检索结果-内蒙古大学图书馆

中国生物工程杂志 2005年第7期25卷 40-44页

作者：许静李侠刘俊霞何一心韩忠朝宋增璇中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020

展示于噬茵体表面的肽库适于用抗体筛选其特异性结合表达肽。scFv-C193是一个抗KGla细胞表面分子的单链抗体,其抗原仍不清楚,为了筛选并鉴定其识别分子,用8cFv-C193筛选了1个展示于T7噬茵体表面的人胎肝cDNA片段库。经4轮生物吸附后分... 详细信息

展示于噬茵体表面的肽库适于用抗体筛选其特异性结合表达肽。scFv-C193是一个抗KGla细胞表面分子的单链抗体,其抗原仍不清楚,为了筛选并鉴定其识别分子,用8cFv-C193筛选了1个展示于T7噬茵体表面的人胎肝cDNA片段库。经4轮生物吸附后分离单个阳性噬斑,并对其表达产物做电泳分析及斑点杂交。结果鉴别出1个scFv-C193结合肽,scFv-C193+克隆噬菌体DNA插入片段的PCR扩增和序列分析结果表明它是1个43bpDNA片段表达产物。BLAST分析EST人类基因数据库,发现它97%相同于CD34+造血干/祖细胞mRNA的1-43bp,提示scFv-C193识别片段存在于人类造血干/祖细胞基因中,单克隆单链抗体scFv-C193可能用于研究这些人类基因的性质。

关键词：抗体筛选表面分子相互作用鉴别造血干/祖细胞 cDNA片段噬菌体DNA CD34^+ 单链抗体表达产物特异性结合 PCR扩增基因数据库 BLAST 生物吸附斑点杂交电泳分析分析结果 mRNA 细胞基因人类基因体表面人胎肝结合肽

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骨髓间充质干细胞通过分泌TGF-β1抑制T细胞的增殖

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中国免疫学杂志 2005年第3期21卷 168-171页

作者：张伟葛薇李长虹尤胜国韩钦邓为民陈磊赵春华中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020

目的研究是否MSCs通过分泌TGFβ1抑制PHA刺激的T淋巴细胞的增殖。方法应用酶联免疫吸附试验测定MSCs上清中转化生长因子TGFβ1的分泌水平,应用抗TGFβ1抗体中和MSCs上清中的TGFβ1后,用3H掺入法检测在不同培养条件下PHA刺激T淋巴细胞增... 详细信息

目的研究是否MSCs通过分泌TGFβ1抑制PHA刺激的T淋巴细胞的增殖。方法应用酶联免疫吸附试验测定MSCs上清中转化生长因子TGFβ1的分泌水平,应用抗TGFβ1抗体中和MSCs上清中的TGFβ1后,用3H掺入法检测在不同培养条件下PHA刺激T淋巴细胞增殖的能力,以及应用Elispot试剂盒检测T淋巴细胞IFNγ的分泌水平。结果MSCs上清减少活化的T淋巴细胞IFNγ的分泌,抑制PHA刺激的T淋巴细胞的增殖能力,且它的这种抑制作用能够被抗TGFβ1抗体部分逆转。结论MSCs通过分泌TGFβ1抑制PHA刺激的T淋巴细胞的增殖。

关键词：骨髓间充质干细胞转化生长因子免疫抑制

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Flk1^+间充质干细胞减轻四氯化碳导致的肝纤维化的研究

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生物工程学报 2005年第3期21卷 396-401页

作者：史明霞房佰俊廖联明杨少光刘煜昊赵春华中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所组织工程中心北京100005 中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020

许多慢性肝脏疾病都会发生肝纤维化,但是目前尚缺乏对肝纤维化切实有效的治疗手段。实验发现,Flk1(fetalliverkinase)阳性间充质干细胞(MSC)能够减轻四氯化碳(CCl4 )所致小鼠肝纤维化。取雄性BALB c小鼠骨髓,分离培养Flk1+ MSC ,用CCl4... 详细信息

许多慢性肝脏疾病都会发生肝纤维化,但是目前尚缺乏对肝纤维化切实有效的治疗手段。实验发现,Flk1(fetalliverkinase)阳性间充质干细胞(MSC)能够减轻四氯化碳(CCl4 )所致小鼠肝纤维化。取雄性BALB c小鼠骨髓,分离培养Flk1+ MSC ,用CCl4 制作雌性小鼠肝纤维化模型,在CCl4 损伤后立即或1周后经尾静脉注射Flk1+ MSC ,2或5周后检测受体小鼠肝脏的纤维化程度和供体细胞的植入。结果发现,CCl4 损伤后立即注射Flk1+ MSC ,可以使肝脏损伤程度明显减轻,减少胶原沉积,使肝脏羟脯氨酸含量及血清纤维化指标显著下降;而损伤1周后注射细胞则无明显变化。免疫荧光、PCR和荧光原位杂交方法证实,在受体肝脏中有供体细胞植入,呈上皮细胞形态,并表达白蛋白,但是数量很少。因此,Flk1+ MSC具有潜在的植入肝组织的能力,并可能启动肝组织的内源性修复,减轻CCl4 导致的肝纤维化。

关键词：间充质干细胞,肝纤维化,移植

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早期分化抗原在急性白血病中的表达及其意义

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中华内科杂志 2005年第1期40卷 46-49页

作者：周余李茜孟恒星王亚非于珍邱录贵中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室

目的　探讨CD3 4 、CD90 及CD13 3 在急性白血病 (AL)中的表达及其意义。方法　采用三色直接免疫荧光法测定 76例AL患者白血病细胞膜上CD3 4 、CD90 及CD13 3 抗原的表达 ,半定量RT PCR方法测定CD13 3 mRNA的表达。结果　 (1)AL患者的CD... 详细信息

目的　探讨CD3 4 、CD90 及CD13 3 在急性白血病 (AL)中的表达及其意义。方法　采用三色直接免疫荧光法测定 76例AL患者白血病细胞膜上CD3 4 、CD90 及CD13 3 抗原的表达 ,半定量RT PCR方法测定CD13 3 mRNA的表达。结果　 (1)AL患者的CD3 4 及CD13 3 表达高于正常对照组(46 37%、0 4 7% )、(2 1 93%、0 2 9% ) ,P值均 <0 0 1;但CD90 的表达二者间差异无统计学意义(0 5 1%、0 2 5 % ) ,P >0 0 5 ;AL、对照组的CD13 3 抗原表达均与CD13 3 mRNA表达相一致。 (2 )急性淋巴细胞白血病 (ALL)的CD90 阳性率高于急性髓细胞白血病 (AML) (P <0 0 5 ) ,B ALL的CD3 4 阳性率高于T ALL(P <0 0 5 )。AML中M4的CD13 3 阳性率最高 (P <0 0 1)。 (3)CD3 4 及CD13 3 阳性组AL的HLA DR阳性率显著高于阴性组 (79 1%、32 0 % ;82 8%、4 6 2 % ) ,P值均 <0 0 1;CD+ 3 4 AML的CD13 3 阳性率高于阴性组 (P <0 0 1) ,但两组之间CD90 阳性率差异无统计学意义。 (4)CD3 4 、CD90 及CD13 3 表达与AL的细胞或分子遗传学异常等临床预后因素无明显关系。 (5 )CD3 4 、CD90 及CD13 3 阳性组的完全缓解率及总反应率低于阴性组 ,但仅有CD3 4 /CD13 3 双阳性组完全缓解率低于双阴性组差异有统计学意义 (P <0 0 5 )。

关键词： CD13 CD34 表达 AL 阳性率阴性急性白血病意义差异结论

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CHP调节NHE1活性影响细胞生长和死亡

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中国生物工程杂志 2005年第10期25卷 63-67页

作者：李庆华庞天翔韩忠朝中国医学科学院/中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020

钠氢离子交换蛋白(NHE)定位于细胞膜,它的重要功能是调节细胞内pH值。钙调磷酸酶B同源蛋白(CHP)是NHE必要的活性调节亚单位。研究了NHE1结合CHP与否对细胞生长和死亡的影响。结果显示,CHP结合于NHE1细胞质调节区域之中靠近细胞膜部位,... 详细信息

钠氢离子交换蛋白(NHE)定位于细胞膜,它的重要功能是调节细胞内pH值。钙调磷酸酶B同源蛋白(CHP)是NHE必要的活性调节亚单位。研究了NHE1结合CHP与否对细胞生长和死亡的影响。结果显示,CHP结合于NHE1细胞质调节区域之中靠近细胞膜部位,二者以疏水键结合而形成蛋白IV级结构。在细胞内pH5.4的非生理条件下,表达没有CHP结合能力的突变体NHE1-4R细胞只有表达野生型NHE细胞7.6%的最大摄取钠活性;在细胞内pH7.2的生理条件下,这个比例降至1.2%的摄取钠活性。与野生型NHE1比较,有血清时表达突变体NHE1-4R的细胞生长速度减慢;在血清饥饿时这些细胞因自身的胞浆酸性化而死亡数增加。实验结果证明,CHP是NHE1生理活性的必要调节因子,它能影响细胞生长和死亡。

关键词：生物活性细胞生长细胞死亡钠氢离子交换蛋白钙调磷酸酶B同源蛋白

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生物被膜分散方式的研究进展

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微生物学通报 2005年第6期32卷 120-123页

作者：董成亚马小彤中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

临床上生物被膜与感染的慢性迁延不愈密切相关,而生物被膜菌的分散又会造成感染的反复急性发作,给临床感染的有效控制带来很大困难。生物被膜菌的分散过程受到了遗传和环境等多因素的调控,主要是通过蜂式分散、块式分散和毯式分散3种形... 详细信息

临床上生物被膜与感染的慢性迁延不愈密切相关,而生物被膜菌的分散又会造成感染的反复急性发作,给临床感染的有效控制带来很大困难。生物被膜菌的分散过程受到了遗传和环境等多因素的调控,主要是通过蜂式分散、块式分散和毯式分散3种形式来实现的。深入进行生物被膜基础研究对改变目前临床感染治疗的窘境有重大意义。

关键词：生物被膜分散方式感染

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抗人VEGF受体Ⅱ胞外Ⅲ区单克隆抗体的生物学活性研究

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免疫学杂志 2005年第5期21卷 366-369页

作者：熊冬生杨铭李容邵晓枫许元富姜文国刘嘉朱祯平杨纯正中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

目的研究抗KDR单体Ycom1D3抑制VEGF诱导脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖的体外生物学活性。方法采用FACS鉴定Ycom1D3与抗原结合特异性,采用免疫共沉淀测定Ycom1D3阻断VEGF165刺激KDR酪氨酸激酶受体磷酸化作用,并采用[3H]-Thymidine掺入法、... 详细信息

目的研究抗KDR单体Ycom1D3抑制VEGF诱导脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖的体外生物学活性。方法采用FACS鉴定Ycom1D3与抗原结合特异性,采用免疫共沉淀测定Ycom1D3阻断VEGF165刺激KDR酪氨酸激酶受体磷酸化作用,并采用[3H]-Thymidine掺入法、内皮细胞损伤愈合试验和内皮细胞血管腔形成实验进一步确定Ycom1D3抑制VEGF165诱导内皮细胞增殖的中和活性。结果Ycom1D3不但能与HUVEC结合,而且能阻断由VEGF165刺激HUVEC表面KDR酪氨酸激酶受体磷酸化,进而显著抑制VEGF165诱导HUVEC增殖、迁移及体外三维胶原模型上内皮细胞毛细血管样结构的形成。结论Ycom1D3可以通过封闭KDR而抑制VEGF活性,在肿瘤及其它血管新生疾病治疗中具有潜在应用前景。

关键词：血管新生血管内皮细胞生长因子受体单克隆抗体

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应重视肿瘤耐药机制和耐药基因检测研究及应用

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中华检验医学杂志 2005年第12期28卷 1221-1224页

作者：杨纯正许元富齐静中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

近年来,我国肿瘤发病率及死亡率一直呈上升趋势.化疗虽然是当前治疗恶性肿瘤的主要手段,但肿瘤耐药却是限制化疗的重要因素,并已成为导致临床肿瘤化疗失败最常见和最难克服的问题.近期大量临床治疗统计资料表明:肿瘤细胞耐药与绝大多数... 详细信息

近年来,我国肿瘤发病率及死亡率一直呈上升趋势.化疗虽然是当前治疗恶性肿瘤的主要手段,但肿瘤耐药却是限制化疗的重要因素,并已成为导致临床肿瘤化疗失败最常见和最难克服的问题.近期大量临床治疗统计资料表明:肿瘤细胞耐药与绝大多数肿瘤患者死因有着直接或间接的关系.目前,国内外在肿瘤临床治疗方面已涌现出许多新的化疗方案(包括一些耐药逆转方案)和抗肿瘤新药,但在治疗时,仍然发现一些患者在化疗过程中对其中一些药物(包括一些新药[1])产生耐药性,这可能与肿瘤耐药发生机制的复杂性有关.因此,全面了解肿瘤细胞耐药发生机制,并开展和普及肿瘤患者的耐药基因常规检测、监测和综合分析,已成为当前肿瘤临床制定合理的"个体化"治疗方案的关键。

关键词：耐药基因检测研究耐药机制肿瘤细胞耐药抗肿瘤新药化疗肿瘤患者肿瘤耐药临床治疗

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12号染色体短臂异常的髓系肿瘤12例分析

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中华医学遗传学杂志 2005年第2期22卷 229-230页

作者：张悦张莉刘世和周学慧郝玉书肖志坚中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

目的　探讨12号染色体短臂异常的髓系肿瘤是否为一个独立的临床病理遗传学病种。方法　回顾性分析2 6 2例骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndrome,MDS)和6 38例急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)患者的细胞遗传学和临... 详细信息

目的　探讨12号染色体短臂异常的髓系肿瘤是否为一个独立的临床病理遗传学病种。方法　回顾性分析2 6 2例骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndrome,MDS)和6 38例急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)患者的细胞遗传学和临床资料。结果　12号染色体短臂异常的发生率MDS为1.6 % ,AML为1.3% ,主要为缺失(10 /12例)。这些患者并无一致性的独特细胞/组织形态学、免疫学和临床特征。结论　12号染色体短臂异常伴髓系肿瘤不是一个独立临床病理遗传学病种。

关键词： 12号染色体髓系肿瘤短臂骨髓增生异常综合征 syndrome 急性髓系白血病病理遗传学回顾性分析细胞遗传学组织形态学临床资料临床特征 MDS 发生率 AML 一致性免疫学病种患者

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NOD/SCID小鼠脐血单个核细胞骨髓腔内移植的实验研究

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中华血液学杂志 2005年第5期26卷 261-264页

作者：孙爱红冯四洲刘斌汤锋武冯义卢士红韩忠朝中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室造血干细胞移植中心天津300020

目的观察骨髓腔内移植(iBM)人脐血单个核细胞(MNC)对小鼠造血重建和免疫功能恢复的作用。方法NOD/SCID小鼠经137Cs全身照射后,在4h内无菌条件下局部麻醉后从尾静脉或骨髓腔内输注分离脐血MNC。受体小鼠随机分为5组:①对照组:骨髓腔内输... 详细信息

目的观察骨髓腔内移植(iBM)人脐血单个核细胞(MNC)对小鼠造血重建和免疫功能恢复的作用。方法NOD/SCID小鼠经137Cs全身照射后,在4h内无菌条件下局部麻醉后从尾静脉或骨髓腔内输注分离脐血MNC。受体小鼠随机分为5组:①对照组:骨髓腔内输注培养液;②阳性对照组(iTV):尾静脉输注脐血MNC3×107/只;③实验Ⅰ组(iBM1):骨髓腔内输注脐血MNC3×106/只;④实验Ⅱ组(iBM2):骨髓腔内输注脐血MNC1×107/只;⑤实验Ⅲ组(iBM3):骨髓腔内输注脐血MNC3×107/只。对照组4只小鼠,实验Ⅱ组7只小鼠,其余每组5只。24h后观察iBM22只小鼠未移植侧胫骨骨髓腔脐血细胞的迁移分布,动态观察移植后小鼠的存活和造血重建情况,7～8周后处死各组小鼠,检测骨髓细胞表面CD分子表达、碳青花(DilCM)染料示踪研究和脐血βactin的DNA标记。结果①照射后骨髓腔内输注脐血MNC,24h后在未输注脐血MNC的一侧胫骨骨髓细胞膜有DilCM标记;②7～8周后小鼠存活14只,其中对照组存活1只,iTV组、iBM1组各存活2只,iBM2组存活4只,iBM3组存活5只;③外周血常规检查结果显示iBM组白细胞的恢复速度比iTV组和对照组快而且稳定;④移植后存活小鼠骨髓细胞表面CD45标记、DilCM染料示踪研究和βactin均显示人源的标记。

关键词： NOD/SCID 脐血单个核细胞骨髓腔内移植实验研究

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