检索结果-内蒙古大学图书馆

中国细胞生物学学报 2024年第2期46卷 214-225页

作者：王梦真段彪白婧罗逸铭马雁冰中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所昆明650531 昆明医科大学昆明650500

该文主要探讨端粒酶抑制剂6-硫代-2’-脱氧鸟苷(6-Thio-2’-deoxyguanosine,6-Thio-dG)是否诱导肿瘤细胞免疫原性死亡(immunogenic cell death,ICD),并揭示所产生的ICD的免疫应答特征,为利用6-Thio-d G诱导肿瘤细胞ICD开展免疫治疗提供... 详细信息

该文主要探讨端粒酶抑制剂6-硫代-2’-脱氧鸟苷(6-Thio-2’-deoxyguanosine,6-Thio-dG)是否诱导肿瘤细胞免疫原性死亡(immunogenic cell death,ICD),并揭示所产生的ICD的免疫应答特征,为利用6-Thio-d G诱导肿瘤细胞ICD开展免疫治疗提供基础。首先,用不同浓度的6-Thio-d G处理小鼠黑色素瘤B16-F10、结肠癌CT26、宫颈癌相关肿瘤TC-1和乳腺癌4T1细胞,在不同时间点用显微镜观察细胞死亡情况及形态特征;利用乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)试剂盒定量分析细胞死亡情况;以检测试剂盒以及酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)分析细胞死亡过程中免疫介质释放情况;免疫荧光染色实验考察钙网蛋白(calreticulin,CALR)向细胞膜的迁移定位。进一步,建立皮下移植TC-1小鼠肿瘤模型,当肿瘤长至4~5 mm时,注射6-Thio-d G对荷瘤小鼠进行治疗性干预,通过酶联免疫斑点技术(enzyme-linked immunospot assay,ELISPOT)与流式细胞术分析小鼠的细胞免疫应答情况;免疫组化检测肿瘤组织中高迁移率组蛋白B1(high mobility group box protein B1,HMGB1)的释放情况。研究结果显示,6-Thio-dG可诱导4种肿瘤细胞死亡,死亡特征与细胞类型、药物剂量和处理时间有关;肿瘤细胞经6-Thio-dG诱导后促进了发挥免疫刺激作用的“发现我”信号分子三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)和HMGB1、炎症细胞因子白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)的释放,以及“吃了我”信号分子CALR在细胞膜的聚集。在肿瘤模型中,6-Thio-dG显著抑制了小鼠肿瘤生长,提高了肿瘤组织中HMGB1水平,增强了表达γ-干扰素(interferon-γ,IFN-γ)的肿瘤抗原特异性的脾细胞应答,降低了脾细胞中髓源性抑制细胞(myeloid derived suppressor cell,MDSC)的水平。该研究揭示了6-Thio-d G能够诱导肿瘤细胞ICD,在杀伤肿瘤细胞的同时,增强了T细胞的抗肿瘤免疫应答能力,为肿瘤免疫治疗提供了新思路。

关键词： 6-Thio-dG 免疫原性细胞死亡黑色素瘤宫颈癌结肠癌乳腺癌

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轮状病毒NSP4胞质区在杆状病毒系统的表达及其黏膜佐剂效应评价

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中国免疫学杂志 2023年第5期39卷 917-921,927页

作者：谢力曾韦锟李臣孔璟王纪爱陈伟伟李鸿钧孙茂盛昆明学院医学院昆明650214 昆明医科大学第三附属医院昆明650118 中国医学科学院医学生物学研究所北京协和医学院云南省重大传染病疫苗研发重点实验室昆明650118.

目的:应用Bac-to-Bac杆状病毒系统表达轮状病毒(RV)非结构蛋白NSP4的胞质区(CF)片段(47~175 aa),并初步检测其黏膜免疫佐剂效应。方法:将RV NSP4-CF基因片段定向克隆至转座载体pFastBac1,转化DH10Bac并筛选重组杆粒Bac-NSP4-CF。脂质体... 详细信息

目的:应用Bac-to-Bac杆状病毒系统表达轮状病毒(RV)非结构蛋白NSP4的胞质区(CF)片段(47~175 aa),并初步检测其黏膜免疫佐剂效应。方法:将RV NSP4-CF基因片段定向克隆至转座载体pFastBac1,转化DH10Bac并筛选重组杆粒Bac-NSP4-CF。脂质体介导Bac-NSP4-CF转染sf9细胞,收获细胞并传代培养。测定病毒滴度,Western blot检测目的蛋白表达情况。纯化后的重组NSP4-CF与卵清蛋白(OVA)滴鼻共免疫小鼠,并检测其黏膜免疫佐剂效应。结果:在杆状病毒系统中成功获取了NSP4-CF重组蛋白,Western blot检测可见约16 kD的特异性条带;重组NSP4-CF与OVA共免疫小鼠后,小鼠血清OVA特异性IgG、IgA抗体水平与肠道SIgA水平较OVA单独免疫组均有升高(P<0.05);ELISPOT检测结果表明NSP4-CF佐剂组(5μg)分泌IFN-γ的脾细胞平均数均高于OVA组(P<0.05)。结论:经昆虫细胞表达系统可获得RV NSP4胞质区(47~175 aa)重组蛋白,该蛋白与模式抗原经黏膜途径免疫小鼠具有增强系统免疫应答与黏膜免疫应答的佐剂活性,为进一步研究RV-NSP4佐剂活性区域及其分子机制提供了实验基础。

关键词：佐剂轮状病毒 NSP4胞质区杆状病毒黏膜免疫

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一株柯萨奇病毒B组5型分离株V1641/YN/CHN/2016的全基因序列分析

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病毒学报 2022年第3期38卷 573-580页

作者：许丹菡郭伟张名冯昌增丛山日刘双芹马绍辉中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所昆明650118 云南省重大传染病疫苗研发重点实验室昆明650118

对2016年云南省昆明市手足口病相关的柯萨奇病毒B组5型分离株V1641/YN/CHN/2016(简称V1641)全基因组进行测序,并分析其分子变异和进化特点。设计针对V1641的引物,提取病毒RNA,RT-PCR扩增和测序,拼接获得的全基因组序列。利用MEGA7.0.26... 详细信息

对2016年云南省昆明市手足口病相关的柯萨奇病毒B组5型分离株V1641/YN/CHN/2016(简称V1641)全基因组进行测序,并分析其分子变异和进化特点。设计针对V1641的引物,提取病毒RNA,RT-PCR扩增和测序,拼接获得的全基因组序列。利用MEGA7.0.26、Geneious9.1.4和SimPlot3.5.1软件分析全基因序列。V1641毒株基因组全长7 392nt,5’-UTR和3’-UTR分别长744nt和90nt,编码区长6 558nt,与其他CVB5相比未见核苷酸的插入和缺失,编码一个2 185aa的多聚蛋白。CVB5流行株大体上分为两个基因组,中国大陆流行株同原型株Faulkner一起分布于GenogroupⅠ分支,外国流行株大多分布于GenogroupⅡ分支。在GenBank中,V1641与KY303900-417/JS-CHN-2013最为同源,相似性为97.86%。V1641与其他中国大陆流行株的全基因组序列的核苷酸和氨基酸相似性分别为85.1%~97.8%和97.1%~99.6%。V1641在P1、P2和P3区段均与EV-B不同血清型的原型株聚类,经SimPlot3.5.1软件验证,提示有重组事件发生。云南CVB5分离株V1641同中国大陆流行株一样属于GenogroupⅠ基因群,在进化过程中可能发生了重组。中国大陆可能存在多条CVB5传播链。

关键词：柯萨奇病毒全基因组进化分析

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病毒通过Rubicon抑制自噬晚期或干扰素的产生实现固有免疫逃逸的研究进展

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细胞与分子免疫学杂志 2025年第1期41卷 83-89页

作者：宿俊玮袁瑾王峰李珺岳磊严敏昆明医科大学基础医学院病原生物学与免疫学系云南昆明650500 浙江大学邵逸夫医院麻醉科浙江杭州310016 云南省普洱市中医医院检验科云南普洱665099 中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南昆明650118

固有免疫反应是宿主抵御病毒感染的第一道防线。通过自噬靶向降解病原微生物,协同模式识别受体诱导干扰素(IFN)产生,是机体抵御病毒感染的重要途径。Rubicon,一种Run结构域Beclin 1相互作用和富含半胱氨酸结构域蛋白,对自噬和IFN产生具... 详细信息

固有免疫反应是宿主抵御病毒感染的第一道防线。通过自噬靶向降解病原微生物,协同模式识别受体诱导干扰素(IFN)产生,是机体抵御病毒感染的重要途径。Rubicon,一种Run结构域Beclin 1相互作用和富含半胱氨酸结构域蛋白,对自噬和IFN产生具有抑制效应。一方面,Rubicon作为磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)复合体的一种结合成分,通过不同的结构域分别与液泡蛋白分选34(Vps34)、紫外线辐射耐受相关基因(UVRAG)、小鸟苷三磷酸(GTP)激酶和RAS癌基因家族成员7(Rab7)相互作用,介导自噬成熟抑制;另一方面,Rubicon抑制核因子κB关键调节因子(NEMO)的泛素化和干扰素调节因子3(IRF3)的二聚化,进而阻断IFN产生相关的信号转导。研究发现卡波西肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)、乙型肝炎病毒(HBV)、仙台病毒(SeV)、丙型肝炎病毒(HCV)等多种病毒,通过调节Rubicon的表达或功能实现固有免疫逃逸,Rubicon有望成为抗病毒治疗的新靶点。

关键词：病毒 Rubicon 干扰素(IFN) 自噬固有免疫逃逸综述

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寨卡病毒母婴传播及动物模型的研究进展

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中国实验动物学报 2021年第2期29卷 256-261页

作者：奎秀莹代解杰北京协和医学院/中国医学科学院医学生物学研究所昆明650118

寨卡病毒(Zika virus)是属于黄病毒科黄病毒属的一种虫媒病毒,可经过埃及伊蚊和白纹伊蚊叮咬传播,也可通过血液、泪液传播,以及性传播和母婴垂直传播。寨卡病毒一旦感染孕妇,就会有导致胎儿感染的可能。成人多出现一些较轻的临床症状,... 详细信息

寨卡病毒(Zika virus)是属于黄病毒科黄病毒属的一种虫媒病毒,可经过埃及伊蚊和白纹伊蚊叮咬传播,也可通过血液、泪液传播,以及性传播和母婴垂直传播。寨卡病毒一旦感染孕妇,就会有导致胎儿感染的可能。成人多出现一些较轻的临床症状,但胎儿更容易受到中枢神经系统的伤害,继而诱发小头畸形,重症脑部发育缺陷以及一些神经系统性炎症,因此,阻断寨卡病毒的传播及感染迫在眉睫。为了能够对寨卡病毒母婴传播途径有更全面的认识,研究其致病机理,并且找到有效的预防、检测和治疗方法,建立成功的动物模型极为关键。文章将对目前已有的寨卡病毒母婴传播在各种动物模型上的研究进展进行综合整理。

关键词：寨卡病毒垂直传播动物模型

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长链非编码RNA在宫颈癌中作用的研究进展

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中国肿瘤生物治疗杂志 2021年第4期28卷 398-404页

作者：李娅亨(综述) 杨佳李传印(审阅) 中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南昆明650118

宫颈癌是妇科最常见的恶性肿瘤之一,严重威胁女性的生命健康。然而,目前尚未确定用于诊断和治疗宫颈癌的有效手段。长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)是长度大于200个核苷酸且无蛋白质编码功能的RNA分子,近年来越来越多的研究... 详细信息

宫颈癌是妇科最常见的恶性肿瘤之一,严重威胁女性的生命健康。然而,目前尚未确定用于诊断和治疗宫颈癌的有效手段。长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)是长度大于200个核苷酸且无蛋白质编码功能的RNA分子,近年来越来越多的研究发现,lncRNA可能是细胞多种生物学过程的关键调节剂。多种lncRNA在宫颈癌组织和细胞中表达异常,参与多条信号通路的调控,影响宫颈癌细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭等过程,在宫颈癌的发生发展中起抑制肿瘤或促进肿瘤的重要作用。本文在简要介绍lncRNA结构与功能的基础上,着重对近年来宫颈癌中异常表达的lncRNA和lncRNA基因中单核苷酸多态性与宫颈癌的关系、分子调节机制以及潜在的临床应用等研究进展进行综述。

关键词：宫颈癌长链非编码RNA 分子调节分子标志物

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Ⅰ型单纯疱疹病毒感染危险因素的Meta分析

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中国生物制品学杂志 2021年第5期34卷 575-580,584页

作者：冯骁徐兴丽李琦涵中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南昆明650118

目的研究全球Ⅰ型单纯疱疹病毒(herpes simplex virus type 1,HSV-1)感染的危险因素,以期为我国HSV-1的流行病学研究和防御控制提供参考。方法运用Meta分析方法对全球范围内1980—2018年发表的HSV-1新发感染及危险因素相关研究结果进行... 详细信息

目的研究全球Ⅰ型单纯疱疹病毒(herpes simplex virus type 1,HSV-1)感染的危险因素,以期为我国HSV-1的流行病学研究和防御控制提供参考。方法运用Meta分析方法对全球范围内1980—2018年发表的HSV-1新发感染及危险因素相关研究结果进行汇总和定量综合分析;采用Review Manager 5.3软件进行异质性检验、效应量合并统计分析、偏倚性检验和敏感性分析。结果女性(OR=1.33,95%CI:1.20~1.47,P<0.001)、年龄超过40岁(OR=2.99,95%CI:1.84~4.86,P<0.001)、初次性交年龄偏低(OR=1.22,95%CI:1.09~1.36,P<0.001)、受教育水平较低(OR=1.68,95%CI:1.23~2.29,P=0.001)、低收入(OR=2.25,95%CI:1.38~3.66,P=0.001)是HSV-1感染的危险因素。既往HSV-2(OR=0.96,95%CI:0.84~1.11,P>0.5)的感染与HSV-1的新发感染无关。结论应重点加强女性、青少年、社会底层人群的性知识及包括HSV-1在内病毒感染的宣传教育,并可根据不同年龄感染HSV-1的危险程度,制定候选疫苗临床试验的接种计划。

关键词： Ⅰ型单纯疱疹病毒感染危险因素 Meta分析

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二十二碳六烯酸诱导小鼠宫颈癌相关肿瘤细胞免疫原性死亡的作用

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中国生物制品学杂志 2021年第3期34卷 294-299,306页

作者：陈永俊孙文佳何金蓉马雁冰中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南昆明650000

目的建立诱导小鼠宫颈癌相关肿瘤细胞TC-1发生免疫原性死亡(immunogenic cell death,ICD)的优化策略并揭示其特点。方法在体外分别用花青素、二甲双胍和二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA)处理TC-1细胞,显微镜观察细胞死亡情况... 详细信息

目的建立诱导小鼠宫颈癌相关肿瘤细胞TC-1发生免疫原性死亡(immunogenic cell death,ICD)的优化策略并揭示其特点。方法在体外分别用花青素、二甲双胍和二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA)处理TC-1细胞,显微镜观察细胞死亡情况及形态特征,筛选性价比较高的药物探讨其毒力学特征;通过不同浓度的药物处理同一时间和同一浓度的药物处理不同时间两种方案处理TC-1细胞,显微镜观察及LDH试剂盒检测细胞死亡情况;ATP试剂盒、ELISA检测细胞死亡的免疫介质释放,Western blot检测自噬相关分子表达。结果 DHA在诱导细胞死亡效果和成本上优于花青素及二甲双胍。160μmol/L DHA诱导TC-1细胞8 h是诱导ICD的最优条件,且TC-1细胞死亡呈现肿胀的细胞焦亡形态。DHA处理促进了TC-1细胞ICD物质ATP及IL-6、IL-1β、TNF-α的释放;DHA诱导的ICD可能与细胞自噬相关。结论 DHA能够有效诱导TC-1细胞ICD,本研究为探讨肿瘤细胞焦亡以及基于小鼠模型开展宫颈癌免疫治疗奠定了基础。

关键词：二十二碳六烯酸免疫原性细胞死亡宫颈癌 TC-1细胞

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SARS-CoV-2疫苗序贯免疫的研究进展

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中华实验和临床病毒学杂志 2022年第3期36卷 327-336页

作者：李兴航李琦涵中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室昆明650118

严重急性呼吸系统综合症冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)感染造成的新型冠状病毒肺炎(coronavirus disease 2019,COVID-19)是人类本世纪来面临的威胁最大的传染病之一。目前,全球范围内有4类疫苗已经获批上市或授权紧急使用—灭活疫苗、mRNA疫苗、腺病毒载体疫苗和重组蛋白疫苗。随着COVID-19大流行的持续,已进行全程免疫人群的抗体水平逐渐降低,加强免疫是必要的措施,而序贯免疫策略似乎是一种更好的疫苗接种策略。本文将对四类不同技术路线疫苗在序贯免疫中的研究进行综述。

关键词：新型冠状病毒新型冠状病毒肺炎序贯免疫疫苗

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低剂量IL⁃2注射对EV⁃A71乳鼠感染模型的影响

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病毒学报 2022年第4期38卷 866-873页

作者：姬桐李慧张志晓朱文兵杨燕吴忠香董少忠宋杰中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室昆明650118 中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所国家药品监督管理局疫苗及生物制品质量控制与评价重点实验室昆明650118

肠道病毒A组71型(Enterovirus 71,EV⁃A71)是引起婴幼儿手足口病(Hand,foot and mouth disease,HFMD)的主要病原体,研究表明EV⁃A71感染诱发的中枢神经系统(Central nervous system,CNS)并发症与EV⁃A71患儿机体的免疫失调有着密切的关系。白细胞介素⁃2(interleukin⁃2,IL⁃2)是一种能激活T细胞,并维持T细胞分化和增殖的T细胞生长因子,同时也参与炎症或自身免疫性反应。本研究旨在研究低剂量IL⁃2(500 IU/只)对EV⁃A71感染乳鼠模型的影响。研究结果发现,注射低剂量IL⁃2能显著改善EV⁃A71感染BALB/c乳鼠的存活率和疾病指数,能明显减轻EV⁃A71感染BALB/c乳鼠的脑部和肺部的病理损伤,能显著降低EV⁃A71感染Balb/c乳鼠脑部的病毒载量,并且能显著下调IL⁃1β、IL⁃6、IL⁃18和TNF⁃α的表达。本研究的结果初步提示了低剂量IL⁃2用于治疗HFMD的有效性,为IL⁃2用于EV⁃A71感染导致的HMFD患者的临床治疗提供了理论依据。

关键词： EV⁃A71 手足口病低剂量IL⁃2

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