检索结果-内蒙古大学图书馆

中国实验血液学杂志 2006年第4期14卷 731-736页

作者：李云涛徐燕孟恒星葛薇李桥川万长春于珍李长虹邱录贵中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

为了研究低血清条件下从脐血中分离多能非造血成体干细胞的相关影响因素,探索优化培养条件,通过不同培养液、接种密度、首次换液时间对脐血多能非造血成体干细胞生长的影响的比较,并以选定的条件对其培养扩增,进行免疫表型及诱导分化能... 详细信息

为了研究低血清条件下从脐血中分离多能非造血成体干细胞的相关影响因素,探索优化培养条件,通过不同培养液、接种密度、首次换液时间对脐血多能非造血成体干细胞生长的影响的比较,并以选定的条件对其培养扩增,进行免疫表型及诱导分化能力检测。结果表明在低血清条件下,DMEM/F12培养液更适合于脐血多能非造血成体干细胞生长;1×106/cm2是原代培养的适宜接种密度,原代第72小时首次换液为最佳换液时问。利用所选条件培养的细胞可在体外持续扩增,并具有良好的分化潜能。结论建立了人脐血多能非造血成体干细胞的体外优化培养条件,为其在组织工程方面的应用作出了新的探索。

关键词：干细胞多能非造血成体干细胞脐血分离效率

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Bcl-x_L在原发性血小板增多症患者巨核细胞分化过程中的表达

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中华血液学杂志 2006年第1期27卷 50-52页

作者：张磊杨仁池刘斌卢士红刘永泽赵辉任贺韩忠朝中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

原发性血小板增多症（ET）是一类造血系统慢性骨髓增生性疾病，其临床特点是外周血中血小板持续增高，同时骨髓中巨核细胞过度增生。ET的发病机制目前尚未完全明确。近来有学者发现体外诱导CD34^＋细胞分化得到的巨核细胞具有明显的凋... 详细信息

原发性血小板增多症（ET）是一类造血系统慢性骨髓增生性疾病，其临床特点是外周血中血小板持续增高，同时骨髓中巨核细胞过度增生。ET的发病机制目前尚未完全明确。近来有学者发现体外诱导CD34^＋细胞分化得到的巨核细胞具有明显的凋亡特征，是巨核细胞成熟晚期的表现。有研究也显示了巨核细胞的凋亡特征，显示血小板的形成是巨核细胞成熟后的晚期表现。抗凋亡蛋白Bcl-xL属于Bcl-2蛋白家族，主要在造血细胞中表达，在调节造血干细胞的分化中具有重要功能。有人研究发现抗凋亡蛋白Bcl-xL，

关键词：原发性血小板增多症 Bcl-xL 巨核细胞分化过程慢性骨髓增生性疾病抗凋亡蛋白 Bcl-2蛋白患者 CD34^+ 细胞成熟

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脂多糖和金黄色葡萄球菌对IL-23、IL-12表达的调控

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中国免疫学杂志 2006年第1期22卷 33-36页

作者：马小彤吴克复张秀军李戈林永敏宋玉华中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

目的:检测脂多糖(LPS)和金黄色葡萄球菌(SAC)对人外周血单个核细胞(PBMC)IL-23和IL-12各亚基表达的调节作用并探索其作用机制。方法:用LPS和SAC直接刺激人PBMC,或用CD14抗体或p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK) 抑制剂Mastoparan预处理PBMC... 详细信息

目的:检测脂多糖(LPS)和金黄色葡萄球菌(SAC)对人外周血单个核细胞(PBMC)IL-23和IL-12各亚基表达的调节作用并探索其作用机制。方法:用LPS和SAC直接刺激人PBMC,或用CD14抗体或p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK) 抑制剂Mastoparan预处理PBMC后再予LPS和SAC刺激,半定量RT-PCR方法检测IL-23p19、IL-12p35和IL-12p40亚基的基因表达变化。结果:人PBMC组成性表达p19和p35,不表达p40。LPS和SAC可上调各亚基的表达。LPS诱导的IL-23和IL- 12各亚基表达均需通过CD14;CD14仅部分参与SAC诱导的IL-12 p40和p35表达上调,而与p19上调无关。LPS和SAC诱导的IL-23和IL-12各亚基表达均需要p38 MAPK通路。结论:LPS和SAC刺激下IL-23和IL-12亚基表达及信号传导通路既有相似之处又有不同点,为单独或同时调控这两种因子的表达提供线索。

关键词： IL-23 IL-12 细菌信号传导

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RAD51G135C和XRCC3C241T多态性与急性髓系白血病和骨髓增生异常综合征的发生及其染色体异常相关性研究

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中华血液学杂志 2006年第11期27卷 727-731页

作者：张美荣张悦徐世才刘旭平肖志坚中国医学科学院、中国协和医科大学血液学研究所、血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

目的探索同源重组修复基因RAD51和XRCC3多态性与急性髓系白血病（AML）、骨髓增生异常综合征（MDS）发生及染色体异常之间的关系。方法对306例AML患者、52例MDS患者和458名与患者无血缘关系的正常人，用聚合酶链反应-限制性内切酶片段... 详细信息

目的探索同源重组修复基因RAD51和XRCC3多态性与急性髓系白血病（AML）、骨髓增生异常综合征（MDS）发生及染色体异常之间的关系。方法对306例AML患者、52例MDS患者和458名与患者无血缘关系的正常人，用聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性（PCR—RFLP）方法分析RAD51、XRCC3、NQ01基因型，用多重PCR方法检测GSTF1和GSTM1基因型。结果AML患者RAD51G135CG／C基因型比例（35．3％）与正常对照组（26．9％）比较差异有统计学意义（P=0．023），RAD51cmcG／C基因型患AML的相对风险性（OR值）为1．441（95％CI：1．052～1．973）。inV（16）和（或）t（16；16）／CBFB-MYH11（＋）患者，XRCC3G241T，杂合子基因型的比例（41．2％）明显高于正常对照组（10．0％）（P=0．000），XRCC3C241T，杂合子基因型患inv（16）和（或）t（16；16）AML的OR值为6．133（95％CI：2．227—16．887，P=0．000）；且不同基因之间有显著的协同效应，XRCC3C241T，和RAD51G135C同时为变异基因型，0R值增高至8．697，在此基础上同时GSTM1为缺失型，OR值增至12．656，同时NQ01C609-为变异基因型，0R值增至17．091。MDS患者RAD51cⅢc和XRCC3。㈨，各基因型比例与正常对照组比较差异无统计学意义。结论XRCC3C241T，基因型与inv（16）和（或）t（16；16）／CBFB—MYH11（＋）AML发生高度相关，此相关性与XRCC3C241T，和RAD51C135C之间，及与GSTM1和NQ01C509-基因之间存在显著的协同效应。RAD51G135C和XRCC3C241T基因型与MDS发生及MDS染色体异常之间未发现有相关性。

关键词：白血病非淋巴细胞急性骨髓增生异常综合征基因 RAD51 XRCC3

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骨髓间充质干细胞复合纤维蛋白封闭剂体内构建可注射性组织工程软骨

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中国修复重建外科杂志 2006年第2期20卷 139-143页

作者：葛薇姜文学李长虹尤佳邱录贵赵春华中国医学科学院中国协和医科大学血液病医院血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020 天津市第一中心医院骨关节外科

目的探讨利用人骨髓间充质干细胞(marrowmesenchymalstemcells,MSCs)与可注射性纤维蛋白封闭剂(fibrinsealant,FS)复合,在裸鼠体内构建组织工程软骨的可行性。方法体外分离扩增健康人MSCs,以含有转化生长因子β1(transforminggrowthfac... 详细信息

目的探讨利用人骨髓间充质干细胞(marrowmesenchymalstemcells,MSCs)与可注射性纤维蛋白封闭剂(fibrinsealant,FS)复合,在裸鼠体内构建组织工程软骨的可行性。方法体外分离扩增健康人MSCs,以含有转化生长因子β1(transforminggrowthfactorβ1,TGF-β1)、地塞米松、维生素C的培养基进行成软骨诱导,诱导第7、14天分别检测软骨细胞特异的生物学特性。将诱导7d的MSCs与FS复合,接种于裸鼠背部皮下作为实验组,同时设单纯只注射FS或MSCs的支架对照组和细胞对照组。分别于接种后6、12周取材进行大体观察,行HE、阿尔新蓝染色和型胶原免疫组织化学染色评价其成软骨能力。结果MSCs以特定的培养基诱导后由纺锤形变为多角形,并表达软骨细胞分泌的基质。复合物接种6和12周后,实验组均可形成软骨样组织块,6周时形成的组织块较小而质地柔韧,陷窝清楚,可检测到阳性阿尔新蓝及型胶原表达;12周形成的组织块较大,质地较硬,表面光滑,软骨细胞位于成熟的陷窝中,阿尔新蓝及型胶原免疫组化阳性染色较6周增强。两个对照组均无软骨样组织块形成。结论MSCs复合FS可以作为一种较优良的可注射性组织工程软骨的构建方法。

关键词：组织工程软骨骨髓间充质干细胞可注射性纤维蛋白封闭剂

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儿童血友病429例临床回顾分析

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中国实用儿科杂志 2006年第4期21卷 292-295页

作者：郭晔张磊竺晓凡杨仁池中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院国家实验血液学重点实验室天津300020

目的探讨血友病患儿确诊时间、症状及其关节畸形等情况。方法天津血液学研究所血液病医院于1986年7月至2004年8月,对就诊的429例血友病患儿临床症状出现时间、诊断时间及关节畸形出现的时间进行分析。结果429例血友病患儿,均为男性,血友... 详细信息

目的探讨血友病患儿确诊时间、症状及其关节畸形等情况。方法天津血液学研究所血液病医院于1986年7月至2004年8月,对就诊的429例血友病患儿临床症状出现时间、诊断时间及关节畸形出现的时间进行分析。结果429例血友病患儿,均为男性,血友病A共390例,占90.9%,其中亚临床型5例(1.3%),轻型43例(11.0%),中型181例(46.4%),重型161例(41.3%);血友病B共39例,占9.1%,其中亚临床型2例(5.1%),轻型6例(15.4%),中型26例(66.7%),重型5例(12.8%)。患儿初次出现出血症状的中位年龄为1.6岁(0～12岁);但初次诊断年龄0.3～12.0岁,中位年龄为5.2岁(0.3～12.0岁),两者之间差异具有显著性意义(P<0.01)。结论目前血友病患儿的诊断存在延迟,替代治疗疗程和因子剂量的不足是关节畸形高发生率的原因。

关键词：血友病关节畸形诊断治疗

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两步法扩增诱导脐血及动员外周血CD34^+细胞来源树突状细胞的比较

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中国实验血液学杂志 2006年第6期14卷 1163-1167页

作者：王亚非孟恒星葛薇于珍李云涛李桥川万长春徐燕李新李增军王国蓉尤胜国邱录贵中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所和血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

为了比较先扩增、后诱导的两步法从脐血(CB)CD34+细胞和动员外周血(MPB)CD34+细胞诱导所得DC的产量及功能,将免疫磁珠分选获得的CB-CD34+细胞和MPB-CD34+细胞用FL、TPO、SCF、GM-CSF等细胞因子先扩增10天,然后加入GM-CSF、IL-4及TNF-α... 详细信息

为了比较先扩增、后诱导的两步法从脐血(CB)CD34+细胞和动员外周血(MPB)CD34+细胞诱导所得DC的产量及功能,将免疫磁珠分选获得的CB-CD34+细胞和MPB-CD34+细胞用FL、TPO、SCF、GM-CSF等细胞因子先扩增10天,然后加入GM-CSF、IL-4及TNF-α、CD40Ab、PGE2等细胞因子组合诱导获得DC。采用流式细胞仪检测DC表型,混合淋巴细胞培养检测DC刺激异基因T细胞增殖能力,ELISA法检测DC分泌IL-12能力,Transwell板检测DC在次级淋巴组织趋化因子(SLC)介导下的趋化功能。结果表明①扩增10天时CB组、MPB组细胞中CD14+CD1a-细胞含量无显著差异[(40.48±16.85)%vs(28.07±23.19)%,P>0.05]。但由于CB组细胞扩增倍数显著高于MPB组(388.88±84.63倍vs79.67±10.32倍,P<0.01),CB组CD14+CD1a-细胞扩增倍数显著高于MPB组(189.42±25.02倍vs28.74±23.27倍,P<0.01);②TNF-α/CD40Ab/PGE2条件下与TNF-α条件下相比,CB组和MPB组所得DC均表达更高的CD83[分别为(34.52±11.22)%vs(3.70±2.27)%、(36.69±13.36)%vs(7.34±3.364)%,P均<0.01];③CB组与MPB组在TNF-α/CD40Ab/PGE2诱导条件下所得DC均高水平表达CD83、CD86、HLA-DR、CD11c、CD54、CD40,CB组所得CD83+细胞的扩增倍数显著高于MPB组(198.72±117.53倍vs33.95±6.19倍,P<0.01);④CD40Ab/PGE2/TNF-α条件下CB与MPB来源的DC在刺激异基因T细胞增殖、IL-12的分泌[(16.2±4.31)pg/mlvs(13.5±4.1)pg/ml]以及SLC介导的迁移率[(28.09±7.76)%vs(18.5±3·47)%]上均无显著差别(P均>0.05)。结论在两步法培养体系下,CB-CD34+细胞与MPB-CD34+细胞来源的DC具有相同的功能,而前者产量显著高于后者。

关键词：树突状细胞脐血动员外周血 CD34^+细胞两步法培养法

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血友病骨关节病101例X线表现及临床分析

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中国综合临床 2006年第4期22卷 326-328页

作者：孙淑娟张磊杨仁池孙洪砚韩忠朝中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院血液科天津300020 中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院放射科天津300020 中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020

目的通过单中心较大样本的X线检查及临床分析，了解我国血友病骨关节病的治疗现状。方法回顾性分析101例血友病患者的临床资料和骨关节的放射学积分。结果 ①患者首次发生异常出血和首次就诊的中位年龄分别为1岁和15岁，诊断时间延迟... 详细信息

目的通过单中心较大样本的X线检查及临床分析，了解我国血友病骨关节病的治疗现状。方法回顾性分析101例血友病患者的临床资料和骨关节的放射学积分。结果 ①患者首次发生异常出血和首次就诊的中位年龄分别为1岁和15岁，诊断时间延迟。②骨关节病在重型、中型、轻型血友病的发生率分别为77．8％、53．6％、20．0％，中型、轻型患者也有较高的罹患率。易受累的关节依次为膝、肘、踝；③在0～9岁、10～19岁、20～29岁、30～39岁、40～49岁、≥50岁等各年龄段，骨关节病的发病率分别为37．5％、59．4％、78．3％、83．3％、76．9％、100％。④治疗组和非治疗组骨关节病的发病率分别为69．4％和62．1％。差异无显著性；⑤骨关节畸形的发生率在具有靶关节组和无靶关节组分别为71．2％和20．0％，差异有显著性。结论我国血友病患者骨关节病发病率高，成为影响患者健康相关生活质量的主要因素之一。靶关节可以作为判断发生病变骨关节预后的较好指标。

关键词：血友病慢性骨关节病变放射学积分靶关节

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多发性骨髓瘤患者骨髓Flk1^+间充质干细胞的成骨能力降低

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基础医学与临床 2006年第6期26卷 586-592页

作者：李炳宗李静史明霞陈磊高伟波赵春华中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所组织工程研究中心北京100005 中国医学科学院中国协和医科大学血液病研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

目的研究多发性骨髓瘤(MM)患者骨髓F lk1+间充质干细胞(F lk1+MSCs)的成骨特性,探讨其与多发性骨髓瘤骨病的关系。方法分离并鉴定MM患者骨髓源F lk1+MSCs;利用实时定量RT-PCR检测F lk1+MSCs成骨诱导前后成骨指标的表达,诱导2周后用Von-K... 详细信息

目的研究多发性骨髓瘤(MM)患者骨髓F lk1+间充质干细胞(F lk1+MSCs)的成骨特性,探讨其与多发性骨髓瘤骨病的关系。方法分离并鉴定MM患者骨髓源F lk1+MSCs;利用实时定量RT-PCR检测F lk1+MSCs成骨诱导前后成骨指标的表达,诱导2周后用Von-Kossa染色法测定钙盐沉积;同时测定F lk1+MSCs中转录共刺激因子(TAZ)的表达。结果MM患者骨髓F lk1+MSCs在体外经成骨诱导后,其成骨指标的表达较正常人明显降低,Von-Kossa染色也可见矿化基质沉积相应减低。同时F lk1+MSCs中TAZ的表达在MM中较正常人明显下调(P<0.05)。结论多发性骨髓瘤患者的骨髓F lk1+MSCs成骨能力较正常人减低,此因素可能参与了MM患者骨病的发病环节,而TAZ表达的减弱可能在此过程中发挥一定作用。

关键词：多发性骨髓瘤间充质干细胞成骨转录共刺激因子

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基质金属蛋白酶9在粒细胞集落刺激因子诱导的造血干/祖细胞动员中的作用

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中华医学杂志 2006年第42期86卷 2966-2970页

作者：靳风艳邱录贵李桥川孟恒星王亚非于珍李茜韩俊领中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020 现在吉林省肿瘤医院肿瘤内科天津市脐带血造血干细胞库

目的探讨基质金属蛋白酶9(MMP-9)在粒细胞集落刺激因子(G-CSF)诱导的造血干/祖细胞(HSPC)动员中的作用。方法应用酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫组织化学、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)等方法测定了健康供者稳态及G-CSF动员第5天骨髓、... 详细信息

目的探讨基质金属蛋白酶9(MMP-9)在粒细胞集落刺激因子(G-CSF)诱导的造血干/祖细胞(HSPC)动员中的作用。方法应用酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫组织化学、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)等方法测定了健康供者稳态及G-CSF动员第5天骨髓、外周血MMP-9蛋白及mRNA水平的变化,比较富含MMP-9的细胞系HT1080无血清培养上清孵育前后CD34+细胞表面CXCR4表达及对基质细胞衍生因子1(SDF-1)的迁移能力的变化,将rhMMP-9与rhSDF-1孵育后应用Western印迹检测MMP-9对SDF-1的降解作用,观察注射MMP-9化学抑制剂(MPI)ο-邻二氮杂菲对G-CSF动员BALB/c小鼠外周血成熟白细胞计数(WBC)和干/祖细胞的数量的影响。结果G-CSF动员第5天,骨髓上清MMP-9浓度增加了6.6倍(P<0.01),骨髓组织表达MMP-9的中性粒细胞明显增多。动员后骨髓单个核细胞MMP-9mRNA表达水平上调(P<0.05)。rhSDF-1与rhMMP-9短期孵育后可被后者降解。HT1080无血清培养上清液能够上调脐血和动员外周血富集的CD34+细胞的CXCR4表达水平(均P<0.05)及增强CD34+细胞向SDF-1浓度梯度迁移能力(均P<0.05),该效应可被MPI阻断(P<0.05)。与G-CSF共注射MPI后BALB/c小鼠外周血成熟WBC(12.3×106/L±1.2×106/L)和造血祖细胞集落形成单位(69U/2×105MNC±3U/2×105MNC)数量显著低于对照组(P<0.05)。结论MMP-9可能通过裂解SDF-1、上调CD34+细胞表面SDF-1特异性受体CXCR4的表达及增强CD34+细胞迁移能力在G-CSF介导的HSPC动员中发挥重要作用。

关键词：基质金属蛋白酶粒细胞集落刺激因子造血干细胞动员

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