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中国实验动物学报 2014年第2期22卷 86-89页

作者：殷安国匡德宣李晓飞张媛孙晓梅夏雪山代解杰昆明理工大学生命科学与技术学院昆明650500 中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所树鼩种质资源中心云南省重大传染病疫苗研发重点实验室昆明650118

由于树鼩在进化上接近于灵长类动物,在生理、生化及解剖学等生物学特性方面与人类有着相似之处,树鼩得到越来越多的关注,研究人员运用与其他动物相比具有多种优势的树鼩建立了一系列的疾病模型,如病毒类疾病、神经系统、肿瘤等,本文着... 详细信息

由于树鼩在进化上接近于灵长类动物,在生理、生化及解剖学等生物学特性方面与人类有着相似之处,树鼩得到越来越多的关注,研究人员运用与其他动物相比具有多种优势的树鼩建立了一系列的疾病模型,如病毒类疾病、神经系统、肿瘤等,本文着重就树鼩在人类病毒疾病方面的研究进展进行概述。

关键词：树鼩病毒动物模型

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实验树鼩主要内分泌器官的组织学观察

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中国比较医学杂志 2014年第6期24卷 35-39,F0003,F0004页

作者：匡德宣孙晓梅陆彩霞王文广仝品芬殷安国李晓飞代解杰中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所树鼩种质资源中心云南省重大传染病疫苗研发重点实验室昆明650118

目的了解树鼩主要内分泌器官的组织学结构特征,建立树鼩正常的内分泌器官组织学图谱。方法选取人工饲养的健康树鼩10只,麻醉后放血处死和病理解剖,对甲状腺、甲状旁腺、肾上腺及脑垂体进行病理大体检查和取材,常规病理制片,采用常规组... 详细信息

目的了解树鼩主要内分泌器官的组织学结构特征,建立树鼩正常的内分泌器官组织学图谱。方法选取人工饲养的健康树鼩10只,麻醉后放血处死和病理解剖,对甲状腺、甲状旁腺、肾上腺及脑垂体进行病理大体检查和取材,常规病理制片,采用常规组织HE染色技术,显微镜下观察组织学结构。结果（1）甲状腺呈淡黄色,位于气管两侧,在第2~4气管软骨环之间,呈板状,表面包有薄层被膜,被膜伸人甲状腺实质内分成若干小叶。小叶内有滤泡和滤泡旁细胞,滤泡腔内可见红染胶质。（2）甲状旁腺每侧一个,位于甲状腺颅侧或中部外表面,稍被甲状腺覆盖,呈圆形或卵圆形,其实质由主细胞和嗜酸性细胞组成,并可见腺泡样结构。（3）脑垂体位于蝶鞍内,没有垂体隐窝,垂体有腺垂体和神经垂体两部组成,表面包有结缔组织被膜。腺垂体分为远侧部、中间部和结节部,神经垂体由神经部和漏洞部组成。（4）肾上腺呈卵圆形,赭黄色,位于肾门颅侧,与肾相连。肾上腺外包被膜,实质明显区分为皮质和髓质两部分。皮质从外到内可分为球状带、束状带和网状带。球状带最厚,束状带最薄,网状带介于中间。髓质部细胞形成团块或网状,髓质中央有静脉。结论基本建立了树鼩内分泌器官组织学图谱,其在组织形态学上接近于灵长类动物,可以为研究树鼩内分泌器官的功能和病变,以及建立人类相关疾病的动物模型提供组织学依据。

关键词：树鼩内分泌器官组织学

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树鼩呼肠孤病毒RT-nPCR检测方法的建立及初步应用

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中国比较医学杂志 2014年第6期24卷 63-68页

作者：李晓飞殷安国张媛罗军孙晓梅代解杰中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所树鼩种质资源中心云南省重大传染病疫苗研发重点实验室昆明650118

目的建立树鼩呼肠孤病毒(TRV)RT-nPCR检测方法,为树鼩的质量控制提供检测方法。方法从三批野外来源的具有感染临床症状的树鼩粪便中分离得到三株病毒,经电镜观察和聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定为哺乳动物呼肠孤病毒(MRV)。根据GenBank中已发... 详细信息

目的建立树鼩呼肠孤病毒(TRV)RT-nPCR检测方法,为树鼩的质量控制提供检测方法。方法从三批野外来源的具有感染临床症状的树鼩粪便中分离得到三株病毒,经电镜观察和聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定为哺乳动物呼肠孤病毒(MRV)。根据GenBank中已发表的MRV L1基因的保守区域,设计合成巢式引物,对所分离的三株树鼩呼肠孤病毒(TRV1、TRV2、TRV3)的RNA进行RT-nPCR扩增,优化反应条件,进行特异性、敏感性试验。应用RT-nPCR方法对25只野外来源的相同症状疑似病例样本进行检测。结果针对分离到的三株树鼩呼肠孤病毒的RNA进行RT-nPCR扩增,均得到513 bp的特异性目的片段,培养细胞及甲肝病毒、轮状病毒、单纯疱疹病毒阴性对照均未扩增出条带。敏感性试验结果显示可检测到的最小RNA模板浓度为0.01 pg/μL。25只树鼩粪便样本经RT-nPCR检测,有14只TRV阳性,其中死亡动物组10只,检出率为100%;存活动物组15只,检出率为27%。结论建立的TRV RT-nPCR检测方法特异、敏感、稳定,可用于TRV的常规检测。

关键词：树鼩哺乳动物呼肠孤病毒反转录巢式聚合酶链式反应巢式引物

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人呼吸道合胞病毒Long株的免疫原性初探

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医学研究杂志 2014年第6期43卷 17-21页

作者：李华杨婷岳磊刘正玲姜广菊龙润乡杨蓉罗芳宇谢忠平中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗工程技术研究中心云南省重大传染病疫苗研发重点实验室昆明650118

目的评价人呼吸道合胞病毒(HRSV)Long株的免疫原性,为进一步的研究疫苗提供实验数据。方法将HRSV制备成纯化抗原,取40只ICR鼠,随机分为4组,分别用纯化HRSV、纯化HRSV+Al(OH)3、并设0.01 mol/L PBS、Al(OH)3对照组,0天、28天免疫小鼠,采... 详细信息

目的评价人呼吸道合胞病毒(HRSV)Long株的免疫原性,为进一步的研究疫苗提供实验数据。方法将HRSV制备成纯化抗原,取40只ICR鼠,随机分为4组,分别用纯化HRSV、纯化HRSV+Al(OH)3、并设0.01 mol/L PBS、Al(OH)3对照组,0天、28天免疫小鼠,采用中和试验检测血清中和抗体,流式检测7种细胞因子。结果初免后28天,加Al(OH)3组与无Al(OH)3组抗体阳转率分别为60%和50%,抗体几何平均效价(GMT)分别为1∶4.49和1∶5.27;加强免疫后,Al(OH)3组与无Al(OH)3组小鼠血清抗体阳转率均达100%,抗体几何平均效价(GMT)分别为1∶17.15和1∶10.56,平均增长3.8倍和2.0倍;中和抗体在组间无差异,而组内初免与再免的中和抗体有统计学差异(P<0.01)。加Al(OH)3样品组与无Al(OH)3样品组,所检测7种细胞因子均诱导IL-6及TNF,与两个对照组间有统计学差异(P<0.05),而另外5种细胞因子则无明显升高。结论人呼吸道合胞病毒Long株可产生良好的免疫效应。

关键词：人呼吸道合胞病毒 Long株细胞因子免疫原性

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宿主免疫系统IL-4、IL-10基因多态性与丙型肝炎病毒慢性感染的相关性研究

宿主免疫系统IL-4、IL-10基因多态性与丙型肝炎病毒慢性感染的相...

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第九届全国免疫学学术大会

作者：许秀雯李莹姚宇峰俞建昆史荔孙明波中国医学科学院&北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室

背景:细胞因子在宿主免疫系统对病毒抗原刺激后引起的免疫应答中起到重要作用。研究证实,IL-4可促进B细胞MHC II类抗原、FcεR II/CD23和CD40的表达,并增强B细胞提呈抗原能力,在体液免疫应答中发挥重要作用。IL-10在调节细胞免疫和致炎... 详细信息

背景:细胞因子在宿主免疫系统对病毒抗原刺激后引起的免疫应答中起到重要作用。研究证实,IL-4可促进B细胞MHC II类抗原、FcεR II/CD23和CD40的表达,并增强B细胞提呈抗原能力,在体液免疫应答中发挥重要作用。IL-10在调节细胞免疫和致炎细胞因子方面起重要作用。目的:探讨IL-4基因以及IL-10基因SNP位点与HCV慢性感染的相关性。方法:入选云南地区汉族人群HCV慢性感染患者380例,健康体检人群364例。采用TaqMan探针基因分型方法对IL-4基因SNP rs2243248、rs2243250、rs2070874、rs2227284、rs2243247和rs2243292位点的6个位点,以及IL-10基因启动子SNP-1082G/A(rs1800896)、-819C/T(rs1800871)、-592C/A(rs1800872)的3个位点进行基因分型,并构建单倍型。分析上述SNPs及单倍型与HCV慢性感染的相关性。结果:在病例组和对照组中,IL-4基因rs2243247和rs2243292位点无多态性。rs2243248、rs2243250、rs2070874、rs2227284位点基因型频率和等位基因频率差异在病例组和对照组中没有统计学意义(P>0.05)。单倍型分析结果显示,rs2243248、rs2243250、rs2070874、rs2227284位点构建的单倍型频率差异在病例组和对照组中无统计学意义(P>0.05)。IL-10基因SNP-1082G/A(rs1800896)、-819C/T(rs1800871)、-592C/A(rs1800872)基因型频率和等位基因频率差异在病例组和对照组中无有统计学意义(P>0.05)。单倍型分析结果显示,SNP-1082G/A(rs1800896)、-819C/T(rs1800871)和-592C/A(rs1800872)构建的单倍型频率的差异在病例组和对照组中无统计学意义(P>0.05)。结论:在云南汉族群体中,IL-4基因rs2243248、rs2243250、rs2070874、rs2227284、rs2243247和rs2243292位点,以及IL-10基因启动子SNP-1082G/A(rs1800896)、-819C/T(rs1800871)、-592C/A(rs1800872)与HCV慢性感染没有相关性。

关键词： HCV 慢性感染单核苷酸多态性 IL-4 IL-10

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HLAⅠ类抗原呈递通路基因LMP2和LMP7基因多态性与丙型肝炎病毒慢性感染的相关性研究

HLAⅠ类抗原呈递通路基因LMP2和LMP7基因多态性与丙型肝炎病毒慢...

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中国免疫学会第九届全国免疫学学术大会

作者：李莹张华姚宇峰史磊俞建昆史荔中国医学科学院&北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室

背景:适应性免疫应答是宿主控制病毒感染的重要手段.HLA Ⅰ类抗原呈递通路中参与抗原肽产生,转运和呈递的基因可能存在共同进化,从而有助于抗原呈递.已有研究表明低分子量多肽(low molecular weight protein,LMP)基因多态性与感染性疾... 详细信息

背景:适应性免疫应答是宿主控制病毒感染的重要手段.HLA Ⅰ类抗原呈递通路中参与抗原肽产生,转运和呈递的基因可能存在共同进化,从而有助于抗原呈递.已有研究表明低分子量多肽(low molecular weight protein,LMP)基因多态性与感染性疾病的发生、发展关联.近年来,国内外一些研究报道了LMP基因与丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus,HCV)感染的关联研究,但是由于种族和人群的差异,结果并不完全一致.目的:评价中国汉族人群中LMP2和LMP7基因多态性与丙型肝炎病毒慢性感染的相关性.

关键词： LMP基因 HCV 慢性感染单核苷酸多态性

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宿主免疫系统IL-4、IL-10基因多态性与丙型肝炎病毒慢性感染的相关性研究

宿主免疫系统IL-4、IL-10基因多态性与丙型肝炎病毒慢性感染的相...

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中国免疫学会第九届全国免疫学学术大会

作者：许秀雯李莹姚宇峰俞建昆史荔孙明波中国医学科学院&北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室

背景:细胞因子在宿主免疫系统对病毒抗原刺激后引起的免疫应答中起到重要作用.研究证实,IL-4可促进B细胞MHC Ⅱ类抗原、FcεR Ⅱ/CD23和CD40的表达,并增强B细胞提呈抗原能力,在体液免疫应答中发挥重要作用.IL-10在调节细胞免疫和致炎细... 详细信息

背景:细胞因子在宿主免疫系统对病毒抗原刺激后引起的免疫应答中起到重要作用.研究证实,IL-4可促进B细胞MHC Ⅱ类抗原、FcεR Ⅱ/CD23和CD40的表达,并增强B细胞提呈抗原能力,在体液免疫应答中发挥重要作用.IL-10在调节细胞免疫和致炎细胞因子方面起重要作用.目的:探讨IL-4基因以及IL-10基因SNP位点与HCV慢性感染的相关性.

关键词： HCV 慢性感染单核苷酸多态性 IL-4 IL-10

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HLAI类抗原呈递通路基因LMP2和LMP7基因多态性与丙型肝炎病毒慢性感染的相关性研究

HLAI类抗原呈递通路基因LMP2和LMP7基因多态性与丙型肝炎病毒慢性...

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第九届全国免疫学学术大会

作者：李莹张华姚宇峰史磊俞建昆史荔中国医学科学院&北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室

背景:适应性免疫应答是宿主控制病毒感染的重要手段。HLA I类抗原呈递通路中参与抗原肽产生,转运和呈递的基因可能存在共同进化,从而有助于抗原呈递。已有研究表明低分子量多肽(low molecular weight protein,LMP)基因多态性与感染性疾... 详细信息

背景:适应性免疫应答是宿主控制病毒感染的重要手段。HLA I类抗原呈递通路中参与抗原肽产生,转运和呈递的基因可能存在共同进化,从而有助于抗原呈递。已有研究表明低分子量多肽(low molecular weight protein,LMP)基因多态性与感染性疾病的发生、发展关联。近年来,国内外一些研究报道了LMP基因与丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus,HCV)感染的关联研究,但是由于种族和人群的差异,结果并不完全一致。目的:评价中国汉族人群中LMP2和LMP7基因多态性与丙型肝炎病毒慢性感染的相关性。方法:入选云南地区汉族人群丙型肝炎病毒慢性感染患者232例,健康体检人群362例。采用聚合酶链反应直接测序(Polymerase chain reaction-sequence based typing,PCR-SBT)对LMP2基因3个SNPs(rs17587,rs2071477,rs2071476)和LMP7 3个SNPs(rs2071542,rs2071543,rs6924102)进行基因分型,并构建LMP2基因单倍型和LMP7基因单倍型,评估上述6个SNPs及单倍型与丙型肝炎病毒慢性感染的相关性。结果:对照组与HCV慢性感染组中,LMP2基因rs2071476和LMP7基因rs2071542等位基因频率分布差异有统计学意义(P值分别为0.010和0.022,OR值分别为0.733和1.625)。分别构建LMP2和LMP7单倍型后发现,LMP2基因和LMP7基因单倍型频率差异在病例组和对照组中无统计学意义(校正后P>0.05)。结论:LMP2/LMP7基因的多态性与HCV感染有显著关联,推测LMP2/LMP7基因多态性可能是中国汉族人群HCV慢性感染的易感因素之一。

关键词： LMP基因 HCV 慢性感染单核苷酸多态性

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登革病毒通过IL-10非依赖性方式抑制NOS2表达介导抗体依赖增强感染

登革病毒通过IL-10非依赖性方式抑制NOS2表达介导抗体依赖增强感染

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中国免疫学会第九届全国免疫学学术大会

作者：黄新伟李多赵玉娇孙强明北京协和医学院/中国医学科学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室

登革热病毒(DENV)是一种蚊媒病毒,在超过100多个国家中,尤其是亚洲和拉丁美洲,引起了巨大的公共卫生问题.据估计,每年有超过5000万人感染登革热病毒.一般认为登革热病毒感染的抗体增强效应(ADE)参与登革出血热(DHF)和登革休克综合症(DSS... 详细信息

登革热病毒(DENV)是一种蚊媒病毒,在超过100多个国家中,尤其是亚洲和拉丁美洲,引起了巨大的公共卫生问题.据估计,每年有超过5000万人感染登革热病毒.一般认为登革热病毒感染的抗体增强效应(ADE)参与登革出血热(DHF)和登革休克综合症(DSS)等重症疾病的免疫发病机制.目前普遍认为,登革热病毒的抗体依赖增强感染是导致重或死亡的最主要原因,而对于重症登革热患者的发病机制研究尚不充分.

关键词：登革热病毒 ADE RIG-Ⅰ MDA-5 NOS2

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不同G血清型轮状病毒单价疫苗与多价疫苗免疫原性及其免疫交叉保护作用的比较与评价

不同G血清型轮状病毒单价疫苗与多价疫苗免疫原性及其免疫交叉保...

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第九届全国免疫学学术大会

作者：米鍇吴晋元易山孙晓琴牛香莲李鸿钧孙茂盛中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室

轮状病毒是造成5岁以下婴幼儿腹泻的主要病原体,全球每年有大约45万婴幼儿因感染轮状病毒导致严重腹泻而死亡。流行病学调查显示,全球轮状病毒流行株以G1,G2,G3,G4几种血清型为主,近几年G9型也出现流行趋势。轮状病毒作为一种多血清型... 详细信息

轮状病毒是造成5岁以下婴幼儿腹泻的主要病原体,全球每年有大约45万婴幼儿因感染轮状病毒导致严重腹泻而死亡。流行病学调查显示,全球轮状病毒流行株以G1,G2,G3,G4几种血清型为主,近几年G9型也出现流行趋势。轮状病毒作为一种多血清型的病毒,一度使其疫苗的研发策略在单价疫苗或多价疫苗之间存在争议。目前上市的轮状病毒疫苗有Rotarix(单价疫苗)和Rotateq(多价疫苗),虽然都具有良好的保护效果及安全性,但是这些疫苗是否具有交叉保护作用来抵抗稀有血清型轮状病毒的感染,目前尚无完整的研究资料。本研究利用现在主要流行血清型轮状病毒标准毒株Wa(G1),SA11(G3),Gottfried(G4),采用ELISA和微量中和试验两种方法,对不同血清型轮状病毒单价疫苗及不同血清型轮状病毒组合的多价疫苗的免疫原性及其交叉保护效果进行了比较与评价,结果显示单价疫苗与多价疫苗对其亲本株均有较好的免疫原性,但多价疫苗能更好地激发轮状病毒在机体内的血清型转换,因此所产生的交叉保护作用强于单价疫苗,且产生交叉保护作用的时间早于单价疫苗。本研究为疫苗的深入研发策略提供重要的科学依据,也为目前已使用的疫苗提供前瞻性评价体系。

关键词：轮状病毒单价疫苗多价疫苗免疫原性交叉保护

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