检索结果-内蒙古大学图书馆

中国实用内科杂志 2006年第20期26卷 1610-1612页

作者：徐泽锋李睿张莉郝玉书肖志坚中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室

目的初步评价环孢素A单独应用或联合沙利度胺治疗骨髓增生异常综合征的疗效与不良反应。方法于2000年10月至2005年10月取中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院血液六科的32例骨髓增生异常综合征患者,随机分为两组,分... 详细信息

目的初步评价环孢素A单独应用或联合沙利度胺治疗骨髓增生异常综合征的疗效与不良反应。方法于2000年10月至2005年10月取中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院血液六科的32例骨髓增生异常综合征患者,随机分为两组,分别接受了环孢素A(A组,n=14)或环孢素A联合沙利度胺(B组,n=18)治疗,比较两组的疗效和不良反应。结果共15例患者取得血液学进步[A组3例(21.4%),B组12例(66.7%),P<0.05]。A组红系显效3例;血小板显效2例,有效1例;中性粒细胞显效2例,有效1例。B组红系显效11例,有效1例;血小板显效5例,有效2例;中性粒细胞显效3例,有效3例。A组11例依赖输血的患者中2例(18.2%)脱离输血,B组14例依赖输血的患者中9例(64.3%)脱离输血,二者疗效比较差异有统计学意义(P<0.05)。共9例患者出现肝功能异常[A组3例(21.4%),B组6例(33.3%),P=0.457],3例出现肾功能异常[A组1例(7.1%),B组2例(11.1%),P=0.702],经停药或治疗后均好转。结论联合环孢素A和沙利度胺治疗骨髓增生异常综合征疗效较单用环孢素A好,出现肝肾功能异常是可逆性的。

关键词：骨髓增生异常综合征环孢素A 沙利度胺

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人促血液血管细胞生成素的原核表达及兔抗体的制备

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细胞与分子免疫学杂志 2006年第6期22卷 801-803页

作者：任倩刘拥军徐斌韩之波卢士红马凤霞陈钟韩忠朝中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室国家干细胞工程研究中心天津300020

目的:表达人促血液血管细胞生成素(hemangiopoi-etin,HAPO)蛋白并制备兔抗HAPO抗体。方法:利用硫氧还原蛋白TrxA融合表达载体(pET32c),表达可溶性HAPO。表达的HAPO融合蛋白经亲和层析快速纯化,并通过Westernblot进行鉴定。以纯化的人HAP... 详细信息

目的:表达人促血液血管细胞生成素(hemangiopoi-etin,HAPO)蛋白并制备兔抗HAPO抗体。方法:利用硫氧还原蛋白TrxA融合表达载体(pET32c),表达可溶性HAPO。表达的HAPO融合蛋白经亲和层析快速纯化,并通过Westernblot进行鉴定。以纯化的人HAPO免疫新西兰大白兔,制备抗体并测定其效价。结果:获得高效表达并纯化的HAPO蛋白。制备的兔抗人HAPO抗体的免疫双扩散的效价为1∶8。结论:建立了HAPO基因的原核表达载体和快速纯化体系并制备出兔抗HAPO的抗体,为研制检测HAPO的ELISA试剂盒奠定了基础。

关键词：人促血液血管细胞生成素 pET32C 抗体制备兔

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急性白血病患者同源结构域相互作用蛋白激酶2的表达及其临床意义

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中国病理生理杂志 2006年第12期22卷 2364-2367页

作者：邢海燕张新伟田征唐克晶秘营昌王敏中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

目的:探讨急性白血病患者中同源结构域相互作用蛋白激酶2(H IPK2)基因的表达及其临床意义。方法:应用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测急性白血病患者(AL)及健康供者骨髓单个核细胞(MNC)H IPK2基因的表达。结果:①初发AL患者H IPK... 详细信息

目的:探讨急性白血病患者中同源结构域相互作用蛋白激酶2(H IPK2)基因的表达及其临床意义。方法:应用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测急性白血病患者(AL)及健康供者骨髓单个核细胞(MNC)H IPK2基因的表达。结果:①初发AL患者H IPK2的相对转录水平为0.364±0.286,显著低于正常对照组(1.160±0.272)(P<0.01);②AML患者中M2b的H IPK2的转录水平显著高于其它类型的AML(P<0.05);③除M2b外的AL患者H IPK2的转录水平与FAB亚型、发病时外周血白细胞数、细胞或分子遗传学异常、乳酸脱氢酶水平、多药耐药基因1(mdr1)表达、P170表达及年龄等预后因素无显著相关性(P>0.05)。结论:H IPK2在AL患者中低表达,可能与AL的发生发展有关。

关键词：白血病基因 HIPK2 基因表达

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酶联免疫斑点技术在肿瘤研究中的应用

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免疫学杂志 2006年第z1期22卷 101-104页

作者：刘娟妮茹永新朱惠芳中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

酶联免疫斑点技术(enzyme-linked immunospot assay,ELISPOT)广泛应用在肿瘤疫苗开发、疗效评价和肿瘤病因研究方面,本文就ELISPOT技术的历史、原理、一般步骤、在肿瘤研究中的应用及优缺点做一综述。

关键词：酶联免疫斑点技术抗原肿瘤

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影响脐血多能非造血成体干细胞分离的相关因素研究

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中国实验血液学杂志 2006年第4期14卷 731-736页

作者：李云涛徐燕孟恒星葛薇李桥川万长春于珍李长虹邱录贵中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

为了研究低血清条件下从脐血中分离多能非造血成体干细胞的相关影响因素,探索优化培养条件,通过不同培养液、接种密度、首次换液时间对脐血多能非造血成体干细胞生长的影响的比较,并以选定的条件对其培养扩增,进行免疫表型及诱导分化能... 详细信息

为了研究低血清条件下从脐血中分离多能非造血成体干细胞的相关影响因素,探索优化培养条件,通过不同培养液、接种密度、首次换液时间对脐血多能非造血成体干细胞生长的影响的比较,并以选定的条件对其培养扩增,进行免疫表型及诱导分化能力检测。结果表明在低血清条件下,DMEM/F12培养液更适合于脐血多能非造血成体干细胞生长;1×106/cm2是原代培养的适宜接种密度,原代第72小时首次换液为最佳换液时问。利用所选条件培养的细胞可在体外持续扩增,并具有良好的分化潜能。结论建立了人脐血多能非造血成体干细胞的体外优化培养条件,为其在组织工程方面的应用作出了新的探索。

关键词：干细胞多能非造血成体干细胞脐血分离效率

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人促血液血管细胞生成素对内皮细胞粘附功能的影响

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中国医学科学院学报 2006年第3期28卷 364-367页

作者：王晓静刘拥军卢士红梁琳慧王晗韩忠朝中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室细胞产品国家工程研究所泰达生命科技中心天津300020

目的研究人促血液血管细胞生成素(HAPO)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)粘附功能的影响。方法采用结晶紫粘附实验、流式细胞术和半定量RT-PCR方法检测HUVEC的粘附性和粘附分子CD54、CD102、CD106、CD31、CD62E和CD62P的表达。结果HAPO以剂量... 详细信息

目的研究人促血液血管细胞生成素(HAPO)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)粘附功能的影响。方法采用结晶紫粘附实验、流式细胞术和半定量RT-PCR方法检测HUVEC的粘附性和粘附分子CD54、CD102、CD106、CD31、CD62E和CD62P的表达。结果HAPO以剂量依赖性方式增加HUVEC的总粘附性。HAPO能显著促进HUVEC表面粘附分子CD106和CD62E表达,并呈时间依赖性。HAPO作用HUVEC6h后,CD106和CD62E的阳性率分别为(80·83±2·22)%和(22·77±2·59)%,是各自对照组的2·10倍和5·84倍,且转录水平和蛋白质水平一致。CD106和CD62E的最高转录水平分别为对照组的1·86倍和6·16倍。结论HAPO可能对造血干/祖细胞归巢有一定促进作用。

关键词：人促血液血管细胞生成素粘附分子内皮细胞

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骨髓间充质干细胞复合纤维蛋白封闭剂体内构建可注射性组织工程软骨

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中国修复重建外科杂志 2006年第2期20卷 139-143页

作者：葛薇姜文学李长虹尤佳邱录贵赵春华中国医学科学院中国协和医科大学血液病医院血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020 天津市第一中心医院骨关节外科

目的探讨利用人骨髓间充质干细胞(marrowmesenchymalstemcells,MSCs)与可注射性纤维蛋白封闭剂(fibrinsealant,FS)复合,在裸鼠体内构建组织工程软骨的可行性。方法体外分离扩增健康人MSCs,以含有转化生长因子β1(transforminggrowthfac... 详细信息

目的探讨利用人骨髓间充质干细胞(marrowmesenchymalstemcells,MSCs)与可注射性纤维蛋白封闭剂(fibrinsealant,FS)复合,在裸鼠体内构建组织工程软骨的可行性。方法体外分离扩增健康人MSCs,以含有转化生长因子β1(transforminggrowthfactorβ1,TGF-β1)、地塞米松、维生素C的培养基进行成软骨诱导,诱导第7、14天分别检测软骨细胞特异的生物学特性。将诱导7d的MSCs与FS复合,接种于裸鼠背部皮下作为实验组,同时设单纯只注射FS或MSCs的支架对照组和细胞对照组。分别于接种后6、12周取材进行大体观察,行HE、阿尔新蓝染色和型胶原免疫组织化学染色评价其成软骨能力。结果MSCs以特定的培养基诱导后由纺锤形变为多角形,并表达软骨细胞分泌的基质。复合物接种6和12周后,实验组均可形成软骨样组织块,6周时形成的组织块较小而质地柔韧,陷窝清楚,可检测到阳性阿尔新蓝及型胶原表达;12周形成的组织块较大,质地较硬,表面光滑,软骨细胞位于成熟的陷窝中,阿尔新蓝及型胶原免疫组化阳性染色较6周增强。两个对照组均无软骨样组织块形成。结论MSCs复合FS可以作为一种较优良的可注射性组织工程软骨的构建方法。

关键词：组织工程软骨骨髓间充质干细胞可注射性纤维蛋白封闭剂

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基质金属蛋白酶9在粒细胞集落刺激因子诱导的造血干/祖细胞动员中的作用

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中华医学杂志 2006年第42期86卷 2966-2970页

作者：靳风艳邱录贵李桥川孟恒星王亚非于珍李茜韩俊领中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020 现在吉林省肿瘤医院肿瘤内科天津市脐带血造血干细胞库

目的探讨基质金属蛋白酶9(MMP-9)在粒细胞集落刺激因子(G-CSF)诱导的造血干/祖细胞(HSPC)动员中的作用。方法应用酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫组织化学、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)等方法测定了健康供者稳态及G-CSF动员第5天骨髓、... 详细信息

目的探讨基质金属蛋白酶9(MMP-9)在粒细胞集落刺激因子(G-CSF)诱导的造血干/祖细胞(HSPC)动员中的作用。方法应用酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫组织化学、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)等方法测定了健康供者稳态及G-CSF动员第5天骨髓、外周血MMP-9蛋白及mRNA水平的变化,比较富含MMP-9的细胞系HT1080无血清培养上清孵育前后CD34+细胞表面CXCR4表达及对基质细胞衍生因子1(SDF-1)的迁移能力的变化,将rhMMP-9与rhSDF-1孵育后应用Western印迹检测MMP-9对SDF-1的降解作用,观察注射MMP-9化学抑制剂(MPI)ο-邻二氮杂菲对G-CSF动员BALB/c小鼠外周血成熟白细胞计数(WBC)和干/祖细胞的数量的影响。结果G-CSF动员第5天,骨髓上清MMP-9浓度增加了6.6倍(P<0.01),骨髓组织表达MMP-9的中性粒细胞明显增多。动员后骨髓单个核细胞MMP-9mRNA表达水平上调(P<0.05)。rhSDF-1与rhMMP-9短期孵育后可被后者降解。HT1080无血清培养上清液能够上调脐血和动员外周血富集的CD34+细胞的CXCR4表达水平(均P<0.05)及增强CD34+细胞向SDF-1浓度梯度迁移能力(均P<0.05),该效应可被MPI阻断(P<0.05)。与G-CSF共注射MPI后BALB/c小鼠外周血成熟WBC(12.3×106/L±1.2×106/L)和造血祖细胞集落形成单位(69U/2×105MNC±3U/2×105MNC)数量显著低于对照组(P<0.05)。结论MMP-9可能通过裂解SDF-1、上调CD34+细胞表面SDF-1特异性受体CXCR4的表达及增强CD34+细胞迁移能力在G-CSF介导的HSPC动员中发挥重要作用。

关键词：基质金属蛋白酶粒细胞集落刺激因子造血干细胞动员

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神经钙粘连素胞外结构域的分离和表达

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中国病理生理杂志 2006年第3期22卷 520-523页

作者：黄跃龙许静李侠刘俊霞卢光琇宋增璇中南大学生殖与干细胞工程研究所湖南长沙410078 中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020

目的:分离和表达神经钙粘连素(N-cadherin,N-cad)胞外结构域cDNA并观察其表达蛋白质的免疫原性。方法:从胚胎肝脏和骨髓中分离出CD34+细胞,提取总RNA,RT-PCR扩增N-cad胞外结构域cDNA,插入表达载体pOPE101-215,重组载体pOPE-N-cad,经异... 详细信息

目的:分离和表达神经钙粘连素(N-cadherin,N-cad)胞外结构域cDNA并观察其表达蛋白质的免疫原性。方法:从胚胎肝脏和骨髓中分离出CD34+细胞,提取总RNA,RT-PCR扩增N-cad胞外结构域cDNA,插入表达载体pOPE101-215,重组载体pOPE-N-cad,经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达,以所表达蛋白免疫小鼠。结果:分离片段符合预期大小,DNA测序正确。重组质粒转化宿主菌XL1-Blue后,经IPTG诱导表达出了约70kD目的蛋白。免疫5次后,小鼠血清中可检出抗N-cad抗体。结论:CD34+细胞表达N-cad基因,其胞外结构域cDNA表达产物具有较好的免疫原性。

关键词：钙粘着糖蛋白类细胞外结构域基因表达

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纤维蛋白封闭剂复合人胚关节软骨细胞体内构建可注射性软骨

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中国生物工程杂志 2006年第8期26卷 77-83页

作者：葛薇姜文学李长虹尤佳邱录贵赵春华实验血液学国家重点实验室中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所天津300020 天津市第一中心医院骨关节外科天津310000

目的：研究以纤维蛋白封闭剂（FS）为载体，复合人胚关节软骨细胞，体内构建可注射性组织工程软骨的可行性。方法：常规分离消化，体外单层培养胎儿关节软骨细胞，观察软骨细胞的生物学特性。分别将1×10^7、2×10^7、3×1... 详细信息

目的：研究以纤维蛋白封闭剂（FS）为载体，复合人胚关节软骨细胞，体内构建可注射性组织工程软骨的可行性。方法：常规分离消化，体外单层培养胎儿关节软骨细胞，观察软骨细胞的生物学特性。分别将1×10^7、2×10^7、3×10^7第4代软骨细胞与FS混合接种于裸鼠皮下，并于第10周取材判断体内形成软骨的能力。结果：3～4代软骨细胞保持了很高的增殖和分泌基质的能力。软骨细胞与FS的复合物体内接种后各组均可形成软骨样组织块，其湿重、GAG含量随着接种细胞数量的增多而增高，各组之间差异具有显著性（P〈0．05）。3×10^7细胞组GAG含量与正常人胚关节软骨没有差异（P〉0．05）。组织切片显示软骨细胞位于类似正常软骨组织的陷窝中，阿尔新蓝染色及Ⅱ型胶原表达阳性，细胞内富含高尔基体、粗面内质网及大量分泌泡。结论：FS和人胚关节软骨细胞可以作为理想的支架材料和种子细胞应用于可注射软骨组织的构建。

关键词：纤维蛋白封闭剂软骨细胞组织工程可注射软骨

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