检索结果-内蒙古大学图书馆

中华糖尿病杂志 2018年第9期10卷 596-600页

作者：王彤李明敏于淼卢超霞张化冰平凡张茜齐翠娟郑佳王晓晶付俊玲肖新华中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院内分泌科卫生部内分泌重点实验室 100730 中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室麦库西克-张孝骞协和遗传医学中心

目的研究中国人群中叉头状转录因子P3（FOXP3）基因突变所致新生儿糖尿病（NDM）患者的临床特点以及基因型一临床表型关系。方法纳入自2007年8月至2016年8月就诊于北京协和医院的可疑NDM患者50例，详细收集临床资料，通过目标区域捕获... 详细信息

目的研究中国人群中叉头状转录因子P3（FOXP3）基因突变所致新生儿糖尿病（NDM）患者的临床特点以及基因型一临床表型关系。方法纳入自2007年8月至2016年8月就诊于北京协和医院的可疑NDM患者50例，详细收集临床资料，通过目标区域捕获测序技术对21个已知NDM致病基因进行测序，寻找可疑致病基因，用Sanger测序进行验证，明确分子遗传学诊断。结果遗传学确诊FOXP3-NDM患者3例，分别携带FOXP3p．R312H、p．V408M、p．P133L半合子突变。此3例患者均表现为单纯的永久性NDM，随访至9-12岁均未合并IPEX综合征常见的其他相关临床表现，仅需使用胰岛素降糖治疗。而国外已报道的、甚至是携带相同致病突变的FOXP3-NDM病例均表现为除NDM外还合并其他多种自身免疫相关疾病，均需使用免疫抑制治疗。结论本研究首次报道中国人群中的FOXP3-NDM患者，且表现为与国外已报道病例截然不同的临床表型。相同致病基冈型、不同临床表型背后的分子机制尚有待进一步研究。

关键词：糖尿病婴儿新生叉头状转录因子P3 IPEX综合征

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耻垢分枝杆菌新型毒素-抗毒素系统MSMEG_3435-3436基因功能的初步研究

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结核病与胸部肿瘤 2020年第2期 102-111页

作者：张蓝月耿艺漫贾红彦肖婧李自慧潘丽萍孙义成张宗德首都医科大学附属北京胸科医院/北京市结核病胸部肿瘤研究所/耐药结核病研究北京市重点实验室 101149 中国医学科学院北京协和医学院病原生物学研究所/卫生部病原微生物系统生物学重点实验室首都医科大学附属北京儿童医院/北京市儿科研究所/教育部儿科重大疾病研究重点实验室

目的初步探讨耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis)毒素-抗毒素(toxin-antitoxin,TA)系统基因的功能及其在细菌药物耐受中的作用。方法利用无水四环素(ATe)诱导穿梭质粒构建毒素基因(MSMEG_3436和MSMEG_6760)表达系统,检测毒素基因表... 详细信息

目的初步探讨耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis)毒素-抗毒素(toxin-antitoxin,TA)系统基因的功能及其在细菌药物耐受中的作用。方法利用无水四环素(ATe)诱导穿梭质粒构建毒素基因(MSMEG_3436和MSMEG_6760)表达系统,检测毒素基因表达的抑菌作用。应用CRISPR-Cas12a基因编辑技术构建△MSMEG_3435-3436和△MSMEG_6762-6760敲除菌株,探究毒素-抗毒素系统对菌株生长的影响。通过计算菌株存活率检测MSMEG_3435-3436基因对异烟腓(96 ug/ml)和利福平(40 pgml)的耐受相关性。在耻垢分枝杆菌中用LacZ报告基因分别替换毒素-抗毒素基因(MSMEG_1277-1278、MSMEG_1283-1284、MSMEG_3435-3436、MSMEG_4447-448和MSMBG_5635-5634),构建5个启动子活性检测突变菌株(SY3328、SY3309、SY6407、SY310和SY3311),并将pMV261空载体和pMV261-抗毒素系列质粒分别电转至5个突变菌株中,通过测定吸光度值(***和Ana)计算β-半乳糖苷酶活性[酶活性单位为“Miller单位(MU)”],以检测毒素抗毒素系统的启动子活性。结果在耻垢分枝杆菌中,ATc诱导表达毒素基因MSMEG_3436可抑制细菌生长,而同时表达对应的抗毒素基因MSMEG_3435可消除抑制作用;ATe诱导表达毒素基因MSMEG_6760未发现明显的抑菌作用。与野生株相比,AMSMEG_3435-3436和△MSMEG_6762-6760敲除菌株在TH9液体培养基中生长表型无明显差异。野生株和△MSMEG_3435-3436敲除菌株经异烟阱和利福平处理后的存活率[分别为(4.38±1.48)%和(3.49±0.66)%,(0.15±0.04)%和(0.03±0.02)%]显示毒素-抗毒素基因MSMEG_3435-3436与药物耐受性无关(t=0.548,P=0.613;t=2.663,P=0.056)。启动子(SY328、SY3309、SY6407、SY3310和SY3311)在携带pMV261-空载体和pMV261抗毒素表达质粒的报告菌株中的β-半乳糖苷酶活性分别为(376.50±17.13)和(315.50±20.71)、(189.00±12.24)和(160.70±9.89)(1225.20±9.95)和(211.70±2.57)(221.40±12.07)和(186.60±13.17)(179.10±5.87)和(127.70±19.21)MU,差异均无统计学意义(t=2.272,P=0.086;t=1.795,P=0.147;t=1.319,P=0.258;t=1.949,P=0.123;t=-2.562,P=0.063)。结论成功构建了MSMEG_3435-3436和MSMEG_6762-6760在耻垢分枝杆菌中的诱导表达体系及敲除菌株,并发现MSMEG_3435-3436是一个新的有功能的毒素-抗毒素系统,以及这两个毒素-抗毒素系统与菌株生长表型及异烟阱和利福平耐受性无关,最后发现耻垢分枝杆菌中5对毒索-抗毒素系统的抗毒素基因可能在自身启动子调控中不发挥关键作用,可为进一步研究结核分枝杆菌毒素-抗毒素系统的功能提供线索。

关键词：分枝杆菌耻垢类毒素类抗毒素类,基因表达调控,细菌药物耐受性

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多黏菌素药物敏感性检测及临床解读专家共识

多黏菌素药物敏感性检测及临床解读专家共识

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山东省医师协会重症感染医师分会第三届学术年会

作者：杨启文马筱玲胡付品张菁孙同文陈佰义徐英春刘又宁欧洲临床微生物和感染病学会药敏委员会华人抗菌药物敏感性试验委员会中国医药教育协会感染疾病专业委员会中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院检验科北京100730 中国科学技术大学附属第一医院检验科合肥230001 复旦大学附属华山医院抗生素研究所上海200040 郑州大学第一附属医院综合ICU 郑州450052 中国医科大学附属第一医院感染病科沈阳110001 中国人民解放军总医院第一医学中心呼吸内科北京100853

多黏菌素是耐药革兰阴性杆菌的重要治疗药物.2020年美国临床和实验室标准协会变更了多黏菌素药物敏感性折点，取消了多黏菌素敏感折点，仅报告中介(I≤2 mg/L)与耐药(R≥4 mg/L)，而欧洲抗菌药物敏感性试验委员会则建议采用敏感(S≤2 mg... 详细信息

多黏菌素是耐药革兰阴性杆菌的重要治疗药物.2020年美国临床和实验室标准协会变更了多黏菌素药物敏感性折点，取消了多黏菌素敏感折点，仅报告中介(I≤2 mg/L)与耐药(R≥4 mg/L)，而欧洲抗菌药物敏感性试验委员会则建议采用敏感(S≤2 mg/L)、耐药(R＞2 mg/L)作为临床折点.多黏菌素药物敏感性试验的操作难度以及国际药物敏感性折点的不统一给国内临床实验室一线人员带来极大困扰.因此，如何精准开展多黏菌素药物敏感性检测，规范其报告解读是当前国内抗菌药物应用和抗感染领域亟待解决的问题.本共识对多黏菌素药物敏感性试验方法及结果进行规范解读，并提出相应建议.

关键词：多黏菌素药物敏感性临床解读专家共识

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九例家族性高胆固醇血症患者的LDLR基因突变检测

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中华医学遗传学杂志 2018年第6期35卷 783-786页

作者：孟晓露司锘申育奇汪奇何疆春卢超霞吴炜张抒扬张学中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室麦库西克-张孝骞协和遗传医学中心北京100005 中国人民解放军总医院心血管内科北京100853 中国人民解放军海军总医院心脏中心北京100048 中国医学科学院北京协和医院心内科北京100730

目的检测9例家族性高胆固醇血症(familial hypercholesterolemia,FH)患者的LDLR基因突变情况,为临床诊断与遗传咨询提供依据。方法PCR扩增LDLR基因的全部编码及侧翼序列,对扩增产物进行直接测序。对携带纯合突变以及复合杂合突变的患者... 详细信息

目的检测9例家族性高胆固醇血症(familial hypercholesterolemia,FH)患者的LDLR基因突变情况,为临床诊断与遗传咨询提供依据。方法PCR扩增LDLR基因的全部编码及侧翼序列,对扩增产物进行直接测序。对携带纯合突变以及复合杂合突变的患者,通过父母样本测序或T克隆测序明确突变的双等位基因来源。结果在7例患者中检出了8个LDLR基因突变,分别为c.259T>G、c.513delC、c.530C>T、c.682G>T、c.763C>T、c.1187-10G>A、c.1948delG、c.1730G>A。4例患者携带杂合突变,2例患者携带纯合突变,1例患者携带复合杂合突变,携带双等位基因突变的患者较杂合突变的患者症状更加严重。结论9例FH患者中7例检出LDLR基因突变,同时新突变位点的检出丰富了LDLR基因突变谱。

关键词：家族性高胆固醇血症 LDLR基因基因检测突变

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植物来源的磷脂酰胆碱可介导抗肺纤维化小RNA(HJT-sRNA-m7)进入哺乳动物细胞

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中国科学：生命科学 2018年第4期48卷 469-481页

作者：杜涧超梁竹许剑涛赵妍李晓芸张艳丽赵丹丹陈茹萱刘洋 Trupti Joshi 常佳慧王志清张延旭朱锦东刘强许东蒋澄宇中国医学科学院&北京协和医学院基础医学院、医学分子生物学国家重点实验室北京100005 中国医学科学院&北京协和医学院、北京协和医院内科北京100730 Department of Computer Science Informatics Instituteand Christopher S.Bond Life Science CenterUniversity of MissouriColumbiaMO65211USA Department of Health Management and Informatics and Office of Medical Research School of MedicineUniversity of MissouriColumbiaMO 65212USA 四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室生物治疗协同创新中心成都610000

肺纤维化是慢性进行性疾病,死亡率高,临床上除肺移植之外尚无其他明显有效治疗手段.本研究发现,来源于中药大花红景天(Rhodiola crenulata)的小RNA,HJT-sRNA-m7,可以显著降低纤维化因子的表达,在细胞和动物水平上均可改善纤维化症状.此... 详细信息

肺纤维化是慢性进行性疾病,死亡率高,临床上除肺移植之外尚无其他明显有效治疗手段.本研究发现,来源于中药大花红景天(Rhodiola crenulata)的小RNA,HJT-sRNA-m7,可以显著降低纤维化因子的表达,在细胞和动物水平上均可改善纤维化症状.此外,本研究组在红景天熬制的汤汁中提取鉴定了一百多种脂质,其中大部分脂质也同时存在于中药蒲公英(Taraxacum mongolicum)、穿心莲(Andrographis paniculata)和金银花(lonicera japonica)中.选取其中两种磷脂酰胆碱PC(18:0/18:2)和PC(16:0/18:2),使之与植物小RNA形成脂质体,发现其可促进HJT-s RNA-m7等小RNA进入人肺和胃肠道细胞,降低纤维化靶基因的表达.实验结果揭示了植物来源小RNA通过脂质复合物进入人体的可能途径,为si RNA的临床应用提供了新的口服递送途径.

关键词：磷脂细胞摄取抗纤维化红景天小RNA

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肠道病毒EV-D68表面结构蛋白VP2、VP3的原核表达及其特异性分析

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国际免疫学杂志 2018年第5期41卷 477-485页

作者：龙海亭孔璟郑惠文李冰香张寒李恒刘玉斌范海涛于丽廖国阳孙明刘龙丁中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所呼吸道病毒实验室昆明650118 昆明学院医学检验与预防医学教研室昆明650214 中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所生物制品八室昆明650118 中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所廖国阳实验室昆明650118 中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院感染内科北京100730

目的原核表达肠道病毒68型(enterovirus D68,EV—D68)表面结构蛋白VP2、VP3,分析其亲和力和结合力,得到具备高结合力的、可结合特异性记忆性B细胞的EV-D68病毒表面结构蛋白。方法采用PCR法扩增EV-D68病毒的VP2、VP3蛋白基因,插入原核表... 详细信息

目的原核表达肠道病毒68型(enterovirus D68,EV—D68)表面结构蛋白VP2、VP3,分析其亲和力和结合力,得到具备高结合力的、可结合特异性记忆性B细胞的EV-D68病毒表面结构蛋白。方法采用PCR法扩增EV-D68病毒的VP2、VP3蛋白基因,插入原核表达载体pGEX-5X-1,构建重组表达质粒pGEX-5X-1-VP2和pGEX-5X-1-VP3,转化到工程菌Rosetta(DE3)pLy中,异丙基硫代半乳糖苷(i-sopropyl β-D-thiogalactoside,IPTG)诱导表达,表达的重组蛋白形成包涵体,经超声洗涤、透析复性;采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(polyacrylamide gel immunosorbent,SDS-PAGE)电泳、westem-blot鉴定重组蛋白;竞争性酶联免疫吸附检测(eIlzyme linked immunosorbent assay,EusA)检测蛋白VP2、VP3的蛋白活性和亲和力;藻红蛋白荧光素(phycoeryth面,PE)标记VP2和VP3重组蛋白,结合CD19-APC、CD27-nTc抗体,流式细胞术检测VP2、VP3蛋白结合特异性记忆性B细胞的情况。结果成功构建出重组表达质粒pGEX-5X-1-VP2和pGEX-5X-1-VP3,通过双酶切鉴定及测序分析,确认表达载体构建正确,通过表达纯化,成功获得EV-D68的VP2、VP3蛋白,SDS-PAGE电泳灰度扫描显示,VP2蛋白的纯度可达80%,VP3蛋白的纯度可达75%;经westem-blot和EusA鉴定,均有抗原特异性;通过竞争EusA检测,VP2亲和力常数为2.7×10^7M^-1,为中等亲和力;VP3亲和力常数为3.25×10^6M^-1,为低亲和力;通过流式细胞术可以检测到病毒攻击小鼠后脾脏细胞中的特异性记忆性B细胞。结论成功原核表达,复性纯化得到EV-D68VP2、EV-D68VP3蛋白,两个蛋白均具有较强的抗原特异性,利用流式细胞仪能检测到特异性记忆性B细胞。最终获得了具有较强结合能力,可用于分选抗原特异性记忆性B细胞的EV-D68表面结构蛋白VP2、VP3,为研究VP2、VP3蛋白的中和抗原表位及其广谱中和抗体的分选检测打下了基础。

关键词：肠道病毒68型 VP2蛋白 VP3蛋白原核表达

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河北地区临床实验室丝状真菌分离鉴定情况分析

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中国真菌学杂志 2020年第4期15卷 206-212页

作者：赵颖李志荣赵建宏栗方董爱英刘金禄郭彦言谢守军吴相锟郭秀华王建升张金艳刘冬青魏宏莲孙艳赵文申任宏涛郭映辉肖盟徐英春徐晓琳王军爽杨文航中国医学科学院北京协和医院检验科侵袭性真菌病机制研究与精准诊断北京市重点实验室北京100730 河北医科大学第二医院河北省临床检验中心石家庄050000 河北燕达医院感染与疾病控制部廊坊065201 首都医科大学附属北京朝阳医院感染与微生物科北京100020 华北理工大学附属医院唐山063000 河北北方学院附属第一医院张家口075000 承德医学院附属医院承德067000 河北省唐山市工人医院唐山063000 河北燕达医院廊坊065201 河北省武安市第一人民医院武安056300 河北省人民医院石家庄050057 河北医科大学第四医院石家庄050019 邯郸市第一医院邯郸056002 河北医科大学第二医院石家庄050000 沧州市中心医院沧州061001 邯郸市中心医院邯郸056001 邢台市人民医院邢台054001

目的开展一项由河北地区多所医院参与的临床实验室丝状真菌检测研究,促进实验室丝状真菌检测能力提升。方法共收集丝状真菌菌株,采用沙堡弱培养基和乳酸酚棉兰染色直接镜检进行菌种常规鉴定;中心实验室采用Vitek MS质谱进行复核鉴定,对M... 详细信息

目的开展一项由河北地区多所医院参与的临床实验室丝状真菌检测研究,促进实验室丝状真菌检测能力提升。方法共收集丝状真菌菌株,采用沙堡弱培养基和乳酸酚棉兰染色直接镜检进行菌种常规鉴定;中心实验室采用Vitek MS质谱进行复核鉴定,对MS不能有效鉴定的菌种进行核糖体DNA内转录间隔区ITS和/或钙调蛋白CaM测序分析。结果参与研究的15家三级医院2016~2017年共收集到丝状真菌225株。其中烟曲霉133株(59.11%)、黄曲霉/米曲霉28株(12.44%)、黑曲霉复合群18株(8.00%)、聚多曲霉6株(2.67%)、构巢曲霉6株(2.67%)、其他丝状真菌34株(15.11%)。样本类型包括下呼吸道痰标本203株(90.22%),耳道分泌物10株(4.44%),肺泡灌洗液4株(1.78%),其他样本8株(3.56%)。菌株鉴定正确率(148/225)65.78%,错误率(77/225)34.22%。结论丝状真菌感染中最常见的是曲霉菌属,主要以烟曲霉菌、黄曲霉菌和黑曲霉菌为主。传统的鉴定方法错误率高达30%以上,采用微生物质谱鉴定结合ITS/CaM区测序方法可以有效提高丝状真菌的鉴定正确率,为临床丝状真菌的治疗提供病原学依据。

关键词：丝状真菌分布特征复核鉴定

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营养支持小组对肿瘤患者经鼻饲管喂养并发症预防的临床实践

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肿瘤综合治疗电子杂志 2019年第4期5卷 40-44页

作者：姚克青郭志利代忠陈艳陈爽徐碧芳孙延滕刘清扬刘雪辉田红改丛明华北京市朝阳区桓兴肿瘤医院综合科北京100122 石家庄医学高等专科学校病原微生物免疫教研室石家庄050599 国家癌症中心/国家肿瘤临床医学研究中心/中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院综合科北京100021 北京市朝阳区桓兴肿瘤医院营养科北京100122

目的探讨营养支持小组实践预防管理方案对肿瘤患者经鼻饲管喂养并发症预防的临床效果。方法营养支持小组制定肿瘤患者肠内营养鼻胃/肠管并发症预防管理方案并在北京市朝阳区恒兴肿瘤医院推广实践,以2017年9月至12月的153名鼻胃/肠管饲... 详细信息

目的探讨营养支持小组实践预防管理方案对肿瘤患者经鼻饲管喂养并发症预防的临床效果。方法营养支持小组制定肿瘤患者肠内营养鼻胃/肠管并发症预防管理方案并在北京市朝阳区恒兴肿瘤医院推广实践,以2017年9月至12月的153名鼻胃/肠管饲患者作为对照组,以2018年1月至4月经营养支持小组实施专业化营养支持管理措施后的145名鼻胃/肠管管饲患者作为观察组,对比分析预防管理方案实施前后常见管饲并发症(腹泻、胃潴留、血糖异常、便秘、堵管)发生的变化情况。结果观察组管饲患者的并发症(腹泻、胃潴留、血糖异常、便秘、堵管)发生率均明显低于对照组(均P<0.05)。结论营养支持小组的实践可有效提高临床鼻胃/肠管管饲患者的管理,减少并发症发生率,而且对各科室医护人员和药师的沟通起了桥梁作用,取得很好的临床效果,值得大力推广。

关键词：营养支持小组肠内营养肿瘤鼻胃/肠管管饲并发症

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青少年起病的成人型糖尿病相关基因新突变位点的发现

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基础医学与临床 2018年第4期38卷 470-474页

作者：李怡心李玉秀常永生中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005 中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院内分泌科卫生部内分泌重点实验室北京100730

目的发现新的青少年起病的成人型糖尿病(MODY)相关基因或已知的相关基因的新突变位点,为临床上MODY的诊断提供依据。方法以已知的MODY临床特征为筛选标准,从北京协和医院内分泌科就诊的患者中选取4例,提取其基因组DNA并进行全外显子组测... 详细信息

目的发现新的青少年起病的成人型糖尿病(MODY)相关基因或已知的相关基因的新突变位点,为临床上MODY的诊断提供依据。方法以已知的MODY临床特征为筛选标准,从北京协和医院内分泌科就诊的患者中选取4例,提取其基因组DNA并进行全外显子组测序,用PCR及Sanger测序法对测序结果进行验证。结果在2例患者中分别发现了MODY相关基因GCK和HNF4α的新的突变位点c.1348G>T(***450Thr)和c.758G>A(***253Gln)。结论 2例患者均为MODY患者,所发现的MODY相关基因中的突变位点均为首次发现。

关键词： MODY GCK HNF4α 突变

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不同唑类药物体外诱导热带念珠菌耐药特征及其耐药机制研究

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中国真菌学杂志 2018年第4期13卷 197-200页

作者：范欣黄晶晶侯欣肖盟张丽徐英春首都医科大学附属北京朝阳医院感染和临床微生物科北京100020 中国医学科学院北京协和医院检验科北京100730 侵袭性真菌病机制研究与精准诊断北京市重点实验室北京100730

目的比较体外不同唑类药物诱导热带念珠菌耐药性产生的特点以及耐药机制的不同。方法选取1株临床分离的唑类敏感菌,分别在含16μg/mL氟康唑,2μg/mL伏立康唑,1μg/mL泊沙康唑的液体培养基中进行传代培养。显色微量肉汤稀释法检测每一代... 详细信息

目的比较体外不同唑类药物诱导热带念珠菌耐药性产生的特点以及耐药机制的不同。方法选取1株临床分离的唑类敏感菌,分别在含16μg/mL氟康唑,2μg/mL伏立康唑,1μg/mL泊沙康唑的液体培养基中进行传代培养。显色微量肉汤稀释法检测每一代菌的抗真菌药物敏感性。对第50代传代菌的唑类作用靶位点基因ERG11进行扩增测序,并对ERG11基因、泵蛋白基因MDR1、CDR1以及线粒体细胞色素b基因CYTb进行荧光定量检测。结果体外氟康唑、伏立康唑暴露的情况下,菌株很快出现耐药性;相比,泊沙康唑并未诱导出耐药菌;氟康唑、伏立康唑诱导耐药性产生的方式呈现不同特征。氟康唑诱导下菌株MIC值逐渐上升,但伏立康唑诱导菌出现了明显的跳跃式升高。耐药机制研究发现,伏立康唑诱导菌ERG11基因出现了与耐药密切相关的G/G1390G/A碱基杂合突变。荧光定量PCR结果显示,仅伏立康唑诱导耐药菌CDR1基因的相对表达量显著升高。结论热带念珠菌在体外氟康唑、伏立康唑暴露情况下会很快出现耐药性,但其出现的特征以及耐药机制有所差别。

关键词：热带念珠菌耐药机制诱导唑类耐药

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