检索结果-内蒙古大学图书馆

单纯疱疹病毒Ⅰ型基因突变株M3株与水痘带状疱疹病毒减毒活疫苗Oka株感染小鼠的生物学特性比较

中国生物制品学杂志 2019年第3期32卷 249-254页

作者：柳蕾徐兴丽冯敏何玉凤王丽春张莹李琦涵中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室云南昆明650118 昆明医科大学云南昆明650500

目的比较单纯疱疹病毒Ⅰ型(herpes simplex virus typeⅠ,HSV-Ⅰ)基因突变株M3株与水痘带状疱疹病毒(varicella-zoster virus,VZV)减毒活疫苗Oka株感染BALB/c小鼠的生物学特性。方法用不同剂量(103、104、105 PFU/只)的HSV-ⅠM3株及疫... 详细信息

目的比较单纯疱疹病毒Ⅰ型(herpes simplex virus typeⅠ,HSV-Ⅰ)基因突变株M3株与水痘带状疱疹病毒(varicella-zoster virus,VZV)减毒活疫苗Oka株感染BALB/c小鼠的生物学特性。方法用不同剂量(103、104、105 PFU/只)的HSV-ⅠM3株及疫苗剂量的VZV Oka株以不同方式(腹腔、肌肉、鼻腔、足垫)感染小鼠后,对小鼠的急性临床反应、体重变化、病毒增殖、组织病理损伤及病毒重激活等生物学特性进行比较。结果 HSV-ⅠM3及VZV Oka组小鼠均未见弓背、倒毛、单侧眼失明等急性临床症状,体重均呈逐渐上升趋势;器官组织中病毒拷贝数均处于较低水平,且两组差异无统计学意义(P> 0. 05);小鼠脑组织出现轻微局部炎症细胞浸润、出血、胶质小结或无异常,两组差异较小,脊髓组织均未出现明显异常;神经组织与Vero细胞共培养,均未观察到细胞病变(CPE)。结论 HSV-ⅠM3株与VZV Oka株感染小鼠后的生物学特征无明显差异。

关键词：单纯疱疹病毒Ⅰ型突变株水痘带状疱疹病毒减毒活疫苗小鼠生物学特性

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

树鼩的标准化研究与应用进展

引用

实验动物科学 2020年第1期37卷 74-78页

作者：王文广匡德宣仝品芬李娜陆彩霞罕园园孙晓梅代解杰中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所树鼩种质资源中心、云南省重大传染病疫苗研发重点实验室、云南省眼科疾病防治研究重点实验室、中国医学科学院医学生物学研究所实验树鼩标准化与应用研究省创新团队昆明650118

树鼩是我国正在开发的新型实验动物,与人类有较近的亲缘关系,其许多生物学特性也与人类近似,在生命科学研究领域应用广泛。建立树鼩人工种群并开展标准化研究,是实现树鼩实验动物化的重要保证,本文就树鼩的标准化建设工作和应用情况进... 详细信息

树鼩是我国正在开发的新型实验动物,与人类有较近的亲缘关系,其许多生物学特性也与人类近似,在生命科学研究领域应用广泛。建立树鼩人工种群并开展标准化研究,是实现树鼩实验动物化的重要保证,本文就树鼩的标准化建设工作和应用情况进行简要概述。

关键词：树鼩标准化应用

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

二磷酸氯喹对THP-1细胞增殖及凋亡的影响

引用

中国生物制品学杂志 2019年第4期32卷 386-389页

作者：洪珊杨佳佳文送娇林垚叶超孙强明昆明医科大学云南昆明650500 中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室云南昆明650118 赣南医学院基础医学院江西赣州341000

目的探讨不同浓度二磷酸氯喹对急性单核细胞性白血病细胞THP-1增殖及凋亡的影响。方法分别用10、20、40、80、100μmol/L氯喹处理THP-1细胞,分别于处理12、24、48和72 h收集细胞,MTS法检测细胞增殖情况,同时采用Hoechst33342荧光染色法... 详细信息

目的探讨不同浓度二磷酸氯喹对急性单核细胞性白血病细胞THP-1增殖及凋亡的影响。方法分别用10、20、40、80、100μmol/L氯喹处理THP-1细胞,分别于处理12、24、48和72 h收集细胞,MTS法检测细胞增殖情况,同时采用Hoechst33342荧光染色法及流式细胞仪检测二磷酸氯喹对THP-1细胞凋亡的影响。结果处理细胞12、24 h时,10、20、40、80、100μmol/L二磷酸氯喹对细胞增殖无明显影响,各组间差异无统计学意义(P>0.05);处理细胞48、72 h时,各浓度二磷酸氯喹对细胞增殖均有抑制作用,细胞活力均明显下降,各组间差异有统计学意义(P<0.01),并具有剂量依赖性。不同浓度二磷酸氯喹对THP-1细胞凋亡均具有诱导作用,且随着浓度的增加,细胞凋亡愈加明显。结论二磷酸氯喹在体外可抑制THP-1细胞的增殖,并诱导细胞凋亡,其作用具有剂量依赖性。

关键词：二磷酸氯喹 THP-1细胞细胞增殖细胞凋亡

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

单纯疱疹病毒2型疫苗的研究进展

引用

微生物与感染 2019年第4期14卷 246-251页

作者：柳蕾李琦涵中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室

单纯疱疹病毒2型(herpes simplex virus type 2,HSV-2)是人类疱疹病毒家族中α家族成员,可引起多年龄段的人群生殖器疱疹及其他疱疹疾病。由于该病毒具有复杂的基因结构及感染病理,其感染至今尚无有效的治疗方法。该病毒可抑制机体免疫... 详细信息

单纯疱疹病毒2型(herpes simplex virus type 2,HSV-2)是人类疱疹病毒家族中α家族成员,可引起多年龄段的人群生殖器疱疹及其他疱疹疾病。由于该病毒具有复杂的基因结构及感染病理,其感染至今尚无有效的治疗方法。该病毒可抑制机体免疫系统,在神经细胞潜伏感染,具有重激活特性,因此,其疫苗的研制亦需要复杂的技术,且面临重重的挑战。

关键词：单纯疱疹2型病毒疫苗感染

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

us3基因的缺失对单纯疱疹病毒1型毒力和抗凋亡功能的影响

引用

微生物与感染 2019年第3期14卷 137-145页

作者：吴化叶牟唐维徐兴丽冯骁王丽春范胜涛李琦涵中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室

利用CRISPR/Cas9系统使单纯疱疹病毒1型(herpes simplex virus type 1,HSV-1) ul7、ul41、LAT 基因缺失构建M3减毒株(M3株),在M3株基础上通过缺失 us3 得到M4突变株(M4株)。本研究旨在分析野毒株(McKrae株)、M3株与M4株在毒力和抗细胞... 详细信息

利用CRISPR/Cas9系统使单纯疱疹病毒1型(herpes simplex virus type 1,HSV-1) ul7、ul41、LAT 基因缺失构建M3减毒株(M3株),在M3株基础上通过缺失 us3 得到M4突变株(M4株)。本研究旨在分析野毒株(McKrae株)、M3株与M4株在毒力和抗细胞凋亡方面的差异。结果表明,McKrae组出现明显的临床症状,且100%死亡(P<0.001),而M3、M4组未出现临床症状。M4组小鼠组织中病毒载量明显低于McKrae组和M3组;病理学检测表明,McKrae组出现蛛网膜出血、胶质小结等现象,而M3、M4组未见病理损伤,M4组炎性因子表达与McKrae、M3组相比也显著下降(P<0.01);免疫后M4组较M3组出现高水平的中和抗体、γ干扰素(interferon γ,IFN-γ)和白细胞介素4(interleukin 4,IL-4)抗原特异性T细胞;McKrae株再次感染时,M4组小鼠组织中病毒载量明显低于对照组和M3组;在人急性T细胞淋巴瘤细胞中,M4株相比McKrae株和M3株可明显诱导细胞凋亡。

关键词：单纯疱疹病毒1型减毒株 us3基因细胞凋亡

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

Ⅲ型登革病毒在C6/36及Vero细胞中复制对其毒力的影响

引用

中国生物制品学杂志 2019年第10期32卷 1070-1073,1079页

作者：林垚洪珊王晓丹陈俊英潘玥孙强明中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室

目的探讨Ⅲ型登革病毒(dengue virus,DENV)在C6/36和Vero细胞中复制对其毒力的影响。方法将DV3-1及DV3-2两株Ⅲ型DENV在C6/36细胞上接种传代培养,待其毒力稳定再接种至Vero细胞连续传代培养。用Ⅲ型DENV标准质粒检测不同代次病毒拷贝数,... 详细信息

目的探讨Ⅲ型登革病毒(dengue virus,DENV)在C6/36和Vero细胞中复制对其毒力的影响。方法将DV3-1及DV3-2两株Ⅲ型DENV在C6/36细胞上接种传代培养,待其毒力稳定再接种至Vero细胞连续传代培养。用Ⅲ型DENV标准质粒检测不同代次病毒拷贝数,PCR扩增获得传代毒种全长基因序列,并与原代病毒基因序列进行比对。结果DV3-1在C6/36细胞上传代至第17代次(P17-C6/36)时毒力保持稳定,DV3-2在盲传过程中均未见明显的细胞病变;将DV3-1和DV3-2第17代次病毒在Vero细胞上继续传代,DV3-1传至第10代次(P10-Vero)CPE为40%,DV3-2传至第4代次CPE达30%。DV3-1在P17-C6/36时具有较高的病毒拷贝数,在P0(原代病毒)及P10-Vero时病毒拷贝数偏低。与P0比较,P17-C6/36及P10-Vero全长碱基共16处发生突变,导致12个氨基酸的非同义突变,其中P0和P10-Vero在第5826、6251、7907位点碱基相同,P17-C6/36相应的氨基酸位点(第1942、2084、2636位点)均发生非同义突变。结论传代细胞更换可对Ⅲ型DENV的毒力造成影响,多次传代及更换细胞传代后仍可能发生回复突变。本研究为后续DENV减毒策略的研究提供了实验依据。

关键词： Ⅲ型登革病毒 C6/36细胞 Vero细胞毒力

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

一株2013年云南省Ⅲ型疫苗相关脊髓灰质炎病毒全基因组分析

引用

中国病毒病杂志 2019年第3期9卷 195-201页

作者：刘红波张捷赵义林张海浩张名黄小琴孙浩杨昭庆马绍辉中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室云南昆明650118

目的分析一株疫苗相关脊髓灰质炎病毒(vaccine-related poliovirus,VRPV)云南分离株R1351/YN/CHN/2013的全基因组序列和遗传特性。方法采用RD细胞分离获得病毒,提取病毒RNA,通过RT-PCR扩增全基因组序列并测序。利用BioEdit 7.09、MEGA7.... 详细信息

目的分析一株疫苗相关脊髓灰质炎病毒(vaccine-related poliovirus,VRPV)云南分离株R1351/YN/CHN/2013的全基因组序列和遗传特性。方法采用RD细胞分离获得病毒,提取病毒RNA,通过RT-PCR扩增全基因组序列并测序。利用BioEdit 7.09、MEGA7.0、SimPlot3.5.1等软件对全基因序列进行分析。结果 R1351/YN/CHN/2013全基因序列由7 430个核苷酸构成,编码含2 206个氨基酸残基的多聚蛋白,5′UTR和3′UTR核苷酸长分别为742 nt和70 nt;与Sabin3疫苗株全基因核苷酸和氨基酸序列的同源性分别为99.7%和99.6%;在5′UTR的减毒位点(nt472)发生回复突变,在VP3减毒位点(nt2034)未发生改变;与Sabin3疫苗株的VP1序列比对,共发生3个碱基突变,变异率为0.33%。进化分析显示73株Ⅲ型脊髓灰质炎病毒株分为A、B和C三个分支,R1351/YN/CHN/2013属于C分支,Sabin1/2疫苗株独立形成两个分支。重组分析表明R1351/YN/CHN/2013基因组各区域并未与Sabin1/2疫苗株及其他肠道病毒发生重组。结论 R1351/YN/CHN/2013为Ⅲ型VRPV,并且在减毒位点nt472处发生了回复突变。

关键词：疫苗相关脊髓灰质炎病毒进化分析遗传特性

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

一株Vero细胞适应的柯萨奇病毒A组10型毒株遗传稳定性研究

引用

中国病毒病杂志 2019年第3期9卷 202-208页

作者：张捷刘红波丛山日张名张海浩孙浩杨昭庆马绍辉中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室云南昆明650118

目的探讨一株手足口病相关柯萨奇病毒A组10型(coxsackievirus A10,CV-A10)毒株R6-19/XY/CHN/2017在Vero细胞中的适应性,及其连续传代的遗传稳定性。方法对R6-19/XY/CHN/2017毒株在Vero细胞上进行连续适应传代培养后,对适应前病毒及适应... 详细信息

目的探讨一株手足口病相关柯萨奇病毒A组10型(coxsackievirus A10,CV-A10)毒株R6-19/XY/CHN/2017在Vero细胞中的适应性,及其连续传代的遗传稳定性。方法对R6-19/XY/CHN/2017毒株在Vero细胞上进行连续适应传代培养后,对适应前病毒及适应后的第1、5、10、15代次毒株的致细胞病变效应(cytopathic effect,CPE)、病毒感染性滴度、全基因组核苷酸序列及氨基酸序列等进行比较分析。结果该毒株能较好地在Vero细胞上适应,不同代次的感染性滴度在7.85 lgCCID50/ml^8.17 lgCCID50/ml。与适应前毒株比较,其5′UTR及编码区共有7个碱基发生改变,VP4和VP1编码区分别有1、3个氨基酸发生改变;而适应后病毒各代次在CPE、病毒感染力特点等无明显区别,且各代次全基因核酸序列中,只有第15代的VP1蛋白编码区发生一个碱基突变。结论 CV-A10株R6-19/XY/CHN/2017能在Vero细胞较好地适应,并具有良好的遗传稳定性,这将为后续CV-A10疫苗的研发和相关机制研究提供参考。

关键词：柯萨奇病毒A组10型 Vero细胞适应病毒株连续传代遗传稳定性

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

树鼩干细胞生长因子的原核表达、纯化及免疫原性

引用

中国生物制品学杂志 2019年第1期32卷 20-24,28页

作者：龙琼郝嘉茂徐盟毕研伟肖红剑李智华闫玲梅丁晨李育中姚月婷寸韡中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室云南昆明650118 昆明医科大学海源学院云南昆明650106 吉林省万通药业四川分公司四川宜宾644000

目的原核表达、纯化树鼩干细胞生长因子(stem cell factor,SCF),并检测其免疫原性。方法根据GenBank预测的树鼩SCF基因序列设计引物,PCR扩增SCF基因,克隆至原核表达载体p ET-30a(+)中,构建重组表达质粒pET-30a(+)-SCF,转化大肠埃希菌BL2... 详细信息

目的原核表达、纯化树鼩干细胞生长因子(stem cell factor,SCF),并检测其免疫原性。方法根据GenBank预测的树鼩SCF基因序列设计引物,PCR扩增SCF基因,克隆至原核表达载体p ET-30a(+)中,构建重组表达质粒pET-30a(+)-SCF,转化大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。表达的融合蛋白经Ni柱纯化后,免疫家兔,Western blot和ELISA法检测其免疫原性,并检测SCF在树鼩不同组织中的分布情况。结果重组表达质粒pET-30a(+)-SCF经酶切及测序证实构建正确;表达的重组蛋白相对分子质量约为34 500,表达量约占菌体总蛋白的35. 6%,以包涵体形式存在;纯化后的重组蛋白纯度达90%以上,可与兔抗人SCF多克隆抗体特异性结合,且免疫原性良好,抗血清效价为1∶256 000。在鼻、气管、肺、脾、肾、食管中能检测到SCF的分布。结论在大肠埃希菌中高效表达了重组SCF蛋白,纯化复性后具有良好的免疫原性。

关键词：树鼩干细胞生长因子原核表达纯化免疫原性

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

CV-A16疫苗候选株 K168-8Ac 低温连续传代效果的评价

引用

中国病毒病杂志 2019年第2期9卷 130-134页

作者：谢天宏宋霞杨婷李华龙润乡岳磊张也何鑫王正鑫谢忠平中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室云南昆明650118

目的通过对柯萨奇A组16型(coxsackievirus A16,CV-A16)K168-8Ac毒株低温连续传代后的生长稳定性和免疫原性进行评价,为柯萨奇A组16型减毒疫苗的研究提供指导。方法用本科室筛选的CV-A16疫苗候选株K168-8Ac在KMB17细胞上32℃连续传代到... 详细信息

目的通过对柯萨奇A组16型(coxsackievirus A16,CV-A16)K168-8Ac毒株低温连续传代后的生长稳定性和免疫原性进行评价,为柯萨奇A组16型减毒疫苗的研究提供指导。方法用本科室筛选的CV-A16疫苗候选株K168-8Ac在KMB17细胞上32℃连续传代到第80代(P80),从中选取8个代次的病毒P35、P40、P50、P60、P64、P66、P69、P80,分别进行感染性滴度检测,然后用这8个代次的病毒原液分别免疫BALB/c小鼠,初次免疫后60 d进行加强免疫,于初次免疫后28 d、60 d及加强免疫后7 d、21 d进行采血;同时选取第80代的病毒进行10倍系列稀释至10^(-7),分别用原液和10倍系列稀释的8个稀释度的病毒(即7.75 lgCCID_(50)/ml～1.75 lgCCID_(50)/ml)免疫BALB/c小鼠,初次免疫后第28天进行加强免疫,于初次免疫后28 d、加强免疫后7 d、加强免疫后21 d采血,用体外微量细胞病变法进行中和抗体效价检测。结果 K168-8Ac毒株在32℃条件下在KMB17细胞上连续传代后,8个代次的病毒均有较高的感染性滴度,感染性滴度在7.37 lgCCID_(50)/ml～7.75 lgCCID_(50)/ml间波动(平均为7.56 lgCCID_(50)/ml),表明其增殖特性较稳定。8个代次的病毒免疫小鼠后抗体效价及抗体阳转率之间差异均无统计学意义,初次免疫28 d(一次免疫)中和抗体效价GMT仅为1∶27.1(1∶11～1∶64),但初次免疫60 d时GMT比初次免疫28 d增长了2.0倍,达到1∶54.3;加强免疫后7 d、21 d GMT为1∶422.0和1∶1 140.0,分别比初次免疫28 d增长了15.6倍及42.1倍。用P80的病毒以7.75 lgCCID_(50)～1.75 lgCCID_(50)的剂量免疫小鼠,其中和抗体效价随感染剂量的降低而降低;初次免疫后第28天,7.75 lgCCID_(50)及6.75 lgCCID_(50)两个病毒剂量的中和抗体效价GMT分别为1∶32及1∶14,而5.75 lgCCID_(50)以下的剂量全部阴性;加强免疫后7 d及21 d,病毒含量低至4.75 lgCCID_(50)的GMT仍能达到1∶11,但低于3.75 lgCCID_(50)则为阴性,加强免疫后7 d及21 d,平均中和效价均小于1∶4;P80的病毒初次免疫后第28天加强免疫,加强免疫后7 d及21 d中和抗体GMT为1∶1 552、 1∶2 048;初次免疫后60 d加强免疫组,加强免疫后7 d及21 d GMT为1∶294.1、 1∶1 176.3。结论柯萨奇病毒A组16型K168-8Ac 32℃低温连续传代后具有良好的生长稳定性和免疫原性。

关键词：柯萨奇病毒A组16型疫苗低温传代感染性滴度中和抗体效价

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：