检索结果-内蒙古大学图书馆

生物工程学报 2005年第5期21卷 703-707页

作者：姜文国熊冬生邵晓枫王金宏许元富刘芳郭红星朱祯平杨纯正中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020

用RTPCR方法从人单核THP1细胞系克隆人41BBL胞外区基因,将其重组到pAYZ表达载体中,构建成人41BBL胞外区基因表达载体。将该载体转化大肠杆菌16C9,获得稳定表达,表达产物主要以可溶性状态存在;SDSPAGE和Westernblot分析显示,其分子量约为... 详细信息

用RTPCR方法从人单核THP1细胞系克隆人41BBL胞外区基因,将其重组到pAYZ表达载体中,构建成人41BBL胞外区基因表达载体。将该载体转化大肠杆菌16C9,获得稳定表达,表达产物主要以可溶性状态存在;SDSPAGE和Westernblot分析显示,其分子量约为22kD,与预期结果一致。这是首次在大肠杆菌中获得41BBL胞外区可溶性表达。生物学活性检测显示41BBL对于维持T淋巴细胞系因子释放非常有益,同时PI单染表明它能抑制Jurkat细胞的凋亡。这将在抗肿瘤免疫治疗中具有潜在应用前景。

关键词： 4-1BBL 协同刺激分子原核表达

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GSTT1,GSTM1和NQO1基因多态性与急性髓系白血病发生及其重现染色体异常关系的研究

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中华医学杂志 2005年第33期85卷 2312-2316页

作者：杨琳张悦张美荣肖志坚中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

目的探讨GSTT1,GSTM1和NQO1基因多态性与原发性急性髓系白血病(AML)易感性及AML染色体核型异常的关系。方法228例AML和241名与患者无血缘关系的正常人群对照,用多重聚合酶链反应(PCR)方法检测GSTT1和GSTM1基因型,用PCR限制性内切酶片段... 详细信息

目的探讨GSTT1,GSTM1和NQO1基因多态性与原发性急性髓系白血病(AML)易感性及AML染色体核型异常的关系。方法228例AML和241名与患者无血缘关系的正常人群对照,用多重聚合酶链反应(PCR)方法检测GSTT1和GSTM1基因型,用PCR限制性内切酶片段长度多态性(RFLP)方法分析NQO1基因型。结果AML患者GSTM1无效型(null)比例(62.3%)明显高于正常对照组(52.7%),而GSTT1无效型(null)比例与正常对照组比较,差异无统计学意义。NQO1C609TC/T和T/T基因型比例AML患者(分别为53.1%和25.0%)、t(8;21)(q22;q22)/AMLETO阳性患者(分别为64.3%和25.0%)、t(15;17)(q22;q11)/PMLRARα阳性患者(分别为57.1%和26.0%)明显高于正常对照组(分别为49.4%和13.7%)。NQO1C609TC/T和T/T基因型患t(8;21)(q22;q22)/AMLETO阳性AML的相对危险性分别为4.487(95%CI:1.282～15.705)和6.293(95%CI:1.536～25.782),NQO1C609TC/T和T/T基因型患t(15;17)(q22;q11)/PMLRARα阳性AML的相对危险性分别为2.531(95%CI:1.286～4.981)和4.149(95%CI:1.856～9.275)。结论NQO1C609TC/T和T/T基因型与我国成人原发性AML,特别是伴重现染色体异常t(8;21)(q22;q22)/AMLETO阳性及t(15;17)(q22;q11)/PMLRARα阳性AML高度相关。

关键词：白血病,粒细胞,急性易位(遗传学) 基因原发性急性髓系白血病 GSTM1基因型 GSTT1 染色体异常基因多态性 NQO1 多重聚合酶链反应(PCR)

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血源细胞系中CD39的表达和功能分析

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生物物理学报 2005年第3期21卷 175-181页

作者：聂坤郑国光张秀军林永敏宋玉华吴克复中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020

细胞外ATP通过激活细胞膜上核苷酸受体介导细胞间通讯。CD39是一个钙、镁离子依赖的ATP双磷酸酶,其对ATP信号的调节机制尚未完全阐明。采用半定量RT-PCR、ABC免疫酶标和流式细胞术以及荧光素/荧光素酶法,研究了七个血源细胞系中CD39的... 详细信息

细胞外ATP通过激活细胞膜上核苷酸受体介导细胞间通讯。CD39是一个钙、镁离子依赖的ATP双磷酸酶,其对ATP信号的调节机制尚未完全阐明。采用半定量RT-PCR、ABC免疫酶标和流式细胞术以及荧光素/荧光素酶法,研究了七个血源细胞系中CD39的表达和功能。结果表明,不同细胞中CD39的表达水平差异显著:在J6-1和LCL-H中高水平表达,在HL60中低水平表达,而在Namalva、Jurkat、U937细胞中极低水平表达。CD39的表达与这些细胞膜上ATP酶活性、胞外ATP的基础水平结果一致,提示CD39是这些细胞膜上ATP酶活性的主要来源,可能在调节P2受体介导的细胞间通讯中起重要作用。

关键词： CD39 ATP酶血源细胞系 P2受体

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负载转化生长因子β1的生物蛋白胶促进骨髓间充质干细胞体内构建组织工程软骨

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中国医学科学院学报 2005年第6期27卷 692-695,i0011-i0012页

作者：葛薇姜文学李长虹尤佳邱录贵赵春华中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020 Department of Osteal Surgery Tianjin First Center Hospital

目的探讨负载转化生长因子β1(TGF-β1)的生物蛋白胶(FS)促进骨髓间充质干细胞(BMSCs)体内构建组织工程软骨的可能性。方法体外分离扩增健康人BMSCsK以含有TGF-β1、地塞米松的特定培养基进行软骨起源的诱导。将诱导7d的BMSCs分别与含... 详细信息

目的探讨负载转化生长因子β1(TGF-β1)的生物蛋白胶(FS)促进骨髓间充质干细胞(BMSCs)体内构建组织工程软骨的可能性。方法体外分离扩增健康人BMSCsK以含有TGF-β1、地塞米松的特定培养基进行软骨起源的诱导。将诱导7d的BMSCs分别与含或不含有TGF-β1的FS复合后接种于裸鼠背部,作为BMSCs+FS-TGF-β1和BMSCs+FS实验组,同时设只注射FS和BMSCs的对照组。12周后从裸鼠体内取出组织工程标本进行大体观察、湿重测定、蛋白聚糖含量测定,并进行组织学及免疫组织化学检测。结果BMSCs以特定培养基诱导后可具备软骨细胞的形态和功能特征。复合物接种后两个实验组均可形成软骨样组织块,BMSCs+FS-TGF-β1组与BMSCs+FS组相比,可形成体积和重量更大的软骨样复合物;阿尔新兰染色显示具有更多的细胞外基质分泌;蛋白聚糖含量明显增高;免疫组织化学检测Ⅱ型胶原表达增强。而两个对照组无软骨样组织块形成。结论负载TGF-!1的FS支架可以促进BMSCs体内构建组织工程软骨。

关键词：骨髓间充质干细胞转化生长因子β1 可注射软骨生物蛋白胶组织工程

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口服携带人PF4基因的减毒沙门氏菌对大剂量化疗小鼠的促造血重建作用

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中国生物工程杂志 2005年第2期25卷 12-13,15-18页

作者：闫凤英卢士红许子亮刘斌赵丽华梁琳慧宋忻杨发金韩忠朝中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020

目的:探索口服携带人PF4基因的减毒沙门氏菌对大剂量化疗小鼠造血重建作用.方法:通过在大剂量化疗前/后喂服携带PIRES2-EGFP/PF4减毒沙门氏菌,检测化疗后小鼠的生存率,小鼠在不同时间外周血血常规、骨髓细胞数、骨髓中Sca-1和C-kit细胞... 详细信息

目的:探索口服携带人PF4基因的减毒沙门氏菌对大剂量化疗小鼠造血重建作用.方法:通过在大剂量化疗前/后喂服携带PIRES2-EGFP/PF4减毒沙门氏菌,检测化疗后小鼠的生存率,小鼠在不同时间外周血血常规、骨髓细胞数、骨髓中Sca-1和C-kit细胞含量、不同时间骨髓生成各系细胞的集落数等.结果:在大剂量化疗前、后均口服携带PIRES2-EGFP/PF4减毒沙门氏菌组小鼠生存率高于只在化疗前口服携带PIRES2-EGFP/PF4减毒沙门氏菌组;两组口服携带PIRES2-EGFP/PF4减毒沙门氏菌组小鼠存活率明显高于PBS对照组及携带空载体的减毒沙门氏菌组;口服携带PIRES2-EGFP/PF4减毒沙门氏菌组小鼠在化疗后第9～12天的外周血血小板数、骨髓细胞中Sca-1和C-kit阳性细胞含量明显比对照组高,第5天、9天、12天的骨髓细胞总数、骨髓细胞形成Mix集落数明显增加.结论:口服减毒沙门氏菌SL3261为载体的PF4基因可以保护小鼠免受损伤,并促进化疗损伤小鼠的造血恢复.

关键词：小鼠 PF4 携带减毒口服大剂量化疗骨髓细胞 EGFP 基因进化

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用抗细胞表面分子单链抗体筛选和鉴别其相互作用肽

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中国生物工程杂志 2005年第7期25卷 40-44页

作者：许静李侠刘俊霞何一心韩忠朝宋增璇中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020

展示于噬茵体表面的肽库适于用抗体筛选其特异性结合表达肽。scFv-C193是一个抗KGla细胞表面分子的单链抗体,其抗原仍不清楚,为了筛选并鉴定其识别分子,用8cFv-C193筛选了1个展示于T7噬茵体表面的人胎肝cDNA片段库。经4轮生物吸附后分... 详细信息

展示于噬茵体表面的肽库适于用抗体筛选其特异性结合表达肽。scFv-C193是一个抗KGla细胞表面分子的单链抗体,其抗原仍不清楚,为了筛选并鉴定其识别分子,用8cFv-C193筛选了1个展示于T7噬茵体表面的人胎肝cDNA片段库。经4轮生物吸附后分离单个阳性噬斑,并对其表达产物做电泳分析及斑点杂交。结果鉴别出1个scFv-C193结合肽,scFv-C193+克隆噬菌体DNA插入片段的PCR扩增和序列分析结果表明它是1个43bpDNA片段表达产物。BLAST分析EST人类基因数据库,发现它97%相同于CD34+造血干/祖细胞mRNA的1-43bp,提示scFv-C193识别片段存在于人类造血干/祖细胞基因中,单克隆单链抗体scFv-C193可能用于研究这些人类基因的性质。

关键词：抗体筛选表面分子相互作用鉴别造血干/祖细胞 cDNA片段噬菌体DNA CD34^+ 单链抗体表达产物特异性结合 PCR扩增基因数据库 BLAST 生物吸附斑点杂交电泳分析分析结果 mRNA 细胞基因人类基因体表面人胎肝结合肽

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骨髓间充质干细胞通过分泌TGF-β1抑制T细胞的增殖

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中国免疫学杂志 2005年第3期21卷 168-171页

作者：张伟葛薇李长虹尤胜国韩钦邓为民陈磊赵春华中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020

目的研究是否MSCs通过分泌TGFβ1抑制PHA刺激的T淋巴细胞的增殖。方法应用酶联免疫吸附试验测定MSCs上清中转化生长因子TGFβ1的分泌水平,应用抗TGFβ1抗体中和MSCs上清中的TGFβ1后,用3H掺入法检测在不同培养条件下PHA刺激T淋巴细胞增... 详细信息

目的研究是否MSCs通过分泌TGFβ1抑制PHA刺激的T淋巴细胞的增殖。方法应用酶联免疫吸附试验测定MSCs上清中转化生长因子TGFβ1的分泌水平,应用抗TGFβ1抗体中和MSCs上清中的TGFβ1后,用3H掺入法检测在不同培养条件下PHA刺激T淋巴细胞增殖的能力,以及应用Elispot试剂盒检测T淋巴细胞IFNγ的分泌水平。结果MSCs上清减少活化的T淋巴细胞IFNγ的分泌,抑制PHA刺激的T淋巴细胞的增殖能力,且它的这种抑制作用能够被抗TGFβ1抗体部分逆转。结论MSCs通过分泌TGFβ1抑制PHA刺激的T淋巴细胞的增殖。

关键词：骨髓间充质干细胞转化生长因子免疫抑制

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早期分化抗原在急性白血病中的表达及其意义

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中华内科杂志 2005年第1期40卷 46-49页

作者：周余李茜孟恒星王亚非于珍邱录贵中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室

目的　探讨CD3 4 、CD90 及CD13 3 在急性白血病 (AL)中的表达及其意义。方法　采用三色直接免疫荧光法测定 76例AL患者白血病细胞膜上CD3 4 、CD90 及CD13 3 抗原的表达 ,半定量RT PCR方法测定CD13 3 mRNA的表达。结果　 (1)AL患者的CD... 详细信息

目的　探讨CD3 4 、CD90 及CD13 3 在急性白血病 (AL)中的表达及其意义。方法　采用三色直接免疫荧光法测定 76例AL患者白血病细胞膜上CD3 4 、CD90 及CD13 3 抗原的表达 ,半定量RT PCR方法测定CD13 3 mRNA的表达。结果　 (1)AL患者的CD3 4 及CD13 3 表达高于正常对照组(46 37%、0 4 7% )、(2 1 93%、0 2 9% ) ,P值均 <0 0 1;但CD90 的表达二者间差异无统计学意义(0 5 1%、0 2 5 % ) ,P >0 0 5 ;AL、对照组的CD13 3 抗原表达均与CD13 3 mRNA表达相一致。 (2 )急性淋巴细胞白血病 (ALL)的CD90 阳性率高于急性髓细胞白血病 (AML) (P <0 0 5 ) ,B ALL的CD3 4 阳性率高于T ALL(P <0 0 5 )。AML中M4的CD13 3 阳性率最高 (P <0 0 1)。 (3)CD3 4 及CD13 3 阳性组AL的HLA DR阳性率显著高于阴性组 (79 1%、32 0 % ;82 8%、4 6 2 % ) ,P值均 <0 0 1;CD+ 3 4 AML的CD13 3 阳性率高于阴性组 (P <0 0 1) ,但两组之间CD90 阳性率差异无统计学意义。 (4)CD3 4 、CD90 及CD13 3 表达与AL的细胞或分子遗传学异常等临床预后因素无明显关系。 (5 )CD3 4 、CD90 及CD13 3 阳性组的完全缓解率及总反应率低于阴性组 ,但仅有CD3 4 /CD13 3 双阳性组完全缓解率低于双阴性组差异有统计学意义 (P <0 0 5 )。

关键词： CD13 CD34 表达 AL 阳性率阴性急性白血病意义差异结论

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Flk1^+间充质干细胞减轻四氯化碳导致的肝纤维化的研究

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生物工程学报 2005年第3期21卷 396-401页

作者：史明霞房佰俊廖联明杨少光刘煜昊赵春华中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所组织工程中心北京100005 中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020

许多慢性肝脏疾病都会发生肝纤维化,但是目前尚缺乏对肝纤维化切实有效的治疗手段。实验发现,Flk1(fetalliverkinase)阳性间充质干细胞(MSC)能够减轻四氯化碳(CCl4 )所致小鼠肝纤维化。取雄性BALB c小鼠骨髓,分离培养Flk1+ MSC ,用CCl4... 详细信息

许多慢性肝脏疾病都会发生肝纤维化,但是目前尚缺乏对肝纤维化切实有效的治疗手段。实验发现,Flk1(fetalliverkinase)阳性间充质干细胞(MSC)能够减轻四氯化碳(CCl4 )所致小鼠肝纤维化。取雄性BALB c小鼠骨髓,分离培养Flk1+ MSC ,用CCl4 制作雌性小鼠肝纤维化模型,在CCl4 损伤后立即或1周后经尾静脉注射Flk1+ MSC ,2或5周后检测受体小鼠肝脏的纤维化程度和供体细胞的植入。结果发现,CCl4 损伤后立即注射Flk1+ MSC ,可以使肝脏损伤程度明显减轻,减少胶原沉积,使肝脏羟脯氨酸含量及血清纤维化指标显著下降;而损伤1周后注射细胞则无明显变化。免疫荧光、PCR和荧光原位杂交方法证实,在受体肝脏中有供体细胞植入,呈上皮细胞形态,并表达白蛋白,但是数量很少。因此,Flk1+ MSC具有潜在的植入肝组织的能力,并可能启动肝组织的内源性修复,减轻CCl4 导致的肝纤维化。

关键词：间充质干细胞,肝纤维化,移植

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生物被膜分散方式的研究进展

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微生物学通报 2005年第6期32卷 120-123页

作者：董成亚马小彤中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

临床上生物被膜与感染的慢性迁延不愈密切相关,而生物被膜菌的分散又会造成感染的反复急性发作,给临床感染的有效控制带来很大困难。生物被膜菌的分散过程受到了遗传和环境等多因素的调控,主要是通过蜂式分散、块式分散和毯式分散3种形... 详细信息

临床上生物被膜与感染的慢性迁延不愈密切相关,而生物被膜菌的分散又会造成感染的反复急性发作,给临床感染的有效控制带来很大困难。生物被膜菌的分散过程受到了遗传和环境等多因素的调控,主要是通过蜂式分散、块式分散和毯式分散3种形式来实现的。深入进行生物被膜基础研究对改变目前临床感染治疗的窘境有重大意义。

关键词：生物被膜分散方式感染

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