递质γ氨基丁酸(GABA)有关,... 详细信息

睡眠-觉醒是一个涉及多系统、多中枢的生理过程,具有复杂的神经调节机制。促进觉醒的系统大部分起源于一系列明确的细胞群,并且这些细胞群与各自明确的神经递质相关联。促进睡眠的系统主要与大脑中抑制性神经递质γ氨基丁酸(GABA)有关,脑中不同部位的GABA神经元共同起到了促进睡眠的作用。为了更好地理解睡眠-觉醒的神经调节机制以及为新药的开发提供线索,本文对促进觉醒的系统和促进睡眠的系统的功能及其有关的神经递质进行了系统描述。

关键词：睡眠觉醒受体神经递质

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小鼠游泳的计算机自动管理系统

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中国实验方剂学杂志 2008年第3期14卷 39-41,45页

作者：龚梦鹃刘新民王立为张煜陈善广广东药学院中药药理教研室广东广州510006 中国医学科学院中国协和医科大学药用植物研究所北京100094 中国航天医学工程研究所北京100094

目的:将计算机引入小鼠游泳测试仪,为抗疲劳和抗抑郁药物的筛选和研究提供新的实验方法。方法:通过摄像将小鼠在游泳测试箱内活动的视频信号传送给视频卡,完成小鼠游泳的实时监视、图形显示、自动采样、存盘、结果自动辨别和打印的全套... 详细信息

目的:将计算机引入小鼠游泳测试仪,为抗疲劳和抗抑郁药物的筛选和研究提供新的实验方法。方法:通过摄像将小鼠在游泳测试箱内活动的视频信号传送给视频卡,完成小鼠游泳的实时监视、图形显示、自动采样、存盘、结果自动辨别和打印的全套自动化管理。通过负重游泳和强迫游泳实验进行验证,并与人工检测手段进行比较。结果:小鼠游泳的计算机监控系统确实方便可行,所获数据更为科学和客观。结论:小鼠游泳的计算机自动管理系统可广泛用于抗抑郁和抗疲劳药物的研究。

关键词：计算机小鼠游泳抗疲劳抗抑郁

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核因子кB受体激动子配体在慢性根尖周炎病损组织中的表达

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口腔医学研究 2008年第2期24卷 166-169页

作者：杨文东李志新郭颖孙建军高学军中国医学科学院·中国协和医科大学北京协和医院口腔科北京100730 北京大学医学部基础医学院中西医结合教研室北京大学口腔医学院口腔医院牙体牙髓科

目的:探讨核因子кB受体激动子配体(receptor activator of nuclear factorκB ligand,RANKL)在慢性根尖周炎发病中的作用。方法:采用RT-PCR法,从mRNA水平检测RANKL在10例慢性根尖肉芽肿及3例根尖囊肿中的表达,分析RANKLmRNA的表达与慢... 详细信息

目的:探讨核因子кB受体激动子配体(receptor activator of nuclear factorκB ligand,RANKL)在慢性根尖周炎发病中的作用。方法:采用RT-PCR法,从mRNA水平检测RANKL在10例慢性根尖肉芽肿及3例根尖囊肿中的表达,分析RANKLmRNA的表达与慢性根尖周炎病损的病理学表现(包括病损的病理分型、炎症细胞浸润程度)之间的关系,采用免疫组化的方法,对RANKL的表达进行细胞定位。结果:RANKLmRNA在根尖肉芽肿病损组和根尖囊肿组明显增高,但根尖肉芽肿和根尖囊肿组之间差异无显著性。RANKL mRNA在轻、重度炎症细胞浸润组较中度炎症细胞浸润组明显增高(P<0.05)。RANKL mRNA水平与病损大小无关。免疫组化结果显示,RANKL主要表达于浸润的炎症细胞中及增生的上皮细胞中。结论:RANKL在慢性根尖周炎的发病中具有重要的作用,但也提示存在其它细胞因子的协同作用。

关键词：核因子кB受体激动子配体根尖周疾病免疫组织化学

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人转化生长因子-β2启动子区低氧反应元件突变体报告基因的构建

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现代生物医学进展 2008年第1期8卷 1-3页

作者：苏燕李宏伟张静王春玲修瑞娟包头医学院生物化学与分子生物学教研室包头014010 中国协和医科大学中国医学科学院微循环研究所北京100005 煤炭总医院心脏中心北京100028

目的:构建人转化生长因子-β2(Transforming growth factor-β2,TGF-β2)启动子区低氧反应元件(hypoxia responsive element,HRE)突变体报告基因。方法:利用重叠延伸PCR技术,以人TGF-β2启动子区报告基因(TGF-β2-pGL3-Basic)为模板,对TGF-β2启动子区(-270bp～+280bp)-114bp、-73bp、-49bp、-4bp和-73/-49 bp位点的低氧反应核心序列5′-RCGTG-3′分别进行定点突变,然后将此突变片段插入荧光素酶报告载体pGL3-Basic进行基因测序。结果:各突变载体的测序结果与预期完全一致。结论:人TGF-β2启动子区HRE突变体报告基因构建成功,为今后进一步研究TGF-β2的低氧调控奠定了基础。

关键词： TGF-β2 低氧基因突变重叠延伸

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攀网法与翻正反射法测定肌松药ED_(50)的比较

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徐州医学院学报 2008年第1期28卷 10-12页

作者：庞训雷张彦戴体俊陈玉芳王玉成徐州医学院徐州医学院麻醉药理学教研室徐州师范大学化学系江苏徐州221116 中国医学科学院中国协和医科大学医学生物技术研究所北京100050

目的对攀网法与翻正反射法测定肌松药在小鼠的半数有效量(ED50)进行比较。方法分别用攀网法与翻正反射法测定小鼠不同肌松药的ED50。结果攀网法测定肌松药ED50与翻正反射法测定肌松药ED50的差异无显著性(P>0.05)。翻正反射法还可同... 详细信息

目的对攀网法与翻正反射法测定肌松药在小鼠的半数有效量(ED50)进行比较。方法分别用攀网法与翻正反射法测定小鼠不同肌松药的ED50。结果攀网法测定肌松药ED50与翻正反射法测定肌松药ED50的差异无显著性(P>0.05)。翻正反射法还可同时测定肌松药的LD50、潜伏期以及持续期等。结论翻正反射法可以替代攀网法测定肌松药的ED50,且效果更好。

关键词：肌松药攀网法翻正反射法半数有效量

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