检索结果-内蒙古大学图书馆

第11次中国实验血液学会议

目的：iASPP 是 ASPP 家族中的抑制性成员, 与该家族中的其它成员竞争性结合 p53,抑制 p53对靶基因的激活。iASPP 是一个新的癌蛋白, 部分肿瘤或白血病的发生可能与 iASPP 过表达导致 p53失活有关。根据肿瘤双打击学说,本研究通过基因... 详细信息

目的：iASPP 是 ASPP 家族中的抑制性成员, 与该家族中的其它成员竞争性结合 p53,抑制 p53对靶基因的激活。iASPP 是一个新的癌蛋白, 部分肿瘤或白血病的发生可能与 iASPP 过表达导致 p53失活有关。根据肿瘤双打击学说,本研究通过基因转导的方法,在小鼠骨髓细胞(BMC) 中过表达 iASPP或/和突变的 N-Ras,观察高表达 iASPP或/和突变的 N-Ras 能否使体外培养的正常 BMC 获得增殖及自我更新的潜能。

关键词： iASPP 癌蛋白小鼠骨髓细胞

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脐带血移植的应用进展及脐带血库建设

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生命科学 2007年第2期19卷 169-173页

作者：吴海江朱德琳韩忠朝中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室细胞产品国家工程研究中心/天津昂赛细胞基因工程有限公司

脐带血(umbilical cord blood)作为公认的造血干细胞重要来源之一,已经被广泛地用于治疗儿童和成人的良恶性血液系统疾病以及中枢神经系统疾病、实体瘤、缺血性下肢血管病和组织再生等。相对于骨髓移植和外周血来源的造血干细胞移植,脐... 详细信息

脐带血(umbilical cord blood)作为公认的造血干细胞重要来源之一,已经被广泛地用于治疗儿童和成人的良恶性血液系统疾病以及中枢神经系统疾病、实体瘤、缺血性下肢血管病和组织再生等。相对于骨髓移植和外周血来源的造血干细胞移植,脐带血移植(UCBT)在细胞收集使用、干细胞增殖能力以及移植物抗宿主反应等方面都具有明显的优势。目前的数据显示,因为HLA配型等原因而无法进行骨髓移植的患者应该尽早进行UCBT。此外,UCBT的增多促进了脐带血库的快速建设。本文针对UCBT和脐带血库的最新进展进行了综述。

关键词：脐带血移植脐带血库造血干细胞

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干细胞研究新进展及其在肿瘤治疗中的作用

干细胞研究新进展及其在肿瘤治疗中的作用

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第一届国际肿瘤干细胞学术会议

作者：韩忠朝中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室国家干细胞工程技术研究中心

干细胞被定义为永存的细胞,能自我更新和在特异组织中分化产生成熟细胞。在多数组织中特异性干细胞是极少的,而支撑这些特异性干细胞生存、分化和成熟的细胞的干细胞(间充质干细胞)则比较普遍存在。为了研究干细胞的特征,干细胞需经过... 详细信息

干细胞被定义为永存的细胞,能自我更新和在特异组织中分化产生成熟细胞。在多数组织中特异性干细胞是极少的,而支撑这些特异性干细胞生存、分化和成熟的细胞的干细胞(间充质干细胞)则比较普遍存在。为了研究干细胞的特征,干细胞需经过仔细纯化和鉴定。尽管有理由认为每种组织来自于一种组织特异性干细胞,但这些组织特异性干细胞的严格鉴定和定向分化只在极少的组织中成功地完成。实际上,来自不同组织,不同发育阶段的干细胞有许多相同的生物学特性,但这些特性的表现则取决于其所处的环境。近年来,干细胞技术在不断地发展和完善。这些新技术包括不同组织来源干细胞的鉴别分离、培养扩增和存储,临床级干细胞的规模化分离、制造工艺技术,干细胞制剂的剂型设计。

关键词：肿瘤治疗干细胞生物学特性剂型设计

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血管干细胞与促血管新生在血栓性血管病中的应用

血管干细胞与促血管新生在血栓性血管病中的应用

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第十一届全国血栓与止血学术会议暨血栓栓塞性疾病（血栓与止血）基础与临床研究进展学习班

作者：韩忠朝中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室国家干细胞工程技术研究中心

早在一个世纪前就有人提出造血细胞和血管细胞可能有一个共同的干细胞—血液血管干细胞 (hemangioblaSt)。血液血管干细胞可以发育分化成造血干细胞(hematopoietic stem cell,HSC)和血管干细胞 (angioblast),后二者进一步分化增殖形成... 详细信息

早在一个世纪前就有人提出造血细胞和血管细胞可能有一个共同的干细胞—血液血管干细胞 (hemangioblaSt)。血液血管干细胞可以发育分化成造血干细胞(hematopoietic stem cell,HSC)和血管干细胞 (angioblast),后二者进一步分化增殖形成血细胞和血管两大系统。但直到近几年,才有实验研究证实了血液

关键词： HSC 促血管新生缺血性疾病

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钙调素拮抗剂O-(4-乙氧基)-丁基-小檗胺对乳腺癌多药耐药细胞系MCF-7/ADR的耐药逆转作用

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中国医学科学院学报 2006年第2期28卷 164-168页

作者：程燕红齐静熊冬生刘杰文齐淑玲潘兵杨纯正朱惠芳中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020

目的研究钙调素拮抗剂O-4-乙氧基-丁基-小檗胺(EBB)对乳腺癌多药耐药细胞系MCF-7/ADR的耐药逆转作用。方法采用四唑盐(MTT)比色法测定药物敏感性,分析联合应用低剂量EBB(≤IC20)时阿霉素(ADR)对MCF-7/ADR细胞的半数抑制浓度(IC50)值及... 详细信息

目的研究钙调素拮抗剂O-4-乙氧基-丁基-小檗胺(EBB)对乳腺癌多药耐药细胞系MCF-7/ADR的耐药逆转作用。方法采用四唑盐(MTT)比色法测定药物敏感性,分析联合应用低剂量EBB(≤IC20)时阿霉素(ADR)对MCF-7/ADR细胞的半数抑制浓度(IC50)值及其增敏倍数;应用流式细胞术测定EBB对细胞周期的影响,同时观察细胞内药物浓度的积累;采用逆转录—多聚酶链反应检测EBB对多药耐药基因-1(mdr1)及拓扑异构酶Ⅱb(topⅡb)mRNA表达水平的影响。结果EBB对MCF-7/ADR的多药耐药具有明显逆转作用,3、7·5μmol/L浓度的EBB可以明显提高MCF-7/ADR对ADR的敏感性,平均增敏倍数分别为50·40、89·80倍,逆转强度明显高于阳性逆转剂维拉帕米(VPL)的14·88倍(P=0·0097)。6μmol/L的EBB处理2h后,细胞内积累的P糖蛋白底物罗丹明123(Rh123)荧光强度峰值发生明显右移;同时EBB可明显增强ADR对MCF-7/ADR细胞在G2/M期的阻滞作用。6和12μmol/L的EBB处理MCF-7/ADR细胞48h后,mdr1的mRNA表达水平有一定的降低趋势,但无统计学差异;topⅡb基因表达差异亦无显著性。结论EBB对MCF-7/ADR细胞具有较强的逆转多药耐药作用,其可能的逆转机制在于增强ADR对耐药细胞在G2/M期的阻滞以及抑制P糖蛋白外排泵作用。

关键词：钙调素拮抗剂 O-(4-乙氧基)-丁基-小檗胺多药耐药逆转

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噬菌体展示抗体微型文库的构建

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生物医学工程学杂志 2006年第6期23卷 1320-1324页

作者：黄跃龙李侠许静刘俊霞宋增璇卢光琇中南大学生殖与干细胞工程研究所中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020 中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室

用噬菌体展示技术构建抗神经钙粘连素(N-cadherin,N-cad)分子胞外结构域、CD34分子胞外结构域及AC133分子的噬菌体展示单链抗体库。将3种分子分别表达于噬菌体表面,再以此噬菌体免疫BALB/c小鼠,提取脾总RNA,RT-PCR扩增抗体重、轻链基因c... 详细信息

用噬菌体展示技术构建抗神经钙粘连素(N-cadherin,N-cad)分子胞外结构域、CD34分子胞外结构域及AC133分子的噬菌体展示单链抗体库。将3种分子分别表达于噬菌体表面,再以此噬菌体免疫BALB/c小鼠,提取脾总RNA,RT-PCR扩增抗体重、轻链基因cDNA并插入噬菌体表达载体,构建分别抗N-cad分子胞外结构域、CD34分子胞外结构域及AC133分子的噬菌体表达文库。然后对文库的库容量、多样性、滴度及表达能力进行鉴定。结果显示,用噬菌体展示的3种分子免疫小鼠获得成功,所构建抗体文库的库容量、多样性、滴度及表达能力均能满足进一步筛选目的抗体基因的需要,为制备相应的特异性抗体奠定了基础。

关键词：神经钙粘连素 CD34 AC133噬菌体展示单链抗体

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慢性特发性血小板减少性紫癜患者Ⅰ类和Ⅱ类T细胞特点的研究

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中华医学杂志 2006年第10期86卷 669-673页

作者：王婷婷赵辉任贺郭建海徐茂强杨仁池韩忠朝中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

目的探讨慢性特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者Ⅰ类和Ⅱ类T细胞的特点。方法采取30例慢性ITP患者外周血及8例慢性ITP患者和6例遗传性球形红细胞增多症患者的脾细胞(接受脾切除的患者),应用流式细胞仪技术检测辅助T细胞(Th)CD4+和细胞毒... 详细信息

目的探讨慢性特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者Ⅰ类和Ⅱ类T细胞的特点。方法采取30例慢性ITP患者外周血及8例慢性ITP患者和6例遗传性球形红细胞增多症患者的脾细胞(接受脾切除的患者),应用流式细胞仪技术检测辅助T细胞(Th)CD4+和细胞毒性T细胞(Tc)CD8+胞质内细胞因子干扰素γ(IFNγ)/白细胞介素(IL)4的比例;应用实时定量聚合酶链反应(PCR)检测Tbet和GATA3mRNA的表达水平。结果疾病活动期患者外周血Th1/Th2和Tc1/Tc2的比例(25.62和30.23)显著高于正常对照组(8.29和12.58,均P<0.01);缓解期患者外周血Th1/Th2和Tc1/Tc2的比例(9.86和10.10)与正常对照组相比,差异无统计学意义。ITP患者脾细胞Th1/Th2的比例(41.46)显著高于对照组(16.30,P<0.01);Tc1/Tc2的比例(35.80)高于对照组(16.88),但差异无统计学意义。疾病活动期患者外周血以及ITP患者脾细胞GATA3mRNA水平明显低于对照组(是对照组的0.20和0.34倍,均P<0.05),缓解期患者与对照组相比,差异无统计学意义(是对照组的0.97倍)。ITP患者外周血及脾细胞TbetmRNA的表达水平与对照组相比,差异无统计学意义(是对照组的1.17和1.04倍)。结论ITP是Ⅰ类T细胞占优势的自身免疫性疾病。促进Ⅰ类T细胞模式向Ⅱ类T细胞转化可能为ITP患者提供一种潜在的免疫治疗方式。

关键词：紫癜血小板减少性特发性 T淋巴细胞干扰素Ⅱ型

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EKI-785对U937细胞系的生长调节作用

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中华肿瘤杂志 2006年第11期28卷 810-814页

作者：袁向飞卢士红冯义刘娜宋忻陆敏中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

目的探讨erbB家族受体在急性单核细胞白血病细胞系U937中的表达及其对细胞生长的影响。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测erbB家族成员在U937细胞中的表达情况,Western blot检测erbB2在蛋白水平的表达。以erbB受体抑制剂EKI-785... 详细信息

目的探讨erbB家族受体在急性单核细胞白血病细胞系U937中的表达及其对细胞生长的影响。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测erbB家族成员在U937细胞中的表达情况,Western blot检测erbB2在蛋白水平的表达。以erbB受体抑制剂EKI-785处理细胞后,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)实验并绘制细胞生长曲线,观察细胞的生长变化情况；应用Annexin V/PI双染和流式细胞仪计数,观察细胞是否发生凋亡；Western blot检测细胞增殖生长信号的变化。结果在U937细胞中,除了erbB1外,其他erbB受体均有表达,且erbB2有蛋白水平的表达。经过1、2、4和8μmoL/L EKI-785处理48h后,U937细胞的生长受到不同程度的抑制,抑制率分别为(10．49±3．69)%、(13．79±2．13)%、(31．42±3．90)%和(44．05±1．56)%,并呈现出比较明显的浓度依赖关系。EKI-785诱导U937细胞发生了早期凋亡,4μmol/L EKI-785处理U937细胞48和72h,Annexin- V^+/PI^-标记的早期凋亡细胞所占的比例分别为相应对照组的2．03倍和6．64倍。经4μmol/L EKI- 785作用24、48、72h后,磷酸化的MEK和Akt蛋白水平随着时间延长不断下降,72h时磷酸化的MEK和Akt几乎消失。结论erbB家族受体很可能在某些类型的白血病发生中发挥重要作用,有望成为这些白血病的新治疗靶点,EKI-785具有治疗白血病的应用前景。

关键词： erbB EKI-785 U937细胞系白血病

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抗CD20嵌合抗体片段Fab′突变体对B淋巴细胞凋亡及胞内Ca^(2+)的影响

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肿瘤 2006年第2期26卷 116-119页

作者：杨铭范冬梅熊冬生刘银星许元富杨纯正中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020

目的研究抗CD20嵌合抗体片段Fab′突变体诱导B淋巴细胞凋亡的发生、凋亡相关基因表达以及细胞内钙离子的浓度变化。方法以人B淋巴细胞(Raji细胞)为凋亡细胞模型,通过MTT法、Western blot和流式细胞仪等方法观察bcl-2/bax基因表达、细胞... 详细信息

目的研究抗CD20嵌合抗体片段Fab′突变体诱导B淋巴细胞凋亡的发生、凋亡相关基因表达以及细胞内钙离子的浓度变化。方法以人B淋巴细胞(Raji细胞)为凋亡细胞模型,通过MTT法、Western blot和流式细胞仪等方法观察bcl-2/bax基因表达、细胞色素c及胞内Ca2+的变化。结果抗CD20嵌合抗体片段Fab′突变体对Raji细胞生长增殖具有明显的抑制作用,并呈剂量依赖性。细胞中bcl-2表达有微弱的下降,而bax表达明显升高,并出现细胞色素c的释放和胞内Ca2+浓度的升高。结论抗CD20嵌合抗体片段Fab′突变体诱导Raji细胞凋亡,与bcl-2/bax表达、细胞色素c的释放和胞内Ca2+浓度的升高有关。

关键词：淋巴瘤,B细胞免疫球蛋白类,FAB 突变 CD20抗体基N表达钙信号 Raji细胞

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重组凝血酶敏感蛋白-1N端片段对CD36表达阴性的ECV304细胞增殖的抑制

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中国生物工程杂志 2006年第4期26卷 27-31页

作者：王黎芳周毓玲顾洁韩忠朝中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020

目的:构建凝血酶敏感蛋白-1N端片段(TSF)的原核表达体系,测定重组蛋白的活性。方法:从人脐静脉内皮细胞cDNA中扩增得到thbs1基因片段,克隆到pET32c(+)载体系统并转化 BL21大肠杆菌,表达纯化得到TSF。MTT法体外测定目的蛋白对ECV304细胞... 详细信息

目的:构建凝血酶敏感蛋白-1N端片段(TSF)的原核表达体系,测定重组蛋白的活性。方法:从人脐静脉内皮细胞cDNA中扩增得到thbs1基因片段,克隆到pET32c(+)载体系统并转化 BL21大肠杆菌,表达纯化得到TSF。MTT法体外测定目的蛋白对ECV304细胞增殖的抑制作用。免疫荧光标记流式细胞仪测定CD36的表达。结果:获得了原核表达的重组TSF蛋白。目的蛋白对CD36阴性的ECV304细胞有增殖抑制作用。结论:低剂量重组TSF蛋白是一个具有临床应用前景的抗肿瘤治疗的辅助方法。

关键词：重组凝血酶敏感蛋白-1 表达纯化内皮细胞CD36

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