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第十六届中国实验动物科学年会

作者：彭婉君赵彬彬武婧刘江宁北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所国家卫健委人类疾病比较医学重点实验室

乙型肝炎是危害人类健康的重要传染病,在中国乙肝携带率高达7.18%,虽然现已有高效的疫苗可预防乙肝感染,但目前还没有有效的抗乙肝病毒药物,慢性乙型肝炎仍无法治愈。因此,建立合适的HBV感染模型,探索新的治疗靶点迫在眉睫。由于HBV具... 详细信息

乙型肝炎是危害人类健康的重要传染病,在中国乙肝携带率高达7.18%,虽然现已有高效的疫苗可预防乙肝感染,但目前还没有有效的抗乙肝病毒药物,慢性乙型肝炎仍无法治愈。因此,建立合适的HBV感染模型,探索新的治疗靶点迫在眉睫。由于HBV具有严格的种属限制性及组织亲嗜性,使得HBV感染与复制模型的研发受到一定限制。本文就国内外HBV感染模型研究进展进行综述。

关键词：乙型肝炎病毒疾病模型

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Marcksl1基因敲除小鼠的建立及造血表型初步分析

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中国比较医学杂志 2021年第5期31卷 108-114页

作者：李博高丽娟于磊张旭李争光刘宁史旭东高凯李静高珊齐晓龙张连峰马元武中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心北京市人类重大疾病实验动物模型工程技术研究中心北京100021 中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室北京100021

目的建立Marcksl1基因敲除小鼠,初步探究该基因缺失对造血系统发育的影响。方法利用CRISPR/Cas9技术构建Marcksl1基因敲除小鼠,通过PCR技术以及Sanger测序方法鉴定小鼠基因型。通过将敲除小鼠与野生型小鼠杂交,分析敲除小鼠的传代情况... 详细信息

目的建立Marcksl1基因敲除小鼠,初步探究该基因缺失对造血系统发育的影响。方法利用CRISPR/Cas9技术构建Marcksl1基因敲除小鼠,通过PCR技术以及Sanger测序方法鉴定小鼠基因型。通过将敲除小鼠与野生型小鼠杂交,分析敲除小鼠的传代情况。通过杂合子小鼠相互杂交,分析发育不同阶段纯合子、杂合子和野生型小鼠的占比。分离小鼠胎肝,利用血常规以及流式细胞术分析该基因缺失对造血系统的影响。结果PCR结合Sanger测序结果表明Marcksl1基因敲除小鼠构建成功。对不同阶段胚胎小鼠基因型鉴定和数量统计,发现小鼠Marcksl1基因敲除造成的胚胎死亡发生于胚胎发育后期。通过血常规与流式细胞分析,结果表明Marcksl1基因缺失在E15.5 d时不影响白细胞,红细胞以及血小板数量,但胎肝中造血干细胞比例显著增多。结论本研究成功建立Marcksl1基因敲除小鼠,并发现该基因缺失影响造血干细胞占比。本研究为进一步了解该基因在胚胎发育和造血系统中的功能提供动物模型。

关键词： Marcksl1 敲除小鼠造血干细胞

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Prpf40b基因缺失诱发大鼠心脏结构异常

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中国比较医学杂志 2021年第4期31卷 21-26页

作者：刘梦迪董伟张旭陈炜高翔高珊张连峰吕丹中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心北京市人类重大疾病实验动物模型工程技术研究中心北京100021 中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室北京100021

目的构建Prpf40b基因敲除大鼠,为该基因的生物学研究建立工具动物,同时初步探究该基因缺失后对心脏发育的影响。方法利用CRISPR/Cas9技术构建Prpf40b基因敲除大鼠,测序及PCR技术鉴定敲除大鼠构建成功及仔代大鼠基因型。通过超声影像技... 详细信息

目的构建Prpf40b基因敲除大鼠,为该基因的生物学研究建立工具动物,同时初步探究该基因缺失后对心脏发育的影响。方法利用CRISPR/Cas9技术构建Prpf40b基因敲除大鼠,测序及PCR技术鉴定敲除大鼠构建成功及仔代大鼠基因型。通过超声影像技术分析敲除大鼠心脏结构形态和功能改变,随后通过病理组织学观察分析该基因敲除后对大鼠心肌显微形态的组织学影响。结果经PCR鉴定和测序比对,确认Prpf40b基因敲除大鼠构建成功。经超声影像学分析,与同窝阴性大鼠相比2月龄敲除大鼠心脏结构形态未见明显异常,而12月龄敲除大鼠收缩期及舒张期时心室腔内径及容积显著减小,同时射血分数显著减小。经病理组织学分析,与同窝阴性大鼠相比12月龄敲除大鼠心肌出现排列不齐,心肌纤维粗细不均及肌浆网扩张等现象。结论Prpf40b基因缺失可诱发大鼠心脏整体结构形态改变及心肌组织学异常。

关键词： Prpf40b 敲除心脏大鼠

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心律失常动物模型研究进展

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中国比较医学杂志 2021年第6期31卷 116-121页

作者：姜笑雨张连峰吕丹中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室北京100021 中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心北京市人类重大疾病实验动物模型工程技术研究中心北京100021

心律失常是最常见的循环系统疾病之一,可影响心、脑、肾等多个重要脏器的功能,重症可危及生命,由心律失常导致的心源性猝死可占所有死亡的25%。至今,心律失常的潜在病理生理学机制仍不完全清楚,对心律失常发病机制的深入研究有助于临床... 详细信息

心律失常是最常见的循环系统疾病之一,可影响心、脑、肾等多个重要脏器的功能,重症可危及生命,由心律失常导致的心源性猝死可占所有死亡的25%。至今,心律失常的潜在病理生理学机制仍不完全清楚,对心律失常发病机制的深入研究有助于临床新的防治策略的研发,而精准动物模型的建立是发病机制研究的重要基础,同时作为研究工具,可用于发病机制及药物干预措施研究的必备材料。所以本文对国内外心律失常动物模型的研究进展,包括模型应用的物种特点,制备原理以及模型应用等进行总结和比较,以期为心律失常相关研究及模型选择提供依据。

关键词：心律失常动物模型机制

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瘦素受体敲除引起大鼠脑组织小胶质细胞活化

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中国比较医学杂志 2021年第5期31卷 7-14页

作者：丁登峰高翔张旭刘旭孙彩显张丽张连峰北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室北京100021 北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所北京市人类重大疾病实验动物模型工程技术研究中心北京100021

目的本文利用瘦素受体(LEPR)敲除大鼠,分析瘦素受体基因敲除后大鼠脑中小胶质细胞形态与功能的改变,探究瘦素受体在小胶质细胞中的功能作用。方法采用RT-PCR,蛋白印迹法,免疫组化法和免疫荧光法,观察大鼠瘦素受体敲除后体内外小胶质细... 详细信息

目的本文利用瘦素受体(LEPR)敲除大鼠,分析瘦素受体基因敲除后大鼠脑中小胶质细胞形态与功能的改变,探究瘦素受体在小胶质细胞中的功能作用。方法采用RT-PCR,蛋白印迹法,免疫组化法和免疫荧光法,观察大鼠瘦素受体敲除后体内外小胶质细胞活化状态。结果瘦素受体在小胶质细胞表达,基因敲除可以完全剔除小胶质细胞中LEPR蛋白;LEPR敲除增强大鼠LPS对刺激的炎症反应,存活率降低了75%;LEPR敲除大鼠脑中的活化的小胶质细胞比例明显增加;LEPR敲除的原代小胶质细胞不仅分泌更多炎性因子也增强了吞噬能力;Western blot发现PI3K/AKT在瘦素受体敲除大鼠脑组织蛋白中磷酸化明显增强。结论瘦素受体敲除后,大鼠小胶质细胞向促炎促吞噬的方向发展,揭示了LEPR/Leptin可能通过小胶质细胞调节神经炎症。

关键词：瘦素受体小胶质细胞炎性因子吞噬神经炎症基因敲除大鼠

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不同灭菌方法对猪专用配方奶粉营养成分的影响

不同灭菌方法对猪专用配方奶粉营养成分的影响

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第十六届中国实验动物科学年会

作者：郭亚茜刘瑞雪杜晓鹏朱华中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室

目的探讨不同灭菌方法对猪专用配方奶粉营养成分的影响。方法猪专用配方奶粉分为高压灭菌组和辐照灭菌组。高压灭菌组分别按照不同灭菌条件对液体配方奶粉灭菌;辐照灭菌组按照不同60 Co-γ射线剂量对液体配方奶粉和粉末配方奶粉进行灭... 详细信息

目的探讨不同灭菌方法对猪专用配方奶粉营养成分的影响。方法猪专用配方奶粉分为高压灭菌组和辐照灭菌组。高压灭菌组分别按照不同灭菌条件对液体配方奶粉灭菌;辐照灭菌组按照不同60 Co-γ射线剂量对液体配方奶粉和粉末配方奶粉进行灭菌。按国标对灭菌处理后的各组配方奶粉进行无菌状态检测,使用液相色谱测定配方奶粉营养成分含量。结果经不同灭菌方法处理后无菌状态检测结果均为阴性。高压灭菌组和辐照灭菌液体组氨基酸含量均有显著性差异(P<0.05),蛋氨酸含量增加(P<0.05)。高压灭菌组121℃30min苯丙氨酸和组氨酸含量增加(P<0.05)。辐照灭菌粉末组30kGy、35kGy、50kGy苏氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸、组氨酸和精氨酸有显著性差异(P<0.05),苯丙氨酸和组氨酸含量增加(P<0.05)。其他氨基酸含量无显著性差异。50kGy辐照灭菌粉末组赖氨酸和精氨酸含量降低最少(P<0.05)。高压灭菌液体组粗蛋白和粗脂肪均有显著性差异(P<0.05),121℃40min、121℃50min、126℃20min粗灰分有显著性差异(P<0.05),121℃30min、121℃40min、121℃50min粗纤维有显著性差异(P<0.05),121℃30min、121℃50min总磷有显著性差异(P<0.05),121℃40min钙有显著性差异(P<0.05)。辐照灭菌液体组粗灰分、粗蛋白、粗脂肪、粗纤维、总磷和钙有显著性差异(P<0.05),水和氯化钠无显著性差异。辐照灭菌粉末组水分、粗灰分、粗蛋白和钙均有显著性差异(P<0.05)。其他组分均无显著性差异。结论高压灭菌组121℃30min营养成分损失最小;辐照灭菌组50kGy辐照剂量营养成分损失最小。两种灭菌方法比较,50kGy辐照灭菌粉末组营养成分含量损失最少。

关键词：无菌猪配方奶粉高压灭菌辐照灭菌营养成分

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PM2.5通过神经炎症和β-淀粉样蛋白沉积加重阿尔茨海默病小鼠的认知症状

PM2.5通过神经炎症和β-淀粉样蛋白沉积加重阿尔茨海默病小鼠的认...

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第十六届中国实验动物科学年会

作者：张钰张玲付信靖郭建国秦川中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室

目的空气细颗粒物PM 2.5是空气污染的重要组成,能通过多种途径引起呼吸系统及各个系统疾病,值得注意的是PM 2.5可引起认知减退,与阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)也具有相关性。AD的发病机制众多,其中神经系统炎症学说是重要... 详细信息

目的空气细颗粒物PM 2.5是空气污染的重要组成,能通过多种途径引起呼吸系统及各个系统疾病,值得注意的是PM 2.5可引起认知减退,与阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)也具有相关性。AD的发病机制众多,其中神经系统炎症学说是重要的疾病理论基础之一。本研究旨在探索空气污染PM 2.5的环境暴露加重神经炎症和病理改变,从而影响AD的机制。方法本研究选用APP/PS1双转基因阿尔茨海默病模型小鼠和C57BL/6对照小鼠,采用狭缝分离式PM 2.5在线浓缩富集系统进行PM 2.5的富集与暴露。通过进行每天4小时,每周5天,共15周暴露,建立小鼠的PM2.5呼吸暴露模型。造模成功后,分别检测动物的行为学症状、病理学变化、以及相关分子机制研究。结果实验结果表明,PM 2.5暴露可造成小鼠肺组织的病理改变,加重小鼠的认知症状,免疫组织化学染色检测到小鼠中枢神经系统出现小胶质细胞的激活。而对AD模型小鼠,PM 2.5暴露不可逆的增加了小鼠海马淀粉样蛋白的沉积。另外,PM 2.5暴露未造成小鼠其他主要脏器损伤。结论本研究表明,空气细颗粒物PM 2.5可导致中枢神经系统炎症,促进小胶质细胞激活,并不可逆增加阿尔茨海默病模型小鼠海马淀粉样蛋白沉积,从而加重阿尔茨海默病模型小鼠的认知障碍。

关键词：阿尔茨海默病 PM2.5 神经炎症小胶质细胞 β-淀粉样蛋白

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遗传多样性小鼠资源及其遗传学特点

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中国实验动物学报 2021年第4期29卷 467-474页

作者：王欣佩张伶燕劳兰兰叶凡刘云鹏李丽秦川中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫健委人类疾病比较医学重点实验室北京市人类重大疾病实验动物模型工程技术研究中心北京100021

目的建立从群体水平体现遗传多样性特点的新型小鼠资源,并初步探讨其遗传学特点。方法(1)多个亲本以重组杂交的方式分别建立携带有多亲本遗传信息的近交系和远交系小鼠;(2)通过全外显子测序,比较分析两个小鼠群体的遗传学特点;(3)通过... 详细信息

目的建立从群体水平体现遗传多样性特点的新型小鼠资源,并初步探讨其遗传学特点。方法(1)多个亲本以重组杂交的方式分别建立携带有多亲本遗传信息的近交系和远交系小鼠;(2)通过全外显子测序,比较分析两个小鼠群体的遗传学特点;(3)通过子代与亲本品系基因组序列的分析,绘制遗传多样性小鼠资源的染色体物理图谱,并统计亲本对子代小鼠的遗传贡献。结果(1)遗传多样性近交系小鼠具有遗传稳定、表型一致的特点,适用于简单快速的表型-基因型相关性分析工作;(2)相比近交系,遗传多样性远交系小鼠拥有更好的繁殖能力,以及更丰富的遗传变异。每个远交系小鼠都是独特的个体,适合更细粒度的微调控遗传学机制研究。这些远交系小鼠的染色体表现出更为马赛克化的特点;(3)原始亲本对子代品系的遗传贡献并非均一等分,存在遗传偏好。结论相比传统单一遗传背景的小鼠,通过多亲本建立的遗传多样性近交系和远交系小鼠资源在系统遗传学的研究中各具优势、互为补充,为复杂性状遗传学机制的研究提供了强有力的工具。

关键词：遗传多样性复杂性状全外显子组学近交系远交系

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遗传多样性高血压小鼠模型的建立与基因转录调控分析

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中国实验动物学报 2024年第5期32卷 576-584页

作者：黄智滨潘吉荣张伶燕赵大路王谦魏承志马旭白琳秦川中国医学科学院北京协和医学院医学实验动物研究所北京100021 国家人类疾病动物模型资源库国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室新发与再发传染病动物模型研究北京市重点实验室北京市人类重大疾病动物模型工程技术研究中心国家动物模型技术创新中心北京100021 昌平实验室(CPNL) 北京102206 呼吸健康与共病国家重点实验室北京100005

目的探讨13个品系的遗传多样性高血压小鼠的血压表型差异、肾病理变化以及相关致病通路。方法将13个品系的遗传多样性小鼠分别与Cckbr-/-小鼠进行杂交,得到不同遗传背景的Cckbr+/+、Cckbr+/-、Cckbr-/-3种基因型的小鼠。利用BP-2000无... 详细信息

目的探讨13个品系的遗传多样性高血压小鼠的血压表型差异、肾病理变化以及相关致病通路。方法将13个品系的遗传多样性小鼠分别与Cckbr-/-小鼠进行杂交,得到不同遗传背景的Cckbr+/+、Cckbr+/-、Cckbr-/-3种基因型的小鼠。利用BP-2000无创血压分析系统测量小鼠血压,利用Western Blot检测小鼠肾CCKBR蛋白表达变化,利用苏木素-伊红(HE)染色、免疫组化(IHC)检测小鼠肾组织病理学变化,利用转录组测序(RNA-Seq)分析筛选原发性高血压致病相关通路。结果3个特定小鼠品系(A/J、LOT、FIM)中,收缩压(systolic blood pressure,SBP)Cckbr-/-组较Cckbr+/+组具有显著性差异(P<0.05)。HE染色及IHC发现高血压对小鼠造成了一定程度的肾损伤。通过GO与Pathway富集分析,发现差异表达基因富集在新陈代谢与昼夜节律调节等方面。结论遗传多样性高血压小鼠在血压表型、病理特征及基因表达等方面呈现显著性差异,有效模拟了人群的遗传异质性对疾病表型的影响。

关键词：遗传多样性小鼠 Cckbr 原发性高血压动物模型

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CREB通过调节突触可塑性调节记忆及在阿尔兹海默症治疗中的研究进展

CREB通过调节突触可塑性调节记忆及在阿尔兹海默症治疗中的研究进...

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第十六届中国实验动物科学年会

作者：罗卓慧庞硕张连峰中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室中国医学科学院神经科学中心

阿尔兹海默症(Alzheimer’s disease,AD)是一种发病机制复杂,不可逆转的神经退行性疾病。AD患者表现为记忆缺失,突触可塑性受损。本文关注与突触可塑性密切相关的环腺苷酸反应元件结合蛋白(cAMP responsive element-binding protein,CRE... 详细信息

阿尔兹海默症(Alzheimer’s disease,AD)是一种发病机制复杂,不可逆转的神经退行性疾病。AD患者表现为记忆缺失,突触可塑性受损。本文关注与突触可塑性密切相关的环腺苷酸反应元件结合蛋白(cAMP responsive element-binding protein,CREB),总结CREB的结构,激活途径,下游基因及对记忆的调控作用,关注CREB与AD的联系,为基于神经可塑性的AD的研究提供参考。

关键词： CREB 突触可塑性长期记忆阿尔兹海默症

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