检索结果-内蒙古大学图书馆

中国实验动物从业人员标准的编制

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中国比较医学杂志 2016年第10期26卷 85-90页

作者：孔琪郑志红魏强秦川中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心北京100021 全国实验动物标准化技术委员会北京100021 中国医科大学实验动物部沈阳110001

实验动物科学发展对生物医学、药学等领域研究起到支撑作用,是衡量一个国家科技水平的重要标志。从业人员素质直接影响实验动物行业发展的速度和质量。本标准制定的目的是规范实验动物从业人员要求,加强培训和资质认证工作,以推动从业... 详细信息

实验动物科学发展对生物医学、药学等领域研究起到支撑作用,是衡量一个国家科技水平的重要标志。从业人员素质直接影响实验动物行业发展的速度和质量。本标准制定的目的是规范实验动物从业人员要求,加强培训和资质认证工作,以推动从业人员素质提高。

关键词：实验动物从业人员标准教育培训

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实验动物源人兽共患病防控战略研究

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中国动物检疫 2017年第2期34卷 38-41页

作者：孔琪夏霞宇高虹魏强马继红池丽娟秦川中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心国家卫生计生委人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京市人类重大疾病动物模型工程技术研究中心北京100021 中国动物疫病预防控制中心北京100125

本文通过实地调研、会议研讨、问卷调查和资料查阅等方法,阐明了实验动物源人兽共患病的防控现状,分析了其中存在的问题,总结了相关疫病的防控经验。在此基础上,形成了我国实验动物源人兽共患病防控的战略目标和措施,提出了相应建议。

关键词：实验动物人兽共患病动物病原质量控制战略研究

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干细胞与转化医学研究进展浅析

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中国实验动物学报 2016年第4期24卷 439-440,I0001,I0002页

作者：高舒平曲春辉周瑞秦川中国医学科学院医学实验动物研究所干细胞与临床转化实验室北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

干细胞与医学转化是近阶段比较热门的学科。由于干细胞的多种分化潜能和高度的自我更新能力,已经成为修复生命有机体功能细胞的种子细胞,而且在再生医学和组织工程中愈发引起人们的广泛重视。干细胞在临床转换应用的实验研究结果给许多... 详细信息

干细胞与医学转化是近阶段比较热门的学科。由于干细胞的多种分化潜能和高度的自我更新能力,已经成为修复生命有机体功能细胞的种子细胞,而且在再生医学和组织工程中愈发引起人们的广泛重视。干细胞在临床转换应用的实验研究结果给许多种疾病带来了希望,它克服了临床常规治疗的局限性。目前,干细胞的临床研究处于一个快速的发展阶段,世界各国均高度重视。我国政府对干细胞研究也高度重视,加大了科研的投入,加强了规范化管理,制定了相关政策。如果在干细胞治疗的领域采用转化医学的模式,将科研与临床密切的联系结合,重视在大型实验动物如猪、犬、猴的人类疾病的动物模型的干细胞治疗应用研究,将会促进干细胞临床转化的速度。

关键词：干细胞转化医学细胞治疗动物模型

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天然免疫在非典型性猴免疫缺陷病毒(SIV)感染中的作用机制探讨

天然免疫在非典型性猴免疫缺陷病毒(SIV)感染中的作用机制探讨

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2017第十九届中国科协年会

作者：熊圣文王卫丛喆薛婧陈霆魏强秦川北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室北京100021

背景在不同的个体中,人免疫缺陷病毒(HIV-1)感染导致差异性的疾病进程.95％以上的感染者出现典型性疾病进程,还有约5％HIV-1 感染者出现非典型疾病进程,表现为病毒感染后,病毒载量水平维持在检测线以下或出现较晚,CD4+ T 细胞绝对数下...

背景在不同的个体中,人免疫缺陷病毒(HIV-1)感染导致差异性的疾病进程.95％以上的感染者出现典型性疾病进程,还有约5％HIV-1 感染者出现非典型疾病进程,表现为病毒感染后,病毒载量水平维持在检测线以下或出现较晚,CD4+ T 细胞绝对数下降不明显,疾病进程呈现不典型性.在小剂量多次粘膜感染艾滋病猴模型研究中,研究人员也发现类似情况.部分恒河猴被猴免疫缺陷病毒(SIV)/猴-人免疫缺陷病毒(SHIV)感染后,血浆病毒载量出现明显的延迟和(或)峰值下降现象.目前研究发现细胞免疫、中和抗体等特异性免疫在非典型性SIV 感染中的作用十分有限,而天然免疫一直被认为是病毒感染早期的一种重要防御机制,包括巨噬细胞的吞噬作用、NK 细胞的ADCC 作用以及树突细胞的抗原提呈作用等;但在非典型艾滋病毒感染过程中,天然免疫发挥作用及作用机制目尚不清楚.

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CD45异构体对HIV-1gp120蛋白诱导T细胞凋亡的影响

CD45异构体对HIV-1gp120蛋白诱导T细胞凋亡的影响

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2017第十九届中国科协年会

作者：李克雷薛婧丛喆陈霆魏强秦川北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室北京100021

HIV感染可通过多种机制引起机体内T细胞凋亡,其中,病毒的编码蛋白可以根据其在靶细胞内的表达水平调节细胞凋亡.gp120蛋白作为HIV包膜蛋白的主要组成部分,既可以在细胞外与细胞表面的CD4分子结合导致靶细胞和旁观者细胞凋亡,又可以在细...

HIV感染可通过多种机制引起机体内T细胞凋亡,其中,病毒的编码蛋白可以根据其在靶细胞内的表达水平调节细胞凋亡.gp120蛋白作为HIV包膜蛋白的主要组成部分,既可以在细胞外与细胞表面的CD4分子结合导致靶细胞和旁观者细胞凋亡,又可以在细胞内上调Fas、FasL、TNF-α、TRAIL受体DR4和DR5的表达诱导细胞凋亡,还可以使细胞滞留在G2期导致胞内ROS升高促进凋亡.研究显示,CD45分子在HIV-1gp120蛋白介导的CD4+T细胞凋亡中发挥调节作用,在gp120蛋白的作用下,CD45分子通过调节FasL的表达参与细胞凋亡.作为Ⅰ型跨膜糖蛋白,CD45分子主要以CD45RABC、CD45RO、CD45RA、CD45RB和CD45RC等异构体形式表达于淋巴细胞,其胞外结构域糖基化形式的差异对CD45异构体活性和功能具有重要影响.目前,CD45异构体在HIV感染引起的细胞凋亡方面研究甚少,为加深对CD45异构体在细胞凋亡过程中作用的理解,本研究通过构建稳定表达CD45异构体的细胞系,比较了CD45异构体在调节gp120蛋白介导的CD4+T细胞凋亡过程中的差异,并进一步分析了其下游分子Lck的活性变化.在本研究中,我们首先比较了CD45+的Jurkat细胞和CD45－的J45.01细胞受到gp120诱导时凋亡率的变化.结果显示,Jurkat细胞可发生明显凋亡现象,J45.01细胞不发生凋亡,说明CD45分子在gp120介导的凋亡过程发挥了调节作用;随后,我们构建了5种稳定表达CD45异构体的细胞系,并比较了这5种异构体在gp120介导T细胞凋亡过程中的作用.结果发现,CD45RO可以明显调节细胞凋亡,其他异构体对细胞凋亡无调节作用;接下来,我们分析了CD45的糖基化形式对细胞凋亡的影响.O-聚糖存在于除CD45RO以外的异构体上,我们通过O-糖基化抑制剂去除这几种异构体细胞表面的O-糖基化.gp120蛋白诱导凋亡处理后,去除O-糖基化后的CD45RA-J45.01细胞表现出凋亡特性,其它异构体细胞未发生明显凋亡.说明O-聚糖对HIV-1gp120蛋白介导的细胞凋亡有一定的抑制作用,但在各异构体中发挥的作用大小并不一致,这可能与CD45异构体的空间结构有关.为了进一步说明CD45异构体在调节细胞凋亡中的功能差异,在HIV-1gp120蛋白诱导各个细胞系后,我们分析了CD45异构体酪氨酸磷酸酶的活性变化.通过比较CD45对其底物Lck的活性抑制位点Tyr505的去磷酸化程度,发现CD45RO可使Lck Tyr505发生明显的去磷酸化,说明HIV-1 gp120 蛋白处理细胞后,CD45RO 的活性增强;Lck Tyr394 是Lck 的活化位点,该位点磷酸化程度增强代表Lck 活性增强.通过比较该位点磷酸化程度变化,发现在CD45RO-J45.01 细胞中Lck Tyr394 磷酸化程度增强,说明在HIV-1 gp120 蛋白处理细胞后CD45RO 促进了Lck 的活化;Lck 的活化在胞内信号转导中具有重要作用,于是我们利用Lck的特异性抑制剂PP2 处理CD45RO-J45.01 细胞和Jurkat 细胞,再经HIV-1 gp120 蛋白诱导凋亡处理,发现PP2可抑制CD45RO-J45.01 细胞和Jurkat 细胞凋亡,说明Lck 的活化参与HIV-1 gp120 蛋白介导的T 细胞凋亡.综上所述,本研究明确了CD45 异构体在调节HIV-1 gp120 蛋白介导的T 细胞凋亡中存在的差异,揭示了这一凋亡过程主要是CD45RO 通过活化Lck 促使凋亡信号向胞内传导,进而对细胞凋亡起调节作用.本研究结果为HIV-1 感染引起的旁观者细胞凋亡奠定了理论基础.

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SIV感染猴外周血CD14+单核细胞CD169分子表达的变化

SIV感染猴外周血CD14+单核细胞CD169分子表达的变化

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2017第十九届中国科协年会

作者：李想丛喆薛婧魏强北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室北京100021

背景唾液酸黏附素(Siglecs)是宿主最大的一组唾液酸结合蛋白,是表达于免疫系统的Ⅰ型跨膜蛋白.Siglec-1,也被称作CD169,是第一个被发现的Siglecs 的成员,主要表达于单核巨噬细胞和树突状细胞的表面.有研究发现,HIV 感染机体后,组织巨...

背景唾液酸黏附素(Siglecs)是宿主最大的一组唾液酸结合蛋白,是表达于免疫系统的Ⅰ型跨膜蛋白.Siglec-1,也被称作CD169,是第一个被发现的Siglecs 的成员,主要表达于单核巨噬细胞和树突状细胞的表面.有研究发现,HIV 感染机体后,组织巨噬细胞和外周血单核细胞高表达CD169,并且随着外周血血浆载量的升高而升高,CD169 在外周血单核细胞中表达量的变化,可以作为研究HIV/SIV 感染的一个早期的表面标记.而在VSV 等病毒的研究中发现,病毒感染单核巨噬细胞后可以诱导细胞释放IFN-α,从而诱导细胞表达CD169.本文拟观察恒河猴感染SIVmac239 前后外周血单核细胞以及各亚群单核细胞表面CD169 分子表达量的变化,分析SIV 感染与CD169 表达的关系;并分析其变化与SIV 感染及细胞因子IFN-α作用的关系.方法本研究中,我们用SIVmac239 静脉途径感染正常中国恒河猴,运用流式细胞术检测不同感染时间外周血CD14+单核细胞及其表面分子CD169 的变化.同时采集正常恒河猴外周血,分离PBMC,流式细胞术分选CD14+单核细胞,分别使用SIVmac239 直接感染、和细胞因子IFN-α刺激CD14+单核细胞,流式细胞术检测细胞表面分子CD169 表达量的变化.结果正常恒河猴外周血CD14+单核细胞表面低表达CD169,经SIVmac239 病毒感染后,CD14+单核细胞的比例出现下降(P＜0.01),CD14+单核细胞表面CD169 表达量升高(P＜0.01),并且在感染的急性期,CD169 的表达量迅速增加.不同外周血单核细胞亚型CD14low/-CD16+,CD14++CD16- 和CD14+CD16+感染后CD169 的表达量均明显增高(P＜0.01),而CD14+CD16+单核细胞中CD169 的升高相比其他两种亚群更为明显.本研究中,我们在体外用SIV 直接感染恒河猴外周血CD14+单核细胞,不能诱导单核细胞表达CD169,而细胞因子IFN-Α可以刺激CD14+单核细胞高表达CD169 分子.结论正常恒河猴经SIVmac239 病毒感染后,外周血单核细胞高表达CD169,不同亚群单核细胞表面CD169 分子均出现明显增加,而CD14+CD16+单核细胞中CD169 的升高更为明显,提示CD14+CD16+单核细胞在感染中可能发挥重要的作用.病毒直接感染不能导致单核细胞高表达CD169,SIV 感染猴外周血单核细胞表面CD169 的升高是体内细胞因子,尤其是IFN-α作用的结果.

关键词：

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转人DPP4的转基因小鼠模型的构建与鉴定

转人DPP4的转基因小鼠模型的构建与鉴定

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第十三届中国实验动物科学年会

作者：刘超崔莹李冰谢英河北省实验动物重点实验室河北医科大学实验动物学部吉林农业大学动物科学技术学院北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所中国人民解放军军事兽医研究所动物病毒学研究室

目的制备携带有人源DPP4基因（hDPP4）的转基因小鼠,为中东呼吸综合征（Middle East Respiratory ***）冠状病毒疫苗的研制和治病机制分析工作提供小动物模型。方法首先从体外培养的人类细胞系中克隆HDPP4 cDNA序列,将其插入表达载体后... 详细信息

目的制备携带有人源DPP4基因（hDPP4）的转基因小鼠,为中东呼吸综合征（Middle East Respiratory ***）冠状病毒疫苗的研制和治病机制分析工作提供小动物模型。方法首先从体外培养的人类细胞系中克隆HDPP4 cDNA序列,将其插入表达载体后构建重组质粒。随后利用原核注射法制备HDPP4转基因小鼠,繁育出F代转基因小鼠。选取整合有HDPP4基因的F代鼠与野生型鼠杂交繁殖获得F代小鼠。PCR鉴定F代转基因小鼠基因型,同时用RT-PCR和Western blotting方法检测HDPP4在转基因小鼠全身组织表达情况。结果共得到F鼠4只。F代转基因小鼠经Western blotting和RT-PCR检测,HDPP4表达水平在心、肝、脾、肺、脑等组织中表达中均明显增高。结论成功构建HDPP4基因小鼠,并且能够稳定遗传。为后续的MERS疫苗评价相关工作奠定了基础。

关键词：中东呼吸综合征转基因小鼠

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钙结合蛋白S1OOB对多巴胺受体及神经递质多巴胺、5-羟色胺生成和代谢的影响

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中华神经科杂志 2016年第9期49卷 697-702页

作者：刘嘉琳郑芳龙彦郑媛林燕刘小青秦川河北大学医学部病理教研室保定071000 保定市第一中心医院老年病科保定市第一中医院内分泌科中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心

目的研究钙结合蛋白S100B对与帕金森病运动协调能力改变有关的多巴胺受体及神经递质多巴胺、5-羟色胺生成和代谢的影响.方法建立hS100B转基因小鼠模型,将其分为S100B转基因组、基因敲除组和阴性对照组3组,每组均14只.用转棒法检测运... 详细信息

目的研究钙结合蛋白S100B对与帕金森病运动协调能力改变有关的多巴胺受体及神经递质多巴胺、5-羟色胺生成和代谢的影响.方法建立hS100B转基因小鼠模型,将其分为S100B转基因组、基因敲除组和阴性对照组3组,每组均14只.用转棒法检测运动协调能力;采用逆转录-PCR、蛋白免疫印迹法对小鼠脑组织中多巴胺D1、D2受体,酪氨酸羟化酶和磷酸化的酪氨酸羟化酶（Ser19、31、40位点）表达进行测定;用高效液相色谱-荧光法检测多巴胺生成代谢途径中的酪氨酸、左旋多巴、多巴胺、高香草酸,5-羟色胺生成代谢途径中的色氨酸、5-羟色胺、5-羟基吲哚乙酸在小鼠中脑组织中的含量.结果与阴性对照组相比,3、6、9个月龄的S100B转基因小鼠在转棒仪上停留时间（s）缩短（3个月：4.60±0.30和4.25±0.21,q=5.194;6个月：4.52±0.31和4.07±0.22,q=6.139;9个月：4.43±0.25和3.60±0.18,q=13.484;均P＜0.05）,且随着月龄的增加,停留时间呈进行性降低.与阴性对照组相比,9个月龄时,转基因小鼠脑组织中多巴胺D2受体mRNA和蛋白表达降低（1.34±0.13和0.48±0.07,q=21.578;1.05±0.15和0.69 ±0.10,q=8.063,均P＜0.05）;Ser19和Ser40位点磷酸化的酪氨酸羟化酶表达升高（0.95±0.10和1.14±0.13,q=4.972;0.94±0.12和1.17±0.14,q=5.382,均P＜0.05）,酪氨酸羟化酶的表达量呈下降趋势,但差异无统计学意义;转基因小鼠中脑组织中左旋多巴、多巴胺及高香草酸生成增多（87.04±11.77和115.28±16.80,q=4.764;56.66±9.87和72.96±11.02,q=3.923;26.58±8.11和38.65±6.67,q=3.981,均P＜0.05）,5-羟色胺含量降低（925.50±74.26和637.87±56.76,q=11.084,P＜0.05）,高香草酸/多巴胺和5-羟基吲哚乙酸/5-羟色胺比值升高（0.45±0.05和0.54±0.08,q=3.325;0.94±0.07和1.42±0.12,q=12.367,均P＜0.05）.与阴性对照组相比,S100B基因敲除小鼠各检测指标差异无统计学意义.结论 S100B很可能是参与帕金森病发生发展的一种重要蛋白,脑组织特异表达S100B的转基因小鼠的建立为研究该基因在帕金森病中的作用提供了工具.

关键词：帕金森病多巴胺受体神经递质

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游离SIVmac239病毒与T细胞介导两种方式感染内皮细胞的效果比较

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中国比较医学杂志 2016年第6期26卷 1-5,10页

作者：黄丹丛喆徐珮薛婧魏强北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

目的比较游离病毒感染与T细胞介导的感染方式对SIV感染内皮细胞的影响,探索SIVmac239感染内皮细胞的主要途径,从而为SIV入侵血脑屏障的机制提供理论基础。方法采用游离SIV病毒直接感染内皮细胞和SIV感染的CEMx174细胞与内皮细胞共培养... 详细信息

目的比较游离病毒感染与T细胞介导的感染方式对SIV感染内皮细胞的影响,探索SIVmac239感染内皮细胞的主要途径,从而为SIV入侵血脑屏障的机制提供理论基础。方法采用游离SIV病毒直接感染内皮细胞和SIV感染的CEMx174细胞与内皮细胞共培养的两种方式,通过巢式PCR、间接免疫荧光法、Western blotting以及ELISA检测内皮细胞的感染程度。结果两种感染方式都能在内皮细胞内检测到前病毒DNA,感染细胞与内皮细胞共培养时,内皮细胞内前病毒DNA含量,SIV P27蛋白表达量和细胞培养上清液中P27含量远高于游离病毒直接感染的方式。结论细胞介导的感染方式相较于游离病毒直接感染方式对内皮细胞的感染能力更强,可能是SIV病毒入侵血脑屏障的主要途径。

关键词： SIV 艾滋病脑病内皮细胞 P27

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Fkbp51基因敲除小鼠肝脏与大脑海马区RNA表达谱系的分析比较

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中国比较医学杂志 2016年第5期26卷 40-48页

作者：徐玉雪邱彬魏强雍伟东中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

目的通过分析野生型小鼠(WT)与Fkbp51基因敲除(KO)小鼠肝脏、海马RNA表达谱系之间的差异,研究Fkbp51基因在代谢通路和神经通路中的作用。方法利用第二代测序技术对Fkbp51KO与WT小鼠的肝脏与海马mRNA进行表达谱测序,将测序结果用BRB-Arra... 详细信息

目的通过分析野生型小鼠(WT)与Fkbp51基因敲除(KO)小鼠肝脏、海马RNA表达谱系之间的差异,研究Fkbp51基因在代谢通路和神经通路中的作用。方法利用第二代测序技术对Fkbp51KO与WT小鼠的肝脏与海马mRNA进行表达谱测序,将测序结果用BRB-Array Tools进行分析,筛选出小鼠肝脏与海马的差异基因,然后分别利用在线工具DAVID对差异基因进行GO本体分析,STRING数据库对其进行蛋白质的相互作用网络分析,并利用Genecard对基因进行注释。结果 (1)Fkbp51的缺失,在肝脏中造成类固醇生物合成及代谢、脂类物质代谢以及氧化还原反应等相关基因表达水平的变化;(2)在海马中造成机械刺激探测、学习或记忆、突触传递的调节、PPAR信号通路、肌萎缩性脊髓侧索硬化症(ALS)等相关基因表达水平的变化;(3)在肝脏与海马中,Fkbp51的缺失同时造成了11个基因的共差异表达,这11个基因的蛋白网络互作图显示:HMGCS2与INSIG1及相关蛋白形成网络,而USP2与PER、CRY、DBP等相关蛋白形成另一个网络。这两个网络既参与代谢也参与神经调节。结论Fkbp51在代谢与神经中的作用既是相互独立又是相互联系的。

关键词： Fkbp51基因敲除小鼠肝脏神经系统 RNA-seq

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