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2016第十一届全国免疫学学术大会

作者：马祎杨子牛海涛中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心 100021

目的：人体肠道微生物菌群对发挥人体的生理功能起到重要作用，肠道微生物菌群稳态被破坏可以引起诸如肥胖、糖尿病、癌症、自身免疫病等多种疾病。系统性红斑性狼疮(简称狼疮)是一种包括遗传、环境等多种因素导致的自身免疫性疾病。关... 详细信息

目的：人体肠道微生物菌群对发挥人体的生理功能起到重要作用，肠道微生物菌群稳态被破坏可以引起诸如肥胖、糖尿病、癌症、自身免疫病等多种疾病。系统性红斑性狼疮(简称狼疮)是一种包括遗传、环境等多种因素导致的自身免疫性疾病。关于狼疮的发病机制研究方面，目前研究表明易感基因对于狼疮发病并非必要因素，这提示包括环境等其他因素在发病过程中起到重要作用，而且有关人体肠道微生物在其中的作用尚无系统性研究。因此我们的研究主要目的是明确肠道微生物菌群在狼疮发病机制中的作用，以及肠道微生物对狼疮治疗作用的影响。方法：收集到3名狼疮累及消化道症状患者和3名健康成年人的粪便标本，利用二代测序技术检测其肠道微生物组成。利用3只自发性狼疮模型小鼠，利用粪便微生态制品移植的方法对重症狼疮模型小鼠进行治疗，利用二代测序技术观察肠道微生物的变化，利用酶联免疫法检测血清中双链DNA (ds-DNA)抗体滴度变化，观察和分析疗效。

关键词：肠道微生物系统性红斑狼疮粪便微生态制品移植

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决明子冻干粉对SD大鼠的长期毒性研究

决明子冻干粉对SD大鼠的长期毒性研究

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第十二届中国实验动物科学年会

作者：魏若尧裴彦宇孙井江王敬竹高虹中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心北京100021

目的研究大鼠连续一年长期食用决明子冻干粉的毒性,为人体食用提供参考依据.方法决明子冻干粉以0.5、2.2及10.0g生药/kgBM剂量分别灌胃给予SD大鼠52周,在试验第13、26、39、52周以及分别在给药26、52周后停药恢复4周,分别剖杀20只/组... 详细信息

目的研究大鼠连续一年长期食用决明子冻干粉的毒性,为人体食用提供参考依据.方法决明子冻干粉以0.5、2.2及10.0g生药/kgBM剂量分别灌胃给予SD大鼠52周,在试验第13、26、39、52周以及分别在给药26、52周后停药恢复4周,分别剖杀20只/组,雌雄各半.结果在整个试验周期中未发生因给予决明子药物本身引起的大鼠濒死和死亡的毒性反应;各组大鼠体重均增长,且增长速度呈现出一定的剂量-反应关系;给药26周及39周后,2.2和10.0 g生药/kgBM剂量组雄性大鼠的肾脏系数均不同程度地显著性高于对照组(P＜0.05或P＜0.01);给药52周后,10.0 g生药/kgBM剂量组发生大鼠肾脏近曲小管上皮细胞内色素沉积,以及引起肾小管萎缩及再生等病理组织学改变,停药恢复4周后,这种现象虽有所缓解但仍然存在.结论在本试验室条件下,决明子冻干粉的未发生毒性反应的剂量(NOAEL)为2.2 g生药/kgBM,在10.0 g生药/kgBM剂量下的毒性靶器官主要是肾脏.

关键词：决明子冻干粉长期毒性 NOAEL 毒性靶器官

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柴胡总皂苷对小鼠抑郁样行为及学习记忆障碍的改善作用

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中国实验方剂学杂志 2016年第24期22卷 134-139页

作者：杨久山张楠宋铭晶王琼孙秀萍山东中医药大学附属医院济南250014 北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院北京协和医学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类动物模型三级实验室北京100021 四川医科大学泸州646000

目的:研究柴胡总皂苷连续给药抗抑郁作用起效时间及作用维持时间,以及柴胡总皂苷对皮质酮损伤引起的小鼠抑郁样行为及认知功能障碍的影响。方法:ICR雄性小鼠随机分为正常组(蒸馏水)、柴胡总皂苷低剂量组(12.5 mg·kg^(-1)),柴胡总... 详细信息

目的:研究柴胡总皂苷连续给药抗抑郁作用起效时间及作用维持时间,以及柴胡总皂苷对皮质酮损伤引起的小鼠抑郁样行为及认知功能障碍的影响。方法:ICR雄性小鼠随机分为正常组(蒸馏水)、柴胡总皂苷低剂量组(12.5 mg·kg^(-1)),柴胡总皂苷中剂量组(25 mg·kg^(-1)),柴胡总皂苷高剂量组(50 mg·kg^(-1))。每周称体重,给药13 d后,进行空场实验。给药14 d后1 h,3 d,6 d观察柴胡总皂苷对强迫游泳实验不动时间的影响。C57BL/6J雄性小鼠随机分为正常组,皮质酮组(CORT组),西酞普兰组(10 mg·kg^(-1))和柴胡总皂苷(25 mg·kg^(-1))组。CORT组、西酞普兰组和柴胡总皂苷组饮用皮质酮。造模3周后,ig给予柴胡总皂苷,给药时间为2周,至第5周结束,西酞普兰ig,给药时间同柴胡总皂苷。给药结束后1 d,进行强迫游泳实验和水迷宫实验。行为学实验结束后,各组各取3只小鼠,断头,取海马,蛋白质免疫印迹(Western blot)进行脑源性神经营养因子(BDNF)和酪氨酸激酶B(Trk B)蛋白表达检测。结果:柴胡总皂苷连续给药14 d,与正常组比较,对体重和空场实验运动路程及速度无影响。停药后1 h和3 d,柴胡总皂苷各剂量组均可缩短小鼠强迫游泳不动时间(P<0.01,P<0.05);停药后6 d,柴胡总皂苷25,50 mg·kg^(-1)仍可缩短小鼠强迫游泳实验不动时间(P<0.05)。柴胡总皂苷25 mg·kg^(-1)连续给药14 d,可缩短皮质酮损伤小鼠强迫游泳不动时间(P<0.01),缩短水迷宫实验寻台潜伏期(P<0.05),提高穿台次数(P<0.05),并增加皮质酮损伤小鼠海马BDNF和Trk B蛋白表达(P<0.01)。结论:柴胡总皂苷连续给药产生较快而持久的抗抑郁作用,逆转皮质酮损伤引起的小鼠抑郁样行为及学习记忆障碍。其作用机制可能与增加小鼠海马BDNF及Trk B表达有关。

关键词：柴胡总皂苷抑郁症强迫游泳脑源性神经营养因子

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慢性皮质酮处理对小鼠学习记忆和突触相关蛋白的影响

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中国实验动物学报 2016年第3期24卷 253-257页

作者：孙秀萍杨久山张楠宋铭晶秦川北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院北京协和医学院实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类动物模型三级实验室北京100021 山东中医药大学附属医院济南250014

目的建立饮入方式,慢性给予皮质酮,观察皮质酮对学习记忆和突触相关蛋白的影响。方法c57BL/6J雄性小鼠随机分为正常组和皮质酮组,每组10只。皮质酮组饮用含皮质酮的0.45%羟丙基-β-环糊精溶液,5 mg/(kg·d)。正常组动物给予0.45%羟... 详细信息

目的建立饮入方式,慢性给予皮质酮,观察皮质酮对学习记忆和突触相关蛋白的影响。方法c57BL/6J雄性小鼠随机分为正常组和皮质酮组,每组10只。皮质酮组饮用含皮质酮的0.45%羟丙基-β-环糊精溶液,5 mg/(kg·d)。正常组动物给予0.45%羟丙基-β-环糊精溶液。造模35 d后,进行社会识别实验和水迷宫实验。行为学实验结束后,动物断头取海马,应用western blot进行突触相关蛋白测定。结果社会识别实验显示,正常组和皮质酮组对刺激鼠笼的嗅闻时间均比空鼠笼长(P<0.05)。对照组对刺激鼠2的嗅闻时间比刺激鼠1长(P<0.05)。皮质酮组对刺激鼠2的嗅闻时间与对刺激鼠1的嗅闻时间差异无显著性。水迷宫实验定位航行结果显示,皮质酮组学习能力下降,寻台潜伏期延长(P<0.05)。空间探索结果显示,皮质酮组穿台次数、进入实台象限的次数和实台象限路程均明显减少(P<0.05,P<0.05,P<0.05)。Western blot结果显示,皮质酮组突触后致密物质(postsynaptic density,PSD-95)、突触素(synapsin-1,Syn-1)和磷酸化细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)表达明显下降(P<0.01,P<0.01,P<0.05)。结论通过饮入方式,慢性给予皮质酮,动物出现社会记忆和空间学习记忆障碍,可能与海马突触相关蛋白表达下降,突触功能受损有关。

关键词：皮质酮学习记忆突触蛋白小鼠

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慢性给予皮质酮对小鼠抑郁样行为和突触素的影响

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中国比较医学杂志 2016年第1期26卷 14-18页

作者：孙秀萍杨久山徐艳峰徐玉环宋铭晶秦川北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院北京协和医学院实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类动物模型三级实验室北京100021 山东中医药大学附属医院济南250014

目的通过饮入方式,慢性给予皮质酮,观察皮质酮对动物抑郁样行为和海马突触素的影响。方法c57雄性小鼠随机分为正常组和皮质酮组,每组10只。皮质酮组饮用含皮质酮的0.45%羟丙基-β-环糊精溶液,5mg/kg/d。正常组动物给予0.45%羟丙基-β-... 详细信息

目的通过饮入方式,慢性给予皮质酮,观察皮质酮对动物抑郁样行为和海马突触素的影响。方法c57雄性小鼠随机分为正常组和皮质酮组,每组10只。皮质酮组饮用含皮质酮的0.45%羟丙基-β-环糊精溶液,5mg/kg/d。正常组动物给予0.45%羟丙基-β-环糊精溶液。造模35 d后,进行行为学实验。行为学实验结束后,动物灌注固定,应用免疫组化方法,检测突触素-1的表达。结果糖水偏爱测试结果表明,正常组和皮质酮组糖水偏爱指数无显著性差异(P>0.05)。强迫游泳实验结果表明,皮质酮组强迫游泳不动时间显著延长(P<0.05)。空场实验结果显示,正常组和皮质酮组总路程和速度无显著性差异。皮质酮组中央区停留时间、路程及进入中央区频次减少,边缘区停留时间增加(P<0.05,P<0.01,P<0.01,P<0.01)。新奇抑制摄食实验结果表明,皮质酮组摄食潜伏期显著延长(P<0.05),5 min内摄食量无变化。免疫组化结果显示,皮质酮组突触素-1表达显著下降(P<0.05)。结论通过饮入方式,慢性给予皮质酮,动物出现抑郁样表现,可能与海马突触素-1表达减少,神经突触传递效能降低有关。

关键词：皮质酮抑郁突触素小鼠

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复杂性状遗传CC小鼠是研究复杂性疾病的重要工具

复杂性状遗传CC小鼠是研究复杂性疾病的重要工具

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第十二届中国实验动物科学年会

作者：孟爱民刘江宁中国医学科学院医学实验动物研究所协和医学院比较医学中心北京100021

目的目前严重危害人类健康的常见疾病如肿瘤、传染性疾病、糖尿病、心脑血管疾病等都是慢性复杂性疾病.为了明确个体遗传因素对复杂性疾病发生发展、诊断及治疗反应性的影响,2002年国际复杂性状联盟(Complex Trait Consortium,CTC)针... 详细信息

目的目前严重危害人类健康的常见疾病如肿瘤、传染性疾病、糖尿病、心脑血管疾病等都是慢性复杂性疾病.为了明确个体遗传因素对复杂性疾病发生发展、诊断及治疗反应性的影响,2002年国际复杂性状联盟(Complex Trait Consortium,CTC)针对复杂性疾病研究的需求,倡议创制复杂性状遗传CC小鼠(Collaborative crossmice,CC小鼠)资源.选定8个品系的小鼠(A/J,C57BL/6J,129S1Sv/ImJ,NOD/ShiLtJ,NZO/H1LtJ,CAST/EiJ,PWK/PhJ, and WSB/EiJ)作为原始亲本小鼠(founder).其中前5个品系是实验室常用的纯系小鼠,后3个来自野生型小鼠,历经10年繁殖建系,目前有200余个重组品系提供使用.全部具有完整的遗传信息,覆盖了90％的小鼠遗传变异.通过检测不同品系表型差异,可以快速鉴定介导复杂性疾病性状的基因.CC小鼠在疾病易感性、发生发展及预后的系统遗传学研究方面具有不可替代的作用.利用CC小鼠研究筛选出的生物学标志物,经基因敲除小鼠、人源化小鼠等动物模型进行验证,将会为阐明疾病发生机制、预测治疗反应性个体差异提供线索和佐证,为个体化治疗研究基础研究提供支撑.

关键词：复杂性状遗传CC小鼠慢性复杂性疾病易感性遗传多样性

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实验动物研究在精准医学模式中的作用

实验动物研究在精准医学模式中的作用

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中国药理学会生化与分子药理学专业委员会2016年研讨会

作者：李程程陈孟毅杜朋管博文樊飞跃孟爱民中国医学科学院医学实验动物研究所协和医学院比较医学中心北京 100021

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小剂量多次注射链脲佐菌素建立糖尿病早期视网膜病变动物模型

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中国实验动物学报 2016年第5期24卷 487-493页

作者：朱华李彦红徐艳峰徐玉环许庆刚尹红霞秦川卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心北京100021 首都医科大学附属同仁医院北京100730

目的多次小剂量注射链脲佐菌素(STZ)制作糖尿病(DM)早期大鼠视网膜病变(DR)动物模型。方法雄性SD大鼠75只,体重(180±15)g。随机分为对照组(CON组,n=30)和模型组(DM组,n=45)。DM组按30mg/kg体重腹腔注射3%的STZ,连续5 d。成模后每... 详细信息

目的多次小剂量注射链脲佐菌素(STZ)制作糖尿病(DM)早期大鼠视网膜病变(DR)动物模型。方法雄性SD大鼠75只,体重(180±15)g。随机分为对照组(CON组,n=30)和模型组(DM组,n=45)。DM组按30mg/kg体重腹腔注射3%的STZ,连续5 d。成模后每周测量体重、血糖等指标。分别在成模后第4、8、12周各组随机安乐死10只动物,对视网膜组织进行H.E染色、免疫组化、消化铺片及透射电镜超微结构观察。结果模型成立后第2周,动物表现出多食、多饮、多尿的糖尿病症状。与对照组比较,模型大鼠4周时仅见视网膜变薄,8周时视网膜内皮细胞增生,毛细血管基底膜增厚,内皮细胞指状突起,吞饮泡增多。12周时毛细血管膨大,毛细血管细胞凋亡,核固缩、深染。视网膜变薄,神经节细胞数量减少。视网膜周细胞线粒体肿胀,嵴脱落空泡样变。模型组大鼠视网膜GFAP阳性细胞主要分布在节细胞层和神经纤维层,呈条索状连续排列,阳性细胞数明显减少。结论小剂量多次注射STZ诱导的大鼠DR模型表现出人类早期视网膜病变相似的特征,可用于发病机理、药效学等方面的研究。

关键词：糖尿病糖尿病视网膜病动物模型链脲佐菌素大鼠

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复杂性状遗传CC小鼠是研究复杂性疾病的重要工具

复杂性状遗传CC小鼠是研究复杂性疾病的重要工具

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第二届《药学学报》药学前沿论坛

作者：孟爱民刘江宁中国医学科学院医学实验动物研究所协和医学院比较医学中心北京 100021

目前严重危害人类健康的常见疾病如肿瘤、传染性疾病、糖尿病、心脑血管疾病等都是慢性复杂性疾病。为了明确个体遗传因素对复杂性疾病发生发展、诊断及治疗反应性的影响,2002 年国际复杂性状联盟(complextrait consortium,CTC)针对复... 详细信息

目前严重危害人类健康的常见疾病如肿瘤、传染性疾病、糖尿病、心脑血管疾病等都是慢性复杂性疾病。为了明确个体遗传因素对复杂性疾病发生发展、诊断及治疗反应性的影响,2002 年国际复杂性状联盟(complextrait consortium,CTC)针对复杂性疾病研究的需求,倡议创制复杂性状遗传CC小鼠(collaborative cross mice,CC小鼠)资源。

关键词：复杂性状遗传CC小鼠慢性复杂性疾病易感性遗传多样性

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FKBP52在子宫内膜癌组织中的表达及其与孕激素受体的相关性研究

FKBP52在子宫内膜癌组织中的表达及其与孕激素受体的相关性研究

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第九届中国肿瘤学术大会暨第十五届海峡两岸肿瘤学术大会

作者：舒桐白萍雍伟东孙慧李淑敏张蓉李斌国家癌症中心/中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院北京协和医学院中国医学科院医学实验动物研究所

目的 FKBP52作为一种激素受体辅助调节蛋白，在激素相关肿瘤研究中逐渐受到重视，但尚在起步阶段.子宫内膜癌是一种激素依赖性肿瘤，发病率逐年升高，孕激素治疗是早期保留生育功能患者的主要治疗手段，也是晚期或复发子宫内膜癌治疗中... 详细信息

目的 FKBP52作为一种激素受体辅助调节蛋白，在激素相关肿瘤研究中逐渐受到重视，但尚在起步阶段.子宫内膜癌是一种激素依赖性肿瘤，发病率逐年升高，孕激素治疗是早期保留生育功能患者的主要治疗手段，也是晚期或复发子宫内膜癌治疗中非常重要的组成部分.本研究意在探讨FKBP52在子宫内膜癌组织中的表达情况及其与孕激素及其受体的相关性.方法收集中国医学科学院肿瘤医院2012年10月至2013年9月手术标本子宫内膜癌40例，正常内膜组织40例，应用RT-PCR及WesternBlot技术分别检测FKBP52mRNA及蛋白在子宫内膜癌及正常内膜中的表达差异.通过免疫组化分析FKBP52在在子宫内膜癌及正常内膜中的表达情况.利用siRNA转染Ishikawa细胞系，抑制FKBP52的表达，应用WesternBlot技术检测细胞转染后孕激素受体的表达情况，并通过MTT法对比转染前后孕激素对子宫内膜癌细胞增殖的影响.结果 FKBP52mRNA及其蛋白在子宫内膜癌组织中的表达均显著低于正常内膜组织.免疫组化显示FKBP52表达可见于子宫内膜癌组织腺体及间质.FKBP52敲降后可促进Ishikawa细胞增殖，且孕激素受体表达明显降低，孕激素抑制细胞增殖的效用随之减弱.结论 FKBP52可抑制子宫内膜癌细胞增殖，该蛋白表达缺失可使孕激素受体表达下调，从而导致孕激素抵抗，促进子宫内膜癌细胞增殖.

关键词： FKBP52 孕激素受体子宫内膜癌 Ishikawa细胞系孕激素抵抗

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