检索结果-内蒙古大学图书馆

中华实用诊断与治疗杂志 2019年第12期33卷 1145-1149页

作者：吴文齐刘超陈晓燕段永娟郑佳睿张英驰竺晓凡中国医学科学院北京协和医学院血液病医院中国医学科学院血液学研究所实验血液学国家重点实验室国家血液病临床医学研究中心儿童血液病诊疗中心天津300020 天津医科大学基础医学院天津300070

目的探讨在急性B淋巴细胞白血病细胞系REH中敲除抑制哺乳动物类雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)活性的基因nprl2后,细胞对雷帕霉素的敏感性。方法构建靶向nprl2基因的CRISPR-Cas9载体,并包装为病毒CRISPR-Cas9-nprl... 详细信息

目的探讨在急性B淋巴细胞白血病细胞系REH中敲除抑制哺乳动物类雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)活性的基因nprl2后,细胞对雷帕霉素的敏感性。方法构建靶向nprl2基因的CRISPR-Cas9载体,并包装为病毒CRISPR-Cas9-nprl2-sg1、CRISPR-Cas9-nprl2-sg2、CRISPR-Cas9-nprl2-sg3感染REH细胞(分别为REH-nprl2-sg1、REH-nprl2-sg2和REH-nprl2-sg3细胞),感染72 h后采用1 mg/L的嘌呤霉素处理72 h,提取细胞DNA进行PCR,进行一代测序,测序结果为杂峰的是感染成功细胞(REH-nprl2-sg1)(敲除组)。REH细胞感染不含sgRNA的CRISPR-Cas9质粒空载体为对照组。采用实时定量PCR检测2组细胞nprl2 mRNA表达水平,采用CCK8法检测2组细胞培养第1~7天细胞活性,计算细胞增殖倍数;2组分别加入0.1、1、10、100、1000、10000 nmol/L雷帕霉素,培养72 h后检测细胞活性,比较雷帕霉素对2组细胞的半数抑制浓度。结果敲除组细胞nprl2 mRNA相对表达量(0.0123±0.0027)低于对照组(0.8330±0.0708)(P<0.05);敲除组第5~7天细胞增殖倍数(15.134±0.312、20.589±0.436、37.595±0.917)高于对照组(13.690±0.106、17.920±0.291、18.817±0.217)(P<0.05),第1~4天与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);1、10、100、1000、10000 nmol/L雷帕霉素处理后,敲除组细胞活性(0.806±0.001、0.478±0.013、0.323±0.002、0.274±0.008、0.279±0.003)较对照组(1.000±0.011、0.711±0.045、0.538±0.034、0.432±0.019、0.403±0.025)明显降低(P<0.05),敲除组雷帕霉素对细胞半数抑制浓度(0.48 nmol/L)小于对照组(2.07 nmol/L)。结论敲除nprl2后的REH细胞对雷帕霉素的敏感性明显提高,在伴有mTOR通路突变的急性B淋巴细胞白血病患者中联合使用雷帕霉素可能有较好治疗效果。

关键词：急性淋巴细胞白血病 CRISPR-Cas9 npr 12 mTOR

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

靶向肿瘤坏死因子的小分子抑制剂的研究

靶向肿瘤坏死因子的小分子抑制剂的研究

引用

第八届泛环渤海生物化学与分子生物学会2018年学术交流会

作者：公海艳马莉朱海燕纪庆苏培刘鹏曹善楠姚剑峰韩明哲周家喜许元富中国医学科学院中国协和医科大学血液病医院血液研究所实验血液学国家重点实验室

目的:采用计算机虚拟筛选(CADD)结合生物学检测的方法来筛选和研究抗TNF-α的小分子抑制剂。方法:计算机虚拟筛选结合体外细胞活性实验从小分子化合物库中筛选候选小分子化合物。MTT实验检测小分子化合物抑制TNF-α和TNF-β对L929细胞... 详细信息

目的:采用计算机虚拟筛选(CADD)结合生物学检测的方法来筛选和研究抗TNF-α的小分子抑制剂。方法:计算机虚拟筛选结合体外细胞活性实验从小分子化合物库中筛选候选小分子化合物。MTT实验检测小分子化合物抑制TNF-α和TNF-β对L929细胞的杀伤作用。Westernblot、RT-PCR及免疫荧光染色技术来研究小分子化合物对TNF-α和TNF-β下游信号通路的影响。等离子共振技术(SPR)检测小分子化合物与TNF-α的结合能力。采用小鼠急性肝炎模型来研究该小分子抑制剂的体内药效。结果:我们采用计算机虚拟筛选结合体外细胞活性筛选的方法从小分子化合物库(约含有9万个小分子化合物)中筛选出了一个候选小分子化合物——C87;C87可以剂量依赖性的抑制TNF-α和TNF-β对L929细胞的细胞毒作用;在L929细胞中,C87可以有效抑制TNF-α和TNF-β下游信号通路的激活,如Caspase-3、Caspase-8的活化,IκΒ-α的降解,及TNF-α引起的下游KC、TNF-α等基因表达的上调;SPR结果表明C87与TNF-α具有较高亲合力(KD=110n M);在小鼠的急性肝炎模型中,C87可以有效减弱TNF-α引起的炎症反应,显著提高小鼠的存活率。结论:获得了一个新型的TNF-α的小分子抑制剂—C87,它可以在体外有效的抑制TNF-α和TNF-β对L929细胞的细胞毒作用和有效阻断TNF-α和TNF-β下游信号通路的激活,并对小鼠急性肝炎模型具有较好的治疗效果,这使得C87有望在今后开发成为治疗TNF-α相关疾病的特异性小分子靶向药物。

关键词： TNF-α TNF-β 小分子抑制剂计算机虚拟筛选 SPR

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

中性粒细胞上清液对人脐带间充质干细胞迁移的影响

引用

蚌埠医学院学报 2017年第7期42卷 845-847,851页

作者：郑丽坤张磊付岭刘金梅陈乃耀卢士红开滦总医院血液科河北唐山063000 开滦总医院骨科河北唐山063000 河北联合大学附属医院血液科河北唐山063000 中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

目的:探讨中性粒细胞上清液和人脐带间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)共培养后,对MSCs迁移的影响,为MSCs更好地应用于炎症性疾病的治疗提供理论依据。方法:分离脐血中性粒细胞,UC-MSCs和中性粒细胞按不同比例共培养后,提取中... 详细信息

目的:探讨中性粒细胞上清液和人脐带间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)共培养后,对MSCs迁移的影响,为MSCs更好地应用于炎症性疾病的治疗提供理论依据。方法:分离脐血中性粒细胞,UC-MSCs和中性粒细胞按不同比例共培养后,提取中性粒细胞上清液,UC-MSCs单独培养的为对照组(1∶0),UC-MSCs在不同浓度的中性粒细胞上清液中进行培养的为实验组,选择18 h和40 h作为培养时间,根据四甲基偶氮唑盐(MTT)的实验结果,选择具有统计学意义的1∶0、1∶1、1∶50分组和18 h作为实验对象,采用划痕的方法观察24 h内不同时间点MSCs的迁移情况。结果:划痕实验观察到1︰50实验组细胞的迁移较1∶0和1∶1实验组明显增快。结论:高浓度的中性粒细胞的上清液促进人脐带MSCs的迁移。

关键词：中性粒细胞上清液人脐带间充质干细胞迁移

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

MLF1IP促进红系造血细胞的扩增并参与真性红细胞增多症的发生

MLF1IP促进红系造血细胞的扩增并参与真性红细胞增多症的发生

引用

中华医学会第14次全国血液学学术会议

作者：冯格格张天佼马晓塘刘晋琴李冰周家喜黄刚杨琳张悦徐泽峰秦铁军石莉红肖志坚中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院 MDS 诊疗中心中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院重点实验室 Division of Pathology & Divisions of Experimental Hematology and Cancer Biology Cincinnati Children'

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

巨核细胞的形态异常对MDS患者的预后影响

巨核细胞的形态异常对MDS患者的预后影响

引用

中华医学会第15次全国红细胞疾病(贫血)学术会议

作者：冯格格崔雯蔡文宇秦铁军张悦徐泽锋方力维张宏丽潘丽娟胡耐博曲士强李冰肖志坚中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院 MDS诊疗中心中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院病理中心中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院 MDS诊疗中心

目的:通过巨核细胞免疫酶标染色来检测骨髓增生异常综合症(MDS)患者骨髓涂片中的异常巨核细胞,规范异常巨核细胞的分类以及探讨异常巨核细胞对患者的预后意义.方法:收集2000年1月至2014年4月于我院确诊的423例原发初治MDS病例资料.其中...

目的:通过巨核细胞免疫酶标染色来检测骨髓增生异常综合症(MDS)患者骨髓涂片中的异常巨核细胞,规范异常巨核细胞的分类以及探讨异常巨核细胞对患者的预后意义.方法:收集2000年1月至2014年4月于我院确诊的423例原发初治MDS病例资料.其中有完整随访资料者371例(88％),中位随访时间22 (1～180)月.我们将IPSS-R积分系统为极低危、低危和中危患者定义为较低危患者,而高危和极高危患者定义为较高危患者.通过对423例患者的骨髓涂片进行巨核细胞特异性抗体(CD41)免疫酶标染色,我们将异常巨核细胞分为7类:微小巨核(＜12 μm)、单圆核小巨核(12～40μm)、双圆核小巨核(12～40 μm)、多圆核小巨核(12～40 um)、单圆核巨核(≥40μm)、双圆核巨核(≥40 μm)以及多圆核巨核(≥40 μm).为评估其对预后的影响,我们从两个方面对这7类异常巨核细胞进行分组:(1)按照细胞大小分为小巨核组(＜40μm)以及非小巨核组(≥40μm);(2)按照细胞核数量分为单核巨核组、双核巨核组以及多核巨核组.同时,我们采用最小P值法确定了每一组巨核细胞对预后影响的最佳界值,分别是:小巨核组(≥25％),非小巨核组(≥5％),单核巨核组(≥30％),双核巨核组(≥1％).而多核巨核组在最佳界点处对预后仍无明显影响(P=0.10).结果:我们发现,随着异常巨核细胞的增加,MDS患者的骨髓原始细胞增加、血小板减少、IPSS-R危险度增加.在单因素分析中,小巨核组≥25％、单核巨核组≥30％患者的预后明显变差(中位生存期为19月[95 ％CI,14～23月]vs 46月[95 ％CI,28～64月]:P＜0.001;18月[95％CI,14～23月]vs 49月[95 ％CI,31～68月]:P＜0.001),而在多因素分析中,这种趋势超越了非小巨核组≥5％以及双核巨核组≥1％,成为影响MDS患者总生存的独立预后因素.在IPSS-R较低危组患者中,小巨核组≥25％、单核巨核组≥30％依然是影响生存的独立预后因素.结论:本研究显示临床实践中结合异常形态巨核细胞对MDS患者预后可做进一步分层判定,将小巨核及单核巨核纳入IPSS-R预后积分系统可以更准确的判断MDS患者的预后.

关键词：

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

胎盘来源细胞与母血、脐血细胞的嵌合

引用

中国组织工程研究 2014年第45期18卷 7327-7332页

作者：莫峥盛宏霞韩忠朝徐曼田宠张斌陈虎解放军军事医学科学院附属第307医院造血干细胞移植科北京市100071 中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津市300020

背景:胎盘中含有丰富的细胞群,因其中CD34+细胞含量高而受到越来越多学者的关注,有望成为临床造血干细胞移植治疗血液病及其他恶性疾病的新来源。目的:探索胎盘来源细胞的数量、集落形成能力及其与母体的嵌合程度。方法:采用健康足月剖... 详细信息

背景:胎盘中含有丰富的细胞群,因其中CD34+细胞含量高而受到越来越多学者的关注,有望成为临床造血干细胞移植治疗血液病及其他恶性疾病的新来源。目的:探索胎盘来源细胞的数量、集落形成能力及其与母体的嵌合程度。方法:采用健康足月剖腹产妇的胎盘,灌注法及组织块消化法收集胎盘中细胞;流式细胞仪检测胎盘及脐血中CD34+细胞比例;培养细胞集落,定期观察集落形态并计数;序列特异性引物PCR扩增技术及序列特异性寡核苷酸探针方法检测胎盘、脐血和母亲外周血的HLA类型;短串联重复PCR方法检测胎盘细胞、脐血细胞和母亲外周血细胞的嵌合情况。结果与结论:胎盘中CD34+细胞数量明显优于脐血,且胎盘具有体外多种集落形成能力,集落形成良好,同时胎盘提取细胞中含有母体来源成分。提示胎盘中细胞数量及其基本生物学特性使其有潜力成为临床造血干细胞移植的新来源。

关键词：干细胞培养胎盘造血干细胞细胞集落序列特异性寡核苷酸探针嵌合移植脐血 antigens,CD34

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

基因工程融合蛋白抗CD19(Fab)-LDM的制备及生物学活性研究

基因工程融合蛋白抗CD19(Fab)-LDM的制备及生物学活性研究

引用

2013医学前沿论坛暨第十三届全国肿瘤药理与化疗学术会议

作者：姜琳琳曹善楠范冬梅杨铭熊冬生中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室

目的构建及表达抗CD19(Fab)-LDP(LDM辅基蛋白)重组嵌合抗体,制备强化融合蛋白anti-CD19(Fab)-LDM,进行体外生物活性的研究。方法采用基因克隆技术,构建基因重组质粒pAZYanti-CD19(Fab)-LDP测序进行鉴定,

关键词： CD19 力达霉素 B淋巴瘤基因工程抗体

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

Anti-CD19-Fab抗体的构建、表达及体外活性研究

Anti-CD19-Fab抗体的构建、表达及体外活性研究

引用

第八届全国难治性白血病学术研讨会、第四届全国难治性淋巴瘤学术研讨会、第四届全国多发性骨髓瘤学术研讨会、第五届钟山国际MDS学术研讨会、南京2012血液学年会

作者：姜琳琳张孝云张梦楠杨铭周圆朱惠芳范冬梅熊冬生中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020

CD19分子是B淋巴细胞表面的一种分化抗原,仅在B淋巴系统恶性肿瘤中广泛表达,而在其它组织中不表达,因此,它是治疗B系淋巴瘤的一个重要靶点。本实验成功构建了表达载体pAYZanti-cd19-Fab，并且能够表达可溶性蛋白，产率高。Anti-CD19-Fa... 详细信息

CD19分子是B淋巴细胞表面的一种分化抗原,仅在B淋巴系统恶性肿瘤中广泛表达,而在其它组织中不表达,因此,它是治疗B系淋巴瘤的一个重要靶点。本实验成功构建了表达载体pAYZanti-cd19-Fab，并且能够表达可溶性蛋白，产率高。Anti-CD19-Fab抗体与CD19+Raji细胞能够特异结合，并且具有很高的亲和活性。Anti-cd19-Fab抗体在B淋巴细胞系中具有内化的特性，这增加了抗体进行肿瘤靶向性治疗的优势。

关键词： B淋巴系统恶性肿瘤 Anti-CD19-Fab抗体靶向性治疗体外活性

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

靶向白血病干细胞CD123的毒性融合蛋白的制备

引用

白血病．淋巴瘤 2011年第8期20卷 490-493页

作者：任思楣张砚君彭洪薇王金宏纪庆范冬梅张楠曾洁卫生部北京医院卫生部临床检验中心北京100730 中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室

目的构建靶向白血病干细胞CD123的融合蛋白，检测其表达效果及其识别白血病干细胞的活性。方法采用PCR法扩增白细胞介素-3（IL-3）和毒素蛋白（LP）的编码DNA序列，经酶切、连接，克隆至表达载体pAYZ，转化大肠杆菌E-coli 16C9，鉴定阳... 详细信息

目的构建靶向白血病干细胞CD123的融合蛋白，检测其表达效果及其识别白血病干细胞的活性。方法采用PCR法扩增白细胞介素-3（IL-3）和毒素蛋白（LP）的编码DNA序列，经酶切、连接，克隆至表达载体pAYZ，转化大肠杆菌E-coli 16C9，鉴定阳性克隆菌落，经低磷培养基AP5诱导表达融合蛋白***，用CM—FF阳离子柱和抗-Etag亲和层析柱纯化，纯化产物经SDS—PAGE和Western blot鉴定，流式细胞术测定其与红白血病细胞TFl的结合活性。结果构建的融合蛋白在大肠杆菌中以可溶性蛋白表达，纯化后纯度达95％以上，表达量约为1mg／L，并有与白血病干细胞表面IL-3受体d亚基（CD123）特异性结合的活性。结论构建的融合蛋白IL-3-G4S—LP具有与白血病干细胞结合的特性，可望成为复发和耐药白血病的治疗药物。

关键词：融合蛋白白细胞介素3 肿瘤干细胞靶向治疗

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

重组腺病毒介导血小板衍生生长因子感染人类脐带间质干细胞的实验研究

引用

白血病．淋巴瘤 2011年第6期20卷 341-344页

作者：董春兰葛菁梁璐陈小军薛峰韩忠朝中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020

目的检测重组腺病毒方法介导血小板衍生生长因子（PDGF）对人类脐带间质干细胞（MSC）的感染能力，为将其用于基因治疗奠定基础。方法反转录．聚合酶链反应（RT—PCR）法扩增人类PDGF的cDNA序列，构建重组病毒载体AdPDGF。分离培养人类... 详细信息

目的检测重组腺病毒方法介导血小板衍生生长因子（PDGF）对人类脐带间质干细胞（MSC）的感染能力，为将其用于基因治疗奠定基础。方法反转录．聚合酶链反应（RT—PCR）法扩增人类PDGF的cDNA序列，构建重组病毒载体AdPDGF。分离培养人类脐带MSC。体外以不同感染复数感染MSC后，流式细胞术检测感染效率，荧光显微镜观察绿色荧光蛋白（GFP）表达。锥虫蓝染色及四甲基偶氮唑蓝（MTY）法检测感染后细胞生存活力及增殖能力。酶联免疫吸附（ELISA）法检测细胞上清液中PDGF分泌水平。结果成功构建病毒载体AdPDGF。其对MSC的感染效率随感染复数增加而增高，当感染复数为50时，达到最高，为87．36％。未感染的MSC、感染AdPDGF和对照病毒的MSC活力分别为（97．8±2．3）％、（91．9±4．0）％和（92．8±4．0）％，增殖能力分别为（100±16．8）％，（95．9±12．0）％和（87．5±9．7）％，感染AdPDGF的MSC与两个对照比较差异均无统计学意义（P〉0．05）。感染48h后MSC能有效分泌PDGF，感染复数为10、30、50时，PDGF分泌水平分别为（1．53±0．37）、（3．03±0．68）和（5．25±0．92）ng／ml，MSC—GFP及MSC组未检测到有PDGF分泌。结论成功构建AdPDGF重组腺病毒并高效感染人类脐带MSC。

关键词：腺病毒科间质干细胞血小板源生长因子基因疗法

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：