检索结果-内蒙古大学图书馆

脊髓灰质炎病毒受体转基因小鼠接种Ⅰ+Ⅲ型二价脊髓灰质炎减毒活疫苗后的排毒规律

中国生物制品学杂志 2021年第5期34卷 505-510,516页

作者：赵婷施红媛李菁陈诗怡傅宇婷赵钰萍杨晓蕾杨净思中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南昆明650118

目的通过脊髓灰质炎(简称脊灰)病毒受体转基因小鼠动物模型,探讨接种Ⅰ+Ⅲ型二价脊髓灰质炎减毒活疫苗(bivalent oral poliovirus vaccine,bOPV)后的排毒规律。方法以灌胃方式给脊灰受体转基因小鼠接种3剂bOPV,间隔28 d。每剂bOPV接种后... 详细信息

目的通过脊髓灰质炎(简称脊灰)病毒受体转基因小鼠动物模型,探讨接种Ⅰ+Ⅲ型二价脊髓灰质炎减毒活疫苗(bivalent oral poliovirus vaccine,bOPV)后的排毒规律。方法以灌胃方式给脊灰受体转基因小鼠接种3剂bOPV,间隔28 d。每剂bOPV接种后第1、3、5、7天采集当天小鼠粪便样本,实时定量PCR检测每剂bOPV接种后的排毒量,ELISA法检测脊灰特异的肠道黏膜免疫球蛋白A(immunoglobulin A,IgA)抗体水平,分析排毒与接种剂次、黏膜IgA水平的关系。将接种了bOPV后检测到排毒量高和排毒量低的两组小鼠分别与洁净小鼠共居,观察洁净小鼠接触后的排毒反应。结果随着接种bOPV剂次的增加,疫苗所引发的排毒量逐渐减少。第1剂bOPV接种后排毒量较高的个体在接种下一剂bOPV后的排毒量显著低于首剂排毒量低的个体(P<0.05)。第1剂bOPV接种后IgA呈阳性的个体在第1剂接种后的排毒量高于IgA呈阴性组,但第2剂接种后排毒量低于IgA呈阴性组。与高排毒组小鼠共居后,洁净小鼠发生排毒的机率显著高于与低排毒的小鼠共居的洁净小鼠(P<0.05),且Ⅲ型脊灰疫苗株比Ⅰ型引起洁净小鼠的排毒反应持续性更长。结论在脊灰消灭的最后阶段,预防脊灰流行的一个关键仍在于激发人群对抗脊灰病毒复制的黏膜免疫,减少排毒。增加bOPV接种剂次可减少后续个体接触脊灰病毒后的排毒概率。在b OPV接种后,需加强排毒检测和个人卫生管理,特别是首剂bOPV接种后。

关键词：脊髓灰质炎排毒二价口服脊髓灰质炎减毒活疫苗脊髓灰质炎病毒受体转基因小鼠

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肠道病毒71型灭活疫苗高温条件下的稳定性

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中国生物制品学杂志 2021年第11期34卷 1284-1288,1294页

作者：周振歆易力胡云光杨家方何佳宁邹静袁洋梅陈镜休梁靖董少忠中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南昆明650031

目的考察肠道病毒71型(enterovirus type 71,EV71)灭活疫苗于(40±2)℃条件下放置的稳定性,为该疫苗储存和运输过程中冷链破坏时(高温),疫苗有效期内的有效性和安全性提供参考。方法将3批(P1、P2、P3)出厂检验合格、按储存要求2~8... 详细信息

目的考察肠道病毒71型(enterovirus type 71,EV71)灭活疫苗于(40±2)℃条件下放置的稳定性,为该疫苗储存和运输过程中冷链破坏时(高温),疫苗有效期内的有效性和安全性提供参考。方法将3批(P1、P2、P3)出厂检验合格、按储存要求2~8℃储存至有效期2年的EV71灭活疫苗分别于(40±2)℃放置0、24、48、72、96 h后,检测其抗原含量,了解高温条件下疫苗的稳定性。再选取另3批(P4、P5、P6)储存条件一致的EV71灭活疫苗,于(40±2)℃放置24 h后,按照企业注册标准的要求进行各项检测,分析高温条件对疫苗全部质量检测指标的影响。结果P1、P2、P3批疫苗于(40±2)℃储存24 h后,其抗原含量均符合企业注册标准要求,随着(40±2)℃超温时间的延长,3批疫苗的抗原含量均呈下降趋势;与0 h相比,疫苗于(40±2)℃放置24 h后,抗原含量有所下降,但并未达到显著差异,放置48 h后,抗原含量明显降低,直至放置96 h,抗原含量又相对稳定。P4、P5、P6批疫苗于(40±2)℃放置24 h后,按照企业注册标准要求进行的各项检测结果均符合要求。结论EV71灭活疫苗暴露于(40±2)℃24 h内具有一定的稳定性,本研究为(40±2)℃高温极端条件下疫苗的质量研究提供了参考。

关键词：肠道病毒71型灭活疫苗高温稳定性

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MiR-125b-1-3p在轮状病毒复制中的作用研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2021年第6期41卷 433-439页

作者：纳璐耿盼盼周艳姚石宝郭梅李鸿钧中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所分子生物室昆明650031 军事医学研究院辐射医学研究所实验血液学与生物化学研究室北京100850

目的研究miR-125b-1-3p在轮状病毒(rotavirus)复制过程中的作用和调控机制。方法将MA104细胞中的miR-125b-1-3p分别上调和下调后感染轮状病毒,通过RT-PCR分析miR-125b-1-3p的表达情况和轮状病毒拷贝数;免疫荧光分析miR-125b-1-3p对轮状... 详细信息

目的研究miR-125b-1-3p在轮状病毒(rotavirus)复制过程中的作用和调控机制。方法将MA104细胞中的miR-125b-1-3p分别上调和下调后感染轮状病毒,通过RT-PCR分析miR-125b-1-3p的表达情况和轮状病毒拷贝数;免疫荧光分析miR-125b-1-3p对轮状病毒蛋白表达情况的影响;Western blot分析miR-125b-1-3p参与调控的相关蛋白表达情况。结果轮状病毒感染细胞后,miR-125b-1-3p的表达水平明显上调,上调miR-125b-1-3p后,轮状病毒的VP7、NSP3基因拷贝数下降,下调miR-125b-1-3p后,轮状病毒的VP7、NSP3基因拷贝数明显升高;上调miR-125b-1-3p的表达水平后轮状病毒蛋白荧光数下降,下调miR-125b-1-3p后,病毒蛋白荧光数增加;轮状病毒感染细胞16 h后PI3K/Akt通路活性受到抑制,上调miR-125b-1-3p能够抑制PI3K/Akt通路的活化。结论miR-125b-1-3p通过调控PI3K/Akt通路抑制轮状病毒的复制。研究结果为探讨miR-125b-1-3p和PI3K/Akt通路之间的具体调控机制研究提供了实验基础,为轮状病毒抗感染治疗提供了靶点。

关键词：轮状病毒 miRNA PI3K/Akt 病毒复制抗病毒反应

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皮内免疫部分剂量组分无细胞百白破-Sabin株脊髓灰质炎联合疫苗的免疫持久性

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中国生物制品学杂志 2023年第5期36卷 513-517,523页

作者：李婧妍蔡路奎马艳温嘉纳胡文廖宏玮史荔杨净思中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南昆明650118 昆明市新发突发高致病性病原体疫苗研发和产业化企业科技创新中心云南昆明650118

目的评价皮内免疫(intradermal,ID)部分剂量组分无细胞百白破-Sabin株脊髓灰质炎联合疫苗(diphtheria-tetanus-acellular component pertussis and Sabin-derived inactivated poliovirus vaccine,DTacP-sIPV)的免疫持久性。方法将40只Wistar大鼠(雌雄各半)分别经ID部分剂量(DTacP-sIPV 1/5和1/10剂量,即1/5D和1/10D ID组)及肌肉注射(intramuscular,IM)全剂量DTacP-sIPV(全剂量IM组),同时设空白对照组(ID PBS)。于0、1、2月共免疫3次,末次免疫后12个月经尾静脉采血,分离血清。微量中和试验法检测抗脊髓灰质炎病毒中和抗体滴度,间接ELISA法检测大鼠血清中抗白喉毒素(diphtheria toxin,DT)、破伤风毒素(tetanus toxin,TT)、百日咳毒素(pertussis toxin,PT)、丝状血凝素(filamentous haemagglutinin,FHA)和百日咳黏附素(pertactin,PRN)的IgG抗体滴度,并计算抗体几何平均滴度(geometric mean titer,GMT)及抗体阳性率。末次免疫后12个月,经雾化吸入百日咳杆菌气雾进行攻击,攻击时间为30 min,于气雾攻击后2、5、14 d检测各组大鼠白细胞数及肺、气管、鼻部位的菌落克隆形成数(colony-forming unit,CFU)。结果与全剂量IM组比较,1/5D和1/10D ID组脊髓灰质炎病毒Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型中和抗体阳性率差异均无统计学意义(P均>0.05),空白对照组各型抗体阳性率均为0。1/5D、1/10D ID及全剂量IM组DT、TT、PT、FHA和PRN的IgG抗体阳性率均为100%,空白对照组IgG抗体阳性率均为0。与攻击后2 d比较,空白对照组大鼠经百日咳杆菌气雾攻击后5 d的白细胞数明显升高(F=3.48,P<0.05),随后开始下降;其他组均随时间的延长保持平稳(F=0.14~1.30,P>0.05)。气雾攻击后,空白对照组大鼠肺部细菌载量明显高于其他3组(F=19.00~206.00,P<0.05),攻击后14 d仍可检测到百日咳杆菌;除空白对照组外,其他3组大鼠肺部细菌载量均于攻击后5 d达峰值,14 d时基本清除,各时间点组间差异无统计学意义(F=1.14~1.25,P>0.05)。空白对照组各时间点气管和鼻部细菌载量略高于其他组,但差异均无统计学意义(F=0.71~3.54,P>0.05);除空白对照组外,其他3组大鼠气管和鼻部细菌载量较接近,差异均无统计学意义(F=0.75~3.41,P>0.05)。结论ID 1/5D DTacP-sIPV可诱导大鼠产生针对疫苗各组分的持久保护性抗体,本研究为ID部分剂量DTacP-sIPV免疫策略的制订提供了实验依据。

关键词：组分无细胞百白破-Sabin株脊髓灰质炎联合疫苗部分剂量皮内免疫免疫持久性

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非人灵长类帕金森模型的研究进展

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中国比较医学杂志 2021年第8期31卷 134-142页

作者：刘永芳吴正存马开利中国医学科学院&北京协和医学院医学生物学研究所昆明650118 中国医学科学院&北京协和医学院医学灵长类研究中心&神经科学中心北京100005

帕金森病(Parkinson’s disease,PD),作为全球第二大神经系统退行性疾病,目前已有的治疗手段仍不能从根本上逆转疾病的进程,而治疗手段的发现和评价离不开动物模型的建立,一个可靠、有效的动物模型将有利于PD的发病机制、诊断、治疗方... 详细信息

帕金森病(Parkinson’s disease,PD),作为全球第二大神经系统退行性疾病,目前已有的治疗手段仍不能从根本上逆转疾病的进程,而治疗手段的发现和评价离不开动物模型的建立,一个可靠、有效的动物模型将有利于PD的发病机制、诊断、治疗方法以及药物筛选的研究。啮齿类动物和非脊椎动物已被广泛用于建立PD模型,但其并不能完全呈现人类PD的行为学和病理特征,而非人灵长类(nonhuman primate,NHP)在生理、解剖结构和免疫等方面与人最为接近,更适合用来探索疾病机理和发现新的治疗方式,因此,本文就帕金森病NHP模型的建立方法进行综述,为帕金森病NHP模型建立提供参考。

关键词： NHP 帕金森病模型

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纳米粒子的表面修饰在疫苗佐剂开发中的应用

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中国生物制品学杂志 2022年第10期35卷 1257-1260页

作者：周珈(综述) 申丽娟刘野(审校) 昆明医科大学基础医学院病理学教研室云南昆明650500 中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南昆明650118

接种疫苗是预防传染病的有效方法。疫苗可增强免疫力,并使个体对病原体感染具有抵抗力。蛋白亚单位疫苗虽具有良好的安全性,但其免疫原性较弱,需要佐剂辅助增强其免疫反应。佐剂作为增加疫苗免疫应答的关键部分,其设计理念和构建原理对... 详细信息

接种疫苗是预防传染病的有效方法。疫苗可增强免疫力,并使个体对病原体感染具有抵抗力。蛋白亚单位疫苗虽具有良好的安全性,但其免疫原性较弱,需要佐剂辅助增强其免疫反应。佐剂作为增加疫苗免疫应答的关键部分,其设计理念和构建原理对开发有效的疫苗十分重要。表面修饰可赋予纳米材料预设的免疫调节功能,以优化疫苗诱导的免疫反应。本文对纳米粒子表面修饰在疫苗佐剂中的应用作一综述。

关键词：纳米粒子表面修饰疫苗佐剂

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帕金森病不同疾病阶段的药物治疗进展

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医药导报 2021年第6期40卷 758-764页

作者：刘永芳马开利中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所昆明650118 中国医学科学院北京协和医学院医学灵长类研究中心&神经科学中心北京100005

帕金森病(PD)分为前驱期、早期(稳定期)、中晚期(不稳定期)、晚期4个阶段。目前,针对PD运动症状的治疗药物包括多巴胺类药物、多巴胺受体激动剂、单胺氧化酶B抑制剂、儿茶酚胺-O-甲基转移酶抑制剂、抗胆碱药物等;而非运动症状的治疗主... 详细信息

帕金森病(PD)分为前驱期、早期(稳定期)、中晚期(不稳定期)、晚期4个阶段。目前,针对PD运动症状的治疗药物包括多巴胺类药物、多巴胺受体激动剂、单胺氧化酶B抑制剂、儿茶酚胺-O-甲基转移酶抑制剂、抗胆碱药物等;而非运动症状的治疗主要为对症治疗。由于PD在不同的疾病阶段其症状不一致,治疗的目标和侧重点也应有差异。因此,该文针对PD不同疾病阶段的药物治疗进行综述。

关键词：帕金森病多巴胺类药物前驱期药物治疗

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树鼩睾丸间质细胞的分离培养及寨卡病毒感染特性的研究

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中国比较医学杂志 2022年第6期32卷 48-54页

作者：邓伟金亮子奎秀莹王文广李娜仝品芬代解杰中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所昆明650031 云南大学生命科学学院昆明650091 昆明医科大学昆明650500

目的建立树鼩原代睾丸间质细胞分离培养方法,探究寨卡病毒(Zika virus,Zikv)对该细胞的感染特性,为Zikv感染导致的睾丸损伤及不育提供研究基础。方法3月龄的雄性树鼩0.4 mL 3%戊巴比妥钠麻醉处死后采集睾丸,采用IV胶原酶和胰蛋白酶联合... 详细信息

目的建立树鼩原代睾丸间质细胞分离培养方法,探究寨卡病毒(Zika virus,Zikv)对该细胞的感染特性,为Zikv感染导致的睾丸损伤及不育提供研究基础。方法3月龄的雄性树鼩0.4 mL 3%戊巴比妥钠麻醉处死后采集睾丸,采用IV胶原酶和胰蛋白酶联合消化法获得单细胞悬液,通过percoll密度梯度离心结合差异贴壁法对细胞进行纯化,3β-羟类固醇脱氢酶(3β-HSD)对细胞荧光染色鉴定,ELISA检测细胞分泌睾酮的能力;用Zikv感染树鼩睾丸间质细胞,并用对寨卡病毒易感的非洲绿猴肾细胞(Vero)作为对比参照,测定感染不同时间点的细胞及其培养上清液中病毒载量,镜下观察细胞病变,ELISA检测睾酮含量。结果分离培养的睾丸间质细胞经3β-HSD鉴定阳性率高达98%以上,且增殖迅速,能够连续分泌睾酮,第4代睾丸间质细胞在0~24 h和24~48 h睾酮分泌量分别为1.253 ng/mL和1.163 ng/mL;用Zikv感染树鼩睾丸间质细胞,6 h内病毒拷贝数可达2.15×10^(5) copies/mL,且感染48 h后基本丧失睾酮分泌能力,感染第3天可见明显的细胞病变。结论成功建立树鼩睾丸间质细胞的分离培养方法,Zikv可感染树鼩睾丸间质细胞并能导致该细胞睾酮分泌功能缺失,为Zikv入侵生殖系统机制研究提供基础。

关键词：树鼩睾丸间质细胞 3β-HSD 睾酮水平 Zikv

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姜黄素协同米托蒽醌对小鼠TC-1肿瘤细胞发生免疫原性细胞死亡的诱导作用及其作为肿瘤疫苗的潜力

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中国生物制品学杂志 2022年第5期35卷 518-526页

作者：杨颖杨英胡永茂刘清文马雁冰昆明医科大学云南昆明650500 中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南昆明650000 云南大学云南昆明650000

目的探讨诱导小鼠宫颈癌相关肿瘤细胞TC-1发生免疫原性细胞死亡(immunogenic cell death,ICD)的药物优化策略,并揭示其作为肿瘤疫苗的潜力,为诱导肿瘤细胞ICD这一新策略在肿瘤免疫干预中的应用提供参考。方法用不同浓度(2、10、20、35... 详细信息

目的探讨诱导小鼠宫颈癌相关肿瘤细胞TC-1发生免疫原性细胞死亡(immunogenic cell death,ICD)的药物优化策略,并揭示其作为肿瘤疫苗的潜力,为诱导肿瘤细胞ICD这一新策略在肿瘤免疫干预中的应用提供参考。方法用不同浓度(2、10、20、35、50μmol/L)的米托蒽醌(mitoxantrone,MTX)和不同浓度(2、10、20、35、50μmol/L)的姜黄素(curcumin,Cur)处理TC-1细胞,在不同时间点显微镜下观察细胞死亡情况及形态特征;检测细胞上清乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)释放以定量反映TC-1细胞整体死亡情况;检测细胞上清三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)及高迁移率族蛋白B1(high mobility group box protein B1,HMGB1)浓度以考察TC-1细胞发生ICD的免疫介质释放。将50μmol/L Cur与3μmol/L MTX联合左侧皮下免疫C57BL/6J小鼠,1个月后右侧皮下接种正常的TC-1细胞进行免疫挑战,流式细胞术检测小鼠脾脏、肿瘤组织中分泌IFNγ的细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)水平和髓源性抑制细胞(myeloid-derived suppressor cells,MDSC)水平。结果MTX和Cur以剂量及时间依赖性的方式诱导TC-1细胞发生死亡;50μmol/L Cur与3μmol/L MTX联合处理TC-1细胞24 h是诱导ICD的较优条件;TC-1细胞在Cur联合MTX诱导下促进了免疫原性死亡介质ATP及HMGB1的释放;Cur联合MTX诱导TC-1细胞发生免疫原性死亡后作为疫苗免疫接种能激发小鼠产生抗肿瘤细胞免疫,并显著抑制TC-1移植肿瘤的生长。结论Cur联合MTX能够有效诱导TC-1肿瘤细胞发生ICD,为基于ICD诱导的肿瘤疫苗等免疫治疗的研究奠定了基础。

关键词：姜黄素米托蒽醌免疫原性细胞死亡宫颈癌 TC-1细胞

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1株柯萨奇病毒A组10型毒株在KMB17细胞上的遗传稳定性分析

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中国生物制品学杂志 2022年第7期35卷 813-817页

作者：许丹菡张捷丛山日张名冯昌增黄小琴孙浩杨昭庆马绍辉中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室云南昆明650118

目的分析柯萨奇病毒A组10型毒株在人胚肺二倍体细胞(KMB17)上增殖的遗传稳定性。方法将V6-19/XY/CHN/2017毒株适应于KMB17细胞,并连续传代培养至15代。分别提取适应前及适应后第5、10、15代病毒RNA,分段对全基因组序列进行RT-PCR扩增、... 详细信息

目的分析柯萨奇病毒A组10型毒株在人胚肺二倍体细胞(KMB17)上增殖的遗传稳定性。方法将V6-19/XY/CHN/2017毒株适应于KMB17细胞,并连续传代培养至15代。分别提取适应前及适应后第5、10、15代病毒RNA,分段对全基因组序列进行RT-PCR扩增、测序及拼接,利用Maga 7.0、Geneious 6.1.4等软件进行系统进化及同源性分析。结果命名该KMB17细胞适应株为K6-19/XY/CHN/2017,各子代病毒感染性滴度为7.25~7.75 lgCCID_(50)/mL。适应前后4个子代病毒的全基因核苷酸和氨基酸序列同源性分别为99.99%~100%和99.95%~100%。适应前与适应后第5、10代毒株均无核苷酸和氨基酸序列突变,第15代毒株VP4区域发生1个核苷酸突变(VP4172 A→G)及1个氨基酸突变(VP458 Ile→Val)。结论CV-A10能较好地适应KMB17细胞,K6-19/XY/CHN/2017在KMB17细胞上适应后可保持较高的病毒滴度和遗传稳定性,为后续疫苗研发奠定了实验基础。

关键词：柯萨奇病毒A组10型 KMB17细胞分子特征遗传稳定性

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