检索结果-内蒙古大学图书馆

中华血液学杂志 2003年第1期24卷 10-13页

作者：王敏王玲郝长来邢海燕唐克晶王建祥中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院血液内科实验血液学国家重点实验室天津300020

目的　进一步确定ETO抑制基因转录的区域及其与组蛋白脱乙酰化酶之间的关系。方法　以位点诱变法使ETO的两个锌指结构分别突变 ,使用聚合酶链反应扩增ETO突变体 ,克隆入真核细胞表达质粒pFA CMV中。通过基因转染、报告基因转录活性分析 ... 详细信息

目的　进一步确定ETO抑制基因转录的区域及其与组蛋白脱乙酰化酶之间的关系。方法　以位点诱变法使ETO的两个锌指结构分别突变 ,使用聚合酶链反应扩增ETO突变体 ,克隆入真核细胞表达质粒pFA CMV中。通过基因转染、报告基因转录活性分析 ,确定ETO的不同区段对基因转录调节的作用。结果　成功构建出锌指突变和不同区段的ETO表达载体 ,并发现ETO存在两个抑制转录的区域 ,分别位于羧基末端的两个锌指结构和第 2 75～ 487位氨基酸残基。结论　ETO通过 2个区域抑制转录 ,并且与组蛋白脱乙酰化酶密切相关 ,后者可能会用作急性髓系白血病M2b的治疗靶点。

关键词：急笥髓系白血病 ETO基因组蛋白脱乙酰基酶鉴定

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两步法从脐血CD34+细胞获得大量树突状细胞的初步研究

两步法从脐血CD34+细胞获得大量树突状细胞的初步研究

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第九届全国实验血液学会议

目的树突状细胞（dendritic cells,DCs）是目前所知的功能最强而且是惟一可以激活初始T细胞的抗原提呈细胞,广泛参与多种免疫反应,在肿瘤免疫、移植免疫、抗感染免疫等方面均发挥着重要作用。但人体内DC数量极少、纯化困难。我们利用CB... 详细信息

目的树突状细胞（dendritic cells,DCs）是目前所知的功能最强而且是惟一可以激活初始T细胞的抗原提呈细胞,广泛参与多种免疫反应,在肿瘤免疫、移植免疫、抗感染免疫等方面均发挥着重要作用。但人体内DC数量极少、纯化困难。我们利用CB-CD细胞,采用先扩增后诱导的“两步法”获得DC,并通过对其形态学、免疫表型及功能进行检测和分析,初步探索“两步法”获得DC时,不同的扩增、诱导时间对其数量及功能的影响。方法（1）CB-CD细胞的分离纯化与扩增:在无菌条件下取足月顺产胎儿CB,6%羟乙基淀粉沉淀红细胞,Ficoll分离的单个核细胞,免疫磁珠分选获得CB-CD细胞。

关键词：初步研究两步法

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PI3K/Akt信号传导途径介导HAPO拮抗MO7e细胞凋亡的作用

PI3K/Akt信号传导途径介导HAPO拮抗MO7e细胞凋亡的作用

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第九届全国实验血液学会议

作者：战梅李文颖卢士红杨仁池韩忠朝中国医学科学院血液学研究所中国协和医科大学血液病医院实验血液学国家重点实验室中国医学科学院血液学研究所中国协和医科大学血液病医院实验血液学国家重点实验室中国医学科学院血液学研究所中国协和医科大学血液病医院实验血液学国家重点实验室中国医学科学院血液学研究所中国协和医科大学血液病医院实验血液学国家重点实验室中国医学科学院血液学研究所中国协和医科大学血液病医院实验血液学国家重点实验室

目的人促血液血管生成素(Hemangiopoietin,HAPO)最初由我室从再生障碍性贫血病人的尿中分离出来,是一种新的促造血干细胞和血管内皮细胞存活和增殖的细胞因子。体内外研究表明,HAPO对人和小鼠早期造血调控,造血干、祖细胞和血管内皮细... 详细信息

目的人促血液血管生成素(Hemangiopoietin,HAPO)最初由我室从再生障碍性贫血病人的尿中分离出来,是一种新的促造血干细胞和血管内皮细胞存活和增殖的细胞因子。体内外研究表明,HAPO对人和小鼠早期造血调控,造血干、祖细胞和血管内皮细胞的增殖、存活具有促进作用。依赖GM-CSF生长的人巨核细胞白血病细胞系MO7e在撤除支持因子后生长缓慢以至终止并发生凋亡。初步实验发现,HAPO能够拮抗MO7e去除因子诱发的凋亡。由于磷酸肌醇3-激酶(PI3K)/AKT信号转导途径的激活能够促进多种抗凋亡蛋白的活性(如bcl-2,Mcl-1,NF-κB,IAPs等),降低具有促凋亡性的蛋白功能

关键词：细胞凋亡信号转导途径 AKT PI3K/Akt 信号传导途径

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一个可保持长期植入潜能的扩增脐带血造血干细胞体系的建立和临床前研究

一个可保持长期植入潜能的扩增脐带血造血干细胞体系的建立和临床...

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第九届全国实验血液学会议

作者：邱录贵翟琼莉 Roger H.Herzig Ronald Brown 韩忠朝中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室 University of Louisville Brown Cancer Center Louisville KY U.S.A Quality Biological Ihc Gaithersburg MD U.S.A 中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室

目的建立一个适合于临床应用的能够在一定时期内持续有效扩增保持体内外功能完整的各阶段造血干/祖细胞（HSPC）的培养扩增体系。方法将从UCB标本中纯化的CD细胞接种于我们建立的无血清无基质悬浮扩增体系培养2周,分别于培养7 d、10 d和... 详细信息

目的建立一个适合于临床应用的能够在一定时期内持续有效扩增保持体内外功能完整的各阶段造血干/祖细胞（HSPC）的培养扩增体系。方法将从UCB标本中纯化的CD细胞接种于我们建立的无血清无基质悬浮扩增体系培养2周,分别于培养7 d、10 d和14 d评价扩增效率,并从扩增产物中再次纯化CD细胞,比较扩增前后CD细胞的增殖和自我更新潜能及归巢相关功能特性。而后将扩增体系放大,并应用异种胎羊-人造血干细胞移植模型评价扩增不同时点的脐带血HSPC的体内植入潜能。结果（1）在2周培养扩增期内,自最早期的LTC-IC和CDCDHLA-D亚群、HPP-CFU和CD细胞到较成熟的各系列祖细胞等各阶段造血干/祖细胞均得到持续和有效的扩增。经过10d和14d扩增培养后,大部分（7/8）脐带血标本可分别产生超过60×10～6和100×10～6CD细胞,这将有可能足够成人

关键词：无血清体内外临床前研究细胞体系

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体外扩增中CD34+细胞CD38与HLA-DR抗原表达的变化

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中华放射医学与防护杂志 2003年第10期 752-752页

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体外扩增中CD34^+细胞CD38与HLA-DR抗原表达的变化

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中华微生物学和免疫学杂志 2003年第10期23卷 752-752页

作者：翟琼莉王亚非周余李茜孟恒星邱录贵中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

CD34~+CD38~-HLA-DR~-是目前公认的原始干／祖细胞（HSPC）的表面抗原标记，本研究的目的是观察脐带血（UCB)CD34~+细胞表面CD38和HLA-DR抗原在扩增过程中的变化，以期探讨HSPC的免疫表型与其功能的关系。

关键词：体外扩增 CD34^+细胞 CD38 HLA-DR 抗原抗体

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不同贫血病时C-erbB_1胚系扩增与骨髓再生和白血病发生

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白血病．淋巴瘤 2003年第6期12卷 330-332页

作者：冯宝章雷健玲郭亚军邵宗鸿杨崇礼赵春华天津市韦尔柏基因治疗公司天津300020 中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院天津300020 实验血液学国家重点实验室天津300020

目的 :证明上皮生长因子受体 (EGFR)基因与白血病发生和骨髓再生的相关性。方法 :应用鸡原始红细胞增多症病毒癌基因 V - erb B作探针 ,进行 Southern印迹杂交 ,对 8例不同贫血状态下的血液病 ,包括 5例骨髓增生异常综合征 (MDS) ,1例... 详细信息

目的 :证明上皮生长因子受体 (EGFR)基因与白血病发生和骨髓再生的相关性。方法 :应用鸡原始红细胞增多症病毒癌基因 V - erb B作探针 ,进行 Southern印迹杂交 ,对 8例不同贫血状态下的血液病 ,包括 5例骨髓增生异常综合征 (MDS) ,1例家族性急性髓细胞白血病及其亲属 ,1例缺铁性贫血 (IDA)和 1例范柯尼贫血 (FA)等进行检测 ,并以 7例 AL、MDS和 AA父母为对照。结果 :MDS和 AL有 C- erb B1 重排 /扩增。患者父母仅有 C- erb B1 重排 ,大多数无胚系扩增 ;MDS和 IDA有 C- erb B1 胚系扩增 ,但 IDA无 C- erb B1 重排 ;正常人大多数与其父母一样 ,既无 C- erb B1 胚系扩增 ,也无 C- erb B1 重排。结论 :C- erb B1 即 EGFR基因重排 /扩增与 MDS和 AL有关 ,且其胚系扩增可能还与骨髓再生相关。白血病的发生还可能与骨髓再生有负相关 ,且对

关键词：贫血白血病骨髓再生胚系扩增血液病

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融合蛋白IL6/IL2在髓系-NK起始细胞(ML-IC)分析体系中对NK细胞分化、增殖的影响

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中国医学科学院学报 2002年第1期24卷 30-35页

作者：范尔进宋俊敏徐世荣赵春华中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

目的建立完善的造血干细胞体外培养及分析体系，用来研究比长期培养起始细胞（ＬＴＣ－ＩＣ）更为原始的造血干祖细胞。在此基础上，研究更适合于ＮＫ细胞的分化、培养介质。方法构建并表达ＦＰＩＬ６／ＩＬ２，采用髓系－ＮＫ起始细胞... 详细信息

目的建立完善的造血干细胞体外培养及分析体系，用来研究比长期培养起始细胞（ＬＴＣ－ＩＣ）更为原始的造血干祖细胞。在此基础上，研究更适合于ＮＫ细胞的分化、培养介质。方法构建并表达ＦＰＩＬ６／ＩＬ２，采用髓系－ＮＫ起始细胞体外培养、分析体系，通过观察培养后单细胞是否能同时向髓系及ＮＫ细胞分化，来判断此单细胞是否为髓系－ＮＫ起始细胞，即髓系－淋系起始细胞（ｍｙｅｌｏｉｄ－ｌｙｍｐｈｏｉｄ　ｉｎｉｔｉａｔｉｎｇ　ｃｅｌｌ，ＭＬ　－ＩＣ）。髓系检测指标是以祖细胞造血集落形成（ＣＦＣ）法检测ＬＴＣ－ＩＣ。ＮＫ细胞的检测指标是以ＦＡＣＳ法检测ＣＤ５６＋　ＮＫ细胞集落。通过观察培养后ＮＫ细胞集落数目的变化，研究ＦＰＩＬ６／ＩＬ２对ＮＫ－ＩＣ分化、增殖的影响。结果经过起始４周的培养后，实验组中（２５．７５±５．６８）％的细胞能够在一个或更多的二级培养体系中产生功能性ＮＫ－ＩＣ细胞，而对照组为（６．８１±１．９７）％，经过６～７周的培养后，实验组共检测出１０２个ＮＫ－ＩＣ细胞，而对照组为３３个，实验组较对照组明显扩增。结论髓系－ＮＫ起始细胞体外培养、分析体系能同时定量及定性研究造血干细胞的分化及增殖。ＦＰＩＬ６／ＩＬ２能明显促进?

关键词：融合蛋白IL6/IL2 髓系-NK起始细胞造血干细胞自我保留细胞分化细胞增殖 NR细胞

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成人和胎儿骨髓间充质干细胞的比较研究

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中华血液学杂志 2002年第12期23卷 645-648页

作者：呼莹马丽马冠杰姜学英赵春华中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

目的　比较成人和胎儿骨髓间充质干细胞 (MSC)的表型和生物学性状差异 ,为临床选择使用MSC提供实验依据。方法　取正常人和胎儿骨髓单个核细胞 ,在SF培养基中进行MSC培养 ,测定生长曲线。电镜观察MSC形态 ,利用流式细胞仪进行MSC表型测... 详细信息

目的　比较成人和胎儿骨髓间充质干细胞 (MSC)的表型和生物学性状差异 ,为临床选择使用MSC提供实验依据。方法　取正常人和胎儿骨髓单个核细胞 ,在SF培养基中进行MSC培养 ,测定生长曲线。电镜观察MSC形态 ,利用流式细胞仪进行MSC表型测定和细胞周期分析 ;SA方法测定Ⅰ、Ⅲ型胶原和vWF因子表达 ;通过碱性磷酸酶染色、苏丹黑染色及骨钙蛋白和脂蛋白酯酶mRNA的表达等来检测细胞向成骨、成脂肪细胞分化情况。结果　从成人和胎儿骨髓中可培养出MSC ,并保持多向分化潜能。两者在细胞形态、生长特性、表面抗原表达等方面是相似的。胎儿骨髓MSC的扩增潜力及多向分化能力明显强于成人MSC。成人骨髓MSC的粘附功能则强于胎儿。结论　从成人及胎儿骨髓中可分离培养出MSC ,在体外有效扩增且保持其低分化状态和多向分化能力。胎儿MSC较成人MSC更原始 ,具有更大的多向分化和体外扩增潜能 ,可作为组织工程的种子细胞 ;而成人MSC支持造血、促进造血功能恢复和重建造血的功能则强于胎儿 ,具有更广泛的临床移植应用前景。

关键词：成人比较研究胎儿骨髓间充质干细胞

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核受体辅助抑制因子中ETO结合结构域的确定

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中华血液学杂志 2002年第12期23卷 621-623页

作者：王敏郝长来唐克晶邢海燕田征张屹王建祥中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院血液肿瘤实验室实验血液学国家重点实验室天津300020

目的　为消除急性髓系白血病标志基因AML1/ETO的活性 ,确定核受体辅助抑制因子(nuclearreceptorco repressor,N CoR)与ETO基因相互作用的活性部位。方法　用PCR扩增不同区段的N CoR(N CoRY) ,克隆入酵母表达质粒pGADGL中 ,构建获得pGADG... 详细信息

目的　为消除急性髓系白血病标志基因AML1/ETO的活性 ,确定核受体辅助抑制因子(nuclearreceptorco repressor,N CoR)与ETO基因相互作用的活性部位。方法　用PCR扩增不同区段的N CoR(N CoRY) ,克隆入酵母表达质粒pGADGL中 ,构建获得pGADGL/N CoRY。应用酵母双杂交技术及X gal染色确定pGADGL/N CoRY 10个区段的N CoR是否与ETO结合。结果　N CoR的 988～ 112 6氨基酸残基与 15 5 1～ 180 1氨基酸残基共存时 ,才能与ETO发生结合作用 ,是与ETO相互作用的结构域。结论　N CoR两个结构域能与ETO的两个锌指结构作用 ,保持两种蛋白之间的稳定结合。

关键词：髓系白血病核受体辅助抑制因子 ETO基因

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