检索结果-内蒙古大学图书馆

生物化学与生物物理进展 2004年第8期31卷 688-692页

作者：冯艳刘冬青王震曹慧青时娜邓仲端丁金凤孟宪敏中国医学科学院中国协和医科大学阜外心血管病医院分子医学中心北京100037 华中科技大学同济医学院药理系武汉430030 华中科技大学同济医学院病理系武汉430030

为了明确p93在心血管系统中的生物学功能及在信号传导通路中的作用 ,采用酵母双杂交技术 ,选择 p93N端第 10 1～ 372位氨基酸构建诱饵质粒 ,筛选成人心脏cDNA文库 ,寻找与之相互作用的蛋白质 ,结果得到蛋白peroxiredoxin 3(PRX 3) .采... 详细信息

为了明确p93在心血管系统中的生物学功能及在信号传导通路中的作用 ,采用酵母双杂交技术 ,选择 p93N端第 10 1～ 372位氨基酸构建诱饵质粒 ,筛选成人心脏cDNA文库 ,寻找与之相互作用的蛋白质 ,结果得到蛋白peroxiredoxin 3(PRX 3) .采用体外结合实验和免疫共沉淀等方法 ,证实了原核和真核表达的 p93确实可与PRX3相互作用 ,通过双重荧光共定位 ,为二者的相互作用提供了定位依据 .研究提示p93可能参与心肌细胞中与PRX3有关的各种生理病理过程 ,如生长、分化、发育、凋亡。

关键词：心肌特异性新蛋白激酶 p93 酵母双杂交心肌细胞生物学功能信号传导通路

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DNA测序模板的制备和测序引物设计中的相关问题

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中国分子心脏病学杂志 2004年第1期4卷 56-60页

作者：王虎王晓健甄一松邹玉宝郑维越张芊中国医学科学院中国协和医科大学阜外心血管病医院分子医学中心北京100037

核酸序列测定是基因研究的重要手段,本世纪60年代和70年代,科学家们一直致力于研究测定核酸序列的方法.

关键词： DNA测序引物设计 RNA分子制备模板序列测定核酸序列 tRNA 基因研究染色体

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E82K新突变对Lamin A与Emerin蛋白结合能力的影响

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中国分子心脏病学杂志 2004年第2期4卷 79-83页

作者：王虎郑维越邹玉宝甄一松宋雷张芊惠汝太中国医学科学院中国协和医科大学阜外心血管病医院分子医学中心北京100037

目的 :研究LaminAE82K突变型蛋白与Emerin蛋白结合能力的减弱是否会导致家族性扩张型心肌病。方法 :构建Emerin基因野生型和LaminA基因野生型和E82K突变型表达载体 ,将Emerin基因表达载体分别与LaminA基因野生型及突变型表达载体共转染H... 详细信息

目的 :研究LaminAE82K突变型蛋白与Emerin蛋白结合能力的减弱是否会导致家族性扩张型心肌病。方法 :构建Emerin基因野生型和LaminA基因野生型和E82K突变型表达载体 ,将Emerin基因表达载体分别与LaminA基因野生型及突变型表达载体共转染HEK2 93细胞 ,免疫共沉淀的方法检测野生型和突变型LaminA蛋白与Emerin蛋白的结合力的差异。结果 :LaminA野生型和E82K突变型蛋白与Emerin蛋白的结合能力不存在明显差异。结论

关键词：家族性扩张型心肌病 Lamin A Emerin 基因突变

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Nelin的肌动蛋白结合特性及与其相互作用蛋白质的筛选

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科学通报 2004年第21期49卷 2173-2177页

作者：王震孟宪敏曹慧青刘冬青冯艳尤昕王茵郭莲军屈伸中国医学科学院中国协和医科大学阜外心血管病医院分子医学中心北京100037 华中科技大学同济医学院基础医学院武汉430030 延边大学医学院附属医院检验科延吉133000 华中科技大学同济医学院生物化学与分子生物学系武汉430030

为了研究人新基因nelin及其心肌表达产物Nelin蛋白的生物特性,并寻找能够与其发生相互作用的蛋白质,对Nelin蛋白的全长及其部分结构域进行了肌动蛋白结合共沉淀实验,并在真核细胞内进行了免疫荧光共定位实验.结果发现,在体外共沉淀和细... 详细信息

为了研究人新基因nelin及其心肌表达产物Nelin蛋白的生物特性,并寻找能够与其发生相互作用的蛋白质,对Nelin蛋白的全长及其部分结构域进行了肌动蛋白结合共沉淀实验,并在真核细胞内进行了免疫荧光共定位实验.结果发现,在体外共沉淀和细胞内共定位实验中Nelin均表现出同肌动蛋白相结合的能力.进一步采用酵母双杂交的方法将Nelin与人心脏cDNA文库进行杂交筛选,得到了3个阳性克隆分别为细丝蛋白(Filamin)C亚型、肌联蛋白(Titin)N2B亚型和胰蛋白酶抑制物重链前体(ITIH).通过免疫共沉淀实验,验证了Nelin能够同Filamin的羧基末端免疫球蛋白样结构发生相互作用.通过上述实验证明了Nelin为一个新的肌动蛋白结合蛋白,并且能够同Filamin相结合.由此推论新基因nelin的心肌表达产物Nelin是一个细胞骨架相关蛋白并且很可能作为一个膜-细胞骨架连接蛋白,起到了参与细胞黏着斑形成的过程.

关键词：肌动蛋白结合蛋白相互作用蛋白白质心肌实验相关蛋白新基因阳性克隆结构域酵母双杂交

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心肌特异表达基因p93的激酶及丝氨酸结构域在大肠杆菌中的高效表达

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中国分子心脏病学杂志 2004年第6期4卷 330-333页

作者：尤昕时娜柳明洙曹慧青刘冬青孟宪敏中国医学科学院中国协和医科大学阜外心血管病医院分子医学中心延边大学医学院生物化学与分子生物学教研室延吉市133000

目的　在大肠杆菌中高水平表达并分离纯化心脏特异表达基因p93的激酶与丝氨酸结构域片段。方法　利用DNA重组技术 ,构建C末端带有 6×His标签的p93激酶与丝氨酸结构域(p93 C)片段的原核表达载体pET2 8a p93 C。对诱导表达条件和包... 详细信息

目的　在大肠杆菌中高水平表达并分离纯化心脏特异表达基因p93的激酶与丝氨酸结构域片段。方法　利用DNA重组技术 ,构建C末端带有 6×His标签的p93激酶与丝氨酸结构域(p93 C)片段的原核表达载体pET2 8a p93 C。对诱导表达条件和包涵体洗涤条件优化后 ,用Ni2 +金属螯合吸附层析柱纯化。结果　成功构建了pET2 8a p93 C原核表达载体 ,诱导后摇床转速在 35 0r/min下表达量最高 ,包涵体洗涤在超声条件下较好 ,分离纯化后从 10 0ml菌液中可获得 2 5mg蛋白。结论建立了高效稳定的p93 C原核表达体系以及较好的包涵体洗涤方法。

关键词：心脏特异基因p93 原核表达分离纯化

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9-顺维甲酸诱导的肺癌细胞RXR_S受体转录水平的变化

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中国分子心脏病学杂志 2004年第1期4卷 16-20页

作者：王虎于雪艳张士国胡国强任贵杰田克力梁琳琳中国医学科学院中国协和医科大学阜外心血管病医院分子医学中心北京100037 山东大学西校区生化教研室济南军区总医院检验科山东大学齐鲁医院胸外科

目的 :检测用 9 cis RA处理前后肺腺癌细胞株PG和A54 9维甲酸受体RXRS 不同时相的表达变化。方法 :将两细胞株分别分为 9 cis RA组和对照组 ,应用细胞计数方法统计每组各时相细胞数 ,相对定量RT PCR方法检测组加药前后RXRS 各亚型在不... 详细信息

目的 :检测用 9 cis RA处理前后肺腺癌细胞株PG和A54 9维甲酸受体RXRS 不同时相的表达变化。方法 :将两细胞株分别分为 9 cis RA组和对照组 ,应用细胞计数方法统计每组各时相细胞数 ,相对定量RT PCR方法检测组加药前后RXRS 各亚型在不同时相的表达变化。结果 :加入 9 cis RA后 ,PG和A54 9细胞RXRSmRNA转录水平检测结果显示 :(1)RXRγ 在两细胞株中均有一定水平的基础转录 ,而RXRα、RXRβ 均无基础转录。 (2 )应用 1uM 9 cis RA后 ,两细胞株的RXRγ 有短暂增高 ,其余受体转录无明显变化。结论 :RXRγ 可能参与介导 9 cis

关键词： 9-顺维甲酸维甲酸受体 RT-PCR 肺癌

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心肌特异表达的肌小节相关激酶基因p93的克隆与鉴定

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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 2003年第12期35卷 1083-1089页

作者：孟宪敏赵勇魏英杰曹慧青赵秀文刘冬青时娜丁金凤中国医学科学院中国协和医科大学阜外心血管病医院分子医学中心北京100037 中国医学科学院中国协和医科大学阜外心血管病医院分子医学中心

心肌收缩受到由蛋白质因子构成的信号转导通路的调控 ,但确切机制尚未完全明了。从人心脏cDNA文库中克隆到心肌特异表达的可能参与信号转导调控的新基因 ,命名为p93基因。该基因定位于 1p31.1,属于MAP KKKs家族的相近亚家族。Northern... 详细信息

心肌收缩受到由蛋白质因子构成的信号转导通路的调控 ,但确切机制尚未完全明了。从人心脏cDNA文库中克隆到心肌特异表达的可能参与信号转导调控的新基因 ,命名为p93基因。该基因定位于 1p31.1,属于MAP KKKs家族的相近亚家族。Northern印迹及含 76种组织的点杂交显示了p93仅在心肌组织中表达 ;免疫组化表明它主要定位于成人与胎儿的心肌细胞核 ,胞液次之 ;体外激酶活性实验证明野生型p93是一个可以进行自我磷酸化的功能性激酶分子 ;以该基因C端为诱饵质粒的酵母双杂交筛选表明 ,p93主要与心肌肌钙蛋白I(cTnI)等与收缩有关的肌小节蛋白发生相互作用 ,并以免疫共沉淀实验得到了验证。推测p93可能通过激酶信号转导通路的方式参与对肌小节收缩蛋白的调节。

关键词： p93基因克隆心肌特异激酶肌小节心肌肌钙蛋白I

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中国成年人高血压患病率、知晓率、治疗和控制状况

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中华预防医学杂志 2003年第2期37卷 84-89页

作者：顾东风 Jiang He 吴锡桂 Kristi Reynolds 甘文奇刘东海宿少勇段秀芳黄广勇 Paul K.Whelton 中国医学科学院中国协和医科大学阜外心血管病医院心血管病研究所群体遗传学和人群防治研究室北京100037 美国Tulane大学医学中心公共卫生学院

目的　评估中国成年人高血压的患病率、高血压知晓率、治疗和控制状况。方法　亚洲国际心血管病合作研究 (InterASIA)于 2 0 0 0～ 2 0 0 1年进行 ,应用多阶段抽样方法选择有代表性的样本。共调查了 35～ 74岁的成年人 15 838人。测量... 详细信息

目的　评估中国成年人高血压的患病率、高血压知晓率、治疗和控制状况。方法　亚洲国际心血管病合作研究 (InterASIA)于 2 0 0 0～ 2 0 0 1年进行 ,应用多阶段抽样方法选择有代表性的样本。共调查了 35～ 74岁的成年人 15 838人。测量血压时 ,先让调查对象休息 5min ,由经过培训合格的调查人员应用标准水银柱血压计测量 3次血压。应用标准问卷询问高血压病史及高血压的治疗情况。高血压定义为收缩压≥ 140mmHg、舒张压≥ 90mmHg或正在服用降压药。结果　 35～ 74岁的中国成年人的高血压患病率为 2 7 2 %,即全国约有 1 3亿高血压患者。 35～ 44、45～ 5 4、5 5～ 6 4和 6 5～ 74岁年龄组的高血压患病专率分别为男性 17 4%、 2 8 2 %、 40 7%和 47 3 %;女性为 10 7%、2 6 8%、38 9%和 5 0 2 %。在高血压病人中 ,44 7%知道自己患有高血压 ,2 8 2 %正在服用降压药 ,8 1%的人血压得到了控制 ( <140 / 90mmHg)。在过去 10年中 ,高血压知晓、治疗和控制率的增长百分率分别为 86 2 %、92 6 %和 145 4%。结论　在过去的 10年中 ,高血压知晓、治疗和控制率有显著的提高。中国成年人高血压的患病率比较高 ,而高血压的知晓率偏低 ,治疗率和控制率又非常低。在我国迫切需要改善高血压的预防、检测和治疗状况?

关键词：中国成年人高血压患病率知晓率药物治疗血压控制

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双基因共表达在血管再狭窄研究中的应用

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解剖学报 2003年第6期34卷 624-628页

作者：孟宪敏米立国曹慧青赵秀文刘冬青高润霖丁金凤中国医学科学院中国协和医科大学阜外心血管病医院分子医学中心北京100037 河北医科大学基础医学院解剖学教研室石家庄050017

目的　观察携带反义凝血酶受体 (ATR)和p2 1的双基因载体共表达后对血管平滑肌细胞增殖的抑制作用 ,为再狭窄基因治疗寻求新途径。　方法　以携带ATR或和p2 1的单、双基因载体重组腺病毒伴随病毒(rAAV)感染培养的人主动脉平滑肌细胞 (... 详细信息

目的　观察携带反义凝血酶受体 (ATR)和p2 1的双基因载体共表达后对血管平滑肌细胞增殖的抑制作用 ,为再狭窄基因治疗寻求新途径。　方法　以携带ATR或和p2 1的单、双基因载体重组腺病毒伴随病毒(rAAV)感染培养的人主动脉平滑肌细胞 (hASMC) ,用半定量RT PCR检测各基因的整合与表达 ,MTT法测定病毒感染后不同时间点的细胞存活率。将携带AP双基因的rAAV导入WKY大鼠拉伤侧的颈总动脉 ,免疫组织化学法分别检测凝血酶受体 (TR)和p2 1两基因在动脉壁中的表达。　结果　RT PCR结果显示 ,TR单基因的mRNA表达降低 ,p2 1单基因表达升高 ,AP双基因得到了共表达 ;MTT法测定的生长曲线显示 ,双基因对hASMC增殖的抑制作用大于两个单基因 ;免疫组织化学证实 ,AP双基因导入后 ,TR基因的表达受到完全抑制 ,p2 1基因的表达明显增加 ,血管新生内膜与平滑肌细胞的增殖受到了抑制。　结论　ATR和p2 1双基因共表达在体外可明显抑制ASMC的增殖 ,在体内可明显抑制血管内膜新生和中膜的增生。

关键词：血管再狭窄反义凝血酶受体基因 p21基因基因共表达平滑肌细胞

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小而密低密度脂蛋白与脑卒中及其危险因素的关系

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中华医学杂志 2003年第22期83卷 1939-1942页

作者：刘晓宁高岩叶珏汪道文廖玉华马爱群祝之明赵炳让赵继宗惠汝太中国医学科学院中国协和医科大学阜外心血管病医院分子医学中心北京100037 华中科技大学同济医学院附属同济医院华中科技大学同济医学院附属协和医院西安医科大学第一附属医院第三军医大学大坪医院天津心血管病研究所北京天坛医院

目的　探讨血浆小而密低密度脂蛋白 (sLDL)与脑卒中及其他危险因素的关系。方法采用 2 %～ 16 %的非变性梯度胶电泳检测经头颅CT和核磁共振检查证实的 2 0 4例脑卒中患者 (其中缺血性脑梗死 10 3例 ,腔隙性脑梗死 5 1例 ,脑出血 5 0例 ... 详细信息

目的　探讨血浆小而密低密度脂蛋白 (sLDL)与脑卒中及其他危险因素的关系。方法采用 2 %～ 16 %的非变性梯度胶电泳检测经头颅CT和核磁共振检查证实的 2 0 4例脑卒中患者 (其中缺血性脑梗死 10 3例 ,腔隙性脑梗死 5 1例 ,脑出血 5 0例 )的血浆sLDL水平。对照 341例 ,性别、年龄匹配并经严格检查排除了脑卒中。观察各组间sLDL的变化及与预后的关系 ,对sLDL的影响因素采用多元逐步回归进行分析。结果　缺血性脑梗死组和腔隙性脑梗死组的血浆sLDL水平为 5 4 %±8%和 5 2 %± 7%明显高于对照组 (4 7%± 11% ,P <0 0 1～P <0 0 0 1) ;脑出血组的血浆sLDL水平(5 0 %± 9% )与对照组比较差异无显著意义 (P >0 0 5 )。多元逐步回归分析显示 ,危险因素中的甘油三酯、年龄、收缩压、高密度脂蛋白和低密度脂蛋白影响血浆sLDL水平 ,(P <0 0 5～ 0 0 1)。Logistic回归分析结果显示 ,sLDL >5 0 %者发生缺血性脑梗死的危险性增加 (OR值 =3 1,95 %可信区间1 6 4 9～ 5 6 91,P <0 0 0 1) ;sLDL异常与腔隙性脑梗死和脑出血的关系无显著统计学意义 (P >0 0 5 )。结论　sLDS水平与缺血性脑梗死的发生密切相关 ,可能是缺血性脑梗死新的危险因素。

关键词：小而密低密度脂蛋白脑卒中危险因素缺血性脑梗死

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