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2014第十一届中国实验动物科学年会

作者：匡德宣孙晓梅陆彩霞王文广仝品芬殷安国李晓飞代解杰中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所树鼩种质资源中心云南省重大传染病疫苗研发重点实验室昆明650118

目的:了解树鼩主要内分泌器官的组织学结构特征,建立树鼩正常的内分泌器官组织学图谱. 方法:选取人工饲养的健康树鼩10只,麻醉后放血处死和病理解剖,对甲状腺、甲状旁腺、肾上腺及脑垂体进行病理大体检查和取材,常规病理制片,采用常... 详细信息

目的:了解树鼩主要内分泌器官的组织学结构特征,建立树鼩正常的内分泌器官组织学图谱. 方法:选取人工饲养的健康树鼩10只,麻醉后放血处死和病理解剖,对甲状腺、甲状旁腺、肾上腺及脑垂体进行病理大体检查和取材,常规病理制片,采用常规组织HE染色技术,显微镜下观察组织学结构. 结果:(1)甲状腺呈淡黄色,位于气管两侧,在第2～4气管软骨环之间,呈板状,表面包有薄层被膜,被膜伸人甲状腺实质内分成若干小叶.小叶内有滤泡和滤泡旁细胞,滤泡腔内可见红染胶质.(2)甲状旁腺每侧一个,位于甲状腺颅侧或中部外表面,稍被甲状腺覆盖,呈圆形或卵圆形,其实质由主细胞和嗜酸性细胞组成,并可见腺泡样结构.(3)肾上腺呈卵圆形,赭黄色,位于肾门颅侧,与肾相连.肾上腺外包被膜,实质明显区分为皮质和髓质两部分.皮质从外到内可分为球状带、束状带和网状带.球状带最厚,束状带最薄,网状带介于中间.髓质部细胞形成团块或网状,髓质中央有静脉.(4)脑垂体位于蝶鞍内,没有垂体隐窝,垂体有腺垂体和神经垂体两部组成,表面包有结缔组织被膜.腺垂体分为远侧部、中间部和结节部,神经垂体由神经部和漏洞部组成. 结论:基本建立了树鼩内分泌器官组织学图谱,其在组织形态学上接近于灵长类动物,可以为研究树鼩内分泌器官的功能和病变,以及建立人类相关疾病的动物模型提供组织学依据.

关键词：内分泌器官组织学图谱构建临床观察

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人工饲养母树鼩产后食仔的综合干预

人工饲养母树鼩产后食仔的综合干预

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2014第十一届中国实验动物科学年会

作者：匡德宣孙晓梅仝品芬王文广陆彩霞代解杰中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所树鼩种质资源中心云南省重大传染病疫苗研发重点实验室昆明650118

目的预防人工饲养母树鼩产后食仔.方法从人工饲养繁殖种群选出50只有产后食仔癖的母树鼩,采取多种措施综合预防产后食仔.结果 50只曾有产后食仔史的树鼩怀孕45只,5只未怀孕,怀孕率为90％,其中2只怀孕10 ～ 15d流产,1只难产死亡,6只仍... 详细信息

目的预防人工饲养母树鼩产后食仔.方法从人工饲养繁殖种群选出50只有产后食仔癖的母树鼩,采取多种措施综合预防产后食仔.结果 50只曾有产后食仔史的树鼩怀孕45只,5只未怀孕,怀孕率为90％,其中2只怀孕10 ～ 15d流产,1只难产死亡,6只仍有产后食仔现象,食仔率由100％降为14％.36只母树鼩怀孕产后无食仔现象出现,并能正常将所生幼仔哺乳成活,预防成功率为86％.结论采取综合预防措施可有效控制和减少树鼩产后食仔,对提高人工驯养树鼩种群的繁殖率具有借鉴作用.

关键词：树鼩产后食仔综合干预

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致树鼩腹泻的奇异变形杆菌分离鉴定及药敏试验

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实验动物科学 2014年第1期31卷 41-44页

作者：仝品芬年朝琴彭超匡德宣王文广孙晓梅代解杰中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所树鼩种质资源中心云南省重大传染病疫苗研发重点实验室昆明650118 云南中医学院昆明650500

目的诊断导致树鼩(Tupaia belangeri)腹泻的肠道致病菌,为疾病预防和控制提供参考。方法采集6只腹泻树鼩新鲜粪便,按常规肠道细菌鉴定方法进行分离培养,观察细菌形态和各菌种比例,对优势可疑菌进行生化和分子生物学鉴定,并进行了8种常... 详细信息

目的诊断导致树鼩(Tupaia belangeri)腹泻的肠道致病菌,为疾病预防和控制提供参考。方法采集6只腹泻树鼩新鲜粪便,按常规肠道细菌鉴定方法进行分离培养,观察细菌形态和各菌种比例,对优势可疑菌进行生化和分子生物学鉴定,并进行了8种常用抗菌素的敏感试验。结果培养菌落在营养琼脂培养基上多数呈黄白色,表面光滑湿润;在S.S琼脂培养基上菌落为圆形、中心发黑,有的蔓延成黑色波纹状且有臭味。细菌形态为两端钝圆短杆菌,大小为(0.4—0.6μm)×(1.0—3.0μm),无芽孢和荚膜,革兰氏染色阴性,非抗酸菌。生化鉴定该分离株产硫化氢,鸟氨酸、尿素等反应阳性。核酸扩增后与GenBank中奇异变形杆菌相似度达99%。鉴定为奇异变形杆菌。该分离株对左氧氟沙星、环丙沙星等8种药物均敏感。结论作为条件致病菌的奇异变形杆菌能够引起哺乳期母树鼩和仔树鼩腹泻甚至死亡。实施针对性的饲养管理和药物治疗,可有效地控制该疾病的传播。

关键词：树鼩奇异变形杆菌分离鉴定药敏试验

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HLAⅠ类抗原呈递通路基因ERAP1和ERAP2基因多态性与丙型肝炎病毒慢性感染的相关性研究

HLAⅠ类抗原呈递通路基因ERAP1和ERAP2基因多态性与丙型肝炎病毒...

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中国免疫学会第九届全国免疫学学术大会

作者：沈云松姚月婷曹丹凤李莹马雁冰史荔姚宇峰云南省第一人民医院中国医学科学院&北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室

背景:在机体病毒感染后的清除中,宿主免疫应答发挥了重要的作用.与抗原递呈密切相关的HLA系统,在对病毒的有效应答中起着关键作用.内质网氨肽酶1和2 (endoplasmic reticulum aminopeptidase 1 and 2,ERAP1 and ERAP2)是抗原递呈中的重... 详细信息

背景:在机体病毒感染后的清除中,宿主免疫应答发挥了重要的作用.与抗原递呈密切相关的HLA系统,在对病毒的有效应答中起着关键作用.内质网氨肽酶1和2 (endoplasmic reticulum aminopeptidase 1 and 2,ERAP1 and ERAP2)是抗原递呈中的重要分子,已有研究报道,ERAP1基因的多态性与自身免疫性疾病、慢性感染性疾病的发生发展有着密切的关联性.目的ERAP1和ERAP2基因多态性与丙型肝炎病毒慢性感染的相关性.

关键词： ERAP基因 HCV 慢性感染单核苷酸多态性

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HLAI类抗原呈递通路基因ERAP1和ERAP2基因多态性与丙型肝炎病毒慢性感染的相关性研究

HLAI类抗原呈递通路基因ERAP1和ERAP2基因多态性与丙型肝炎病毒慢...

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第九届全国免疫学学术大会

背景:在机体病毒感染后的清除中,宿主免疫应答发挥了重要的作用。与抗原递呈密切相关的HLA系统,在对病毒的有效应答中起着关键作用。内质网氨肽酶1和2(endoplasmic reticulum aminopeptidase 1 and 2,ERAP1 and ERAP2)是抗原递呈中的重... 详细信息

背景:在机体病毒感染后的清除中,宿主免疫应答发挥了重要的作用。与抗原递呈密切相关的HLA系统,在对病毒的有效应答中起着关键作用。内质网氨肽酶1和2(endoplasmic reticulum aminopeptidase 1 and 2,ERAP1 and ERAP2)是抗原递呈中的重要分子,已有研究报道,ERAP1基因的多态性与自身免疫性疾病、慢性感染性疾病的发生发展有着密切的关联性。目的ERAP1和ERAP2基因多态性与丙型肝炎病毒慢性感染的相关性。方法:入选云南地区汉族人群丙型肝炎病毒慢性感染患者376例,健康体检人群324例。采用FaqMan探针基因分型方法对ERAP1基因4个SNPs(rs27044、rs30187、rs26618、rs26653)和ERAP2基因2个SNPs(rs2248374和rs2549782)进行基因分型,并构建单倍型,分析上述6个SNPs及单倍型与丙型肝炎病毒慢性感染的相关性。结果:在病例组和对照组中,ERAP1基因rs26618位点基因型和等位基因型频率在病例组和对照组中的差异具有统计学意义(P<0.05,OR=1.318,95%CI:1.035～1.677),其余位点基因型和等位基因频率差异均没有统计学意义(P>0.05)。病例组和对照组rs27044/rs30187/rs26618/rs26653的单倍型频率差异也不具有统计学意义(P值校正后P>0.05)。ERAP2基因2个SNP(rs2248374和rs2549782)基因型和等位基因及单倍型频率差异在病例组和对照组中没有统计学意义(P>0.05)。结论:ERAP1基因SNP rs26618与丙型肝炎病毒慢性感染的发生有关,C等位基因可增加丙型肝炎病毒慢性感染的风险。

关键词： ERAP基因 HCV 慢性感染单核苷酸多态性

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HLAⅠ类抗原呈递通路基因TAP1和TAP2基因多态性与丙型肝炎病毒慢性感染的相关性研究

HLAⅠ类抗原呈递通路基因TAP1和TAP2基因多态性与丙型肝炎病毒慢...

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中国免疫学会第九届全国免疫学学术大会

作者：李莹张淑琼张宇姚宇峰史磊俞建昆史荔中国医学科学院&北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室昆明市第三人民医院

背景:丙型肝炎病毒(HCV)感染是引起慢性肝炎、肝硬化和肝癌的主要原因之一.已有证据表明,宿主免疫系统基因在HCV感染中起关键作用.作为MHC-Ⅰ类抗原呈递通路基因的一部分,抗原加工相关转运体(transporter associated with antigen prese... 详细信息

背景:丙型肝炎病毒(HCV)感染是引起慢性肝炎、肝硬化和肝癌的主要原因之一.已有证据表明,宿主免疫系统基因在HCV感染中起关键作用.作为MHC-Ⅰ类抗原呈递通路基因的一部分,抗原加工相关转运体(transporter associated with antigen presentation,TAP1 and TAP2 subunits)能够将抗原肽从细胞质转运到内质网.研究表明,TAP1和TAP2基因多态性可能会改变其分子结构,进而改变其功能,最终影响抗原呈递过程.

关键词： HCV TAP 汉族人群关联研究基因分型

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HLAI类抗原呈递通路基因TAP1和TAP2基因多态性与丙型肝炎病毒慢性感染的相关性研究

HLAI类抗原呈递通路基因TAP1和TAP2基因多态性与丙型肝炎病毒慢性...

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第九届全国免疫学学术大会

背景:丙型肝炎病毒(HCV)感染是引起慢性肝炎、肝硬化和肝癌的主要原因之一。已有证据表明,宿主免疫系统基因在HCV感染中起关键作用。作为MHC-I类抗原呈递通路基因的一部分,抗原加工相关转运体(transporter associated with antigen pres... 详细信息

背景:丙型肝炎病毒(HCV)感染是引起慢性肝炎、肝硬化和肝癌的主要原因之一。已有证据表明,宿主免疫系统基因在HCV感染中起关键作用。作为MHC-I类抗原呈递通路基因的一部分,抗原加工相关转运体(transporter associated with antigen presentation,TAP1 andTAP2 subunits)能够将抗原肽从细胞质转运到内质网。研究表明,TAP1和TAP2基因多态性可能会改变其分子结构,进而改变其功能,最终影响抗原呈递过程。目的:探讨TAP1和TAP2基因多态性与丙型肝炎病毒慢性感染的相关性。方法:本研究共选取中国云南汉族367名HCV慢性感染人群和368名正常人群作为实验对象。采用Taq Man探针基因分型方法对TAP1(7个SNPs)和TAP2(3个SNPs)进行基因分型,在等位基因水平,SNP水平和基因型水平分析两组之间的差异。结果:本研究没有发现TAP1和TAP2等位基因型在HCV慢性感染组和正常对照组之间有显著差异。但是TAP1中的rs1057141在慢性感染组和正常对照组中有显著差异,而且等位基因G与HCV慢性感染有显著的易感关联(P=0.03;OR=1.277;95%CI:0.996～1.639),而且基因型GG纯合子可能会增加中国汉族人群HCV慢性感染的风险。讨论:尽管本研究没有发现TAP1和TAP等位基因型与HCV慢性感染有明显关联,但是TAP1基因SNP rs1057141在等位基因水平和基因型水平在两组中间有显著差异。结果提示,TAP1rs1057141在中国汉族人群中可能与HCV慢性感染相关。

关键词： HCV TAP 汉族人群关联研究基因分型

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树鼩呼肠孤病毒(Tupaia Orthoreovirus)的分离鉴定

树鼩呼肠孤病毒(Tupaia Orthoreovirus)的分离鉴定

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2014第十一届中国实验动物科学年会

作者：徐娟黄晓燕李晓飞王文广殷安国夏雪山孙晓梅代解杰中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室昆明650118 昆明理工大学生命科学与技术学院昆明650500

致病性病毒严重危害树鼩(tree shrew,Tupaia)生命健康,但却鲜见有关树鼩自然感染病毒的报道.该研究采集6份因腹泻死亡的野生树鼩粪便,用Vero细胞进行病毒分离,72 h后细胞发生病变,特征为颗粒增多、破碎、变圆固缩、拉网及脱落等;电镜观... 详细信息

致病性病毒严重危害树鼩(tree shrew,Tupaia)生命健康,但却鲜见有关树鼩自然感染病毒的报道.该研究采集6份因腹泻死亡的野生树鼩粪便,用Vero细胞进行病毒分离,72 h后细胞发生病变,特征为颗粒增多、破碎、变圆固缩、拉网及脱落等;电镜观察显示该病毒为球形,双层衣壳,完整直径～ 75 nm.纯化病毒经核酸PAGE电泳后呈现10个核酸节段,并为典型的3∶3∶4排列.哺乳动物呼肠孤病毒(mammalian orthoreovirus,MRV) L1基因保守区RT-PCR检测、序列分析及进化树构建结果表明,该病毒株属于MRV,且与来源于蝙蝠的呼肠孤病毒分离株(T3/Bat/Germany/342/08)同源性最高.MRV是人兽共患病病毒,该实验首次从树鼩体内成功分离到MRV,对今后研究制定实验树鼩病毒学控制标准具有指导意义,同时为有效预防该病毒在树鼩与人类之间传播提供了实验依据.

关键词：树鼩呼肠孤病毒分离鉴定

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柯萨奇B组1型云南分离株MSH／KM9／2009全基因组序列分析

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病毒学报 2013年第3期29卷 293-298页

作者：刘建生邵聪文潘玥朱艳菊邓新强廖宏玮刘雅灵马绍辉中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所昆明650118 云南省重大传染病疫苗研发重点实验室昆明650118

对2009年分离自云南省昆明市脑膜脑炎儿童的1株柯萨奇B组1型病毒MSH-KM9-09,进行了全基因组的序列测定,并对其分子变异和进化特点进行了分析。采用逆转录-聚合酶链反应(Reverse transcription-polymerasechain reaction,RT-PCR),分段扩... 详细信息

对2009年分离自云南省昆明市脑膜脑炎儿童的1株柯萨奇B组1型病毒MSH-KM9-09,进行了全基因组的序列测定,并对其分子变异和进化特点进行了分析。采用逆转录-聚合酶链反应(Reverse transcription-polymerasechain reaction,RT-PCR),分段扩增覆盖病毒全长序列的8个重叠片段(未包括多聚腺苷酸尾),并进行序列测定和分析。CVB1MSH-KM9-09病毒株基因组全长7 384个核苷酸(nt),5'端和为3'端分别为741nt和94nt的非编码区,5'和3'非编码区间为一个6 549nt长的开放阅读框,编码一个含2 183个氨基酸的多聚蛋白,编码区内未见核苷酸的插入或缺失。与GenBank库中现有CVB1全基因组序列M16560、pmMC、Tucson B1和CVB1/Nm相比对,整个基因组的核苷酸同源性分别为80.9%、81.6%、80.5%和80%,氨基酸同源性分别为95.6%、95.8%、96.2%和95.6%。首次完成中国CVB1病毒全基因组核苷酸序列的测定,经核苷酸序列同源性比对和进化树分析,证实MSH/KM9/2009株属于CVB1基因型。

关键词：柯萨奇病毒B组1型全基因组同源性序列分析

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2009年云南省柯萨奇病毒B3型分离株A103／KM／09全基因序列分析

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中华流行病学杂志 2013年第12期34卷 1208-1212页

作者：杨卉娟刘建生张云昆马忠飞赵卫中潘玥陈俊英邵聪文马绍辉中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室昆明650118

目的分析2009年云南省脑炎患儿粪便标本分离的柯萨奇病毒B3型分离株A103／KM／09全基因序列，了解其遗传特性。方法设计针对柯萨奇病毒B3型引物，提取病毒RNA、RT-PCR扩增和产物直接测序获得全基因组序列，利用Geneious和Mega5．05软件... 详细信息

目的分析2009年云南省脑炎患儿粪便标本分离的柯萨奇病毒B3型分离株A103／KM／09全基因序列，了解其遗传特性。方法设计针对柯萨奇病毒B3型引物，提取病毒RNA、RT-PCR扩增和产物直接测序获得全基因组序列，利用Geneious和Mega5．05软件进行核苷酸、氨基酸序列比对及其系统进化分析，应用RDP3和SimPlot3．5．1重组软件对序列进行重组分析。结果该分离株全基因组核苷酸序列长度为7389bp。其核苷酸和氨基酸序列与其原型株Nancy的同源性分别为81．0％和95．7％；与其他柯萨奇病毒B3型毒株的各区段核苷酸和氨基酸同源性分别为81．0％～88．0％和95．7％～98．0％；进化分析发现CVB3可分为5个分支（I～V），核苷酸之间的差异为16．2％-24．3％；中国分离株属V分支，又可分为A～D亚分支，核苷酸之间的差异为4．3％～11．4％。并发现A103／KM／09株基因序列在非结构区可能存在重组事件。结论柯萨奇病毒B3型分为5个基因型，云南分离株A103／KM／09属于V—D亚型，而中国分离株已经发生一定进化。

关键词：柯萨奇病毒B3型全基因序列序列分析

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