检索结果-内蒙古大学图书馆

中国生物制品学杂志 2015年第6期28卷 579-586页

作者：任芳芳徐婧雯张雪梅吴忠香马娜卢孔杰董少忠中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室云南昆明650118

目的克隆野生型中缅树鼩的CD4及IL-6分子,并分析其核苷酸、氨基酸序列的多态性及重要的功能位点。方法经野生型树鼩尾静脉采血,分离外周血单核淋巴细胞,经植物血球凝集素(phytohemagglutinin,PHA)刺激24 h后,提取细胞总RNA,以其为模板,... 详细信息

目的克隆野生型中缅树鼩的CD4及IL-6分子,并分析其核苷酸、氨基酸序列的多态性及重要的功能位点。方法经野生型树鼩尾静脉采血,分离外周血单核淋巴细胞,经植物血球凝集素(phytohemagglutinin,PHA)刺激24 h后,提取细胞总RNA,以其为模板,进行RT-PCR扩增,扩增产物插入p MD-19T载体,提取阳性重组质粒,经双酶切鉴定及测序;采用Lasergene分析目的基因核苷酸及氨基酸序列,并构建进化树,分析野生型树鼩与已知中缅树鼩的亲缘关系。结果野生型树鼩CD4全长编码序列的开放阅读框长度为1 365 bp,编码454个氨基酸,IL-6全长编码序列的开放阅读框为627 bp,编码208个氨基酸,22只野生型树鼩成功克隆出CD4分子,23只野生型树鼩成功克隆出IL-6分子。不同野生型中缅树鼩的CD4及IL-6分子有不同程度的核苷酸和氨基酸位点的突变,但分别有35%和26.7%的碱基突变为同义突变,且发生非同义突变的位点对树鼩CD4和IL-6分子重要的功能位点无影响。由CD4核苷酸及氨基酸序列构建的系统进化树基本一致;由IL-6核苷酸及氨基酸序列构建的系统进化树中,23只野生树鼩分为2个分支。结论 CD4和IL-6分子具有重要功能的氨基酸位点是保守稳定的,为今后树鼩CD4和IL-6单克隆抗体的制备及树鼩实验动物模型的建立奠定了基础。

关键词：树鼩 CD4 IL-6 克隆系统进化树

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

树鼩白细胞介素-6的原核表达及其分子特征

引用

中国生物制品学杂志 2015年第6期28卷 557-563页

作者：冯凯李建平胡云光王晶晶王丽春李剑兰李琦涵刘龙丁中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室云南昆明650118

目的原核表达树鼩(tree shrew,ts)白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)基因,并分析ts IL-6蛋白分子特征。方法以人、猴、啮齿类动物等IL-6 m RNA的共有序列作为查询序列,从树鼩c DNA数据库中进行本地blast,获得预测ts IL-6核苷酸序列,将... 详细信息

目的原核表达树鼩(tree shrew,ts)白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)基因,并分析ts IL-6蛋白分子特征。方法以人、猴、啮齿类动物等IL-6 m RNA的共有序列作为查询序列,从树鼩c DNA数据库中进行本地blast,获得预测ts IL-6核苷酸序列,将其翻译成氨基酸序列,用MEGA 6软件进行核酸序列和氨基酸序列比对,绘制进化树。参考预测IL-6基因序列设计引物,PCR扩增IL-6基因序列,克隆至原核表达载体p ET-28a(+),构建重组表达质粒p ET-28a(+)-IL-6;转化感受态*** BL21(ED3),IPTG诱导表达,重组蛋白经14 KD透析膜梯度透析纯化;利用蛋白质在线数据库expasy进行蛋白质结构同源建模,并用Signal P sever预测ts IL-6的信号肽序列,经模板与预测模型的结构拟合来预测树鼩IL-6的gp130结合位点。结果 ts IL-6核苷酸和氨基酸序列与高等灵长类动物有较高的同源性;重组表达质粒p ET-28a(+)-IL-6经双酶切鉴定证明构建正确;重组表达蛋白相对分子质量约为24 000,纯化后可见单一目的条带,浓度为0.2 mg/ml;h IL-6和ts IL-6蛋白的空间结构较类似,ts IL-6的gp130结合位点Ⅱa位于A和C螺旋间,位点Ⅲa位于A和B螺旋的柔性链区及分子近C-端。结论 ts IL-6的核苷酸和氨基酸序列与高等灵长类动物具有较高同源性,成功构建的重组原核表达质粒p ET-28a(+)-IL-6,为后续IL-6相关的病理研究奠定了基础。

关键词：树鼩白细胞介素-6 原核细胞基因表达同源建模

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

不同批次肠道病毒71型(EV71)灭活疫苗的一致性分析

引用

中国生物制品学杂志 2015年第3期28卷 223-227,232页

作者：张莹刘龙丁董承红王丽春廖芸郭磊王晶晶梁燕冯敏崔伟李琦涵中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室云南昆明650118

目的分析不同批次的肠道病毒71型（enterovirus 71,EV71）灭活疫苗（人二倍体细胞）全程免疫后免疫原性及安全性的一致性。方法检测3批EV71灭活疫苗成品的抗原含量、游离甲醛含量、铝含量、内毒素含量、抗生素残留量,并免疫动物检测异... 详细信息

目的分析不同批次的肠道病毒71型（enterovirus 71,EV71）灭活疫苗（人二倍体细胞）全程免疫后免疫原性及安全性的一致性。方法检测3批EV71灭活疫苗成品的抗原含量、游离甲醛含量、铝含量、内毒素含量、抗生素残留量,并免疫动物检测异常毒力及效力。采用随机、双盲的方法,将3批疫苗于第0、28天分别免疫900名6~72月龄的受试人群。于接种前（第0天）、完成2剂疫苗接种后28天（第56天）,采集静脉血,分离血清,采用微量细胞病变法检测EV71中和抗体（neutralizing antibody,Nab）效价;于每次接种后30 min内记录即时反应,每剂接种后0~7 d内记录各种征集性局部和全身症状,0~28 d内记录非征集性不良反应事件,并在整个观察期间报告严重不良反应事件。结果 3批EV71灭活疫苗成品的各项检定结果均在合格范围内。经2剂EV71灭活疫苗全程免疫后,20120101、20120102和20120203批疫苗受试者的抗体阳转率分别为98.00%、95.67%和98.67%,易感人群（Nab〈1∶8）免后抗体阳转率分别为96.45%、92.44%和97.60%,非易感人群（Nab≥1∶8）免后抗体水平的4倍增长率分别为67.94%、65.63%和71.43%;免后抗体GMT分别为283.79、231.48和285.78,组间差异均无统计学意义（P均〉0.05）。3批疫苗诱导的与疫苗相关的不良反应及严重不良反应事件,组间差异无统计学意义（P〉0.05）。结论通过比较3批疫苗的各项生产质量控制指标及其诱导的抗体水平,证实该疫苗的生产工艺较稳定。

关键词： EV71灭活疫苗人二倍体细胞免疫原性安全性一致性

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

G1P型轮状病毒ZTR-68株冷适应株的筛选及其生物学特征鉴定

引用

病毒学报 2015年第5期31卷 548-553页

作者：谢力米锴叶静牛香莲孙晓琴易山李鸿钧孙茂盛昆明学院医学院昆明650214 中国医学科学院医学生物学研究所北京协和医学院云南省重大传染病疫苗研发重点实验室昆明650118 昆明医科大学昆明650503

通过对G1P[8]型人野生轮状病毒ZTR-68株的梯度降温传代,筛选适应低温的轮状病毒减毒毒株,为轮状病毒减毒疫苗的制备提供研究基础。自腹泻婴儿粪便样品中分离轮状病毒,在MA104猴肾细胞中自37℃始传代培育,每传代8代后降温3℃,连续传代至2... 详细信息

通过对G1P[8]型人野生轮状病毒ZTR-68株的梯度降温传代,筛选适应低温的轮状病毒减毒毒株,为轮状病毒减毒疫苗的制备提供研究基础。自腹泻婴儿粪便样品中分离轮状病毒,在MA104猴肾细胞中自37℃始传代培育,每传代8代后降温3℃,连续传代至28℃,累计传代32代,低温适应过程中检测病毒生物学性状的变化。梯度降温传代后得到的冷适应株RNA基因组电泳迁移条带仍与原始毒株保持一致,血凝滴度降低,病毒蚀斑形态趋于变小且不规则,37℃回复培养时病毒呈现增殖速度减慢且感染性滴度降低的变化。结果显示:野生轮状病毒经冷适应传代后可以得到具有减毒效应的稳定毒株,该毒株出现了部分生物学特征的改变,冷适应株的选育为轮状病毒减毒活疫苗的研制提供了一种备选策略。

关键词：轮状病毒冷适应株生物学特征鉴定

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

云南汉族人群CD6基因多态性与HCV慢性感染的关系

引用

贵阳医学院学报 2016年第5期41卷 527-531页

作者：刘城秀沈云松李桃意张禹檀林萍姚月婷俞建昆姚宇峰史荔中国医学科学院&北京协和医学院医学生物学研究所云南昆明650118 云南省重大传染病疫苗研发重点实验室云南昆明650118 云南省第一人民医院&昆明理工大学附属医院云南昆明650032

目的:探讨云南汉族人群中CD6基因多态性与慢性丙型肝炎病毒(HCV)感染的关系。方法:随机抽取云南地区汉族人群HCV慢性感染患者434例,健康对照人群444例;采用TaqMan探针基因分型方法对2组人群的CD6基因3个SNPs(rs17824933、rs12360861、rs... 详细信息

目的:探讨云南汉族人群中CD6基因多态性与慢性丙型肝炎病毒(HCV)感染的关系。方法:随机抽取云南地区汉族人群HCV慢性感染患者434例,健康对照人群444例;采用TaqMan探针基因分型方法对2组人群的CD6基因3个SNPs(rs17824933、rs12360861、rs11230563)进行基因分型,构建CD6基因单倍型,评估上述3个SNPs与HCV慢性感染的关系。结果:两组人群CD6基因SNP-rs17824933(C>G)、SNP-rs12360861(G>A)和SNP-rs11230563(C>T)基因型频率和等位基因频率比较,差异无统计学意义(P>0.05);2组人群的SNP-rs17824933(C>G)、SNP-rs12360861(G>A)和SNP-rs11230563(C>T)单倍型频率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:此次调查的云南汉族群体的CD6基因SNP-rs17824933(C>G)、SNP-rs12360861(G>A)和SNP-rs11230563(C>T)与HCV慢性感染无关。

关键词：肝炎,丙型,慢性多态性单核苷酸基因,CD6 云南

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

云南汉族人群HSPA1A基因多态性位点与肺癌的相关性研究

引用

贵阳医学院学报 2016年第9期41卷 1010-1014,1020页

作者：张新文李盈甫史荔马千里洪超王婷婷俞建昆李传印姚宇峰杨慧娟中国医学科学院&北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室云南昆明650118 昆明医科大学第一附属医院干疗科云南昆明650032 昆明医科大学第三附属医院胸外科云南昆明650118

目的：探讨HSPA1A基因多态性与肺癌发生发展的相关性。方法：选取云南地区汉族人群肺癌患者288例为病例组,健康体检人群298例为对照组,采用Taq Man探针基因分型方法对HSPA1A基因中的4个多态性位点（SNPs）位点rs12190359（C〉T）、rs562... 详细信息

目的：探讨HSPA1A基因多态性与肺癌发生发展的相关性。方法：选取云南地区汉族人群肺癌患者288例为病例组,健康体检人群298例为对照组,采用Taq Man探针基因分型方法对HSPA1A基因中的4个多态性位点（SNPs）位点rs12190359（C〉T）、rs562047（C〉G）、rs1008438（G〉T）及rs1043618（G〉C）进行基因分型,研究其等位基因、基因型及所构建的单倍型在两组人群中分布差异。结果：2组人群rs1043618（G〉C）等位基因C和G的分布频率差异有统计学意义（P=0.038）,其中等位基因C是肺癌发生的保护性因素[OR=0.767;95%CI（0.597～0.986）];rs12190359（C〉T）、rs562047（C〉G）和rs1008438（G〉T）的等位基因和基因型的分布差异无统计学意义（P〉0.05）;rs12190359与rs1008438（G〉T）以及rs562047（C〉G）与rs11043618（G〉C）的单倍型在2组间分布频率差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：HSPA1A基因rs1043618（G〉C）等位基因C可能是云南汉族肺癌发生的保护性因素。

关键词：肺肿瘤 HSPA1A 单核苷酸多态性相关性汉族云南

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

宿主遗传因素对疫苗接种后免疫反应的影响

引用

中国生物制品学杂志 2015年第2期28卷 199-203页

作者：李莹姚宇峰史荔中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室云南昆明650118

疫苗是当今世界预防感染性疾病的主要手段,在降低传染病的发病率和死亡率方面,几乎没有其他干预方式能够达到疫苗的效果。众所周知,机体对疫苗的反应与很多因素有关,包括年龄、性别、种族、身体质量指数、疫苗的质量、注射剂量以及注射... 详细信息

疫苗是当今世界预防感染性疾病的主要手段,在降低传染病的发病率和死亡率方面,几乎没有其他干预方式能够达到疫苗的效果。众所周知,机体对疫苗的反应与很多因素有关,包括年龄、性别、种族、身体质量指数、疫苗的质量、注射剂量以及注射方式等。但就同一种疫苗而言,机体的遗传因素在免疫应答中发挥着重要作用。研究表明,直接或间接参与免疫反应的各种基因,例如,宿主细胞膜上的病毒受体基因、先天Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)基因、细胞因子及其受体基因、人类白细胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)基因等,其单个变异或多个的变异均可能与疫苗所引起的免疫应答水平相关。本文就人群遗传因素与免疫反应的相关性作一综述。

关键词：宿主遗传因素 HLA 免疫反应

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

云南汉族人群CD80基因多态性位点与肺癌的相关性

引用

贵阳医学院学报 2016年第9期41卷 1015-1020页

作者：李传印李盈甫史荔马千里王云飞蔡秋龙洪超俞建昆张新文姚宇峰中国医学科学院&北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室云南昆明650118 昆明医科大学第一附属医院干疗科云南昆明650032 昆明医科大学第三附属医院胸外科云南昆明650118

目的：探讨云南汉族人群中CD80基因中的多态性位点（SNPs）rs16829980（A〉G）、rs16829984（G〉C）、rs41271391（G〉T）及rs41271393（C〉T）与肺癌的相关性。方法：选取云南地区汉族人群肺癌患者288例（病例组）,健康体检人群288例... 详细信息

目的：探讨云南汉族人群中CD80基因中的多态性位点（SNPs）rs16829980（A〉G）、rs16829984（G〉C）、rs41271391（G〉T）及rs41271393（C〉T）与肺癌的相关性。方法：选取云南地区汉族人群肺癌患者288例（病例组）,健康体检人群288例（对照组）,采用Taq Man探针基因分型方法对CD80基因中上述4个SNPs位点进行基因分型,研究其等位基因、基因型及所构建的单倍型在两组人群中的分布差异。结果：rs16829980（A〉G）等位基因A和G、rs41271391（G〉T）等位基因G和T、rs41271393（C〉T）等位基因C和T在病例组和对照组中的分布频率的差异具有统计学意义（P=0.018,0.015,0.015）,单倍型分析结果显示GGTT单倍型是云南汉族人群肺癌发生的保护性因素（OR=0.723;95%CI：0.555~0.941）。结论：CD80基因SNPs位点rs16829980（A〉G）中等位基因A、rs41271391（G〉T）中等位基因G以及rs41271393（C〉T）的等位基因C可能是云南汉族人群肺癌发生的危险因素,GGTT单倍型可能是云南汉族人群肺癌发生的保护性因素。

关键词：肺肿瘤 CD80基因单核苷酸多态性相关性汉族云南

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

一株柯萨奇病毒B2分离株的VP1基因序列特征分析

引用

中国生物制品学杂志 2015年第1期28卷 49-53页

作者：苏婷朱艳菊闫姗姗陈俊英杨舜乔潘玥陈伟邵聪文马绍辉中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室云南昆明650118

目的分析一株柯萨奇病毒（Coxsackievirus,CV）B2分离株（CVB2）全VP1基因序列特征。方法用RD细胞对10份HFMD疑似患儿的粪便标本进行病毒分离,利用RT-PCR法从分离的病毒中扩增VP1基因,并测序,采用NCBI BLAST、Mega 6.1和Geneious等软件... 详细信息

目的分析一株柯萨奇病毒（Coxsackievirus,CV）B2分离株（CVB2）全VP1基因序列特征。方法用RD细胞对10份HFMD疑似患儿的粪便标本进行病毒分离,利用RT-PCR法从分离的病毒中扩增VP1基因,并测序,采用NCBI BLAST、Mega 6.1和Geneious等软件进行序列分析,并构建系统进化树。结果从10份HFMD疑似患儿粪便中分离到一株CVB2,命名为509/YN/CHN/2010,其全长VP1基因的核苷酸长度与其他CVB2一致,均为846 bp。与中国其他分离株的核苷酸和氨基酸序列同源性分别为81.0%～95.3%和97.9%～98.9%,而与国外分离株的核苷酸和氨基酸序列同源性分别为81.1%～87.8%和97.9%～98.6%。在进化树上与其他中国分离株分属不同的两个分支,而与M10MG17亲缘关系较近。结论 509/YN/CHN/2010分离株为肠道病毒CVB2,为两个中国分支中的一支。

关键词：柯萨奇病毒B2 VP1基因序列分析

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

重组人成纤维细胞生长因子21慢病毒质粒的构建及鉴定

引用

中国生物制品学杂志 2015年第7期28卷 677-681页

作者：陈瑜徐丽兰杨建波马开利和占龙马进李鸿钧吴正存鲁帅尧中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室云南昆明650118

目的构建人成纤维细胞生长因子21(human fibroblast growth factor 21,h FGF21)重组慢病毒质粒,并进行包装和鉴定。方法 PCR扩增人FGF21 ORF序列,经Eco RⅠ和Bam HⅠ双酶切后,连接至慢病毒载体PLV-EF1a-EGFP[2A]Puro,构建重组慢病毒质粒... 详细信息

目的构建人成纤维细胞生长因子21(human fibroblast growth factor 21,h FGF21)重组慢病毒质粒,并进行包装和鉴定。方法 PCR扩增人FGF21 ORF序列,经Eco RⅠ和Bam HⅠ双酶切后,连接至慢病毒载体PLV-EF1a-EGFP[2A]Puro,构建重组慢病毒质粒PLV-EF1a-EGFP[2A]Puro-h FGF21,经293T细胞包装为重组慢病毒颗粒,并感染KMB17靶细胞。荧光显微镜观察293T细胞中报告基因EGFP的绿色荧光,判断重组慢病毒的感染效率;RT-PCR法检测KMB17靶细胞中h FGF21基因m RNA的转录;免疫荧光和Western blot法检测KMB17靶细胞中h FGF21蛋白的表达。结果重组慢病毒质粒PLV-EF1a-EGFP[2A]Puro-h FGF21经双酶切及测序鉴定,证明构建正确,在包装细胞中获得较高的转染效率,重组慢病毒感染KMB17靶细胞72 h后,荧光显微镜下可见EGFP绿色荧光。感染组KMB17靶细胞中存在h FGF21基因m RNA的转录和蛋白的表达。结论成功构建了重组慢病毒质粒PLV-EF1aEGFP[2A]Puro-h FGF21,并于KMB17靶细胞中表达,为FGF21功能与特性的相关研究及基因工程药物的探索和研发奠定了基础。

关键词：人成纤维细胞生长因子21 慢病毒质粒 KMB17细胞

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：