检索结果-内蒙古大学图书馆

中国生物工程杂志 2005年第5期25卷 36-40页

作者：刁世勇张新伟饶青邢海燕陈森王建祥王敏中国医学科学院/中国协和医科大学血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

iASPP是新近发现的高度保守的p5 3相关基因,其蛋白产物定位于细胞核内,具有结合NF κBp65亚基和p5 3功能,进而抑制NF κB的转录调节和p5 3对凋亡的调节功能。利用RT PCR方法从人白血病细胞系U 937中克隆出癌基因iASPP ,将其克隆至原核... 详细信息

iASPP是新近发现的高度保守的p5 3相关基因,其蛋白产物定位于细胞核内,具有结合NF κBp65亚基和p5 3功能,进而抑制NF κB的转录调节和p5 3对凋亡的调节功能。利用RT PCR方法从人白血病细胞系U 937中克隆出癌基因iASPP ,将其克隆至原核表达载体pET2 8a( + )中,成功构建iASPP表达载体PIAF ,重组质粒读码框和序列与预期一致。在IPTG诱导下,重组载体大肠杆菌Rosetta(DE3)菌株,表达产物经SDS PAGE和Westernblot方法分析证实系iASPP融合蛋白。利用Ni离子鳌合层析的方法纯化iASPP融合蛋白,经SDS PAGE鉴定其纯度超过80 %。

关键词：癌基因 iASPP 克隆表达纯化 p53 细胞凋亡抗体

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静脉及口服伊曲康唑治疗85例血液病患者真菌感染的临床研究

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中华血液学杂志 2005年第9期26卷 562-564页

作者：冯四洲李睿杨栋林秦铁军魏嘉璘 王津雨刘春陈雪晶张桂新韩琳邱录贵韩明哲中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

真菌感染是引起免疫功能缺陷的血液病患者死亡的主要原因之一.寻找高效低毒的抗真菌药物对于提高血液病患者疗效十分重要.我们对85例真菌感染的血液病患者采用静脉与口服伊曲康唑(Itra)序贯治疗,并对其临床疗效、不良反应及影响疗效的... 详细信息

真菌感染是引起免疫功能缺陷的血液病患者死亡的主要原因之一.寻找高效低毒的抗真菌药物对于提高血液病患者疗效十分重要.我们对85例真菌感染的血液病患者采用静脉与口服伊曲康唑(Itra)序贯治疗,并对其临床疗效、不良反应及影响疗效的相关因素进行了研究。

关键词：血液病患者口服伊曲康唑真菌感染序贯治疗临床研究静脉免疫功能缺陷临床疗效抗真菌药物

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体外诱导小鼠胚胎干细胞血管形成

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中国医学科学院学报 2005年第1期27卷 62-66,i006-i007页

作者：李宗金杨晨汤锋武张志华徐斌赵钦军杨仁池王征宇韩忠朝中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020 Department of Surgery Beijing Tongren Hospital Beijing Experimental Hematology/AIDS Research Center Massachusetts General HospitalHarvard Medical School

目的探讨体外定向诱导胚胎干细胞向内皮细胞分化的条件,模拟体内血管生成和血管新生过程,为研究新血管的形成提供一种新思路。方法体外培养小鼠胚胎干细胞诱导形成胚胎小体,将11d的胚胎小体种植到胶原中诱发出芽性血管新生;通过免疫组... 详细信息

目的探讨体外定向诱导胚胎干细胞向内皮细胞分化的条件,模拟体内血管生成和血管新生过程,为研究新血管的形成提供一种新思路。方法体外培养小鼠胚胎干细胞诱导形成胚胎小体,将11d的胚胎小体种植到胶原中诱发出芽性血管新生;通过免疫组织化学染色方法检测胚胎小体及其出芽向内皮细胞和功能血管的分化。结果胚胎干细胞在体外能自发形成胚胎小体,其内部含有血管样结构,并伴有平滑肌的分化;种植到胶原中的胚胎小体能再现出芽性血管新生。结论胚胎干细胞在体外不但能定向分化成内皮细胞,还能再现体内血管生成、血管新生及动脉生成过程。

关键词：胚胎干细胞胚胎小体血管新生血管生成分化

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慢性粒细胞性白血病骨髓间充质干细胞的分离纯化及其功能特性的研究

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中华医学杂志 2005年第29期85卷 2054-2057页

作者：赵智刚唐晓琼李静史明霞邹萍华中科技大学同济医学院附属协和医院血液科武汉430022 中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室

目的分离、纯化慢性粒细胞性白血病(CML)患者骨髓间充质干细胞(MSC),并对MSC进行功能、特性鉴定。方法获取CML患者的骨髓MSC,应用极限稀释法获取单克隆来源的MSC,并在低血清培养液中培养和扩增;流式细胞术检测MSC免疫表型和细胞周期;通... 详细信息

目的分离、纯化慢性粒细胞性白血病(CML)患者骨髓间充质干细胞(MSC),并对MSC进行功能、特性鉴定。方法获取CML患者的骨髓MSC,应用极限稀释法获取单克隆来源的MSC,并在低血清培养液中培养和扩增;流式细胞术检测MSC免疫表型和细胞周期;通过油红O染色、VonKossa染色和Western印迹检测MSC向脂肪、骨和神经细胞的分化。电镜检测CML患者骨髓MSC的超微结构;通过软琼脂培养法和裸鼠接种,确定CML来源的MSC是否存在致瘤性。结果MSC在相应的诱导条件下可以向骨、脂肪和神经细胞分化。CML来源的MSC在倒置显微镜下为梭形,表达CD29、CD44、CD105,而CD11b,CD31、CD34、CD45、HLA-DR均为阴性。CML来源的MSCBCR/ABL融合基因阴性,不具备体内和体外致瘤性。结论CML患者骨髓中存在具有多向分化能力的MSC,该细胞群体不具备体外和体内致瘤性,表现为正常MSC的生物学特征。

关键词：慢性粒细胞性白血病骨髓间充质干细胞分离纯化功能特性

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不同制剂诱导单个核细胞IL-23、IL-12亚基表达的对比分析

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现代免疫学 2005年第3期25卷 213-216页

作者：马小彤葛薇张秀军徐玢林永敏李戈宋玉华吴克复中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

为探索并比较人类外周血单个核细胞(PBMC)IL-23、IL-12亚基表达的诱导剂和调控模式,分离正常人PBMC、单核细胞、CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群,检测各种细菌、细菌产物、细胞因子、丝裂原对上述细胞IL-23和IL-12亚基表达的诱导作用,半定量RT-... 详细信息

为探索并比较人类外周血单个核细胞(PBMC)IL-23、IL-12亚基表达的诱导剂和调控模式,分离正常人PBMC、单核细胞、CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群,检测各种细菌、细菌产物、细胞因子、丝裂原对上述细胞IL-23和IL-12亚基表达的诱导作用,半定量RT-PCR方法测定各亚基的mRNA表达水平。结果显示,未经刺激的PBMC可表达IL-23p19和IL-12p35mRNA;脂多糖(LPS)和金黄色葡萄球菌(SAC)可上调PBMCIL-23和IL-12各亚基的表达;γ干扰素(IFN-γ)预处理后予LPS刺激可使单核细胞IL-23p19、IL-12p35和IL-12p40表达高于LPS直接作用的表达水平。植物血凝素(PHA)可促进CD4+、CD8+T细胞IL-23p19表达,而对IL-12p35、p40表达无调节作用。本文结果提示,IL-23的两个亚基的表达都处于紧密调控之下,易受各类诱导剂调节;人类外周血细胞IL-23p19的表达和调控模式与IL-12p35既有相似之处又存在不同点。

关键词：白介素23 白介素12 γ干扰素植物血凝素

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小鼠白介素18与白介素1β转化酶共表达载体的构建及真核表达

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现代免疫学 2005年第3期25卷 177-181页

作者：徐玢马小彤董成亚石洋林永敏宋玉华吴克复中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

为了制备白介素18前体(proIL-18)和白介素1β转化酶(ICE)共表达肿瘤疫苗,从小鼠脾细胞克隆proIL-18和ICE基因,构建小鼠proIL-18和ICE共表达质粒(pIRES-proIL-18-ICE),经测序证实序列正确后,脂质体法转染小鼠淋巴细胞白血病细胞系L1210,... 详细信息

为了制备白介素18前体(proIL-18)和白介素1β转化酶(ICE)共表达肿瘤疫苗,从小鼠脾细胞克隆proIL-18和ICE基因,构建小鼠proIL-18和ICE共表达质粒(pIRES-proIL-18-ICE),经测序证实序列正确后,脂质体法转染小鼠淋巴细胞白血病细胞系L1210,筛选稳定表达细胞株。转染细胞RT-PCR及转染细胞培养上清IL-18ELISA检测结果表明,肿瘤细胞可以表达并分泌成熟的IL-18。培养上清的IL-18可显著诱导ConA刺激的小鼠脾细胞产生IFN-γ,表明其具有功能活性。生长曲线和细胞周期实验证实与未转染的肿瘤细胞相比,转染空载体pIRES、pIRES-proIL-18、pIRES-ICE、pIRES-proIL-18-ICE基因对肿瘤细胞生长增殖无明显影响。IL-18白血病瘤苗的成功制备表明,利用pIRES载体在同一肿瘤细胞中共表达的proIL-18和ICE能够完全模拟生理过程,在真核细胞内有效酶切,分泌出成熟并有功能活性的IL-18;构建的IL-18瘤苗为进一步评价其在小鼠体内的抗白血病效果奠定基础。

关键词：小鼠白细胞介素18 真核表达载体pIRES L1210白血病细胞肿瘤疫苗

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减毒沙门氏菌介导的血小板第四因子活性片段的放射保护作用研究

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中国生物工程杂志 2005年第3期25卷 23-28页

作者：刘斌赵丽华李彬余晓菲冯义卢士红韩忠朝中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室国家干细胞工程技术研究中心天津300020

目的:观察减毒沙门氏菌携带的血小板第四因子活性片段PF417-70的放射保护作用.方法:通过口服途经喂饲小鼠携带PF4活性片段的减毒沙门氏菌,在第2次喂饲后小鼠接受700cGy全身照射,然后观察PIRES2-EGFP/PF417-70在小鼠体内的表达,并观察小... 详细信息

目的:观察减毒沙门氏菌携带的血小板第四因子活性片段PF417-70的放射保护作用.方法:通过口服途经喂饲小鼠携带PF4活性片段的减毒沙门氏菌,在第2次喂饲后小鼠接受700cGy全身照射,然后观察PIRES2-EGFP/PF417-70在小鼠体内的表达,并观察小鼠的造血恢复情况.结果:在小鼠的肝脏、脾脏、肾脏、小肠、外周血及骨髓均能检测到GFP的表达和转基因的整合.与对照组比较,实验组小鼠的生存期明显延长,照射后第7d和14d骨髓有核细胞数、骨髓培养的CFU-GM和HPP-CFC数量明显增加(P＜0.05).结论:首次应用减毒沙门氏菌SL3261为载体来介导PF4活性片段的生物学作用,并证实通过口服途径可以保护小鼠免受放射损伤,并促进放射损伤后小鼠的造血恢复.

关键词：减毒沙门氏菌放疗保护口服 PF417-70

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血小板内皮细胞黏附分子的剪接体在胚胎干细胞血管形成过程中的表达

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中华医学杂志 2005年第19期85卷 1299-1304页

作者：李宗金徐斌李妍涵卢士红郑以州杨仁池王征宇钱冠清韩忠朝中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室国家干细胞工程研究中心天津300020 美国哈佛大学医学院艾滋病中心

目的探讨血小板内皮细胞黏附分子(PECAM)1的剪接体在胚胎干细胞分化过程中的表达规律。方法体外培养胚胎干细胞,在细胞因子的作用下形成胚胎样小体(EB);然后将EB种植到胶原中,在细胞因子的作用下诱导出芽性血管新生。分别利用免疫组织... 详细信息

目的探讨血小板内皮细胞黏附分子(PECAM)1的剪接体在胚胎干细胞分化过程中的表达规律。方法体外培养胚胎干细胞,在细胞因子的作用下形成胚胎样小体(EB);然后将EB种植到胶原中,在细胞因子的作用下诱导出芽性血管新生。分别利用免疫组织化学、流式细胞术、逆转录聚合酶链反应等方法检测胚胎干细胞及其分化过程中PECAM1、Oct4及胚胎阶段特异性抗原(SSEA)1的表达。应用克隆分析的方法检测不同的PECAM1剪接体在EB形成和出芽性血管新生过程中的表达分布。结果PECAM1主要表达在胚胎干细胞细胞连结部位。随着胚胎干细胞的分化,Oct4及SSEA1表达下降。胚胎干细胞表达8种PECAM1的剪接体,包括全长、Δ12、Δ14、Δ15、Δ12&14、Δ12&15、Δ14&15、Δ12&14&15,其中Δ15和Δ14&15表达水平最高。在胚胎干细胞形成EB和出芽性血管新生过程中,剪接体表达水平发生变化,其中Δ12&14&15的表达明显上升,Δ15表达下降。结论未分化的胚胎干细胞表达PECAM1,剪接体的表达变化可能参与了胚胎干细胞的血管形成。

关键词：血小板内皮细胞黏附分子剪接体胚胎干细胞血管形成表达细胞培养

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成体干细胞

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基础医学与临床 2005年第10期25卷 5-10页

作者：吴皖陈建河赵春华中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所组织工程研究中心实验血液学国家重点实验室北京100005 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所组织工程研究中心实验血液学国家重点实验室

在胎儿、儿童和成人组织中存在的多潜能干细胞统称成体干细胞。成体干细胞具有自我更新的能力,并且可以分化成与其来源不同的其他组织类型的细胞。一种组织来源的干细胞可分化成各种类型的细胞,即干细胞可塑性。成体干细胞可塑性是成体... 详细信息

在胎儿、儿童和成人组织中存在的多潜能干细胞统称成体干细胞。成体干细胞具有自我更新的能力,并且可以分化成与其来源不同的其他组织类型的细胞。一种组织来源的干细胞可分化成各种类型的细胞,即干细胞可塑性。成体干细胞可塑性是成体干细胞应用于临床的基础,但对干细胞可塑性机制的认识学术界仍存在较大的争议,先后有学者提出脱分化、异质细胞群体和细胞融合等学说,但都不能完全解释成体干细胞的可塑性。近年来的研究提示,成体组织中存在多潜能干细胞,我们发现在胚胎发育后的多种组织中都存在一类原始干细胞群体,在体内、外的特殊环境下,这类原始干细胞可分化为不同胚层的组织细胞,我们称其为亚全能干细胞。亚全能干细胞是存在于人体多种组织中的分化潜能介于从人体胚胎干细胞逐渐形成组织多能干细胞的发育过程中的一种原始干细胞亚群。

关键词：成体干细胞可塑性亚全能干细胞

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氯霉素通过线粒体途径诱导白血病多药耐药细胞凋亡

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中华血液学杂志 2005年第12期26卷 760-761页

作者：王笑蕾张茂宏许元富齐静杨纯正山东大学齐鲁医院血液肿瘤中心济南250012 中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室

多药耐药(MDR)是影响白血病治疗效果的主要障碍,因耐药机制的复杂性或耐药逆转药物临床应用的不良反应,致使目前尚未解决这一难题。

关键词：白血病多药耐药线粒体途径细胞凋亡氯霉素多药耐药(MDR) 多药耐药细胞研究发现介导途径半胱天冬酶白血病细胞

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