检索结果-内蒙古大学图书馆

国际遗传学杂志 2012年第1期35卷 31-36页

作者：董兆梅史荔中国医学科学院&北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室

丙型肝炎是由丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)感染导致的世界范围的感染性疾病,我国是高流行地区。多项研究表明:人类白细胞抗原(human leucocyte antigen,HLA)以及其特异配体-杀伤细胞免疫球蛋白样受体(killercell immunoglobulin... 详细信息

丙型肝炎是由丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)感染导致的世界范围的感染性疾病,我国是高流行地区。多项研究表明:人类白细胞抗原(human leucocyte antigen,HLA)以及其特异配体-杀伤细胞免疫球蛋白样受体(killercell immunoglobulin-like receptors,KIR)类型与HCV感染结局相关。HLA、KIR各自的多态性使得受体KIR与配体HLA的结合更为复杂化,二者结合的强弱以及KIR抑制性和激活性受体之间的平衡关系,直接影响了机体对HCV感染的免疫能力。该文将从HLA/KIR基因系统与HCV易感性,HLA/KIR基因系统与HCV自体清除的相关性以及它们在HCV感染进程中的作用三个方面来进行综述。

关键词： HLA KIR HCV

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肠道病毒71型灭活疫苗的规模化制备和免疫原性研究

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中国病毒病杂志 2012年第6期2卷 409-414页

作者：梁燕赵红玲刘龙丁廖芸董承红纳锐雄张莹王晶晶王丽春李琦涵中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室云南昆明650118

目的规模化制备3批肠道病毒71型(EV71)灭活疫苗(人二倍体细胞),研究其免疫原性。方法在人二倍体细胞上适应的EV71毒株经灭活、纯化后,制备成为EV71灭活疫苗成品。采用0、4周2针程序,皮下注射免疫恒河猴,于第2次免疫后2、4～72周取外周... 详细信息

目的规模化制备3批肠道病毒71型(EV71)灭活疫苗(人二倍体细胞),研究其免疫原性。方法在人二倍体细胞上适应的EV71毒株经灭活、纯化后,制备成为EV71灭活疫苗成品。采用0、4周2针程序,皮下注射免疫恒河猴,于第2次免疫后2、4～72周取外周静脉血分离血清进行中和抗体测定,同时于第2次免疫后8周时取外周静脉血采用γ干扰素酶联免疫斑点(IFN-γELIspot)方法检测细胞免疫应答。通过EV71毒株颅内注射乳鼠的研究方法,获得乳鼠攻毒的半数致死量(LD50),按5倍LD50对疫苗免疫母鼠所生的乳鼠攻毒,评价疫苗的动物保护效果。结果 EV71灭活疫苗免疫恒河猴后,2针免疫后2周即可诱导中和抗体的产生,其抗体水平可达到1∶32,在2针免疫后72周时中和抗体水平仍能维持在1∶16～1∶32;于2针免疫后第8周取血,疫苗组诱导产生IFN-γ斑点数[250斑点形成细胞(SFC)/1×106外周血单核细胞(PBMCs)]显著高于接种生理盐水的对照组(16SFC/1×106 PBMCs),P<0.01。EV71疫苗对小鼠—乳鼠免疫的保护性研究结果表明,接种EV71疫苗后,在5倍LD50攻毒情况下,对乳鼠的保护率达到100%。结论规模化生产制备以人二倍体细胞作为细胞基质的EV71疫苗,具有较好的免疫原性。

关键词：肠道病毒71型病毒灭活疫苗人二倍体细胞(KMB17) 规模化制备免疫原性

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肠道病毒71型感染的血清流行病学分析近况

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国际生物制品学杂志 2012年第3期35卷 118-121页

作者：郭磊(综述) 李琦涵(综述) 中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室昆明650118

近年来肠道病毒71型（enterovirus71，EV71）在我国引发了手足口病的暴发和流行。针对该病毒的流行病学研究，可为预防和控制EV71引发的手足口病流行提供重要依据。此文就目前EV71在人群中的血清阳性率和中和抗体水平资料进行综述。

关键词：肠道病毒属流行病学血清阳性率抗体

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流感病毒裂解疫苗儿童剂型在小鼠中的安全性及免疫原性研究

引用

国际检验医学杂志 2012年第15期33卷 1793-1794,1797页

作者：戴宗祥王湘宜王俊张新文宋绍辉蔡玮李映波姜述德廖国阳高菁霞中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室云南昆明650118

目的比较本研究所制备的流感病毒裂解疫苗儿童剂型(昆明疫苗)与赛诺菲巴斯德流感裂解疫苗儿童剂型(巴斯德疫苗)在动物中的安全性和免疫效果。方法用流感病毒裂解疫苗儿童剂型于0d和14d,腹腔内接种ICR小鼠。每天称取体质量,免疫后35d,眼... 详细信息

目的比较本研究所制备的流感病毒裂解疫苗儿童剂型(昆明疫苗)与赛诺菲巴斯德流感裂解疫苗儿童剂型(巴斯德疫苗)在动物中的安全性和免疫效果。方法用流感病毒裂解疫苗儿童剂型于0d和14d,腹腔内接种ICR小鼠。每天称取体质量,免疫后35d,眼眶采血分离血清,用微量血凝抑制(HI)法测定小鼠血清中特异性抗体滴度,计算抗体阳转率、保护率及几何平均滴度(GMT)增长倍数。结果免疫后小鼠体质量逐渐增加,组间无明显差异;两组间HI抗体阳转率、保护率及H1N1、H3N2型和B型HI抗体倍数差异无显著意义。结论两种疫苗均具有很好的安全性和免疫原性。

关键词：流感病疫苗药物评价免疫原性剂型儿童

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表达甲型H1N1流感病毒神经氨酸酶的重组腺病毒的构建及其免疫原性

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中国生物制品学杂志 2011年第11期24卷 1264-1268,1277页

作者：严敏孙茂盛王文举谢天宏李太华李鸿钧中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室昆明650118

目的构建表达甲型H1N1流感病毒神经氨酸酶(Neuraminidase,NA)的重组腺病毒,并检测其免疫原性。方法从质粒pMD19T-simple-NA中扩增NA基因,克隆至穿梭质粒pShuttleCMV中,经同源重组获得重组腺病毒质粒,转染Ad-293细胞,包装出重组腺病毒Ad-... 详细信息

目的构建表达甲型H1N1流感病毒神经氨酸酶(Neuraminidase,NA)的重组腺病毒,并检测其免疫原性。方法从质粒pMD19T-simple-NA中扩增NA基因,克隆至穿梭质粒pShuttleCMV中,经同源重组获得重组腺病毒质粒,转染Ad-293细胞,包装出重组腺病毒Ad-NA,RT-PCR和免疫荧光法检测NA基因在Vero细胞中的转录和表达。CsCl密度梯度离心纯化重组腺病毒,免疫小鼠,ELISA法检测免疫小鼠血清中抗NA抗体滴度。结果重组腺病毒质粒经PacⅠ酶切鉴定表明带有目的基因的穿梭质粒已整合到腺病毒基因组中;NA基因在Vero细胞中成功转录和表达;重组腺病毒可刺激小鼠产生抗NA抗体,初免后4周,抗体水平达最高,为1∶100 000。结论成功构建了表达甲型H1N1流感病毒NA蛋白的重组腺病毒,其可刺激小鼠产生有效的免疫应答,为甲型H1N1流感病毒基因工程疫苗的研发奠定了基础。

关键词：流感病毒A型 H1N1亚型神经氨酸酶重组腺病毒免疫原性

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人Semaphorin 4D慢病毒载体的构建及鉴定

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中国生物工程杂志 2011年第7期31卷 1-7页

作者：孙强明潘玥赵玉娇陈俊英施海晶马绍辉北京协和医学院/中国医学科学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室昆明650118

目的:构建并制备能够有效表达Semaphorin 4D的重组慢病毒。方法:从人急性T细胞白血病Jurkat细胞DNA扩增人Semaphorin 4D基因,克隆至pWPI GW慢病毒载体上,与pVSVG及pSPAX质粒共转染人胚肾293T细胞,包装出重组慢病毒,将纯化后的重组病毒... 详细信息

目的:构建并制备能够有效表达Semaphorin 4D的重组慢病毒。方法:从人急性T细胞白血病Jurkat细胞DNA扩增人Semaphorin 4D基因,克隆至pWPI GW慢病毒载体上,与pVSVG及pSPAX质粒共转染人胚肾293T细胞,包装出重组慢病毒,将纯化后的重组病毒直接感染293T和HUVEC细胞,通过免疫印迹、免疫荧光染色和血管内皮细胞迁移分析等方法检测Semaphorin 4D的表达和诱导血管内皮细胞迁移的作用。结果:重组慢病毒介导Semaphorin 4D在293T和HUVEC内获得表达,能介导血管内皮细胞迁移。结论:成功构建了表达Semaphorin 4D的重组慢病毒载体。

关键词： Semaphorin 4D 慢病毒血管新生基因治疗

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DTaP-sIPV联合疫苗中SabinIPV 免疫原性研究

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中华实验和临床病毒学杂志 2011年第3期25卷 197-200页

作者：马艳秦敏胡慧琼姬光冯玲高娜顾洁谢炳锋何继红孙明波中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大疾病传染病疫苗研发重点实验室昆明650118 成都生物制品研究所

目的探讨吸附无细胞百白破-Sabin株脊髓灰质炎联合疫苗（DTaP-sIPV）的制备工艺,并比较不同配比的DTaP-sIPV中Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗（SabinIPV）三针基础免疫大鼠的中和抗体效价,为确定联合疫苗的最佳制备工艺及抗原剂量配比提供... 详细信息

目的探讨吸附无细胞百白破-Sabin株脊髓灰质炎联合疫苗（DTaP-sIPV）的制备工艺,并比较不同配比的DTaP-sIPV中Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗（SabinIPV）三针基础免疫大鼠的中和抗体效价,为确定联合疫苗的最佳制备工艺及抗原剂量配比提供参考.方法用不同配比的SabinIPV,制备两批DTaP-sIPV,进行各项指标的检定及稳定性试验,并联合单独的Sabin IPV和GSK制备的DTaP-wIPV对56只Wistar大鼠进行3针免疫,每针间隔1个月,每次免疫后30 d采血并分离血清,采用微量中和试验测定血清中抗脊髓灰质炎病毒3个型别的中和抗体效价.结果两批DTaPsIPV的各项检定指标均符合〈中国药典〉三部（2005版）要求,且稳定性良好.大鼠经3针基础免疫后,其Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型脊髓灰质炎病毒中和抗体的几何平均滴度均显著上升,3针免疫后抗体阳转率已经达到100%.结论经此制备的DTaP-sIPV安全、稳定、有效,且DTaP-sIPV中的SabinIPV在大鼠中有良好的免疫效果,经3针免疫可产生高水平的中和抗体.

关键词：脊髓灰质炎病毒疫苗,灭活抗体,病毒

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树鼩IL-2基因序列的克隆及分子特征分析

树鼩IL-2基因序列的克隆及分子特征分析

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首届昆明灵长类动物模型学术论坛

作者：黄晓燕代解杰李明利徐娟高跃东王文广殷安国李晓飞孙晓梅中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室云南昆明650118 中国科学院昆明动物研究所动物模型与人类疾病机理重点实验室免疫生物学实验室云南昆明650223 中国科学院昆明生物多样性大型仪器区域中心云南昆明650223 中国科学院昆明动物研究所遗传资源与进化国家重点实验室云南昆明650223 中

树鼩作为人类疾病良好模型己受到广泛关注,但对其白细胞介素一2方面的研究尚属空白.本实验以培养的树鼩淋巴细胞总RNA为材料,通过RT-PCR技术克隆出长度约为465bp的树鼩IL-2完整开放阅读框(ORF),并通过Clustal W等软件对其序列和分子特... 详细信息

树鼩作为人类疾病良好模型己受到广泛关注,但对其白细胞介素一2方面的研究尚属空白.本实验以培养的树鼩淋巴细胞总RNA为材料,通过RT-PCR技术克隆出长度约为465bp的树鼩IL-2完整开放阅读框(ORF),并通过Clustal W等软件对其序列和分子特征进行了分析,发现树鼩IL-2 cDNA编码一个由154个氨基酸组成的蛋白质,采用MEGA5.0构建进化树发现,树鼩与人、恒河猴亲缘关系较近.

关键词： Tree shrews Interleukin 2 Cloning Structure Function

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人肠道病毒71型与宿主相互作用研究进展

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病毒学报 2011年第5期27卷 505-509页

作者：郭素杰李琦涵中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室昆明650118

自1969年首次从美国加利福尼亚患者分离出人肠道病毒71型（Human enterovirus 71，HEV71）后，该病毒已在世界范围内造成多次暴发流行，近年来又在中国大陆、中国台湾及其他亚太地区流行。

关键词：肠道病毒71型相互作用宿主中国大陆加利福尼亚暴发流行世界范围亚太地区

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人轮状病毒ZTR-5株灭活疫苗的制备及小鼠血清免疫学评价

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中国生物工程杂志 2011年第11期31卷 6-10页

作者：贾琴妹吴晋元易山张光明郜岩杨星赵晓南孙茂盛李鸿钧中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室昆明650118 昆明医学院昆明650031

目的:研究人轮状病毒ZTR-5株灭活疫苗的制备及在实验小鼠中的免疫原性评价。方法:轮状病毒ZTR-5株在MA104细胞上经蚀斑筛选纯化后,获得单一克隆接种至Vero细胞上适应性培养,免疫荧光定量检测病毒的感染性滴度,对收获的病毒液进行离心、... 详细信息

目的:研究人轮状病毒ZTR-5株灭活疫苗的制备及在实验小鼠中的免疫原性评价。方法:轮状病毒ZTR-5株在MA104细胞上经蚀斑筛选纯化后,获得单一克隆接种至Vero细胞上适应性培养,免疫荧光定量检测病毒的感染性滴度,对收获的病毒液进行离心、超滤、分子筛纯化,甲醛灭活,抗原定量检测Al(OH)3吸附制备的实验性疫苗。使用不同剂量(8EU、32EU、128EU、256EU)经肌内注射免疫小鼠,共免疫三次,免疫间隔2周。采用间接ELISA法检测血清特异性抗体效价。结果:通过蚀斑纯化,筛选得到一株纯化的病毒株ZTR-5纯-1,在Vero细胞上适应性后感染性滴度达7.35logCCID50/ml;大量培养收获的病毒原液滴度为7.57logCCID50/ml,制备获得轮状病毒样品抗原含量为2 560EU/ml;经肌内注射,初次免疫后,所有剂量组动物均获得抗体阳转,阳转率为100%;第一次加强免疫后,各组血清特异性抗体水平均明显增高,免疫剂量为128EU和256EU的两组小鼠血清抗体效价均达1∶10 240;第二次加强免疫后,各剂量组(8EU、32EU、128EU、256EU)血清抗体效价依次达1∶5 120,1∶7 456,1∶14 481.54,1∶14 481.54。结论:人轮状病毒ZTR-5株可在Vero细胞上稳定增殖,所制备的疫苗具良好免疫原性,用128EU/2次免疫即可获得良好的免疫效果。

关键词：人轮状病毒 Vero细胞灭活疫苗免疫试验

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