检索结果-内蒙古大学图书馆

中国生物工程杂志 2004年第12期24卷 78-83页

作者：汤锋武李宗金范存刚卢士红刘斌韩忠朝中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020

目的 :探讨小鼠胚胎干 (ES)细胞在无血清培养基中以单层粘附培养方式向神经分化的方法。方法 :比较ES细胞在不同培养基中的生长情况 ,分析ES细胞在不同时间分化形成神经细胞的比例。结果 :( 1 )DMEM F1 2和Neurobasal B2 7的 1∶1混合... 详细信息

目的 :探讨小鼠胚胎干 (ES)细胞在无血清培养基中以单层粘附培养方式向神经分化的方法。方法 :比较ES细胞在不同培养基中的生长情况 ,分析ES细胞在不同时间分化形成神经细胞的比例。结果 :( 1 )DMEM F1 2和Neurobasal B2 7的 1∶1混合培养基最适合ES的生长。 ( 2 )单层粘附的ES细胞表达神经细胞粘附分子 (NCAM)的比例随时间增长而增加 ,而nestin的表达先增加后下降。 ( 3)ES细胞可在两周分化为神经胶质及神经元 ,形成神经网络。结论 :小鼠ES细胞可在单层粘附培养中获得向神经的高效分化。

关键词： ES细胞粘附分化神经细胞表达干细胞 NCAM 小鼠胚胎 DMEM 无血清培养基

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人脐血干细胞移植促进大鼠脊髓损伤神经恢复

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中国医学科学院学报 2004年第1期26卷 38-42页

作者：李洪钧刘海英赵宗茂卢士红杨仁池朱惠芳蔡英林张庆俊韩忠朝中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所国家实验血液学重点实验室天津300020 Department of Neurosurgery Second Hospital of Hebei Medical UniversityShijiazhuang Department of Neurosurgery Second Hospital of Hebei Medical University Shijiazhuang

目的观察移植人脐血CD３４＋干细胞是否可以存活、分化、促进脊髓损伤的行为和功能恢复。方法２６只Wister大鼠随机分成移植组和对照组。移植组行脊髓半切术并移植５-溴脱氧尿核苷（Brdu）标记的脐血CD３４＋细胞，对照组行脊髓半切术... 详细信息

目的观察移植人脐血CD３４＋干细胞是否可以存活、分化、促进脊髓损伤的行为和功能恢复。方法２６只Wister大鼠随机分成移植组和对照组。移植组行脊髓半切术并移植５-溴脱氧尿核苷（Brdu）标记的脐血CD３４＋细胞，对照组行脊髓半切术后注射PBS液。采用改良Tarlov评分标准对移植组和对照组所有大鼠在术前和术后２４h、１、２、３、４周进行运动功能评价。组织学和免疫组化分析移植细胞的定位和分化情况。结果移植后在脊髓病理切片中出现Brdu标记人脐血细胞，激光扫描共聚焦显微镜通过免疫荧光双标检测到７％Brdu阳性细胞表达神经胶质元纤维酸性蛋白（GFAP），２％Brdu阳性细胞表达神经元核抗原（NeuN）。神经功能检测发现１周后移植组功能恢复较对照组具有显著性差异（P＜０．０５）。结论移植人脐血干细胞可以促进脊髓损伤的行为和功能恢复，为神经损伤治疗提供了有用的细胞源。

关键词：脐血干细胞移植脊髓损伤神经功能恢复

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肝素促进脐血巨核祖细胞体外扩增

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中国生物工程杂志 2004年第12期24卷 53-58页

作者：冯义冯四州张磊刘斌范存刚任贺韩忠朝实验血液学国家重点实验室中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院天津300020 河北医科大学第二医院石家庄050000

目的 :探索肝素在脐带血CD34+ 细胞定向扩增巨核祖细胞中的作用。方法采用免疫磁珠法 (MACS)分选CD34+ 细胞 ,在TPO ,IL 1 1的扩增体系中加入肝素 ,巨核祖细胞集落分析 (CFU MK)测定巨核祖细胞扩增倍数 ,流式细胞仪检测巨核祖细胞分化... 详细信息

目的 :探索肝素在脐带血CD34+ 细胞定向扩增巨核祖细胞中的作用。方法采用免疫磁珠法 (MACS)分选CD34+ 细胞 ,在TPO ,IL 1 1的扩增体系中加入肝素 ,巨核祖细胞集落分析 (CFU MK)测定巨核祖细胞扩增倍数 ,流式细胞仪检测巨核祖细胞分化过程中的特异性标记 (CD34+ ,CD41a+ ,CD61 + ,CD34+ CD41a+ ,CD41a+ CD61 + ) ,巨核细胞特异性抗体 (CD41a)免疫组化染色和透射电镜观察鉴定巨核细胞形态及超微结构 ,血小板体外活化实验及NOD SCID小鼠异种体内移植实验评价扩增的巨核祖细胞的功能。结果 :TPO( 5 0ng ml)与IL 1 1 ( 5 0ng ml)双因子联合应用 ,7天巨核祖细胞克隆扩增倍数为 83 1 7± 39 41倍 ,1 0天为 2 0 5 0 6± 74 2 6倍 ,流式细胞仪分析显示 7天CD34+ CD41a+ 细胞扩增 1 0 5 1± 4 79倍 ,0天加入肝素后 ,7天巨核祖细胞克隆扩增倍数为 1 0 8 2 5± 32 67倍 ,1 0天为 333 0 6± 2 7 5 4倍 ,7天CD34+ CD41a+ 细胞扩增到 2 9 93± 6 39倍 ,为无肝素组的 2 85倍 ,与双因子组相比有统计学差异 (P <0 0 1 ) ,肝素在第 5天及第 7天加入没有增加巨核祖细胞扩增效果。经全身照射预处理的NOD SCID小鼠静脉输注扩增第 7天的巨核细胞 (TPO、IL 1 1、肝素联合 ) 。

关键词：祖细胞细胞扩增肝素 CD41 IL-1 巨核细胞 CD34^+ 克隆 NOD 体外扩增

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自发性高血压大鼠间充质干细胞生物学特性变化的研究

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中国生物工程杂志 2004年第4期24卷 49-53页

作者：刘煜昊房佰俊史明霞杨少光廖联明赵春华中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室中美合作实验室组织工程中心天津300020

目的 :研究自发性高血压大鼠 (SHR)间充质干细胞 (MSC)生物学特性的改变。方法 :取SHR和WKY骨髓和主动脉的贴壁细胞 ,经CD1 0 5免疫磁珠分选 ,测定其生长曲线和倍增时间 ,流式细胞仪检测其免疫表型 ,进行纤维母细胞集落形成单位计数 ,... 详细信息

目的 :研究自发性高血压大鼠 (SHR)间充质干细胞 (MSC)生物学特性的改变。方法 :取SHR和WKY骨髓和主动脉的贴壁细胞 ,经CD1 0 5免疫磁珠分选 ,测定其生长曲线和倍增时间 ,流式细胞仪检测其免疫表型 ,进行纤维母细胞集落形成单位计数 ,体外诱导成脂肪和成骨 ,以油红O及VonKossa染色证实 ,免疫组化和半定量PCR法测胶原蛋白。结果 :这些细胞呈梭形贴壁生长 ,SHR组细胞倍增时间长于WKY级 ,这些细胞CD1 0 5、CD44、CD2 9,Flk 1均阳性 ,SHR组CFU F低于WKY组 ,SHR组细胞更易成脂肪、成骨、促纤维化。结论 :这些细胞为MSC ,SHR组MSC增殖能力较WKY组弱 ,成脂肪、成骨、促纤维化强于WKY组 ,MSC的异常可能是高血压易患动脉弱样硬化原因之一。

关键词：自发性高血压大鼠间充质干细胞动脉弱样硬化细胞分化

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胎儿肺脏来源间充质干细胞的鉴定与损伤修复的实验研究

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中国生物工程杂志 2004年第3期24卷 48-53页

作者：郑春梅孙昭曹莹孙琪云马丽马冠杰姜学英赵春华实验血清学国家重点实验室中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院天津300020 中国军事医学科学院附属307医院北京100039

目的 :为研究胎儿肺脏来源间充质干细胞的生物学性状 ,表型和多向分化能力。方法 :取胎龄为 4～ 5个月水囊引产胎儿 ,将肺脏细胞在SF(含 2 %FBS)培养基中培养。测定生长曲线、利用流式细胞仪对培养细胞进行表型测定 ,细胞周期分析 ,体... 详细信息

目的 :为研究胎儿肺脏来源间充质干细胞的生物学性状 ,表型和多向分化能力。方法 :取胎龄为 4～ 5个月水囊引产胎儿 ,将肺脏细胞在SF(含 2 %FBS)培养基中培养。测定生长曲线、利用流式细胞仪对培养细胞进行表型测定 ,细胞周期分析 ,体外诱导分化实验。NOD SCID鼠放射损伤后 ,尾静脉输入经PKH2 6染色的间充质干细胞 ,两个月后检测外源细胞在肺脏的定植情况。结果 :从胎儿肺脏可培养出间充质干细胞 ,并可诱导成骨、软骨和脂肪细胞分化 ;移植两个月后可以检测到外源细胞在肺脏的定植。结论 :从胎儿肺脏可分离培养出间充质干细胞 ,在体外有效扩增且保持其低分化状态 ;间充质干细胞可以在肺脏长时间定植。

关键词：胎儿肺脏间充质干细胞 MSC 生物学性状间质性肺疾病

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慢性特发性血小板减少性紫癜的血清瘦素水平测定

慢性特发性血小板减少性紫癜的血清瘦素水平测定

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中华医学会第八次全国血液学学术会议

特发性血小板减少性紫癜(idiopathic thrombocytopenic purpura,ITP)是因为体内产生抗血小板抗体导致网状内皮系统吞噬破坏血小板,造成血小板减少的一种自身免疫疾病。当前的研究表明,无论是儿童抑或成人慢性ITP在疾病活动期主要体现一... 详细信息

特发性血小板减少性紫癜(idiopathic thrombocytopenic purpura,ITP)是因为体内产生抗血小板抗体导致网状内皮系统吞噬破坏血小板,造成血小板减少的一种自身免疫疾病。当前的研究表明,无论是儿童抑或成人慢性ITP在疾病活动期主要体现一种T辅助细胞1型(Th1)极化模式。瘦素作为一种T辅助细胞分泌调控因子是如何在本病的发病机制中发挥作用目前还不清楚。为此,我们率先进行了瘦素与特发性血小板减少性紫癜相关性的研究,以期发现一些线索。

关键词：慢性特发性血小板减少性紫癜瘦素水平

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原发性血小板增多症中抗凋亡蛋白Bcl-xL早期下调导致其巨核细胞过早分化成熟

原发性血小板增多症中抗凋亡蛋白Bcl-xL早期下调导致其巨核细胞过...

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中华医学会第八次全国血液学学术会议

目的:Bcl-x抗凋亡蛋白属于bcl-2蛋白家族,主要表达在造血细胞中,在调节造血细胞的分化具有重要功能。Bcl-x抗凋亡蛋白失活或过度表达皆会影响血小板的生成,因此其在巨核细胞分化及血小板形成过程中具有重要的作用。

关键词：抗凋亡蛋白巨核细胞 Bcl-xL 原发性血小板增多症分化成熟

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4-1BB在肿瘤治疗中的作用

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国外医学（肿瘤学分册） 2004年第4期31卷 258-260页

作者：姜文国熊冬生杨纯正中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020

4 1BB是肿瘤坏死因子受体 (TNFR)超家族成员 ,具有影响T细胞扩增和存活的功能特性。通过 4 1BBL或者抗 4 1BB单克隆抗体干预 4 1BB协同刺激途径可能对肿瘤有治疗作用。最近提出的s4 1BBL即 4 1BBL可溶性形式 ,对恶性血液病的诊断... 详细信息

4 1BB是肿瘤坏死因子受体 (TNFR)超家族成员 ,具有影响T细胞扩增和存活的功能特性。通过 4 1BBL或者抗 4 1BB单克隆抗体干预 4 1BB协同刺激途径可能对肿瘤有治疗作用。最近提出的s4 1BBL即 4 1BBL可溶性形式 ,对恶性血液病的诊断和治疗以及判断预后有一定价值。现综述有关 4

关键词： 4-1BB 肿瘤治疗学肿瘤坏死因子 T细胞单克隆抗体研究进展协同刺激

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凋亡细胞清除的研究进展

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国外医学（输血及血液学分册） 2004年第5期27卷 411-413页

作者：战梅韩忠朝中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020

细胞凋亡与增殖过程的平衡是维持机体组织的自身稳定性和保证正常细胞及组织功能发挥的一个重要机制。凋亡细胞表面组分性质的改变构成传递给吞噬细胞识别信号。单核细胞来源的巨噬细胞、树突细胞等通过识别凋亡细胞表面特异性信号,如... 详细信息

细胞凋亡与增殖过程的平衡是维持机体组织的自身稳定性和保证正常细胞及组织功能发挥的一个重要机制。凋亡细胞表面组分性质的改变构成传递给吞噬细胞识别信号。单核细胞来源的巨噬细胞、树突细胞等通过识别凋亡细胞表面特异性信号,如细胞表面的胞膜磷脂成分、碳水化合物等,识别、吞噬和清除凋亡细胞。凋亡细胞的及时清除,可以防止细胞内有害物质的释放,避免炎症的发生,对防止重要组织、器官(如肺、肝)的损伤和延缓自身免疫性疾病的发生有重要的临床意义。

关键词：凋亡细胞吞噬细胞膜磷脂延缓细胞表面研究进展细胞内正常细胞器官特异性

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肿瘤耐药新基因sorcin及其机制研究

肿瘤耐药新基因sorcin及其机制研究

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第三届中国肿瘤学术大会

作者：周圆谭耀红许元富李光耀齐静肖瑛杨纯正中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室

目的:在用cDNA Microarray分析白血病多药耐药细胞K562/A02时,发现有12个基因在两株细胞中的表达有明显差异,其中一个就是sorcin。Sorcin最初是在耐药细胞株中发现的,但它与肿瘤耐药的关系一直未得到肯定,因此我们深入研究了sorcin基因... 详细信息

目的:在用cDNA Microarray分析白血病多药耐药细胞K562/A02时,发现有12个基因在两株细胞中的表达有明显差异,其中一个就是sorcin。Sorcin最初是在耐药细胞株中发现的,但它与肿瘤耐药的关系一直未得到肯定,因此我们深入研究了sorcin基因与白血病多药耐药的相关性,并初步分析了其耐药机制。方法:用Northern Blot和Western Blot分别检测K562和K562/A02细胞中sorcin基因和蛋白水平表达的差异。用RT—PCR方法对sorcin基因在白血病患者和健康人中的表达水平进行检测。利用反义寡核苷酸和RNA干扰技术验证了抑制sorcin基因后细胞耐药表型的变化。将从K562/A02细胞中克隆得到的sorcin基因转染K562敏感细胞,观察稳定转染后细胞对阿霉素及其它多药耐药类药物的敏感性。用荧光钙指示剂fura-2/AM测定敏感与耐药细胞内以及sorcin转染后细胞内的游离钙浓度。结果:Northern Blot和Western blot结果均显示与敏感细胞相比,sorcin在K562/A02细胞中有明显扩增。临床资料分析表明,白血病患者sorcin基因表达明显高于正常人,急性白血病患者复发难治组高于初诊组和完全缓解组,临床耐药组显著高于非临床耐药组。反义寡核苷酸转染K562/A02细胞后,细胞内sorcin蛋白的表达被抑制,细胞内蓄积的阿霉素浓度升高了44%,对阿霉素的敏感性提高了18.27%。两段针对sorcin基因的siRNA分别转染K562/A02细胞72小时后,细胞中sorcin mRNA分别降低了34.46%和65.8%,对阿霉索的IC50,由113.26ug/ml降为76.76 ug/ml和69.32ug/ml。Sorcin基因转染,K562细胞后,细胞中sorcin表达水平明显高于未转染和转染空载体的K562细胞,在经G418筛选得到的两株sorcin稳定表达的细胞中,K562/E8A6和K562/G7D4对阿霉素的耐药倍数分别为4.85和3.67倍;对VP-16的耐药倍数分别为2.19和1.46倍;对高三尖衫酯碱的耐药倍数分别为10.5和1.7倍。用F340/F380表示细胞内游离钙浓度的高低,在K562、K562/A02以及sorcin转染的K562细胞中,其F340/F380分别为2.07±0.26、0.94±0.1、1.457±0.11。结论:sorcin基因不但在K562/A02细胞中稳定高表达,而且其过度表达与白血病患者临床耐药密切相关。抑制sorcin基因具有一定的耐药逆转作用。sorcin基因的转染能够增加细胞的耐药表型。耐药细胞内的游离钙水平要低于敏感细胞,sorcin基因转染敏感细胞后也会降低游离钙水平。我们分析,sorcin与Ca2+的结合不但会改变信号传导,而且通过细胞内游离钙水平的改变影响其它耐药蛋白的活性,这些改变都可能会影响细胞的多药耐药。我们认为作为一种肿瘤耐药相关基因,sorcin参与了白血病耐药表型的形成,可作为白血病耐药诊断和治疗的新靶点。

关键词： sorcin基因白血病多药耐药耐药机制

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