检索结果-内蒙古大学图书馆

中国生物工程杂志 2004年第12期24卷 53-58页

作者：冯义冯四州张磊刘斌范存刚任贺韩忠朝实验血液学国家重点实验室中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院天津300020 河北医科大学第二医院石家庄050000

目的 :探索肝素在脐带血CD34+ 细胞定向扩增巨核祖细胞中的作用。方法采用免疫磁珠法 (MACS)分选CD34+ 细胞 ,在TPO ,IL 1 1的扩增体系中加入肝素 ,巨核祖细胞集落分析 (CFU MK)测定巨核祖细胞扩增倍数 ,流式细胞仪检测巨核祖细胞分化... 详细信息

目的 :探索肝素在脐带血CD34+ 细胞定向扩增巨核祖细胞中的作用。方法采用免疫磁珠法 (MACS)分选CD34+ 细胞 ,在TPO ,IL 1 1的扩增体系中加入肝素 ,巨核祖细胞集落分析 (CFU MK)测定巨核祖细胞扩增倍数 ,流式细胞仪检测巨核祖细胞分化过程中的特异性标记 (CD34+ ,CD41a+ ,CD61 + ,CD34+ CD41a+ ,CD41a+ CD61 + ) ,巨核细胞特异性抗体 (CD41a)免疫组化染色和透射电镜观察鉴定巨核细胞形态及超微结构 ,血小板体外活化实验及NOD SCID小鼠异种体内移植实验评价扩增的巨核祖细胞的功能。结果 :TPO( 5 0ng ml)与IL 1 1 ( 5 0ng ml)双因子联合应用 ,7天巨核祖细胞克隆扩增倍数为 83 1 7± 39 41倍 ,1 0天为 2 0 5 0 6± 74 2 6倍 ,流式细胞仪分析显示 7天CD34+ CD41a+ 细胞扩增 1 0 5 1± 4 79倍 ,0天加入肝素后 ,7天巨核祖细胞克隆扩增倍数为 1 0 8 2 5± 32 67倍 ,1 0天为 333 0 6± 2 7 5 4倍 ,7天CD34+ CD41a+ 细胞扩增到 2 9 93± 6 39倍 ,为无肝素组的 2 85倍 ,与双因子组相比有统计学差异 (P <0 0 1 ) ,肝素在第 5天及第 7天加入没有增加巨核祖细胞扩增效果。经全身照射预处理的NOD SCID小鼠静脉输注扩增第 7天的巨核细胞 (TPO、IL 1 1、肝素联合 ) 。

关键词：祖细胞细胞扩增肝素 CD41 IL-1 巨核细胞 CD34^+ 克隆 NOD 体外扩增

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自发性高血压大鼠间充质干细胞生物学特性变化的研究

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中国生物工程杂志 2004年第4期24卷 49-53页

作者：刘煜昊房佰俊史明霞杨少光廖联明赵春华中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室中美合作实验室组织工程中心天津300020

目的 :研究自发性高血压大鼠 (SHR)间充质干细胞 (MSC)生物学特性的改变。方法 :取SHR和WKY骨髓和主动脉的贴壁细胞 ,经CD1 0 5免疫磁珠分选 ,测定其生长曲线和倍增时间 ,流式细胞仪检测其免疫表型 ,进行纤维母细胞集落形成单位计数 ,... 详细信息

目的 :研究自发性高血压大鼠 (SHR)间充质干细胞 (MSC)生物学特性的改变。方法 :取SHR和WKY骨髓和主动脉的贴壁细胞 ,经CD1 0 5免疫磁珠分选 ,测定其生长曲线和倍增时间 ,流式细胞仪检测其免疫表型 ,进行纤维母细胞集落形成单位计数 ,体外诱导成脂肪和成骨 ,以油红O及VonKossa染色证实 ,免疫组化和半定量PCR法测胶原蛋白。结果 :这些细胞呈梭形贴壁生长 ,SHR组细胞倍增时间长于WKY级 ,这些细胞CD1 0 5、CD44、CD2 9,Flk 1均阳性 ,SHR组CFU F低于WKY组 ,SHR组细胞更易成脂肪、成骨、促纤维化。结论 :这些细胞为MSC ,SHR组MSC增殖能力较WKY组弱 ,成脂肪、成骨、促纤维化强于WKY组 ,MSC的异常可能是高血压易患动脉弱样硬化原因之一。

关键词：自发性高血压大鼠间充质干细胞动脉弱样硬化细胞分化

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胎儿肺脏来源间充质干细胞的鉴定与损伤修复的实验研究

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中国生物工程杂志 2004年第3期24卷 48-53页

作者：郑春梅孙昭曹莹孙琪云马丽马冠杰姜学英赵春华实验血清学国家重点实验室中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院天津300020 中国军事医学科学院附属307医院北京100039

目的 :为研究胎儿肺脏来源间充质干细胞的生物学性状 ,表型和多向分化能力。方法 :取胎龄为 4～ 5个月水囊引产胎儿 ,将肺脏细胞在SF(含 2 %FBS)培养基中培养。测定生长曲线、利用流式细胞仪对培养细胞进行表型测定 ,细胞周期分析 ,体... 详细信息

目的 :为研究胎儿肺脏来源间充质干细胞的生物学性状 ,表型和多向分化能力。方法 :取胎龄为 4～ 5个月水囊引产胎儿 ,将肺脏细胞在SF(含 2 %FBS)培养基中培养。测定生长曲线、利用流式细胞仪对培养细胞进行表型测定 ,细胞周期分析 ,体外诱导分化实验。NOD SCID鼠放射损伤后 ,尾静脉输入经PKH2 6染色的间充质干细胞 ,两个月后检测外源细胞在肺脏的定植情况。结果 :从胎儿肺脏可培养出间充质干细胞 ,并可诱导成骨、软骨和脂肪细胞分化 ;移植两个月后可以检测到外源细胞在肺脏的定植。结论 :从胎儿肺脏可分离培养出间充质干细胞 ,在体外有效扩增且保持其低分化状态 ;间充质干细胞可以在肺脏长时间定植。

关键词：胎儿肺脏间充质干细胞 MSC 生物学性状间质性肺疾病

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慢性特发性血小板减少性紫癜的血清瘦素水平测定

慢性特发性血小板减少性紫癜的血清瘦素水平测定

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中华医学会第八次全国血液学学术会议

特发性血小板减少性紫癜(idiopathic thrombocytopenic purpura,ITP)是因为体内产生抗血小板抗体导致网状内皮系统吞噬破坏血小板,造成血小板减少的一种自身免疫疾病。当前的研究表明,无论是儿童抑或成人慢性ITP在疾病活动期主要体现一... 详细信息

特发性血小板减少性紫癜(idiopathic thrombocytopenic purpura,ITP)是因为体内产生抗血小板抗体导致网状内皮系统吞噬破坏血小板,造成血小板减少的一种自身免疫疾病。当前的研究表明,无论是儿童抑或成人慢性ITP在疾病活动期主要体现一种T辅助细胞1型(Th1)极化模式。瘦素作为一种T辅助细胞分泌调控因子是如何在本病的发病机制中发挥作用目前还不清楚。为此,我们率先进行了瘦素与特发性血小板减少性紫癜相关性的研究,以期发现一些线索。

关键词：慢性特发性血小板减少性紫癜瘦素水平

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原发性血小板增多症中抗凋亡蛋白Bcl-xL早期下调导致其巨核细胞过早分化成熟

原发性血小板增多症中抗凋亡蛋白Bcl-xL早期下调导致其巨核细胞过...

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中华医学会第八次全国血液学学术会议

目的:Bcl-x抗凋亡蛋白属于bcl-2蛋白家族,主要表达在造血细胞中,在调节造血细胞的分化具有重要功能。Bcl-x抗凋亡蛋白失活或过度表达皆会影响血小板的生成,因此其在巨核细胞分化及血小板形成过程中具有重要的作用。

关键词：抗凋亡蛋白巨核细胞 Bcl-xL 原发性血小板增多症分化成熟

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髓系肿瘤染色体核型的研究

髓系肿瘤染色体核型的研究

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作者：肖志坚郝玉书刘世和李建波卞寿庚等中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室

主要内容：该项目通过髓系肿瘤染色体核型的系列研究，揭示中国髓系肿瘤患者染色体核型异常特点并收集中国该研究领域的基础数据；开展中国急性髓系白血病最常见的t(8；21)染色体易位形成机制及t(8；21)白血病细胞克隆起源时间及其起因... 详细信息

标准号: 0601310198

主要内容：该项目通过髓系肿瘤染色体核型的系列研究，揭示中国髓系肿瘤患者染色体核型异常特点并收集中国该研究领域的基础数据；开展中国急性髓系白血病最常见的t(8；21)染色体易位形成机制及t(8；21)白血病细胞克隆起源时间及其起因的研究；研究了髓系肿瘤染色体核型在髓系肿瘤诊断、分型及个体化治疗策略制定中实际应用价值。项目意义：提出了t(8；21)形成的主要机制是通过非同源染色体DNA断裂的修复和拓朴异构酶Ⅱ抑制剂诱导AMLl基因重排、融合及t(8；21)/AML患者的AML-ETO(+)白血病克隆起源于胎儿期等全新理论；阐明了中国髓系肿瘤患者染色体核型的特征；提出染色体核型是髓系肿瘤个体化治疗新策略制定的重要依据。主要发现发明及创新点：发现中国AML患者t(8；21)检出率明显高于西方国家。在国际上首次阐明了t(8；21)断裂区基因组DNA结构特征。在国际上首次证实t(8；21)形成机制是通过非同源染色体DNA断裂的修复和拓朴异构酶Ⅱ抑制剂诱导AMLI基因重排、融合。在国际上首次证实AMLl-ET0(+)白血病克隆起源于胎儿期。证实染色体核型是髓系肿瘤诊断和分型及独立亚型确认和个体化治疗新策略制定的重要依据。取得的成效：发表论文已被国际一流杂志如《自然癌症综述》、《自然遗传综述》和《科学》引用91次，已得到国际同行的认可。为t(8；21)/AML的Ⅰ、Ⅱ级预防奠定了理论基础。提出需增加脐血常见白血病基因检测剔除阳性标本以提高其临床使用安全性。根据染色体核型制定髓系肿瘤患者个体化治疗策略已在全国推广使用并已获得了显著的效益。培养了进修医师400余人，博士生10名，硕士生12名。

关键词：髓系肿瘤染色体核型白血病诊断

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外周血干细胞治疗血管闭塞性脉管炎

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中华医学杂志 2004年第16期84卷 1334-1334页

作者：韩忠朝杨晨中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室国家干细胞工程技术研究中心天津300020

早在一个世纪前就有人提出造血细胞和血管细胞可能有一个共同的干细胞--血液血管干细胞(hemangioblast).血液血管干细胞可以发育分化成造血干细胞(HSC)和血管干细胞(angioblast),后两者进一步分化增殖形成血细胞和血管两大系统.但直到... 详细信息

早在一个世纪前就有人提出造血细胞和血管细胞可能有一个共同的干细胞--血液血管干细胞(hemangioblast).血液血管干细胞可以发育分化成造血干细胞(HSC)和血管干细胞(angioblast),后两者进一步分化增殖形成血细胞和血管两大系统.但直到近几年,才有实验研究证实了血液血管干细胞的存在,并可通过免疫磁珠或流式细胞仪等技术进行鉴别和分离纯化.这些干细胞虽然数量很少,但其双重分化潜能使之成为临床移植治疗血液和血管性疾病的候选干细胞.

关键词：外周血干细胞血管闭塞性脉管炎造血干细胞 HSC 心血管病

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脐血干/祖细胞短期体外扩增后归巢相关粘附特性的研究

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中华血液学杂志 2003年第2期24卷 64-67页

作者：翟琼莉周余邱录贵李茜韩俊领于珍孟恒星应红光王亚非韩忠朝中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室

目的　探讨体外扩增对脐血 (UCB)造血干祖细胞 (HSPC)原有粘附功能的影响。方法　将从新鲜UCB标本中纯化的CD34+ 细胞接种于无血清、无基质的悬浮扩增体系 ,分别于培养第 7天、第10天和第 14天从扩增产物中再次纯化CD34+ 细胞 ,比较... 详细信息

目的　探讨体外扩增对脐血 (UCB)造血干祖细胞 (HSPC)原有粘附功能的影响。方法　将从新鲜UCB标本中纯化的CD34+ 细胞接种于无血清、无基质的悬浮扩增体系 ,分别于培养第 7天、第10天和第 14天从扩增产物中再次纯化CD34+ 细胞 ,比较扩增前后CD34+ 细胞表面VLA 4 (CD4 9d)、VLA 5(CD4 9e)、LFA 1(CD1 1a)、L selectin (CD6 2L)、PECAM 1(CD31 )、ICAM 1(CD54)和HCAM(CD4 4)等归巢相关粘附分子 (CAMs)的表达情况 ,并检测CD34+ 细胞与纤连蛋白 (FN)间的自发粘附率和基质细胞来源因子 1(SDF 1)诱导粘附率。结果　①在第 14天的培养扩增中 ,表达上述CAMs的各CD34+ 细胞亚群均有不同程度 (15～ 72倍 )的扩增 ;②扩增后CD34+ 细胞表面粘附分子CD4 4、CD1 1a、CD4 9e和CD4 9d的表达与原代CD34+ 细胞持平或高于培养开始时水平 ,而CD6 2L、CD54和CD31 的表达则有不同程度下调 ;③在前 10d的扩增中 ,CD34+ 细胞与FN间的自发粘附率和SDF 1诱导粘附率均呈上升趋势。结论　所建立的短期培养体系不仅可以支持表达重要CAMs的UCBCD34+ 细胞亚群的有效扩增 ,而且扩增后的HSPC总体上保持原有的粘附功能。

关键词：脐血干/祖细胞体外扩增归巢相关粘附特性研究

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ETO转录抑制结构域的分析与鉴定

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中华血液学杂志 2003年第1期24卷 10-13页

作者：王敏王玲郝长来邢海燕唐克晶王建祥中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院血液内科实验血液学国家重点实验室天津300020

目的　进一步确定ETO抑制基因转录的区域及其与组蛋白脱乙酰化酶之间的关系。方法　以位点诱变法使ETO的两个锌指结构分别突变 ,使用聚合酶链反应扩增ETO突变体 ,克隆入真核细胞表达质粒pFA CMV中。通过基因转染、报告基因转录活性分析 ... 详细信息

目的　进一步确定ETO抑制基因转录的区域及其与组蛋白脱乙酰化酶之间的关系。方法　以位点诱变法使ETO的两个锌指结构分别突变 ,使用聚合酶链反应扩增ETO突变体 ,克隆入真核细胞表达质粒pFA CMV中。通过基因转染、报告基因转录活性分析 ,确定ETO的不同区段对基因转录调节的作用。结果　成功构建出锌指突变和不同区段的ETO表达载体 ,并发现ETO存在两个抑制转录的区域 ,分别位于羧基末端的两个锌指结构和第 2 75～ 487位氨基酸残基。结论　ETO通过 2个区域抑制转录 ,并且与组蛋白脱乙酰化酶密切相关 ,后者可能会用作急性髓系白血病M2b的治疗靶点。

关键词：急笥髓系白血病 ETO基因组蛋白脱乙酰基酶鉴定

来源：评论

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单价抗CD20抗体诱导人B细胞淋巴瘤Raji细胞的凋亡

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癌症 2003年第12期22卷 1249-1253页

作者：刘银星范冬梅熊冬生许元富邵晓枫许元生彭晖杨铭秦岚朱祯平杨纯正中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020 天津市第一中心医院核医学室天津300192

背景与目的:抗CD20抗体和片段已应用于非霍奇金淋巴瘤的临床治疗,但仍需要开发新的抗CD20抗体和片段(未修饰的或放射性标记的),以治疗对美罗华(利妥昔单抗)无反应的患者。鼠源性抗CD20抗体HI47的嵌合抗体片段Fab和F(ab)'2已被构建... 详细信息

背景与目的:抗CD20抗体和片段已应用于非霍奇金淋巴瘤的临床治疗,但仍需要开发新的抗CD20抗体和片段(未修饰的或放射性标记的),以治疗对美罗华(利妥昔单抗)无反应的患者。鼠源性抗CD20抗体HI47的嵌合抗体片段Fab和F(ab)'2已被构建。本研究目的是观察HI47(鼠抗-CD20抗体)和其嵌合抗CD20抗体片段抑制肿瘤细胞生长和诱导肿瘤细胞凋亡的作用。方法:用免疫荧光法测定抗CD20抗体与CD20+人B细胞淋巴瘤Raji细胞的结合能力;MTT法测定抗CD20抗体片段对Raji细胞生长的影响;用膜联蛋白Ⅴ染色和DNA琼脂糖凝胶电泳检测和验证抗CD20抗体片段诱导Raji细胞凋亡。结果:HI47和其嵌合的抗CD20抗体片段均可与CD20+Raji细胞结合,结合率可达90%以上;HI47不能与美罗华竞争结合Raji细胞;HI47和其嵌合的抗CD20抗体片段浓度为100μg/ml对Raji细胞的抑制率分别为:(57.0±1.5)%、(65.2±2.5)%、(77.2±3.2)%;单价的抗CD20抗体片段Fab(20μg/ml)能够诱导Raji细胞的凋亡,早期凋亡率为17%。结论:HI47的嵌合抗体片段对Raji细胞有抑制作用,能诱导Raji细胞的凋亡。

关键词：单价抗CD20抗体诱导 B细胞淋巴瘤 Raji细胞细胞凋亡

来源：评论

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