检索结果-内蒙古大学图书馆

中国肿瘤临床 2007年第17期34卷 973-977页

作者：齐静杨铭周圆王彩云熊冬生杨纯正中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津市300020

目的:明确Pgp在Gleevec耐药白血病细胞中的表达和功能,为临床合理用药提供理论指导。方法:四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测K562/G01细胞对阿霉素(Doxorubicin,DOX)和伊马替尼(Gleevec,STI571)细胞毒作用的敏感性以及Pgp抑制剂维拉帕米(Verapa... 详细信息

目的:明确Pgp在Gleevec耐药白血病细胞中的表达和功能,为临床合理用药提供理论指导。方法:四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测K562/G01细胞对阿霉素(Doxorubicin,DOX)和伊马替尼(Gleevec,STI571)细胞毒作用的敏感性以及Pgp抑制剂维拉帕米(Verapamil,VPL)对K562/G01细胞药物敏感性的调节作用;RT-PCR和Western-blotting方法检测细胞中MDR基因mdr1及Pgp的表达;流式细胞仪(Flow cytometry,FCM)检测细胞内DOX及罗丹明123(Rhodamin123,Rho123)水平以及Gleevec和ATP对Pgp功能的调节作用。结果:人白血病Gleevec耐药K562/G01细胞对Gleevec耐药约40倍,但对MDR类化疗药物DOX却保持敏感,而且,Pgp抑制剂VPL不改变K562/G01细胞对DOX的敏感性。与MDR表型的K562/A02细胞一样,K562/G01细胞表达mdr1及其编码的Pgp蛋白,但Pgp却没有药物外排泵功能,K562/G01细胞中DOX或Rh123浓度与敏感细胞K562相当。加入Gleevec或ATP可明显降低K562/G01细胞中DOX水平。结论:人白血病Gleevec耐药细胞K562/G01表达mdr1/Pgp,但Pgp功能明显受阻,Bcr/Abl抑制剂Gleevec或ATP可部分恢复K562/G01细胞中Pgp的药物外排泵功能。

关键词：白血病 Gleevec耐药性 P-糖蛋白

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pig7基因在急性白血病细胞中的表达及其临床意义

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中华血液学杂志 2007年第8期28卷 532-536页

作者：王东海王洋王敏刘航徐智芳饶青孟继虹王建祥中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

目的检测 pig7基因在急性白血病(AL)细胞中的表达水平及其临床意义,在基因甲基化调控方而探讨 pig7基因表达异常的可能机制。方法应用实时定量逆转录 PCR(RT-PCR)方法对138例 AL 患者、21名正常人骨髓标本以及6个白血病细胞株进行了 pig... 详细信息

目的检测 pig7基因在急性白血病(AL)细胞中的表达水平及其临床意义,在基因甲基化调控方而探讨 pig7基因表达异常的可能机制。方法应用实时定量逆转录 PCR(RT-PCR)方法对138例 AL 患者、21名正常人骨髓标本以及6个白血病细胞株进行了 pig7转录本的检测,并在全反式维甲酸(ATRA)作用下观察 NB4细胞分化效应及 pig7基因表达情况。进行限制性内切酶分析以鉴定白血病细胞中存在的 pig7转录剪接体。通过甲基化特异性 PCR(MSP)检测白血病细胞 pig7基因启动子区域是否存在过度甲基化。结果 AL 进展期(包括初治、复发/难治)患者骨髓细胞 pig7 mRNA 相对表达水平与正常骨髓细胞相比明显降低(RQ 中位数分别为0.62和18.30,P<0.01),其中急性髓系白血病(AML)与急性淋巴细胞白血病(ALL)差异无统计学意义,而初治组与复发/难治组比较 pig7mRNA 水平差异有统计学意义,前者明显高于后者(RQ 中位数分别为1.43和0.16,P<0.05)。pig7低表达患者完全缓解率也较低(P<0.05)。NB4细胞经 ATRA 诱导分化后 pig7表达水平由1.61±0.72增至44.75±3.93(P<0.01)。酶切结果提示白血病细胞中仅存在 SIMPLE 剪接体。在 K562、HL-60及 Nalm-6细胞 pig7启动子区域存在过度甲基化,而 U937、NB4和 kasumi-1细胞中该区域非甲基化状态占优势。结论 pig7基因在 AL 的表达下调为白血病发病机制的探讨和疗效预测提供了新的思路。

关键词：白血病,急性基因,pig7 聚合酶链反应,实时定量 DNA甲基化

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Akt/eNOS信号途径调节内皮祖细胞存活和功能的实验研究

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中华心血管病杂志 2007年第2期35卷 173-177页

作者：马凤霞任倩韩忠朝中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020

目的研究 Akt/eNOS 信号途径是否调节内皮祖细胞(EPC)的存活和功能。方法分离、培养 EPC,然后与不同浓度氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)、硝基精氨酸甲酯(L-NAME)或triciribine 孵育48 h,一部分 EPC 与左旋精氨酸预处理后,再与 oxLDL 孵育... 详细信息

目的研究 Akt/eNOS 信号途径是否调节内皮祖细胞(EPC)的存活和功能。方法分离、培养 EPC,然后与不同浓度氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)、硝基精氨酸甲酯(L-NAME)或triciribine 孵育48 h,一部分 EPC 与左旋精氨酸预处理后,再与 oxLDL 孵育。然后,检测 EPC 凋亡率及迁移、黏附和管状结构形成能力,同时检测磷酸化 Akt 的蛋白表达、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的蛋白及 mRNA 表达、一氧化氮的产生。结果 oxLDL 剂量依赖性地诱导 EPC 凋亡,抑制 EPC 迁移、黏附及管状结构形成能力,L-NAME 和 triciribine 具有与 oxLDL 相似的作用。oxLDL 的作用能被左旋精氨酸抑制。oxLDL 降低磷酸化 Akt 及 eNOS 蛋白表达,oxLDL 剂量为50μg/ml 时下降率分别为(66±4)%和(68±9)%。而且,oxLDL 降低 EPC eNOS mRNA 的表达及一氧化氮的产生,oxLDL 剂量为50μg/ml 时 eNOS mRNA 表达的下降率为(59±14)%。结论 oxLDL 通过调节 Akt/eNOS 信号途径调节 EPC 的存活和功能。

关键词：脂蛋白类 LDL 干细胞一氧化氮合酶

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白血病细胞系来源的P2X_7受体的功能研究

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生物物理学报 2007年第2期23卷 139-144页

作者：张海燕郑国光聂坤王琳林永敏种靖慧马媛媛吴克复中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020

P2X7受体是ATP门控的离子通道。从白血病细胞系J6-1细胞中扩增P2X7受体编码区全序列,克隆到pTARGET真核表达载体,经DNA序列分析后转染Ramos细胞,获得稳定表达细胞株;应用RT-PCR、Westernblot和流式细胞术检测P2X7受体在Ramos中的表达;... 详细信息

P2X7受体是ATP门控的离子通道。从白血病细胞系J6-1细胞中扩增P2X7受体编码区全序列,克隆到pTARGET真核表达载体,经DNA序列分析后转染Ramos细胞,获得稳定表达细胞株;应用RT-PCR、Westernblot和流式细胞术检测P2X7受体在Ramos中的表达;荧光分光光度计检测P2X7受体介导的胞内钙离子浓度变化。结果显示,J6-1细胞来源的P2X7受体在第559位有一个A→G的有义突变,导致Asn187→Asp187,可在Ramos细胞中表达,在特异性激动剂BzATP作用下可引起胞内钙离子浓度的升高,但所需激动剂浓度高于常规浓度。

关键词： P2X7受体克隆表达功能 ATP酶

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100例多发性骨髓瘤患者细胞遗传学分析

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中华医学杂志 2007年第24期87卷 1685-1688页

作者：邓书会徐燕王亚非麦玉洁刘旭平赵耀中邹德慧王迎邱录贵中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020 大连大学附属中山医院血液科

目的总结我国多发性骨髓瘤(MM)患者的细胞遗传学特点及其临床意义。方法回顾性分析我院100例 MM 患者的细胞遗传学结果。结果 (1)患者总体的克隆性染色体畸变(CA)检出率为17.2%;纳入亚克隆后 CA 检出率为37.0%;其中亚二倍体最多见;13号... 详细信息

目的总结我国多发性骨髓瘤(MM)患者的细胞遗传学特点及其临床意义。方法回顾性分析我院100例 MM 患者的细胞遗传学结果。结果 (1)患者总体的克隆性染色体畸变(CA)检出率为17.2%;纳入亚克隆后 CA 检出率为37.0%;其中亚二倍体最多见;13号染色体异常(C13A)检出率为6.0%,其荧光原位杂交(FISH)检出率为33.3%;14号染色体易位和/或14q32异常检出率6.0%;(2)单因素分析示克隆性 CA、非超二倍体和 C13A 都使患者的总体生存时间(OS)和疾病进展时间(TTP)显著缩短;多因素分析中仅 C13A 具有独立预后意义。结论 C13A、非超二倍体、超二倍体、免疫球蛋白重链(IgH)易位等 CA 在我国 MM 患者中具有重现性。预后分析显示 C13A是独立预后不良因素。

关键词：多发性骨髓瘤细胞遗传学染色体畸变回顺性分析

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小鼠β-防御素2肿瘤疫苗的构建及特性鉴定

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中国免疫学杂志 2007年第8期23卷 675-679页

作者：马小彤徐玢董成亚石洋林永敏吴克复中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

目的:构建分泌性小鼠β-防御素2(MBD2)真核表达质粒,转染L1210淋巴细胞白血病细胞,对转染细胞进行功能及特性鉴定。方法:RT-PCR法从小鼠皮肤细胞克隆MBD2成熟部分基因片段,用overlap PCR法将小鼠Igκ信号肽与MBD2成熟片段相连,构建MBD2... 详细信息

目的:构建分泌性小鼠β-防御素2(MBD2)真核表达质粒,转染L1210淋巴细胞白血病细胞,对转染细胞进行功能及特性鉴定。方法:RT-PCR法从小鼠皮肤细胞克隆MBD2成熟部分基因片段,用overlap PCR法将小鼠Igκ信号肽与MBD2成熟片段相连,构建MBD2分泌表达载体。经测序证实序列正确后,脂质体法转染L1210细胞,筛选稳定表达细胞株。RT-PCR、Western blot检测瘤苗MBD2的表达。Transwell法检测瘤苗分泌的MBD2对不成熟树突状细胞(iDC)迁移的作用。细胞计数、PI染色及FACS观察转染MBD2对肿瘤细胞增殖、细胞周期及MHCⅠ类(H-2Kd,H-2Dd)、Ⅱ类(I-Ad)分子及共刺激分子(CD80、CD860)表达的影响。结果:转染MBD2基因的肿瘤细胞表达并分泌MBD2,并以剂量依赖方式趋化iDC,表明具有生物学活性。转染MBD2基因对肿瘤细胞生长增殖、细胞周期及细胞表面MHC分子及共刺激分子表达无明显影响。结论:本实验成功构建了MBD2白血病细胞疫苗,为进一步体内评价抗白血病效果奠定了基础。

关键词：防御素天然免疫瘤苗急性淋巴细胞白血病

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肿瘤细胞内pH值改变与肿瘤多药耐药的关系

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中国药理学通报 2007年第9期23卷 1128-1130页

作者：芦颖李庆华庞天翔中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院.实验血液学国家重点实验室天津300020

细胞内pH值(pHi)增高是许多耐药肿瘤的共同特点,其结果引起肿瘤细胞对化疗药物的敏感性下降,降低药物疗效。通过对pHi的调节,可纠正细胞内碱化,逆转肿瘤耐药。Na+-H+交换蛋白(Na+/H+exchanger,NHE)抑制剂可通过抑制NHE的活性调节pHi,为... 详细信息

细胞内pH值(pHi)增高是许多耐药肿瘤的共同特点,其结果引起肿瘤细胞对化疗药物的敏感性下降,降低药物疗效。通过对pHi的调节,可纠正细胞内碱化,逆转肿瘤耐药。Na+-H+交换蛋白(Na+/H+exchanger,NHE)抑制剂可通过抑制NHE的活性调节pHi,为肿瘤的治疗提供了新的思路和手段。

关键词：细胞内pH值多药耐药 P-糖蛋白 Na^+-H^+交换蛋白

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β-catenin基因在白血病患者中的表达及其临床意义

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中华血液学杂志 2007年第8期28卷 541-544页

作者：麦玉洁邱录贵李增军于珍李长虹王亚非王国蓉李茜中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室大连大学附属中山医院血液科 116001

目的检测β-catenin在白血病患者中的表达,仞步探讨其在白血病中的作用。方法采用半定量 RT-PCR 方法检测β-catenin 在白血病患者中的表达,同时对部分标本应用免疫细胞化学检测其蛋白表达水平,结合临床资料分析其表达的意义。结果骨髓... 详细信息

目的检测β-catenin在白血病患者中的表达,仞步探讨其在白血病中的作用。方法采用半定量 RT-PCR 方法检测β-catenin 在白血病患者中的表达,同时对部分标本应用免疫细胞化学检测其蛋白表达水平,结合临床资料分析其表达的意义。结果骨髓单个核细胞(MNC)中β-cateninmRNA 在急性髓系白血病(AML)和急性淋巴细胞白血病(ALL)患者中的表达(中位值分别为0.7593、0.6415)均明显高于正常人(0.3597)(P 值分别为0.001、0.016),也明显高于慢性粒细胞白血病(CML)慢性期患者(0.2571)(P 值分别为0.001、0.008),但存 AML 和 ALL 之间差异无统计学意义(P>0.05)。β-catenin 在 CML 慢性期患者的表达与正常人相比差异无统计学意义,但是在急变和加速期患者(0.9152)中明显增高,与急性白血病水平相当。按照 FAB 分型,β-catenin 在 AML M_5亚型中高表达,而在 M_3中表达明显低于其他亚型。免疫细胞化学结果显示,正常 MNC β-catenin 主要分布于细胞膜和细胞质,而在白血病细胞中,除 M_3外几乎均可以在细胞核中检测到其程度不一的表达。患者年龄、白细胞计数、高危核型以及治疗反应与β-catenin 均无显著相关,但在 AML 组β-catenin 与 CD34抗原表达有明显相关性。结论经典的 Wnt/β-catenin 信号传导途径有可能在急性白血病及 CML 急变和加速期中被激活。

关键词：基因,β-catenin 白血病基因表达

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增强造血干/祖细胞归巢潜能的可行性策略

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中华血液学杂志 2007年第11期28卷 787-789页

作者：高静韬郑以州中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

造血干／祖细胞（HS／PC）的归巢为一多步骤过程，众多黏附分子、趋化因子、生长因子及蛋白水解酶等参与HS／PC归巢过程的调控，其中以基质衍生因子（SDF）-1α与其特异性G蛋白偶联受体CXCR4（SDF-lα／CXCR4轴）的调节作用尤为重要，Wr... 详细信息

造血干／祖细胞（HS／PC）的归巢为一多步骤过程，众多黏附分子、趋化因子、生长因子及蛋白水解酶等参与HS／PC归巢过程的调控，其中以基质衍生因子（SDF）-1α与其特异性G蛋白偶联受体CXCR4（SDF-lα／CXCR4轴）的调节作用尤为重要，Wright等^[1]研究证实CXCR4或SDF-1α缺陷小鼠因胎肝和骨髓造血功能衰竭而死于围产期。新近发现多种细胞因子或蛋白成分可以增加HS／PC对SDF-lα／CXCR4轴的敏感性和反应性，并由此构建复杂的SDF-1α／CXCR4轴调控模型，我们就此领域的研究现状作一综述。

关键词：造血干/祖细胞细胞归巢 CXCR4 骨髓造血功能衰竭 G蛋白偶联受体 SDF-1 基质衍生因子蛋白水解酶

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急性髓系白血病诱导缓解治疗期残留白血病细胞比例的预后价值

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中华血液学杂志 2007年第5期28卷 341-343页

作者：薛华李睿张莉杨栋林李洪强于明华郝玉书肖志坚中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所、血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

染色体核型异常及其受累基因是急性髓系白血病（AML）最重要的独立预后因素和治疗策略制定的依据，但由于细胞和分子遗传学检测技术要求高，目前在我国尚难以成为常规。已有研究表明通过白血病细胞的清除速度及程度评估急性白血病的早... 详细信息

染色体核型异常及其受累基因是急性髓系白血病（AML）最重要的独立预后因素和治疗策略制定的依据，但由于细胞和分子遗传学检测技术要求高，目前在我国尚难以成为常规。已有研究表明通过白血病细胞的清除速度及程度评估急性白血病的早期疗效具有重要的临床意义。我们对原发初治AML患者在诱导缓解治疗期不同时点残留白血病细胞比例的预后意义进行了探讨，报道如下。

关键词：残留白血病细胞急性髓系白血病诱导缓解治疗期预后价值染色体核型异常分子遗传学急性白血病

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